鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗的安全性和免疫效力试验

用鸡法氏囊病免疫复合疫苗(IBDV-Icx)和常规IBD活疫苗分别免疫1日龄商品鸡和SPF鸡,进行疫苗的安全性及免疫效力比较.免疫后8d检测,IBDV-Icx免疫组鸡的法氏囊未见明显萎缩,而传统弱毒疫苗免疫组鸡的法氏囊萎缩明显;免疫后28d各组用IBDV标准强毒株进行攻击,IBDV-Icx免疫组鸡的攻毒保护率均为10/10,常规IBD活疫苗对照组分别为8/10及9/10.免疫后3个月,IBDV-Icx免疫组血清抗体可达AGP1∶32,攻击强毒仍为10/10保护,而常规IBD活疫苗免疫后2个月抗体AGP为0,攻毒保护率为1/10,免疫后3个月时攻毒10/10发病.     

猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗的研究——菌种选择、疫苗制备及安全性试验

以国内多发的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）1、3、7血清型强毒株作为制苗菌株，制成油佐剂三价灭活苗。经效力试验，对上述3种血清型强毒攻击的保护率分别为88．8％、88．8％和100％；试验动物安全性检验及田间安全检验，除个别猪出现轻微体温反应及暂时减食外，无其他异常反应。表明该苗对猪的保护性及安全性良好。     

兔出血症不同佐剂灭活疫苗的制备及免疫效果比较

本试验制备了3种兔出血症灭活苗,经对试验兔进行免疫对比试验,以1mL为免疫剂量,7d后检测,发现3种疫苗均可产生抗体。组织灭活苗、蜂胶佐剂苗、铝胶佐剂苗7d的抗体滴度分别为27.1、27.2、26.5;14d的抗体滴度分别为27.9、29.0、28.0;45d的抗体滴度分别为26.8、28.5、27.5;85d的抗体滴度分别为25.5、27.2、26.2;145d的抗体滴度普遍下降。在免疫攻毒试验中,第7、15、50、90d攻毒时,3种疫苗的保护率均为100%,对照组全部死亡;150d攻毒时,组织灭活苗、蜂胶佐剂苗、铝胶佐剂苗的保护率分别为25%、75%、50%。以上结果表明,3种疫苗都有很好的免疫效果,其中以蜂胶佐剂苗的抗体滴度更高,免疫保护期更长。     

应用BALB／c小鼠评价口蹄疫灭活疫苗的免疫效力

用不同剂量的口蹄疫灭活疫苗免疫3组雌性BALB／c小鼠，同时设空白对照组，每组8只。免疫后每7d采血一次，用液相阻断ELISA（LPB-ELISA）检测血清抗体水平；第28d用800LD50同源强毒攻击，攻毒后36h，每组随机选取3只BALB／c小鼠，采全血，分别用每只BALg／c小鼠全血注射12只乳鼠，每组共注射36只乳鼠，以乳鼠试验判定BALB／c小鼠的病毒血症和攻毒保护情况。结果表明，免疫组BALB／c小鼠均可产生特异性抗体，保护率分别为75．0％、63．9％、36．1％；对照组小鼠血清抗体为阴性。提示，BALB／c小鼠可以用来评价口蹄疫灭活疫苗的免疫效力。     

重组鸡痘病毒vFV282活疫苗最小免疫剂量及攻毒保护试验

将重组鸡痘病毒vFV282疫苗用生理盐水作10^-1，10^-2，10^-3，10^-4系列稀释，分别免疫7天龄鸡，于免疫后21d，分别用NDV、IBDV和FPV攻毒，观察其保护率，结果除NDV攻毒在10^-4组保护率为40％（4／10），其余各组均为100％（10／10）保护。表明该疫苗的最小免疫剂量≤10^-3TCID50/0.02mL。     

