采用RT-PCR方法诊断猪繁殖与呼吸综合征

山东某猪场发生以猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)为主要特征的疾病。笔者对送检的病料进行了实验室诊断:剖检主要发现肺水肿,出血;组织病理学检测主要发现肺间质明显增宽,肾小管上皮肿胀;采用RT-PCR检测方法检测猪肺脏组织,结果被验样品在400bp扩增带为PRRSV阳性,阴性对照无扩增带出现。诊断结果表明:该猪场发生的病例为猪繁殖呼吸障碍综合征。     

规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒与细菌混合感染的诊断防治

本文就对某规模化猪场暴发急性、高热、呼吸系统疾病导致猪大量死亡,发病率50%,死亡率20%。临床诊断疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染,采集死猪肺脏、淋巴结、肾脏用RT-PCR进行     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR诊断及病理分析

根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)的Nsp2基因部分缺失的特征,设计合成1对特异性引物,对长春某猪场4份疑似HP-PRRSV感染病死猪的淋巴结、脾脏、肺脏等病料进行RT-PCR检测,结果均扩增出226 bp的特异片段,与预想结果一致。取病死猪淋巴结、肺脏、脾脏等组织,用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,HE染色,进行病理组织学分析,结果显示,淋巴结和脾脏中淋巴细胞严重坏死,肺脏呈弥漫性间质性肺炎病变,肝脏、肾脏、脑等器官实质细胞均出现不同程度的损伤。     

猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗宿主的感染机制

正猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以母猪严重的繁殖障碍,断奶仔猪普遍发生肺炎、生长迟缓,以及死亡率增加等为临床特征的疾病。由于猪繁殖与呼吸综合征病毒具有高度的宿主依赖性,主要在肺脏、淋巴及其他组织巨噬细胞中大量复制,使宿主的免疫系统     

猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、支原体混合感染病例的实验室诊断

为查明贵州省贵定县某养殖场猪群发病的原因,分别采集2头病猪的肺脏、肝脏、扁桃体、淋巴结、脾脏、肾脏组织进行细菌分离培养及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、支原体的核酸检测。结果:无细菌感染情况;猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、支原体核酸检测均为阳性。结论:养殖场病例存在猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、支原体混合感染。     

PRRSV SC-1株在人工感染仔猪体内的分布

为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在感染猪体内各器官组织的分布,用PRRSV SC-1株人工感染健康断奶仔猪,接毒后23 d,无菌采集试验猪器官组织,用RT-PCR检测其中病毒核酸分布情况。结果显示,心脏、脾脏、肺脏、肾脏、支气管淋巴结、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结、髂内淋巴结内有病毒核酸,在所有试验猪的肺脏、腹股沟淋巴结都检测到了病毒核酸。本研究结果为PRRS诊断及病毒分离鉴定提供了一定参考依据。     

猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断

为摸清贵州省某猪场猪只发病死亡的原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理解剖诊断、猪繁殖与呼吸综合征抗体快速金标检测卡检测和RT-PCR检测核酸确诊等方法,对该猪场发病猪进行了诊断.试验诊断结果表明:通过流行病学调查、剖检病理和猪繁殖与呼吸综合征抗体快速金标检测卡检测初步诊断该猪场发病猪疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,RT-PCR检测核酸确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒野毒感染.     

一例猪繁殖与呼吸综合征高致病性毒株与链球菌混合感染的实验室诊断

某规模化自繁自养猪场产房母猪出现流产,保育猪关节肿胀、倒地不起、大量死亡,为研究发病原因,采集流产胎儿、死亡仔猪的肺脏、脾脏、淋巴结和关节液,进行分子生物学检测,病毒和细菌分离鉴定,并检测不同胎龄母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体,结果显示猪繁殖与呼吸综合征病毒检测为阳性,使用PAM分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒,经序列鉴定为高致病性毒株;抗体结果表明四胎及以上母猪猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率异常升高;病料分离的细菌经鉴定为猪链球菌,经实验室诊断确定猪场发病的原因为猪繁殖与呼吸综合征高致病性毒株与猪链球菌混合感染。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒混合感染的检测

