基于Fiber1基因分型的安卡拉病毒感染病例实验室检测

为确诊贵州省某养鸡场发生疑似安卡拉病毒感染的病例,实验基于安卡拉病毒Fiber1基因设计合成引物,对病料样本进行病原核酸检测和核酸测序与序列分析。结果:(1)从病例的肝脏样本中扩增出大小约1 296 bp的Fiber1基因目的片段,与预期结果相符。(2)序列测定与分析显示,扩增的Fiber1基因序列与国内分离株序列同源性高,亲缘关系近。(3)系统进化分析显示,感染病例中的安卡拉病毒流行株(命名为:GZ-LPS)与K31、MX-SHP9、ON1和河北、江苏等地的FAdV-4分离株处于同一进化分支,而与其他血清型禽腺病毒株处于不同进化分支。结论:此次疫情经实验室诊断,确定为禽腺病毒Ⅰ群C种血清4型的安卡拉病毒感染所致。     

鸡腺病毒Ⅰ群血清4型的分离鉴定与防治

正鸡Ⅰ群腺病毒(FAV-Ⅰ)为腺病毒科,禽腺病毒属病毒,广泛存在于多种家禽的眼睛、上呼吸道及消化道内,大多数呈隐性感染或与其他疾病共同作用引起家禽发病或死亡[1]。2015年以来在我国北方鸡群内流行一种以心包积液、肝脏肿大出血为特征的疾病,发病率呈上升趋势,经研究证实为腺病毒感染,俗称安卡拉病,也称心包积液综合征。本病毒属于禽腺病毒Ⅰ群血清4型,与包涵体肝炎都属于Ⅰ亚群禽腺病毒。主要感染1~3周龄商     

家禽安卡拉病研究进展

家禽安卡拉病是由禽腺病毒4型（FAV-4）所引起的,以心包积液和肝炎为主要临床表现症状,近年来,该病在我国的发生有扩大的趋势。对家禽安卡拉病的流行病学特点、检测方法及防治方法进行综述,以期为该病的深入研究和防治提供思路。     

安卡拉病毒的防制

正1安卡拉病毒(心包积液综合征)流行情况安卡拉病毒(心包积液综合征)首先发生于巴基斯坦的卡拉奇地区,从1987年发现至今,该病己蔓延到整个巴基斯坦,给巴基斯坦养鸡业造成很大损失。该病大多发生于3~6周龄的雏鸡,4~5周龄为死亡高峰期,至5~6周龄死亡逐渐减     

Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定及其致病性研究

为了解Ⅰ群腺病毒(FAV-Ⅰ)在鸡群中的感染状况,对收集的178份疑似病料进行鸡胚病变、细胞病变特征分析,利用RT-PCR、基因测序和BLAST进行病毒的分离鉴定,成功分离出25株FAV-Ⅰ,其中20株与血清4型同源性较高,5株与血清8型同源性较高。动物回归试验结果表明,攻毒鸡的临床症状和病理变化与自然发病鸡基本一致。     

一起鸡心包积液病例的诊治

<正>鸡包涵体肝炎(Inclusion Body Hepatitis,IBH)是由Ⅰ群禽腺病毒(Fowl adenovirusⅠ,FAV-Ⅰ)引起的一种急性传染病。该病最早发生在巴基斯坦卡拉奇市安卡拉地区,所以也称之为安卡拉病[1]。该病特征性病理变化为心包囊积液和肝炎。目前该病已在我国多地流行,可造成肉鸡、蛋鸡乃至水禽发病死亡,已严重影响养禽业健康发展[2-3]。     

绿壳蛋鸡青年鸡疑似心包积液——肝炎综合征的实验室诊断

2017年，在河北省涿鹿县某山间林下饲养的60～80日龄绿壳蛋鸡青年鸡突然发生大量死亡，根据其临床症状以及剖检变化初步怀疑为心包积液——肝炎综合征（hvdroericardium hepatitis syndrome，HHS）。为了进一步确诊，选择发病死亡典型病例采集样品进行细菌和病毒的分离、培养、鉴定，以及10周龄SPF鸡致病试验。结果表明，分离到3株大肠杆菌，但接种SPF鸡未出现典型临床症状和发病死亡；利用电镜观察到直径为60～80nm的圆形病毒，该病毒能够凝集大鼠红细胞；病毒分离株引起SPF鸡出现典型的心包积液一肝炎的剖检变化；经琼脂扩散试验鉴定该病毒为禽Ⅰ群腺病毒4型。     

