中药炎康注射液对伪狂犬病病毒的抑制试验

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药炎康注射液对伪狂犬病病毒的抑制作用。试验共分4组:第Ⅰ组同时接种病毒尿囊液与中药炎康混合液,HA滴度为0。第Ⅱ组同时接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度为4 log2。第Ⅲ组同时接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度为7 log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度为0。结果表明,中药炎康注射液对鸡胚无毒性作用;中药炎康与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制伪狂犬病病毒在鸡胚中增殖。     

中药虎杖注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药虎杖注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药虎杖混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度4log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度7log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药虎仗注射液对鸡胚无毒性作用。中药虎杖与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中增殖。     

中药金丝桃素注射液对鸡新城疫病毒抑制作用研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药金丝桃素注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药金丝桃素混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度5log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药金丝桃素注射液对鸡胚无毒性作用。中药金丝桃素与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药"金不换"注射液在鸡胚中对鸡新城疫病毒的抑制试验

用鸡胚培养法和红血球凝集（HA）试验,测定中药“金不换”注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药金不换混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度3log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药“金不换”注射液对鸡胚无毒性作用,与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药蟾甘口服液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药蟾甘口服液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药蟾甘口服液混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度5log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药蟾甘口服液对鸡胚无毒性作用。中药蟾甘口服液与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城病毒在鸡胚中增殖。     

中药组方鸡胚接种对鹅副粘病毒的抑制试验

选用中药组方对10日龄鸡胚进行药物毒性试验(第1组)和鹅副粘病毒抑制试验(第2组)。其中,第2组分为试验Ⅰ组(接种病毒尿囊液与中药组方混合液)、试验Ⅱ组(接种病毒尿囊液与西药利巴韦林混合液)、试验Ⅲ组(接种病毒尿囊液与生理盐水混合液)、对照组(不接种病毒尿囊液,不给药),并进行红血球凝集(HA)试验。结果:中药组方接种鸡胚无死亡;试验Ⅰ组HA滴度为0,试验Ⅱ组HA滴度为5 log2,试验Ⅲ组HA滴度为9 log2,对照组HA滴度为0。结果表明:中药组方对鸡胚无毒副作用;中药组方与病毒尿囊液同时接种鸡胚,能完全抑制鹅副粘病毒在鸡胚中增殖。     

中药蟾酥注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒的试验研究

采用鸡胚培养法和血凝抑制试验，测定了2种中药配方对新城疫病毒的抑制作用。试验共5组，第1组接种病毒尿囊液与中药1号混合液，HA滴度0。第2组接种病毒尿囊液与中药2号混合液，HA滴度2 log2。第3组接种病毒尿囊液与金刚烷胺，HA滴度2 log2。第4组接种病毒尿囊液与生理盐水，HA滴度7.5log2。第5组不接种病毒尿囊液，不用药，HA滴度0。结果表明，中药1号配方好于2号配方，中药2号配方与金刚烷胺效果相同。     

苗药复方在鸡胚中抗新城疫病毒的试验观察

用鸡胚培养法和红细胞凝集试验(HA)观察苗药复方提取液在鸡胚中对新城疫病毒的抑制作用。第1组接种病毒尿囊液与苗药复方提取液混合液,鸡胚72 h后存活率为88.9%,HA滴度为0;第1I组接种利巴韦林和病毒尿囊液混合液,鸡胚72 h存活率为47.1%,HA滴度为4log_2;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,鸡胚72 h后存活率为0,HA滴度为91og_2;第1V组只接种生理盐水,鸡胚72h存活率为100%,HA滴度0。第1组与第1II组差异极显著(P<0.01),第Ⅰ组与第II组差异显著(P<0.05)。试验表明,苗药复方提取液对鸡胚接种的新城疫病毒有较强的抑制作用。     

紫锥菊注射液鸡胚内抗新城疫病毒作用研究

为研究紫锥菊注射液的抗病毒作用,用鸡胚培养法和血凝试验(HA)测定了紫锥菊注射液及对照药液对感染新城疫病毒鸡胚的保护作用.结果显示,紫锥菊注射液对鸡胚无毒.试验Ⅰ组(紫锥菊注射液和新城疫病毒液混合接种组)对鸡胚保护率达75%,其尿囊液HA滴度为0.试验Ⅱ组(利巴韦林注射液和新城疫病毒液混合接种组)对鸡胚的保护率为37....     

