中药金丝桃素注射液对鸡新城疫病毒抑制作用研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药金丝桃素注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药金丝桃素混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度5log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药金丝桃素注射液对鸡胚无毒性作用。中药金丝桃素与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药虎杖注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药虎杖注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药虎杖混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度4log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度7log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药虎仗注射液对鸡胚无毒性作用。中药虎杖与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中增殖。     

中药"金不换"注射液在鸡胚中对鸡新城疫病毒的抑制试验

用鸡胚培养法和红血球凝集（HA）试验,测定中药“金不换”注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药金不换混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度3log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药“金不换”注射液对鸡胚无毒性作用,与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药泽漆注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药泽漆注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用.试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药泽漆混合液,HA滴度为0;第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度为4loga;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度为8log2;第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度为0.结果表明,中药泽漆注射液对鸡胚无毒性作用.中药泽漆与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖.     

中药蟾甘口服液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药蟾甘口服液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药蟾甘口服液混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度5log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药蟾甘口服液对鸡胚无毒性作用。中药蟾甘口服液与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药组方鸡胚接种对鹅副粘病毒的抑制试验

选用中药组方对10日龄鸡胚进行药物毒性试验(第1组)和鹅副粘病毒抑制试验(第2组)。其中,第2组分为试验Ⅰ组(接种病毒尿囊液与中药组方混合液)、试验Ⅱ组(接种病毒尿囊液与西药利巴韦林混合液)、试验Ⅲ组(接种病毒尿囊液与生理盐水混合液)、对照组(不接种病毒尿囊液,不给药),并进行红血球凝集(HA)试验。结果:中药组方接种鸡胚无死亡;试验Ⅰ组HA滴度为0,试验Ⅱ组HA滴度为5 log2,试验Ⅲ组HA滴度为9 log2,对照组HA滴度为0。结果表明:中药组方对鸡胚无毒副作用;中药组方与病毒尿囊液同时接种鸡胚,能完全抑制鹅副粘病毒在鸡胚中增殖。     

中药蟾酥注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒的试验研究

采用鸡胚培养法和血凝抑制试验，测定了2种中药配方对新城疫病毒的抑制作用。试验共5组，第1组接种病毒尿囊液与中药1号混合液，HA滴度0。第2组接种病毒尿囊液与中药2号混合液，HA滴度2 log2。第3组接种病毒尿囊液与金刚烷胺，HA滴度2 log2。第4组接种病毒尿囊液与生理盐水，HA滴度7.5log2。第5组不接种病毒尿囊液，不用药，HA滴度0。结果表明，中药1号配方好于2号配方，中药2号配方与金刚烷胺效果相同。     

苗药复方在鸡胚中抗新城疫病毒的试验观察

用鸡胚培养法和红细胞凝集试验(HA)观察苗药复方提取液在鸡胚中对新城疫病毒的抑制作用。第1组接种病毒尿囊液与苗药复方提取液混合液,鸡胚72 h后存活率为88.9%,HA滴度为0;第1I组接种利巴韦林和病毒尿囊液混合液,鸡胚72 h存活率为47.1%,HA滴度为4log_2;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,鸡胚72 h后存活率为0,HA滴度为91og_2;第1V组只接种生理盐水,鸡胚72h存活率为100%,HA滴度0。第1组与第1II组差异极显著(P<0.01),第Ⅰ组与第II组差异显著(P<0.05)。试验表明,苗药复方提取液对鸡胚接种的新城疫病毒有较强的抑制作用。     

紫锥菊注射液鸡胚内抗新城疫病毒作用研究

为研究紫锥菊注射液的抗病毒作用,用鸡胚培养法和血凝试验(HA)测定了紫锥菊注射液及对照药液对感染新城疫病毒鸡胚的保护作用.结果显示,紫锥菊注射液对鸡胚无毒.试验Ⅰ组(紫锥菊注射液和新城疫病毒液混合接种组)对鸡胚保护率达75%,其尿囊液HA滴度为0.试验Ⅱ组(利巴韦林注射液和新城疫病毒液混合接种组)对鸡胚的保护率为37....     

