几种血清学方法诊断家畜锥虫病的对比试验

目前在我国对家畜锥虫病的血清学诊断方法有10多种,但这些方法均有不足之处。为了选择一种在农村临床诊断和大面积普查中检出率高,假阳性低,材料来源广,反应快,易于操作,既经济又有实用性的最佳诊断方法,几年来,我市在检查家畜锥虫病的同时,将常用的几种血清学方法作为比较,最后选择了补体结合反应、间接血凝、物理吸附、乳胶凝集反应、变态反应、化学交联     

应用反向间接血凝抑制试验诊断猪囊虫病的研究

<正> 近年来,国内外学者对猪囊虫病的免疫学诊断方法作了大量的研究,有些方法已在国内外一定范围内推广应用。但因囊虫抗原成分复杂,这些诊断方法均存在不同程度的假阳性反应,假阳性率约为1～10%。有些方法在现场应用时发现假阳性率更高。为了减少假阳性反应,许多学者对囊虫抗原进行分离纯化,其主要技术途径包括凝胶过滤、亲和层析等电聚焦和离子交换技术等等。囊虫粗抗原经分离纯化后,其特异性明显提高,但仍未彻底消除假阳性     

青海牦牛新孢子虫病的血清学诊断

使用新孢子虫（Neopora caninum）的全虫体速殖子或来自速殖子的抗原出现一些无法避免的问题，由于这些抗原与它相近虫体T．gondii间存在交叉反应，容易产生假阳性。因此，需要建立一个可靠的、敏感的和特异性的诊断方法用来检测N．caninum的特异性抗体。在本研究中进行了ELISA诊断方法的建立，并且用纯化的重组抗原GST-NcSAGlt作为ELISA诊断抗原，进行了牦牛N．caninum抗体的检测。     

牛结核体外免疫诊断技术

牛分支杆菌感染的主要特征是引起细胞内免疫反应。现在针对牛结核的诊断试验是以T细胞反应机制为基础的。低敏感性的结核血清学试验是不值得提倡的，血清学试验最好作为细胞学试验的补充而不是替代。最近，发现了牛结核r干扰素试验是一种快速的(24小时)惟一使用全血的体外试验，该方法在澳大利亚地区应用发现，该方法要比传统的结核菌素法诊断牛结核更敏感。假阳性反应的难题归因于所使用的抗原制品间的交叉反应特性，设动物对牛PPD和禽PPD的r干扰素反应作对照可解决假阳性的问题。虽然牛结核特异性蛋白已确认并被分类，这些特异性蛋白可能在血清学或细胞学诊断试验中使用，但是它们可能因牛对结核分支杆菌感染的免疫反应的遗传多样性而受到限制。     

牛结核病体外免疫诊断技术

牛分支杆菌感染的主要特征是引起 细胞免疫反应。现在牛结核病的诊断试验是 以T细胞反应机制为基础的。低敏感性的结 核血清学试验是不值得提倡的,血清学试验 最好作为细胞学试验的补充而不是替代。最 近,发现了牛结核γ干扰素试验是一种快速 的(24h)惟一使用全血的体外试验,该方法 在澳大利亚应用,结果表明,比传统的结核菌 素法诊断牛结核更敏感。假阳性反应的难题 归因于所使用的抗原制品间的交叉反应特 性,设动物对牛PPD和禽PPD的γ干扰素反 应作对照可解决假阳性的问题。虽然牛结核 特异性蛋白已确认并被分类,这些特异性蛋 白可能在血清学或细胞学诊断试验中使用, 但是它们可能因牛对牛分支杆菌感染的免疫 反应的遗传多样性而受到限制。     

牛副结核病间接血凝反应

牛副结核病是副结核分枝杆菌(M.paratuberculosis)引起的反刍曾(主要是牛、羊)的一种传染性慢性肠炎。本病散布于全世界,迄今尚无满意的诊断与防治方法。目前国内外常用的诊断方法有皮内反应及补体结合反应(下称补反)。其缺点是对有症状牛和无症状牛的检出各有偏废,检出率不高,并有不少假阳性。虽然细菌学诊断比较可靠,但检出率很低,其中培养法需时数月,而且阴性结     

