猪大肠埃希菌分离鉴定及毒力因子PCR检测

为了解陕西省宁强县部分地区引起仔猪黄白痢的致病性大肠埃希菌的主要血清型及其主要毒力因子,用细菌分离培养方法,从宁强县5个猪场采集的60份有疑似黄白痢症状仔猪的肛门拭子中分离出20个大肠埃希菌菌株。经菌落形态观察、革兰染色镜检、培养特性、生化试验、血清型鉴定,确定分离菌株均为致病性大肠埃希菌。血清分型表明,20个分离菌株中有18株能确定血清型,分布在7个血清型中,其中优势血清型为O8(8株),占总数的40%。药物敏感性试验表明,分离菌株对临床常用药物具有抗药性。毒力因子的PCR检测结果表明,分离菌株均不携带STa、STb、LT和SLT-2e四个毒力基因。     

藏香猪源大肠埃希菌致病性和血清型检测及药敏试验

为了解四川省藏香猪源大肠埃希菌致病性、血清型及耐药性情况,从四川省藏香猪养殖场中无菌采集腹泻仔猪肝脏、肛拭子及粪便等组织病料253份中,分离得到155株大肠埃希菌。采用人工感染小鼠致病性试验、玻板凝集试验和KB药敏纸片法分别测定155株大肠埃希菌分离菌株的致病性、血清型及耐药性。结果显示,小鼠致病性试验表明155株分离菌中120株有致病性;玻板凝集试验表明120株致病性大肠埃希菌分离株属于14个血清型,以O111、O147、O109和O119为主要流行的优势血清型;耐药性试验表明120株致病性大肠埃希菌分离株对阿莫西林、氨苄西林、新霉素、磺胺间甲氧嘧啶4种药物耐药较严重,耐药率在94.2%~98.3%之间,对庆大霉素、氟苯尼考、多西环素等6种药物耐药率在44.2%~85.0%之间,对其他药物耐药率在15.0%~37.5%之间。说明该地区藏香猪源致病性大肠埃希菌血清型呈多样性分布,耐药性严重。     

腹泻仔猪肠道致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌的分离鉴定与耐药性研究

为探明仔猪细菌性腹泻肠道致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌流行的血清型、耐药表型及耐药基因型,本试验采集了贵州省5个地（州）市7个规模化养猪场的128份腹泻仔猪肠道样本,并对采集的样本进行了大肠埃希氏菌和沙门氏菌分离与鉴定,通过动物试验鉴定菌株的致病性,利用血清学方法鉴定其血清型,并通过药敏纸片法对主要致病菌进行耐药性研究,采用PCR技术检测各致病菌株耐药相关基因,分析细菌耐药表型和耐药基因型相关性。结果显示,本研究共分离鉴定到78株致病性大肠埃希氏菌与21株沙门氏菌,致病性大肠埃希氏菌血清型以O138、O87为主,沙门氏菌血清型以鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌居多;药敏试验结果表明,本试验分离到的78株致病性大肠埃希氏菌对β-内酰胺类药物耐药率达80%以上,对其他种类的抗菌药耐药率均超过40%,分离鉴定的21株沙门氏菌对氨基糖苷类药物耐药率达50%以上,对其他种类的抗菌药耐药率均达20%以上;本试验分离鉴定的致病性大肠埃希氏菌共检出12种耐药相关基因,沙门氏菌共检出10种耐药相关基因,两种细菌耐药基因型与耐药表型符合率均达60%以上,且均为多重耐药。本研究为仔猪腹泻的综合防控提供了理论依据。     

引发仔猪水样腹泻的多重耐药、高致病性大肠埃希菌的分离与鉴定

近来,长春地区多个养猪场发生高致病性、高死亡率的仔猪水样腹泻,腹泻仔猪经多种药物反复治疗,均无疗效。试验从发病仔猪肠壁内膜分离到2株大肠埃希菌(Escherichia coli),经鉴定,分离菌株为多耐药、高致病性菌株。将分离株进行生化试验及其16S rRNA序列的克隆、测序,并与GenBank中的序列进行对比,结果显示,分离菌株16S rRNA与GenBank登录的大肠埃希菌序列同源性达99%。动物回归试验结果显示,该大肠埃希菌能引起仔猪水样腹泻。药敏试验结果显示,常用治疗大肠杆菌病的药物如庆大霉素、氧氟沙星、环丙沙星等均对其无效。     