2005年3月,江苏某猪场仔猪发生体温升高,呼吸困难,四肢末端、耳尖发绀,站立不稳和淋巴结出血为主要症状的疾病。4头发病仔猪的淋巴结、脾、肺脏组织用RT-PCR方法分别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒为阳性,用猪瘟ELISA试剂盒检测猪瘟病毒野毒为阳性。结合本病的临床症状和病理剖检,病例确诊为猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟野毒的混合感染。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒自然感染与人工感染下的组织病理学观察

为进一步研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）的致病机理，对HP-PRRSV自然感染和人工感染下的病理组织学变化进行比较观察。在组织病理学变化方面，自然感染病例病变性质与人工感染基本相同，但在病变范围以及严重程度方面存在明显差异：自然感染病例的胃肠道病变尤为显著，而人工感染病例却较少引发消化道病变；自然感染病例的炎症波及全身淋巴结，而人工感染病例以肺门淋巴结、下颌淋巴结、肠系膜淋巴结病变最为明显，其他部位淋巴结未见明显病变。自然感染病例中，常见多种病原的混合感染，提示HP-PRRSV可能作为多种疾病的基础病因。自然感染和人工感染病例在肺脏上均表现为严重的间质性肺炎，说明肺脏部位的病理变化对单纯HP-PRRSV感染的诊断具有指证意义。本研究为HP-PRRSV感染的诊断及其致病机理研究提供了理论依据。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒(平谷株)的分离和鉴定

2010年10月,北京某猪场发生以流产、呼吸困难、全身发紫、死亡为特征的流行性传染疾病,采集发病猪的肺脏、脾脏、淋巴结等研磨成组织混悬液,接种Marcl45细胞,该分离物能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变(CPE)。收取细胞病毒液并提取总RNA,采用RT-PCR方法,利用PRRSV引物扩增出了目的基因片段,经过测序分析证实具有PRRSV特征。根据流行病学、临床特征、病毒分离、RT-PCR等,最终确定该分离株为猪繁殖与呼吸综合征病毒。     

2006-2011年唐山地区猪蓝耳病病毒隐性感染情况调查

为了了解唐山地区猪蓝耳病的带毒情况,采用RT-PCR方法对2006-2011年采自64个县级屠宰场276份商品猪的肺脏或肺门淋巴结进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)病原学检测,结果屠宰场阳性率为51.56%,样品总阳性率为20.29%,其中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)样品总阳性率为15.94%,经典猪繁殖与呼吸综合征病毒(C-PRRSV)样品总阳性率为4.35%。总之,猪繁殖与呼吸综合征病毒,尤其是高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒在唐山地区猪群中污染面积较大,应值得高度重视。     

猪巴氏杆菌病的鉴别诊断与综合防治

在生猪养殖过程中,巴氏杆菌病属常见多发病。诊断此病,根据咽喉肿胀,呼吸困难,皮肤上呈现紫红斑,流行特点和病理变化—肺脏肝变区、水肿、气肿,肺内不同程度坏死灶和化脓灶),基本可诊断。该病易与猪瘟、气喘病、猪流感、猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪传染性胸膜肺炎等相混淆。为科学防治此病,文章介绍了该病的流行病学、典型症状和鉴别诊断,供读者参考和借鉴。     

昆明某猪场猪高致病性蓝耳病的诊断和预防

云南省昆明市某猪场2016年1月频发育肥猪死亡,保育猪生长发育不良、高热、厌食以及母猪繁殖障碍等为主要临床症状的疾病。为了查明该猪场猪只致病原因,笔者通过对病死猪进行临床诊断、病理剖检,以及采集病料进行猪圆环病毒2型、猪冠状病毒以及猪高致病性蓝耳病病毒的RT-PCR检测。检测结果显示,从病死猪只肺脏、脾脏等器官组织中扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒目的条带,与阳性目的条带相吻合,结合临床症状以及病理剖检结果分析,该猪场病死猪为猪繁殖与呼吸综合征病毒感染所致。     