鸡新城疫病毒与传染性支气管炎病毒同胚培养的试验研究

将鸡新城疫病毒（NDV）和鸡传染性支气管炎病毒（IBV）按一定的稀释比例等量混合接种9~10日龄SPF鸡胚,让其在同一鸡胚中增殖（简称同胚培养）。试验结果表明,用5倍稀释的ND-Lasota病毒液与 5000倍稀释的IBH₁₂₀病毒液等体积混合后尿囊腔接种鸡胚,能在同一鸡胚中正常增殖,接种后96 h收毒,用红细胞凝集试验（HA）测得NDV、IBV两种病毒的血凝价分别为11 log2和12 log2,不低于各自病毒单独增殖的HA滴度,病毒的增殖基本趋于平衡。同时也证实了在合适的培养条件下,IBV对NDV的复制不会产生干扰。     

十种单味中药汤剂抗贵州鸭源N6亚型禽流感病毒的筛选

为了筛选出抗N6亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)效果较好的中药,试验用鸡胚培养方法确定桂枝、黄芩、防风、金银花等10种中药汤剂的安全性;用RT-PCR扩增方法检测鸡胚试验扩增病毒是否成功;用鸡胚培养试验和RT-PCR方法确定N6亚型AIV的鸡胚半数感染量(EID_(50));中药汤剂与AIV等量混合后进行鸡胚尿囊腔接种培养试验,培养72 h后收集尿囊液,再对收集的尿囊液进行血凝素(HA)效价测定。结果表明:0.2 mL浓度为250 mg/mL的中药汤剂为安全剂量。贵州鸭源N6亚型AIV EID_(50)为1×10~(-7.66)/0.2 mL。中药汤剂与100EID_(50)等量混合后进行鸡胚尿囊腔接种,黄芩组、防风组、金银花组、荆芥组、鱼腥草组、大青叶组、川芎组、桂枝组、苍术组、地黄组的HA效价分别为2.83,3.58,4.43,4.50,5.00,5.00,5.17,6.20,6.40,6.80 lb。说明在试验选用的十味中药中,单味黄芩汤剂在鸡胚中抗贵州鸭源N6亚型AIV效果最佳,地黄效果最差。     

中药笃温康体内外的抗病毒作用效果研究

本试验旨在研究笃温康的体内外抗病毒效果。以H9亚型禽流感病毒为供试病毒,将不同含量病毒与笃温康混合并接种于SPF鸡胚,72 h后无菌收取每个鸡胚尿囊液,用0.75%鸡红细胞测定尿囊液血凝价;以H9亚型禽流感病毒和传染性支气管炎病毒混合液为供试病毒,人工感染SPF鸡,感染后不同时间用笃温康进行治疗,观察其病理变化。试验结果表明,笃温康体外能够抑制病毒10倍稀释液对0.75%鸡红细胞的凝集,对H9禽流感病毒在鸡胚内复制具有抑制作用。提示笃温康对感染IBV病毒、H9禽流感病毒的SPF鸡具有较好的保护作用,而且随着笃温康用量的增加,其保护作用增强。     

重组鸡α-干扰素对新城疫病毒复制的影响

毕赤酵母表达鸡α-干扰素经纯化后,以50000U、5000U和500U分别与200ELD50新城疫病毒疫苗株LaSota和中等毒力Q株等量混合,接种9～10日龄SPF鸡胚,记录鸡胚死亡情况并测定尿囊液HA效价,结果表明,高浓度重组干扰素可使病毒致死鸡胚时间延长,并使Q株在尿囊液中的HA效价下降2～3个滴度。     

湖南省鸵鸟新城疫病毒的分离及生物学特性测定

湘南某鸵鸟养殖场饲养的鸵鸟发生一起疫病 ,疑似鸵鸟新城疫 ,为了准确迅速地对其进行确诊 ,用 SPF鸡胚进行病毒的分离 ,进行了HA、HI、病毒中和试验及生物学特性测定。结果最初接种的 SPF鸡胚 48～ 96h全部死亡 ,其尿囊液 HA效价为 2 3,死亡胚充血、出血 ,将尿囊液继续传代至第 3代时 ,死亡胚尿囊液 HA在收稿日期 :2 0 0 3- 0 4 - 0 9基金项目 :湖南省林业厅资助 (97- 2 4 )作者简介 :刘振湘 (1971- ) ,男 ,湖南耒阳人 ,湖南环境生物职业技术学院讲师。主要从事预防兽医学的教学与科研工作。2 5～ 2 6 ;其 ND HI试验为阳性 ;鸡胚中和试验结果接种经 ND标准阳性血清处理的病料未见死亡 ,HA效价为 2 0 ,而接种未经处理病料的鸡胚于 2 6～ 3 8h后全部死亡 ,HA效价为 2 6～ 7;其生物学特性测定结果 ICPI为 1 .62 ,IVPI为 1 .0 ,MDT为 45h,对氯仿和酸敏感 ,NHAT为慢 ,HOT为 1 5min。结果表明该分离毒为 NDV并表现出与鸡 NDV相同的特性。     