鸵鸟Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定、血清型鉴定以及Hexon蛋白基因序列分析

对3份来自不同地方的病死鸵鸟进行病理剖检、病原分离鉴定,确诊为Ⅰ群禽腺病毒感染,并成功分离到3株鸵鸟FAV-Ⅰ。采用PCR方法成功扩增2株临床分离株的Hexon基因,分别克隆于p MD20-T载体,对其进行了核苷酸序列测定、同源性比较及遗传进化分析。并运用Ⅰ群禽腺病毒12个标准毒阳性血清对其中2株毒进行了血清型鉴定。结果显示,分离株2014.07.10-HBHD-TN、2014.07.19-HBHS-TN与12个标准株之间的同源性在72.5%~98.0%之间,其中与FAV-4的同源性最高是98.0%。在系统进化树中,这两个分离株均位于FAV-I的大分支中,且与FAV-4位于同一小分支。这2个分离株经血清学鉴定均为血清4型的毒株。     

蛋鸡心包积液-肝炎综合症的预防和治疗

正心包积液-肝炎综合症也叫安卡拉病,是由1群血清4型腺病毒感染鸡等家禽引起的一种传染性疾病,其典型症状为感染鸡死亡较快,并有心包积液和土黄色肝炎症状。该病于1989年10月首先报道于巴基斯坦卡拉奇附近的安卡拉地区,因此得名安卡拉病。2014年以来,我省大部分地区鸡群出现以肝脏坏死为特征的鸡病,死亡率达到20%以上,随后几年又出现了典型的、以心包中出现淡黄色的液体或凝胶     

蛋鸡禽腺病毒4型流行毒株SX17株的分离与鉴定

从陕西渭南蛋鸡场疑似心包积液-肝炎综合征病例中分离鉴定病原,并研究其致病性与分子特征,为防控心包积液-肝炎综合征提供参考。采集并处理临床样品,通过SPF鸡胚绒毛尿囊膜接种传代分离病毒,测定分离毒株的血凝性和鸡胚半数致死量(ELD50),进行攻毒试验、组织病理观察和病毒在不同组织中的分布检测,测定hexon基因序列并比对分析。结果显示,病毒传至第5代后鸡胚死亡出现规律性,鸡胚不同部位病毒分布检测发现肝脏、卵黄囊、尿囊液和绒毛尿囊膜中有病毒分布,将获得的病毒命名为SX17株。血凝性测定结果表明,SX17株对鸡、鸭、鹅红细胞均无血凝特性;测得ELD50为10-3.54/0.1mL;攻毒2d后试验鸡陆续出现临床症状,病理组织学检查肝脏、脾脏、心脏和肾脏均有典型变化;攻毒死亡鸡只肝脏、肠道、心包积液和肾脏中有病毒分布,在肌肉、粪便、心肌、肺脏和气管中未检测到病毒核酸。hexon基因序列比对提示SX17株为FAdV-4型流行毒株。结果表明,鸡胚分离血清4型禽腺病毒可收获肝脏、卵黄囊、绒毛尿囊膜和尿囊液,临床病例样品采集以肝脏、肠道、心包积液和肾脏为佳,分离到的SX17株为致病性较强的FAdV-4型流行毒株。     

一例鸡安卡拉病的实验室诊断与毒株鉴定

2016年5月份江苏省徐州市一养鸡场突发疑似鸡安卡拉病,并蔓延到周边地区。为了确诊该地区养鸡场鸡所发生疾病,并研究病毒分离株的基因遗传进化情况,试验根据鸡安卡拉病所属禽腺病毒(FAV)的相关基因组设计引物,建立鸡安卡拉病的PCR诊断方法。用鸡胚接种的方法进行病毒分离,并将分离出的病毒在SPF鸡上攻毒成功复制出该病例,获得鸡安卡拉病徐州株(SN2016),将SN2016株与国内其他毒株的Hexon基因进行遗传进化分析。结果表明:徐州地区该养鸡场发生的疾病为鸡安卡拉病,从该养鸡场分离出的鸡安卡拉病徐州株SN2016属于Ⅰ群禽腺病毒C基因型,与我国主要流行的FAV-C毒株(KT899324、FAU26221、NC_015323、HQ709228、EU931692、HE608152、KU587519)核苷酸序列的同源性最高,为95.8%～100%,与血清4型参考株在同一进化分支上。说明试验建立的PCR检测方法特异性良好,徐州地区该养鸡场发生的疾病是安卡拉病,分离株SN2016株的血清型为Ⅰ群禽腺病毒C基因型。     