猪繁殖与呼吸综合征检测方法及其中草药防治的综述

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起,以繁殖母猪出现繁殖障碍、早产、流产、死胎和木乃伊胎,仔猪呼吸综合征为特征的高度接触性传染病。本文综述了猪繁殖与呼吸综合征的RT-PCR和ELISA两种检测方法、中草药添加剂对猪繁殖与呼吸综合征的防治作用,以期为养猪者在生产中检测和防控PRRS起到参考作用。     

抗体快速金标检测卡结合RT-PCR技术诊断猪繁殖与呼吸综合征

采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡对贵州省不同发病猪场进行血清学检测,其弱阳性检出率为54%。在此基础上参考GenBank登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计一对特异性引物,用提取上述检测的某猪场猪繁殖与呼吸综合征疑似病料(包括血液、肝、肺、肾、淋巴结、心、脾组织)总RNA为模版,应用RT-PCR方法扩增出目的条带,大小为739 bp,与预期的结果相同。分析表明:该核苷酸序列与已报道的Hunan-3株的同源性为100%,与国内最早PRRSV分离株CH-1 a同源性为95%,与北美代表株VR-2332和欧洲代表株LV的同源性分别为89.2%和29.2%。说明采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡结合RT-PCR方法作为猪繁殖与呼吸综合征的诊断方法是准确、可行的。     

天气异变致母猪流产的诊断与分析

为了诊断云南曲靖区域2015年12月份母猪流产的原因,笔者对云南省曲靖市2个出现母猪流产现象的规模化猪场进行调查,采集流产胎儿脾脏、肺脏、肾脏、淋巴结等组织器官和母猪血清,进行猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪细小病毒病的病原核酸检测,对母猪血清进行猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬抗体检测和流行病学调查。结果表明:猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪细小病毒病的病原核酸均为阴性,正常母猪和流产母猪猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬血清抗体基本一致。说明2015年12月份曲靖区域母猪流产主要原因为天气异变。     

欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪病理学特征及其组织内病毒分布

为了研究仔猪感染欧洲型猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病理学特征及其病毒在组织内的分布特点,用辽宁分离毒株EU-PRRSV LNEU12接种健康仔猪14d后,扑杀所有仔猪,观察病理学特征并采用免疫组织化学方法分析组织内抗原分布情况。结果表明,欧洲型PRRS主要的病理变化是多发性间质性肺炎和淋巴结炎;病毒主要分布在肺脏、淋巴结、脾脏和脑组织中,其次为肝脏和肾脏。证明PRRS典型病理变化的产生与PRRSV分布情况具有明显的相关性。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒F株的分离鉴定

2012年2月,潍坊某猪场疑似发生高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)。病猪主要表现为呼吸困难,耳朵发绀,皮肤有弥漫性出血点;剖检发现淋巴结、肺脏出血严重。从病死仔猪脾、肺、淋巴结和脑组织中分离得到病毒。将该毒株在Marc-145细胞上盲传3代出现典型细胞病变,F3代病毒滴度为106.5TCID50/mL。RT-PCR检测结果显示,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性。用F3代毒株进行动物回归试验,结果符合高致病性PRRSV致病特征。上述结果证明该猪场发生的传染病为高致病性PRRS,并且利用Marc-145细胞成功分离到高致病性PRRSV,命名为F株。本研究为高致病性PRRSV致病特点及其疫苗研制提供物质基础。     

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒继发细菌感染病例的实验室诊断

猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)是严重危害养猪业的病毒性传染病之一。实验采集临床疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征病死猪的脏器组织,应用分子生物学和细菌学方法进行实验室确诊。经荧光RT-PCR检测,该病例确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒感染所致;经细菌分离鉴定和耐药性分析,该病例继发革兰氏阳性球菌感染,头孢氨噻肟对该致病菌抑制效果较好。