十种单味中药汤剂抗贵州鸭源N6亚型禽流感病毒的筛选

为了筛选出抗N6亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)效果较好的中药,试验用鸡胚培养方法确定桂枝、黄芩、防风、金银花等10种中药汤剂的安全性;用RT-PCR扩增方法检测鸡胚试验扩增病毒是否成功;用鸡胚培养试验和RT-PCR方法确定N6亚型AIV的鸡胚半数感染量(EID_(50));中药汤剂与AIV等量混合后进行鸡胚尿囊腔接种培养试验,培养72 h后收集尿囊液,再对收集的尿囊液进行血凝素(HA)效价测定。结果表明:0.2 mL浓度为250 mg/mL的中药汤剂为安全剂量。贵州鸭源N6亚型AIV EID_(50)为1×10~(-7.66)/0.2 mL。中药汤剂与100EID_(50)等量混合后进行鸡胚尿囊腔接种,黄芩组、防风组、金银花组、荆芥组、鱼腥草组、大青叶组、川芎组、桂枝组、苍术组、地黄组的HA效价分别为2.83,3.58,4.43,4.50,5.00,5.00,5.17,6.20,6.40,6.80 lb。说明在试验选用的十味中药中,单味黄芩汤剂在鸡胚中抗贵州鸭源N6亚型AIV效果最佳,地黄效果最差。     

湖南省鸵鸟新城疫病毒的分离及生物学特性测定

湘南某鸵鸟养殖场饲养的鸵鸟发生一起疫病 ,疑似鸵鸟新城疫 ,为了准确迅速地对其进行确诊 ,用 SPF鸡胚进行病毒的分离 ,进行了HA、HI、病毒中和试验及生物学特性测定。结果最初接种的 SPF鸡胚 48～ 96h全部死亡 ,其尿囊液 HA效价为 2 3,死亡胚充血、出血 ,将尿囊液继续传代至第 3代时 ,死亡胚尿囊液 HA在收稿日期 :2 0 0 3- 0 4 - 0 9基金项目 :湖南省林业厅资助 (97- 2 4 )作者简介 :刘振湘 (1971- ) ,男 ,湖南耒阳人 ,湖南环境生物职业技术学院讲师。主要从事预防兽医学的教学与科研工作。2 5～ 2 6 ;其 ND HI试验为阳性 ;鸡胚中和试验结果接种经 ND标准阳性血清处理的病料未见死亡 ,HA效价为 2 0 ,而接种未经处理病料的鸡胚于 2 6～ 3 8h后全部死亡 ,HA效价为 2 6～ 7;其生物学特性测定结果 ICPI为 1 .62 ,IVPI为 1 .0 ,MDT为 45h,对氯仿和酸敏感 ,NHAT为慢 ,HOT为 1 5min。结果表明该分离毒为 NDV并表现出与鸡 NDV相同的特性。     

鸡新城疫病毒与传染性支气管炎病毒同胚培养的试验研究

将鸡新城疫病毒（NDV）和鸡传染性支气管炎病毒（IBV）按一定的稀释比例等量混合接种9~10日龄SPF鸡胚,让其在同一鸡胚中增殖（简称同胚培养）。试验结果表明,用5倍稀释的ND-Lasota病毒液与 5000倍稀释的IBH₁₂₀病毒液等体积混合后尿囊腔接种鸡胚,能在同一鸡胚中正常增殖,接种后96 h收毒,用红细胞凝集试验（HA）测得NDV、IBV两种病毒的血凝价分别为11 log2和12 log2,不低于各自病毒单独增殖的HA滴度,病毒的增殖基本趋于平衡。同时也证实了在合适的培养条件下,IBV对NDV的复制不会产生干扰。     

重组鸡α-干扰素对新城疫病毒复制的影响

毕赤酵母表达鸡α-干扰素经纯化后,以50000U、5000U和500U分别与200ELD50新城疫病毒疫苗株LaSota和中等毒力Q株等量混合,接种9～10日龄SPF鸡胚,记录鸡胚死亡情况并测定尿囊液HA效价,结果表明,高浓度重组干扰素可使病毒致死鸡胚时间延长,并使Q株在尿囊液中的HA效价下降2～3个滴度。     

H9亚型HP株禽流感病毒繁殖规律的探索

为了研究H9亚型HP株禽流感病毒接种非免疫鸡胚后病毒的繁殖规律,试验用H9亚型HP株禽流感病毒接种非免鸡胚,记录不同时间段死亡的鸡胚数量,并分别收获各时间段死亡鸡胚的尿囊液,测定不同时间段尿囊液的病毒效价。结果表明,接种H9亚型HP株禽流感病毒后,非免鸡胚死亡高峰期出现在60～84 h,死亡数量占接种鸡胚数的80%以上,而该时间段死亡鸡胚尿囊液的病毒滴度也处于最高峰,最高到达10^9.63EID₅₀/mL,直到96 h病毒仍维持较高水平(10^9.50EID₅₀/m L),而96 h后病毒滴度开始衰减。     