马梨形虫病及其诊断方法概述

本文概述了马梨形虫病的流行特点及其诊断方法，并分析了各种诊断方法的优缺点。病原学诊断可快速诊断病例，但大量检测时操作较为困难；ELISA 技术已经十分成熟，是世界动物卫生组织推荐的标准诊断方法；CFT可准确诊断早期（急性）感染，但无法识别经过药物已产生抗补体反应的个体；PCR方法可直接检测病原体核酸，敏感性较高，但操作较为复杂；real-time PCR特异性强、灵敏度高、稳定性强，但所需仪器昂贵；LAMP技术敏感、简便、快速，但常出现假阳性结果。除病原学检测外，以上方法大多不适于田间检测。因此，需要建立一种操作简便、诊断准确、成本低廉的田间检测方法，未来研究方向将主要侧重于免疫学和分子生物学。     

牛副结核病疫群中对补反、变态呈阴性反应牛的胎盘感染率调查

牛副结核病胎盘传染已被一些学者通过从病牛胎儿中分离到副结核分枝杆菌所证实。由于副结核病尚没有令人满意的诊断方法,当前所应用的诊断方法都或多或少地存在一些假阳性和假阴性,这些假阴     

血浆纤维蛋白连结素测定在牛酮血病中的临床意义

纤维蛋白连结素(Fn,fibronectin)存在于血液及各型细胞表面,为一组多功能的非免疫性高分子糖蛋白,由多种细胞所合成与分泌,具有诱导细胞、连结细胞和间质、参与血液凝固和机体防御等功能,Fn含量的改变与多种疾病有关.本研究通过对牛酮血病血液Fn的检测,探讨了其临床诊断价值.     

猪囊虫病的早期诊断方法

关于猪囊虫病的诊断方法,国内外有过不少报道,如“变态反应”,“环状沉淀”,“间接血凝”和“炭凝集反应”等。但是均因存在“交叉反应”和所制抗原本身所造成的假阳性而影响在实际工作中的应用。为探索诊断猪囊虫病的方法,我们在流行病学调查的基础上,于１９９１年...     

免疫学诊断试验结果的评估

介绍了一种合理评估免疫学诊断技术结果的数学方法。基于不同诊断技术的灵敏性、特异性以及某种疫病的经验感染率,分别给出了排除假阳性、假阴性及评估个体与群体诊断结果真正感染率的方法。     

结核病与BCG疫苗接种个体TaqMan探针荧光定量PCR诊断方法的建立及初步应用

为快速鉴别诊断结核病(TB),本研究以GenBank登录的致病性结核分枝杆菌复合群、人型结核杆菌和牛分枝杆菌特有基因为对象,设计并合成引物及探针,建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法。实验结果表明,该方法对标准质控菌株反应呈阳性,对卡介苗(BCG)及其他微生物样品反应呈阴性;对结核分枝杆菌或牛分枝杆菌标准菌株的检测灵敏度可达单个菌细胞水平。对45份结核菌素PPD皮肤试验结果为阳性的临床样本进行TaqMan探针荧光定量PCR检测,36份为阳性;而对PPD检测为阴性的50份临床样本进行检测时,7份为阳性。本研究结果表明,所建立的方法可用于TB的鉴别诊断,可对由BCG接种或环境中分枝杆菌引起的PPD检测假阳性样本进行鉴别,对TB的快速检测和早期诊断具有重要意义。     

对酶联免疫吸附法诊断公羊布氏杆菌病的评价

用酶联免疫吸附法,对已确认清除了布氏杆菌病的羊群和已知感染了布氏杆菌病的羊群的羊只血清进行了检查,其结果与补体结合反应和精液的细菌学检查基本相符。酶联免疫吸附法和补体结合反应从临床诊断阴性群的公羊中检出了0.5％的假阳性反应。然而酶联免疫吸附法检出了感染群中补体结合反应没有检出的一些排     