奶牛粪样中致病性大肠埃希菌的分离与鉴定

大肠埃希菌血清型众多,一些具有特殊血清型的大肠埃希菌对人和动物有致病性。本试验从包头市侯家营奶牛场77头外表健康成年泌乳荷斯坦奶牛采集新鲜粪样,进行细菌分离培养,共分离到疑似大肠埃希菌69株,经过形态观察、生化鉴定、动物致病性试验和血清型鉴定,其中12株为致病性大肠埃希菌,均为强毒株,占分离菌数的17.4%,另57株为非致病性大肠埃希菌,占分离菌数的82.6%。同时对12株致病性大肠埃希菌进行了"O"血清型鉴定,分属7种血清型O78、O6、O9、O98、O1、O8、O149,分别占定型菌株的25.0%(3/12)、8.3%(1/12)、16.7%(2/12)、8.3%(1/12)、8.3%(1/12)、8.3%(1/12)、25.0%(3/12)。     

规模化猪场仔猪致病性大肠埃希菌分离株的药敏试验

从湖北省3个规模化猪场45份典型仔猪黄、白痢病料中分离出大肠埃希菌.对其中40株经22种主要致病性大肠埃希菌O抗原定型血清鉴定,其中定型36株,4株未能定型,结果分属于9种血清型.用13种抗菌药物进行药敏试验,结果3个猪场分离的致病性大肠埃希菌对13种药物的敏感性各不相同.选择两种高度敏感药物,在3个相对应猪场进行临床治疗,疗效明显.     

某规模化猪场大肠埃希菌O141的分离鉴定及药敏试验

从河北衡水某规模化猪场21日龄发病仔猪脾脏中分离到1株革兰氏阴性杆菌,通过菌落形态、培养特性和微量生化试验,鉴定为大肠埃希菌,应用大肠埃希菌O抗原定型血清鉴定为O141。该菌株对供试的14种抗菌药物均产生耐药性,其中多种常用抗菌药物对其完全没有抑制作用。动物致病性和毒素试验表明,该菌株在20 h内能够导致70%小鼠死亡,并产生热稳定肠毒素,为1株产肠毒素性大肠埃希菌。     

仔猪水肿病病原的分离鉴定

从陕西省周至县5个乡镇疑似猪水肿病的病、死猪体内分离到8株细菌，根据其形态、培养特性和生化特性鉴定为大肠埃希菌。动物致病性试验表明，8株分离菌中有5株为致病性大肠埃希菌，能致死小鼠和引起断奶仔猪发病。血清学鉴定ZH1、ZH3和ZH7分离株为0138，ZH6分离株为0141，ZH4分离株为08，其中0138为优势血清型。     

猪源大肠埃希菌血清型O145菌株分离鉴定、耐药性及致病性研究

大肠埃希菌是引起仔猪腹泻甚至死亡的最常见的细菌性病原体。本试验对辽宁某规模化猪场3日龄腹泻仔猪进行了细菌分离鉴定。结果显示：从腹泻仔猪肝脏中分离出革兰氏阴性杆菌,经16S rDNA基因扩增和序列测序比对,与GENBANK登录号为CP031919.1(血清型为O145大肠埃希菌)基因序列同源性为99.44%,表明分离菌株为血清型O145大肠埃希菌;动物试验结果：分离菌36h内引起感染小鼠全部死亡,说明分离菌株为强致病性大肠埃希菌;毒力基因检测结果：分离菌株携带iusD、iss、FimH等毒力基因;药敏试验结果：分离菌株对头孢噻肟敏感,对阿米卡星中敏,对多黏菌素B、头孢唑啉、阿奇霉素、阿莫西林、大观霉素、环丙沙星、红霉素、多黏菌素E、利福平、复方磺胺甲唑和多西环素等11种药物均呈现耐药;耐药基因检测：分离菌株携带aac(6′)-Ⅰb、aac(3′)-Ⅱ、TEM、qnrS、ermB等耐药基因。     

一株猫源溶血性大肠埃希菌的分离与鉴定

从上海的1只无症状流浪猫的全血中分离到1株细菌,综合培养性状、生化特性,该菌株鉴定为大肠埃希菌(Escherichia coli),经PCR检测和O抗原血清型试验鉴定为产肠毒性大肠埃希菌O78:k80。该菌株对林可霉素耐药,对阿莫西林、氨苄西林、卡那霉素等15种抗生素均敏感。利用该菌株接种ICR小鼠,试验小鼠20 h内死亡。     