新城疫疫苗对SPF鸡和商业肉鸡的免疫学效力分析

将不同新城疫病毒疫苗免疫SPF鸡和商业用肉鸡，对免疫后抗体水平变化和对野毒株攻击的保护率进行了监测。利用Clone 30、F48E8和NXF3单联苗和联苗免疫过的SPF和商业肉鸡，对10^5EID50两次攻毒保护率均为100％；而只用La Sota疫苗免疫的SPF鸡保护率为40％。试验数据表明，分离株NXF3具有较好的免疫原性和对强毒攻击的保护，可以作为候选疫苗用于商业肉鸡。     

山羊痘灭活疫苗免疫保护试验

将山羊痘GT4-STV42-56种毒在犊牛睾丸细胞上繁殖,收获毒液,用0.1%甲醛溶液灭活,加适量206佐剂,制成山羊痘油佐剂灭活疫苗.将疫苗以不同剂量皮下免疫接种不同种群的山羊.免疫后21 d,用AV40株强毒进行攻毒保护试验.结果显示,免疫剂量达0.5 mL时,疫苗对内蒙绒山羊的保护率为100%,对广西黑山羊的保护率为80%.实验表明,山羊痘灭活疫苗对山羊的免疫效果确实可靠.     

禽流感重组禽痘病毒疫苗不同途径及剂量接种的免疫效力

将表达禽流感病毒(AIV)H5 HA和N1 NA基因的重组禽痘病毒(rFPV—HA—NA)以不同剂量分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴鼻途径接种于4周龄SPF鸡。结果，该疫苗经翅下刺种、肌肉注射和皮下注射途径接种的SPF鸡，能够诱导其产生血凝抑制(HI)抗体；用100LD50的HPAIVA／Goose／Guangalong／1／96(H5N1)毒株攻击后，免疫鸡无一发病和死亡，免疫保护率为100％。以点眼和滴鼻途径免疫的SPF鸡，大剂量接种能够诱导产生一定水平的抗体，攻毒后的保护率分别为83．3％、66．7％；而小剂量接种则不产生免疫反应，保护率为0。表明rFPV—HA—NA疫苗只有经翅下刺种、肌肉注射和皮下注射途径接种，才能够诱导机体产生高水平的免疫力。     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研究

将6种不同亚型的禽流感病毒（AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2）分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90％-100％。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100％,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制（HI）几何平均滴度（GMT）为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100％。     

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗对1日龄低母源抗体水平雏鸡免疫效果的研究

将鸡传染性法代囊病病毒(IBDV)BX株抗原和IBDV高免血清按一定比例混合,初步制备了无菌的鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗1~5(分别含有32、8、4、0.5及0.125单位IBDV中和抗体),用鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗1~5及BX株活疫苗分别免疫1日龄低母源抗体水平雏鸡,免疫后9 d观察法氏囊病变,免疫后28 d采血测定IBDV中和抗体,并用强毒攻击,计算各组疫苗保护率。结果显示,免疫后9 d,复合物疫苗1~3免疫组鸡法氏囊正常,复合物疫苗4、5免疫组和BX株活疫苗免疫组分别有2/10、4/10和5/10的试验鸡法氏囊出现了病变;免疫后28 d,复合物疫苗1~5免疫组和BX株活疫苗免疫组IBDV中和抗体效价分别为8.34log2、9.60log2、9.21log2、7.88log2、9.50log2和9.12log2,攻毒保护率分别为90%、100%、100%、80%、90%和80%。试验结果表明鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗2、3(分别含8、4单位IBDV中和抗体)免疫1日龄低母源抗体水平的雏鸡效果最好,攻毒保护率能达到100%。     

禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗不同剂量的免疫效果比较

将47只28日龄SPF鸡分为4组，第1～3组为试验组，每组12只，分别肌肉注射禽流感H9亚型灭活油乳剂疫苗0．1、0．3、0．5mL／只，第4组11只为对照组。各组鸡在免疫后1、2、3周采血，测定H9抗体水平；在免疫后3周用1：10稀释的AIV H9N2攻毒，0．2mL／只。攻毒后第2、3、4周继续测定H9抗体水平，观察了疫苗对鸡的保护效果。结果显示，0．5mL／只剂量的免疫效果比0．1mL／只和0．3mL／只剂量的免疫效果好；攻毒用的AIV H9N2的致病力低，对所有试验鸡均不致死。     