几种布鲁氏菌病诊断方法的比较

布鲁氏菌病的诊断通常采用细菌学和免疫学方法,尽管细菌学方法是最直接的方法,但培养布鲁氏菌需要较长时间。随着免疫学技术的不断成熟和发展,出现了免疫电泳、补体结合试验、反向间接血凝、酶联免疫吸附试验及放射免疫分析方法等布病的诊断方法,使布鲁氏菌病能够早期诊断。但这些方法也存在假阳性和假阴性等问题。PCR技术提供了其他技术无法比拟的细菌检测手段,具有敏感、快速、准确的优点。PCR方法为布鲁氏菌病的早期诊断开辟了一条新途径。     

结核菌素反应接种口蹄疫、布氏杆菌病和狂犬病三种疫苗的关系

<正> 引言结核菌素反应(结素反应)程度的降低已在受病毒感染和接种病毒疫苗后的人体观察到。结核菌素反应的这些变化也同样在感染某些细菌的人和豚鼠体内发现。在拉丁美州和加勒比海沿岸一些国家中,牛结核病的防治计划正付诸实施,即将开始对牛接种疫苗以预防口蹄疫、狂犬病和布氏杆菌病。接种疫苗与结核菌素试验同时进行可以精     

免疫学诊断试验结果的评估

介绍了一种合理评估免疫学诊断技术结果的教学方法。基于不同诊断技术的灵敏性、特异性以及某种疫病的经验感染率，分别给出了排除假阳性、假阴性及评估个体与群体诊断结果真正感染率的方法。     

动物石蜡切片制作常见问题及改进措施

随着科学研究的进步,目前在动物传染病的诊断方面经常采用准确、快速的PCR、Elisa等分子生物学方法;但是PCR、Elisa等方法要求操作精细、准确,由于操作不当会出现假阳性或假阴性,对于肿瘤等内科病也无法诊断。石蜡切片可以直观地观察到组织细胞的病理变化,是一种准确、低廉的诊断疾病方法,在疾病诊断、病理学研究、教学等方面广泛应用。     

改良格里斯试剂法快速定性检测生鲜牛乳中外源尿素

试验中,我们考虑了生鲜牛乳中含有的内源尿素,对常规格里斯干试剂法的试剂组成和反应条件进行了改良,提高了其检测外源尿素的准确性,降低了假阳性和假阴性的出现。通过尿素添加及实际样品测定显示,该方法在实际应用过程中具有操作简单、反应迅速、结果准确等明显优势。     

猪传染性胃肠炎病毒N蛋白原核表达和间接ELISA检测方法的建立

试验构建了pET28a-TGEV-N重组表达质粒,完成TGEV N蛋白的表达和纯化,通过SDS-PAGE和Western blotting分析,表明表达产物N蛋白可被猪TGEV阳性血清识别。用TGEV N蛋白作为诊断抗原,建立了检测TGEV血清抗体的间接ELISA检测方法,该方法批内、批间重复试验变异系数均小于5%;检测血清的特异性为100%,假阳性率为0,假阴性率为5%,与7种常见猪病血清无交叉反应。针对临床血清,用该方法检测结果与中和试验结果相比,符合率为100%。该方法能够快速、有效地检出TGEV抗体,重复性和特异性好,为标准化诊断试剂盒的开发奠定了基础。     

应用逆转录套式PCR检测猪流行性腹泻病毒

根据已发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)N基因核苷酸序列,设计合成2对引物,其中外引物扩增片段长度为297 bp,内引物扩增片段长度为212 bp,在优化RT-PCR反应条件的基础上,建立了检测PEDV的套式RT-PCR检测方法,该方法较普通RT-PCR更加灵敏、可靠,能有效降低假阳性和污染,可用于PEDV的快速诊断和流行病学调查。