鸡心包积液-肝炎综合征研究进展

心包积液-肝炎综合征是由Ⅰ群禽腺病毒血清4型(FAdV-4)感染家禽所引起的一种严重的禽类传染性疾病,临床上患病鸡以心包积液和肝炎为典型病理变化。近些年,我国不同省份都有病例报道,发病和死亡情况不尽相同。该病毒可通过垂直、水平两种方式进行传播,可感染多种品系鸡群,发病率与死亡率也不断增加,对养鸡业的危害也日趋上升。结合国内外研究,总结了当前安卡拉病毒的生物学特性、流行病学、检测方法及其防治措施,以期为科学研究和临床应用提供重要的参考。     

禽腺病毒4型ZZ株的致病性研究

禽腺病毒血清4型(FAdV-4)感染引起的心包积液综合征(HPS)病例在国内鸡群中持续增加,前期从患有HPS的病鸡样品中分离了1株FAdV-4病毒(FAdV-4 ZZ)并获得了全基因组序列。本研究以FAdV-4 ZZ病毒株感染SPF鸡,从临床症状、存活率、组织病理学变化、病毒的组织分布情况对该毒株的致病性进行了评价。结果:FAdV-4 ZZ株感染SPF鸡96 h内,所有感染鸡全部死亡;剖检发现FAdV-4 ZZ株感染组病死鸡全部出现心包积液和肝脏变黄肿大等典型的病理变化;HE染色后,除十二指肠外,感染组病死鸡的心、肝、脾、肺、肾、腺胃、法氏囊等组织均呈现出一定的组织病理学变化;肝组织的病毒载量最高,其次为肺,而且在心脏、脾、肾、十二指肠、腺胃和心包积液中都检测到不同程度的病毒存在。这些结果表明,FAdV-4 ZZ病毒株对鸡致病性较强。     

新型病毒性肠炎

<正>腺病毒是一种大多数禽类易患的病,鸡、鸽子等感染此病的典型症状为心包含有大量积液,也称为"安卡拉病毒"。雏鹅也易患此病,为雏鹅病毒性肠炎,是一种新型的鹅腺病,3～30日龄小鹅对该病最敏感。该病毒潜伏期多为4 d左右,3 d后小鹅开始感染此病毒,5 d后开始出现死亡,10～18 d后到达死亡顶峰,死亡率在     

鸡毒支原体与鸡安卡拉病毒混合感染病例的实验室诊断

为查明贵州省铜仁市某蛋鸡场11月龄蛋鸡发病死亡的原因,采集病死鸡病料进行细菌分离培养,以及禽流感病毒、新城疫病毒、鸡安卡拉病毒、鸡毒支原体的核酸检测。结果:病料中未分离出细菌;鸡安卡拉病毒和鸡毒支原体核酸检测均为阳性,禽流感病毒、新城疫病毒核酸检测为阴性。结论:鸡场病例存在鸡毒支原体与鸡安卡拉病毒混合感染。     

血清4型鸡腺病毒AHHN分离株全基因组测序及其致病性研究

为明确一株I群C亚群鸡腺病毒血清4型(FAdV-4)AHHN分离株基因组特征及其致病性,本研究对该病毒的全基因组序列进行测定,结果显示:AHHN分离株的基因组全长为43723bp,G+C含量为54.87%,ORF29序列具有FAdV-4变异株29aa缺失的特征。0.1mL/羽(1×10^5TCID50)病毒量肌肉注射3周龄SPF鸡2d后,感染鸡出现急性感染症状,5d内全部死亡;剖检可见其肝脏变黄,表面大量出血灶,伴有心包积液、胸腺萎缩、法氏囊萎缩等眼观病变;病理组织学观察显示,感染鸡肝脏呈现典型的嗜碱性包涵体肝炎病变;病毒载量测定结果显示,各脏器均有不同程度的病毒复制。上述结果表明,FAdV-4AHHN分离株对鸡具有高致病性及广泛的组织嗜性。本研究为进一步研究FAdV-4功能基因对病毒毒力的影响奠定了基础。     