牛口蹄疫AsiaⅠ型灭活疫苗研究——疫苗效力、免疫持续期及安全性等检验

用选出的制苗用种素AsiaⅠ L/96的不同代次BHK-21细胞传代毒试制疫苗3批，共13.1L，在室内用健康牛进行了效力试验，保护率均达100%（5/5、5/5、5/5），对照牛全部发病（3/3、3/3、3/3）；免疫持续期测定2批次，免疫后6个月的牛血清中和抗体效价为1：20-1：120，8个月为1：8-1：60，经强毒攻击保护率达65%；保存期效力试验2批次，在2-8℃保存1a，对该疫苗的效力无影响；最小免疫剂量为每头3mL，注射免疫牛2322头，安全性良好，无不良反应。     

H9亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护研究

为评价H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护效果,将禽流感病毒HF株灭活疫苗和商品化鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗分别以0.3 mL/只接种21日龄SPF鸡,3周后采血测定HI抗体效价,并用2018年-2019年分离的4株H9亚型禽流感病毒分别进行攻毒。结果显示,免疫后21 d, HF株灭活疫苗免疫组HI抗体效价达到9.1 log2以上,商品化疫苗HI抗体效价几何平均值则为6.3 log2以内。4株H9亚型禽流感病毒流行毒株以10~(7.0)EID_(50)的剂量静脉攻毒后,HF株灭活疫苗免疫组可抵抗流行毒株的攻击,保护率为100%;而商品化疫苗对流行毒株的攻毒保护率仅为40%～60%。说明H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗具有较强的免疫原性,能使免疫鸡抵抗流行毒株的攻击。     

鸡新城疫病毒B95株免疫研究

本试验采用鸡胚增殖培养鸡新城疫B95株病毒，经对培养的尿囊液病毒价达EID5010^7.75。无菌性检验和安全性检验均符合疫苗要求，将其选作试验用疫苗进行了试验，结果表明，该苗滴鼻点眼免疫的最小剂量为10^5.75，拌料免疫最小剂量为10^6.75，以B95株疫苗滴鼻点眼免疫的鸡，在免疫后5天时就可产生坚强的免疫力，免疫期可达4个月，同居接触免疫鸡能获得了良好的免疫效果，攻毒总保护率与滴鼻点眼免疫差异不显著，拌料免疫效果良好，与NDV滴鼻点眼免疫差异不显著，B95株苗在0－4℃条件下保存4个月，免疫攻毒保护率达80％，在室温下保存2个月，免疫攻毒保护率达100％。     

鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联油乳剂灭活疫苗最小免疫剂量试验

将ND-AI(H9亚型)二联苗分别以1.0、0.5、0.2、0.1、0.05、0.02 mL 6个不同剂量免疫5周龄SPF鸡,免疫后3周采血测NDV及AIV 的HI抗体,并用H9亚型AIV及NDV F48株攻击.结果表明,这6个免疫组鸡的NDV HI抗体几何平均效价分别为2 10、2 8.8、2 8.5、2 7.0、2 6.1、2 5.7;AIV HI抗体水平分别为2 9.3、2 8.4、2 7.7、2 5.7、2 5.1、2 2.8;对照组鸡的NDV及AIV HI抗体均为零.攻毒试验证实,以0.1～1.0 mL剂量免疫鸡获得了100%的抵抗NDV及AIV强毒攻击的保护力;0.02 mL和 0.05 mL的免疫剂量也可使其对NDV与AIV的保护率达到90%～100%.     