禽流感检测方法

将病料以尿囊腔途径接种9-11日龄的SPF鸡胚,收集死亡鸡胚尿囊液。将收获的鸡胚尿囊液进行血凝价检测,当血凝滴度达1：16以上时。确定病毒分离为阳性。若初次传代获得的尿囊液未检测到血凝性,需再盲传两代．若仍未检测到血凝性则认为病毒分离阴性。将收获的鸡胚尿囊液进行血凝抑制试验,若被AIV标准阳性血清抑制,     

不同日龄鸡胚接种不同浓度病毒对鸽新城疫病毒PB9601株鸡胚适应毒产毒量比较

利用不同浓度的鸽新城疫病毒（NDV）PB9601株在不同日龄的鸡胚上繁殖，观察鸡胚的死亡时间、尿囊液的收获量，并分别测定尿囊液中HA滴度和ELD50值，比较结果表明，以1：500稀释液0．1ml接种9日龄SPF鸡胚或1：100稀释液0．1ml接种10日龄胚产毒量最高。     

快速检测IBV的平板凝集试验

美国学者 Miguel Ruano等建立了一种血凝 (HA)试验，用于快速检测鸡胚尿囊液中的传染性支气管炎病毒 (IBV)。试验检测了 468份疑似传支病鸡的气管和盲肠扁桃体样品。样品经处理后接种鸡胚尿囊腔，收集尿囊液，并用神经氨酸酶处理，然后取 50μ L酶处理的尿囊液与 5％的鸡红血球悬液 (CRBCs)在陶瓷板上混合，在 1 min内判定结果，凝集者为阳性。应用本方法检测接种一种或两种其它禽病病毒的鸡胚尿囊液，以测定其特异性。该方法的敏感性与鸡胚病变及 RT— PCR检测结果作比较。试验结果表明，这种平板血凝试验不仅敏感、特异，可重复性…     

H9N2流感病毒在鸡胚中繁殖规律及血凝活性的研究

为了研究H9N2流感病毒在鸡胚中的繁殖规律及其血凝活性,试验用H9N2河南分离毒株接种鸡胚,对收获的尿囊液进行10倍系列稀释,选取不同浓度尿囊液分别接种不同日龄鸡胚,测定不同日龄鸡胚接种病毒后尿囊液产量及其血凝效价,探讨影响毒株血凝活性的因素。结果表明:10日龄鸡胚接种1×10-5病毒时收获的尿囊液产量最多且血凝效价最高;筛选分析影响H9N2病毒血凝活性因素时发现,缓冲液的p H值为3.0~5.5时发生溶血,水浴温度为70~80℃时几乎完全丧失活性。     

扶正解毒微粉与扶正解毒散体外抗IBDV药效对比试验

将100℃浸泡制备的扶正解毒微粉和扶正解毒散溶液分别用生理盐水稀释成5个浓度,每个浓度经绒毛尿囊膜接种10～12月龄SPF鸡胚6枚,每胚0.2 mL,测定其对鸡胚的安全浓度;然后将由扶正解毒微粉和扶正解毒散制备的溶液在安全浓度下倍比稀释至500、250、125μg mL-13个浓度,分别与传染性法氏囊病毒(IBDV)在37℃共同培育1 h后,每个浓度中药和法氏囊病毒混合液经绒毛尿囊膜接种10～12月龄SPF鸡胚6枚,每胚0.2 mL,测定其ELD50,计算各病毒滴度。结果表明,在所选浓度范围内扶正解毒微粉和扶正解毒散制备溶液都可以降低病毒滴度值,且高浓度效果优于低浓度;同浓度扶正解毒微粉效果优于扶正解毒散。     

鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒试验

为证明鱼腥草抗新城疫病毒的作用效果,通过接种鸡胚方法,对病毒接种前、接种同时、接种后加药三种方式处理的鸡胚尿囊液血凝效价进行测定。结果显示,在三种不同的加药方式中,不同浓度的鱼腥草提取液都能够降低新城疫病毒感染鸡胚尿囊液的血凝效价;鱼腥草提取液和新城疫病毒同时注入鸡胚时,鱼腥草原液抗病毒效果最好;鱼腥草提取液于新城疫病毒接种后注入鸡胚时,2倍稀释液抗病毒效果最好;鱼腥草提取液先于新城疫病毒注入鸡胚时,4倍和8倍稀释液抗病毒效果最好。结果表明,鱼腥草提取液能够抑制新城疫病毒在鸡胚尿囊液中的增殖;鱼腥草提取液在鸡胚内抗新城疫病毒活性与其加药方式及浓度有关。