H9亚型HP株禽流感病毒繁殖规律的探索

为了研究H9亚型HP株禽流感病毒接种非免疫鸡胚后病毒的繁殖规律,试验用H9亚型HP株禽流感病毒接种非免鸡胚,记录不同时间段死亡的鸡胚数量,并分别收获各时间段死亡鸡胚的尿囊液,测定不同时间段尿囊液的病毒效价。结果表明,接种H9亚型HP株禽流感病毒后,非免鸡胚死亡高峰期出现在60～84 h,死亡数量占接种鸡胚数的80%以上,而该时间段死亡鸡胚尿囊液的病毒滴度也处于最高峰,最高到达10^9.63EID₅₀/mL,直到96 h病毒仍维持较高水平(10^9.50EID₅₀/m L),而96 h后病毒滴度开始衰减。     

禽流感检测方法

将病料以尿囊腔途径接种9-11日龄的SPF鸡胚,收集死亡鸡胚尿囊液。将收获的鸡胚尿囊液进行血凝价检测,当血凝滴度达1：16以上时。确定病毒分离为阳性。若初次传代获得的尿囊液未检测到血凝性,需再盲传两代．若仍未检测到血凝性则认为病毒分离阴性。将收获的鸡胚尿囊液进行血凝抑制试验,若被AIV标准阳性血清抑制,     

不同日龄鸡胚接种不同浓度病毒对鸽新城疫病毒PB9601株鸡胚适应毒产毒量比较

利用不同浓度的鸽新城疫病毒（NDV）PB9601株在不同日龄的鸡胚上繁殖，观察鸡胚的死亡时间、尿囊液的收获量，并分别测定尿囊液中HA滴度和ELD50值，比较结果表明，以1：500稀释液0．1ml接种9日龄SPF鸡胚或1：100稀释液0．1ml接种10日龄胚产毒量最高。     

快速检测IBV的平板凝集试验

美国学者 Miguel Ruano等建立了一种血凝 (HA)试验，用于快速检测鸡胚尿囊液中的传染性支气管炎病毒 (IBV)。试验检测了 468份疑似传支病鸡的气管和盲肠扁桃体样品。样品经处理后接种鸡胚尿囊腔，收集尿囊液，并用神经氨酸酶处理，然后取 50μ L酶处理的尿囊液与 5％的鸡红血球悬液 (CRBCs)在陶瓷板上混合，在 1 min内判定结果，凝集者为阳性。应用本方法检测接种一种或两种其它禽病病毒的鸡胚尿囊液，以测定其特异性。该方法的敏感性与鸡胚病变及 RT— PCR检测结果作比较。试验结果表明，这种平板血凝试验不仅敏感、特异，可重复性…     

进口法国种鸽新城疫病毒的分离和鉴定

用鸡成纤维细胞和鸡胚从30只进口法国种鸽中分离出一株病毒,细胞培养物的HA效价为3log2,尿囊液的HA效价为4log2,新城疫阳性血清能抑制这种血凝作用,HI效价均为7log2,禽流感阳性血清不能抑制这种血凝作用.通过透射电镜观察、毒力测定等最终确认,分离出的病毒为新城疫病毒.     

2017年盐田区禽流感预警监测结果与分析

一、样品采集与检测项目共进行了4次检测样品采集,共采集鸡喉拭子109份分别进行禽流感病毒分离,具体情况见表1。二、检测内容及结果将鸡喉拭子样品做10000xg,4℃,15min离心处理,经0.45μm过滤器过滤除菌,经尿囊腔接种9日龄SPF鸡胚,3枚/份,0.1ml/枚,置37℃孵化机孵化。弃24h内死亡的鸡胚,收集并检测24h至72h的鸡胚尿囊液,进行血凝试验(HA),对HA价达2log以上胚液,分别用H5亚型禽流感HI标准血清、H7亚型禽流感HI标准血清、H9亚型禽流感HI标准血清进行血凝抑制试验(HI)。对HA检测阳性样品鸡胚尿囊液进行RNA抽提,经禽流感(H5、H7、H9)特异性引物进行RT-PCR扩增,检测结果具体情况见表2。