猪瘟疫苗不同剂量对猪免疫攻毒效果试验报告

本试验根据近年来湖南农村猪瘟疫苗使用头剂量的变化，在室内、室外分别对猪接种不同剂量猪瘟弱毒乳兔苗和牛睾细胞苗，免疫期１０６￣１３０天攻击石门系猪瘟强毒，其室内接种组攻毒结果：猪瘟乳兔苗头剂量０．５ｍｌ１５０个免疫量，保护率１００％（５／５）；头剂量１．０ｍｌ１５０个免疫量保护率１００％（５／５）；头剂量１．０ｍｌ３００个免疫量保护率１００％（４／４）。牛睾国胞苗头剂量０．５ｍｌ３００个免疫量保护率     

鸡传染性法氏囊病活疫苗免疫效果评估

本试验选用A、B、C、D 4种商品化鸡传染性法氏囊病活疫苗免疫SPF鸡,进行攻毒试验以评估不同疫苗的免疫效果。10日龄SPF鸡分组后分别用A、B、C、D 4种商品化法氏囊病活疫苗按1羽份/只剂量接种免疫,21日龄时用1000 LD₅₀剂量的法氏囊超强毒株(GD0104)进行攻毒,各组疫苗的保护率分别为100%、85%、100%、100%;35日龄时用1000 LD₅₀剂量的法氏囊超强毒株(GD0104)进行攻毒,各组疫苗的保护率分别为100%、75%、95%、100%。免疫后抗体检测显示,抗体滴度水平D＞A＞C＞B,抗体转阳速度A＞D＞C＞B,免疫应激作用A、D＞B、C。综合考虑疫苗免疫攻毒后各项指标的变化,A、D疫苗免疫效果优于其他两种活疫苗,可以有效地为SPF鸡提供保护作用。     

鸭病毒性肝炎A66弱毒苗免疫产生期及免疫持续期试验

用鸭肝炎A66弱毒疫苗，经不同途径免疫1日龄雏鸭。结果，皮下注射组在免疫后2天即对ATCC强毒攻击达100％的保护率，口服组和滴鼻组在免疫后5天才能全部保护；一次饮水兔疫组和二次饮水免疫组在6日龄时对强毒攻击的保护率分别为60％和90％，用该弱毒苗免疫1日龄雏鸭和成年鸭，免疫期分别至少达45天及6个月。     

H9N2亚型禽流感病毒细胞灭活疫苗的免疫效果评价

由于经济和技术因素的制约,尚未有成功的禽流感细胞疫苗产品上市.为此,本研究在细胞扩增而来的含有H9亚型禽流感病毒(AIV)HA和NA基因的SH441HANAPR8(NS mutant)重组病毒里加入终浓度为0.1％的甲醛进行灭活.结果显示,37℃条件下灭活24 h的效果最佳.灭活好的H9 AIV SH441HANAPR8(NS mutant)与佐剂Montanide ISA 70VG乳化制备成灭活苗,以0.05、0.1、0.2、0.3 mL/只的剂量,分别胸部肌肉注射免疫3周龄的SPF鸡,并于免疫后21d静脉感染A/Chicken/Shanghai/441/2009 (H9N2) AIV.结果显示,该疫苗的最小免疫剂量为0.2 mL.此外,研究还发现,当HI抗体效价≥25时,疫苗对鸡只的攻毒保护率达到100％.     

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗对1日龄中等母源抗体水平雏鸡免疫效果的研究

将鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗和BX株活疫苗分别免疫1日龄中等母源抗体水平京红雏鸡,同时免疫1日龄SPF雏鸡作对照,免疫后第9天观察法氏囊病变,免疫后第28天采血测定IBDV中和抗体,并用强毒攻击,计算各组疫苗保护率。结果显示,免疫后第9天,免疫复合物疫苗组SPF雏鸡和京红雏鸡法氏囊均正常,BX株活疫苗组SPF雏鸡法氏囊出现了萎缩病变;免疫后第28天,对照SPF雏鸡和京红雏鸡的免疫复合物疫苗组、BX活疫苗组IBDV中和抗体效价分别为9.2log2、8.5log2和 7.2log2、4.4log2,攻毒保护率均为100%。试验结果表明免疫复合物疫苗免疫1日龄中等水平母源抗体雏鸡效果很好,能产生较高的中和抗体,攻毒保护率能达到100%。