贵州省某绿壳蛋鸡养殖场常见疫病感染情况监测分析

为了探明2017年贵州省某绿壳蛋鸡养殖场主要疫病的感染情况,试验从发病鸡场采集11只发病鸡组织器官和30份临床健康鸡血清样品,应用ELISA方法对30份临床健康鸡血清样品进行禽白血病病毒(ALV)、禽呼肠孤病毒(ARV)、禽脑脊髓炎病毒(AEV)和禽败血支原体(MG)抗体检测,应用RT-PCR方法检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)和禽白血病病毒(ALV),应用PCR方法检测安卡拉病毒(FAV-4)、马立克氏病病毒(MDV)和MG,并对发病鸡肝脏组织样品进行细菌分离培养,用16S RNA引物对分离菌进行PCR扩增,对扩增产物进行测序及比对,最后通过药敏纸片法对分离菌进行药敏试验。结果表明:在发病鸡场中,ALV、ARV、AEV和MG的抗体阳性检出率分别为40.00%(12/30)、83.33%(25/30)、80.00%(24/30)和53.33%(16/30);ALV和MDV的病原核酸检出率都较高,分别为100%(11/11)和81.82%(9/11),而IBV、NDV、AIV、FAV-4和MG均未能检出病原核酸;从发病鸡肝脏组织中均分离得到1株革兰氏阴性杆菌,经序列比对证实该分离菌为沙门氏杆菌;分离菌对硫酸新霉素和硫酸安普霉素极度敏感,对磷酸替米考星、林可霉素、延胡索酸泰妙菌素和硫酸黏杆菌素高度敏感,对盐酸多西环素中度敏感,对磺胺间甲氧嘧啶钠和酒石酸泰乐菌素低度敏感,对酶法阿莫西林不敏感。     

鸭源禽腺病毒分离株的致病性及细胞培养特性研究

为进一步了解Ⅰ群禽腺病毒鸭源分离株的致病性和生物学特性,采取接种鸡胚和鸭胚,攻毒SPF鸡和雏鸭,并应用鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肝细胞(CEL)培养观察细胞病变。试验结果表明,SPF鸡胚和鸭胚均出现死亡以及心包积液等典型症状,SPF鸡和雏鸭也引起不同程度死亡,且出现与临床送检病例类似的症状,PCR检测与序列分析证实分离的2株鸭源Ⅰ群禽腺病毒均为FadV-4血清型,病毒接种CEF细胞后没有细胞病变,而接种CEL细胞后则出现很强的聚集性、细胞变圆等典型病变。表明分离的鸭源FadV-4对SPF鸡和雏鸭均具有一定的致病性,对CEL细胞具有一定的适应性。     

中西药联用对牛源肺炎克雷伯菌体外抑菌作用研究

为了探讨中西药联用对牛源肺炎克雷伯菌体外抑菌效果,筛选出具有较强抑菌作用的中西药组合,试验采用水提法提取中药有效成分,试管二倍稀释法测定7种药物对牛源肺炎克雷伯菌分离株(KpQHD1～14)最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),微量肉汤棋盘稀释法测定12个药物组合联用抑菌浓度(FIC)指数。结果表明:7种药物对牛源肺炎克雷伯菌临床分离菌株有不同程度的抑菌作用,单用时以恩诺沙星和头孢曲松抑菌效果最佳;在12个中西药联用组合中,恩诺沙星+黄连、头孢曲松+黄连、氟苯尼考+黄连组合对牛源肺炎克雷伯菌临床分离株K.p QHD3、K.p QHD12表现为协同或相加作用,氟苯尼考+五味子组合对临床分离菌株K.p QHD1、K.p QHD4、K.p QHD6、K.p QHD9、K.p QHD5、K.p QHD7、K.p QHD8表现为协同或相加作用。说明中西药联用对牛源肺炎克雷伯菌有一定的体外抑菌作用。     

安卡拉病毒贵州流行株penton基因分子特性分析

为了解安卡拉病毒贵州流行株penton基因分子特征,本试验参考GenBank上FAdV基因序列设计合成特异性引物,对penton基因CDS区进行扩增,运用生物信息学软件对penton基因的核苷酸序列、蛋白质理化性质、信号肽、二级结构、三级结构和B细胞表位进行分析。结果显示,3株FAdV(GZ-BJ、GZ-QL、GZ-LPS)penton基因片段大小均为1 578 bp。系统进化树分析显示,GZ-BJ、GZ-QL、GZ-LPS均属于FAdV-4型,3株FAdV-4核苷酸同源性在99.9%～100%之间,推导氨基酸序列同源性在99.8%～100%之间;与国内其他分离株、国外分离株差异不大。蛋白理化性质分析显示,该蛋白属于不稳定的、不具有跨膜结构的亲水蛋白,其二级结构主要以无规则卷曲为主(54.29%);结构域预测结果显示,penton蛋白只含有一个低复杂度区域;B细胞表位预测发现,penton基因编码的氨基酸可能存在3个优势抗原表位区,分别为5-171、207-236和420-462位氨基酸处。本试验结果表明,安卡拉病毒penton基因相对保守,存在多个优势抗原表位,可作为安卡拉病毒防控研究靶蛋白,为该病毒防控与致病机理研究奠定基础。