川渝部分地区仔猪源大肠埃希菌的血清型鉴定及耐药性监测

本研究旨在调查四川和重庆地区仔猪源大肠埃希菌的耐药性及血清型流行状况。本试验采用玻片凝集法和纸片扩散法对采自两地不同区域的43个猪场共273株大肠埃希菌进行血清型鉴定和耐药性测定,结果表明,273株大肠埃希菌分属43个血清型,优势血清型由高及低依次为O138、O20、O8、O60、O141、O7、O38,合占检出菌株的46.83%(96/205);对14种药物存在不同程度的耐药性:对氨苄西林、磺胺嘧啶、四环素呈高度耐药,耐药率均在90%以上,较为敏感的丁胺卡那霉素、头孢他啶敏感率分别为53.11%、49.45%,大部分菌株呈多重耐药,共151种耐药谱型。由此可见,川渝地区部分规模化猪场大肠埃希菌的流行血清型多、耐药程度严重。故掌握优势血清型,筛选有效抗菌药物,采取对应措施防治大肠杆菌病已势在必行。     

幼鹅大肠埃希氏菌的分离与鉴定

从重庆市4个县(市)24户的36只病死幼鹅中,分离到31株大肠埃希氏菌,经致病性试验、生化特性及药物敏感性试验,表明其中24株为致病菌,致病菌分离率为66.7%;致病菌株的生化特性符合大肠埃希氏菌的生化特性;所有菌株对丁胺卡那霉素、妥布霉素高度敏感,对氨苄青霉素、红霉素、氟哌酸、链霉素、复合磺胺、四环素、万古霉素不敏感,部分菌株对氯霉素、庆大霉素、卡那霉素中度敏感,说明大肠埃希氏菌对常用抗生素药物的抗药性日趋严重。     

温州地区鸡肠道大肠埃希菌耐药性分析及血清型鉴定

为研究温州地区鸡肠道大肠埃希菌的耐药性和血清型,从27家养鸡场采集泄殖腔拭子355份,分离并鉴定出346株鸡大肠埃希菌,分离率为97.46%。在346株分离株中,对3种以上抗菌药物耐药的菌株占84.39%(292/346),呈现多重耐药性。O血清型鉴定结果显示,分离菌株分别属于13个血清型,其中O138、O146、O136、O45占分离菌株的39.02%(135/346),为优势血清型。     

仔猪腹泻大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解贵州省规模化养猪场仔猪腹泻致病大肠埃希菌流行及耐药情况,本试验应用细菌分离培养、形态学观察和生物化学鉴定等技术,对采集于贵州省规模化养猪场腹泻仔猪肠道内容物128份进行病原分离鉴定,并通过动物回归试验验证病原致病力、药敏试验分析其耐药特性。结果显示,本次试验共分离鉴定到78株大肠埃希菌。动物致病性试验显示,分离菌可在不同时间致死小鼠,表明分离菌具有较强的致病力;药敏试验结果显示,分离菌对β-内酰胺类药物青霉素耐药率最高,为94.87%(74/78),对磺胺类药物复方新诺明耐药率最低,为21.79%(17/78),对其余抗菌药物均表现出不同程度耐药;多重耐药结果显示,所有分离菌株均为多重耐药菌株,多重耐药主要表现在7～11耐,占分离菌株的83.33%(65/78)。研究结果为仔猪大肠埃希菌性腹泻的防控提供理论依据。     

辽宁省禽大肠杆菌血清型分布与大肠杆菌病防治措施研究

以病原菌分离、血清型鉴定及本动物致病性试验对流行于辽宁省致病性禽大肠埃希氏菌的血清型分布、致病性以及用蜂胶苗防治该病进行了研究。2001至2005年从14市的病死禽和死胚中分离出大肠杆菌226株,定型105株,其中078型占29．52％（31／105）;0109型占10．48％（11／105）。结果证明078、0109血清型是流行于本省致病性禽大肠埃希氏菌的绝对优势血清型。致病性试验研究证明,0109型菌对鸡的致病性强于01、02、078居第一位。用2001年分离的优势菌株的11个血清型大肠杆菌蜂胶苗和大肠杆菌新城疫二联蜂胶苗对鸡免疫,从2005年分离的优势菌株中选078、0109、01、0142、093型菌分别以致死量进行攻毒,保护率均达100％。免疫鸡与发病鸡同居感染试验,100％健康存活。     

辽宁地区猪源大肠埃希菌血清型调查分析

为了解辽宁地区猪群中大肠埃希菌流行的血清型,对来源于辽宁省9个不同地区的病料进行了大肠埃希菌的分离培养、生化鉴定,并采用平板凝集法与试管凝集法测定了这些大肠埃希菌的血清型。结果表明:分离鉴定的70株大肠埃希菌中有63株能够定型,分别属于28种血清型,O_(14)、O_(65)、O_(101)为优势血清型,占已定型菌株的44.44%;其次为O_8、O_(92)、O_(153),占已定型菌株的19.05%;4株自凝,3株未能定型。     

鹅大肠埃希菌的分离鉴定及系统进化树分析

为对发病鹅感染致病性大肠埃希菌的临床治疗提供指导并防控致病性大肠埃希菌感染,本研究无菌采集腹泻鹅及病死鹅脾脏、肝脏等组织器官进行病原菌分离培养、染色观察、生化鉴定、致病性试验,对菌株部分基因进行测序、构建遗传进化树并进行药敏试验。结果显示,普通琼脂培养基上生长出灰白色、圆形、凸起、边缘整齐菌落,麦康凯琼脂培养基上长出玫红色、光滑圆润菌落;分离菌株经革兰氏染色,镜下可见革兰氏阴性菌,两端钝圆、大小中等,多呈单个存在的杆状菌;致病性试验表明,该分离菌株对小鼠、雏鹅均有较高致死率;遗传进化树结果显示,分离菌株与患者粪便分离株（GenBank登录号：CP024992.1）同源性最高,达99.5%;体外抑菌试验发现菌株耐药情况较严重,对大多数抗菌药均有较强抗性,仅头孢噻呋对该分离株有较强的抑菌作用,合理用药后病情得到有效控制。本研究为有效防治鹅大肠埃希菌病提供了理论依据,对规模化鹅场防控大肠埃希菌等其他细菌性疾病具有重要价值。     

仔猪水肿病病原菌的分离和鉴定

选择东北三省的锦州、丹东、盘锦、阜新地区自然发生仔猪水肿病的病例,共分离出96株仔猪水肿病大肠杆菌。对其中的12株菌进行生化鉴定、血清型鉴定和致病性检测。生化鉴定结果:12株菌均符合大肠埃希氏菌生化特征。血清型鉴定结果:12株菌分别为O139、O138、O141、054和048五种血清型,主要为O139、O138和O141三种血清型。致病性检测的结果:菌液、毒素对小白鼠攻毒,结果表明对小白鼠有较强的致病性,引起小白鼠死亡,剖检见相关器官水肿;菌液、毒素对猪攻毒试验结果表明感染断奶仔猪,各病变脏器均分离到大肠杆菌,各方面特性均与所攻毒菌株一致。     

杨凌某牛场犊牛腹泻病细菌的分离鉴定及药敏试验

为了确定引起杨凌地区某肉牛场发生犊牛腹泻的病原菌种类和药物的敏感性,采集腹泻犊牛粪便数份,对其进行细菌学分离鉴定、致病性试验和药物敏感性试验分析。结果表明:分离到革兰氏阴性(G-)杆菌3株,其中沙门氏菌1株、致病性大肠埃希氏菌1株、铜绿假单胞菌1株;动物致病性试验表明所分离到的沙门氏菌和大肠埃希氏菌对小白鼠均有较强致病性,对先锋噻肟、先锋必、菌必治、阿米卡星等抗生素敏感。可见,沙门氏菌和大肠埃希氏菌为该牛场发生犊牛腹泻的主要致病菌,药物敏感试验结果对该养殖场犊牛腹泻提供了诊断和治疗依据。     

猪源大肠埃希氏菌耐药性观察

大肠埃希氏菌是一种容易产生耐药性的细菌 ,用药不当 ,可导致治疗上的失败。 1 999年 4～ 6月 ,在为西宁地区某猪场进行仔猪黄痢的诊治时 ,从 1 2 7头母猪、种公猪、仔猪直肠中分得 92株大肠埃希氏菌 ,为了掌握该猪场大肠埃希氏菌的耐药情况 ,指导临床用药 ,曾随机抽取 8株致病菌株 ,用纸片扩散法做了药敏试验 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 .1　菌株致病性大肠埃希氏菌试验菌株 ,来自该猪场的三栋猪舍 ,共 8株 ;其中二栋生产母猪舍各 2株 (Ｄ2 3、Ｄ2 5、Ｄ4 1 1、Ｄ4 2 1 ) ,分娩母猪舍的母猪 2株 (Ｄ71 3、Ｄ71 5)、仔猪 2株 (Ｄ70…