鸡源高黏附乳酸菌的分离筛选及主要生物学特性研究

研究旨在筛选高黏附特性的鸡源乳酸菌，评价其主要生物学特性。试验应用MRS琼脂培养基从SPF鸡十二指肠、盲肠及小肠分离菌株，通过形态学观察、生理生化试验进行初步筛选，随后采用ERIC-PCR与16S rRNA基因序列分析相结合的方法对分离菌株进行种属鉴定，并对分离鉴定的乳酸菌株进行黏附能力、耐酸与耐胆汁特性、生长曲线、体外传代能力等生物学特征进行分析。结果显示：在34株分离菌株中鉴定到9种基因型，其中7株为罗伊氏乳杆菌、2株为约氏乳杆菌。菌株编号为C7的罗伊氏乳酸杆菌对HT-29细胞黏附率为（32.3±1.67）%，显著高于商品化乳酸乳球菌MG1363株和乳杆菌BNCC182567株以及除S3株外的其他分离株（P<0.05）；在pH2.0～5.0条件下存活率均高于100%，在40%与60%新鲜鸡胆汁作用下存活率分别为（116.67±11.89）%和（102.33±10.87）%，在体外连续传代10代仍能保持良好的活力。结果表明分离获得的C7分离株为罗伊氏乳酸杆菌，具有高黏附特性、耐酸与耐胆汁特性，该菌株为研究益生菌制剂及口服疫苗表达载体奠定了初步基础。     

肉食动物肠道中芽孢杆菌的分离和降胆固醇能力的测定

为筛选、鉴定出降胆固醇芽孢杆菌,试验从健康狮、虎、狼等肉食动物粪便中分离得到3株菌,分别命名为L1、L2和L3。经形态学、染色特性和16S r DNA序列测定,鉴定出L1和L3为枯草芽孢杆菌,L2为蜡样芽胞杆菌。3株菌均具有良好的芽孢形成能力,芽孢形成率分别为82%、93%、91%。应用硫磷铁比色法对3株菌的体外降胆固醇能力进行测定,结果显示L1降胆固醇能力较弱,而L2、L3具有较强的胆固醇降解能力,其中L2在48 h内胆固醇降解率可达50%以上,这为相关降胆固醇药品和保健品的开发奠定了良好的基础。     

肉食动物肠道中芽孢杆菌的分离和降胆固醇能力的测定

为筛选、鉴定出降胆固醇芽孢杆菌,试验从健康狮、虎、狼等肉食动物粪便中分离得到3株菌,分别命名为L1、L2和L3。经形态学、染色特性和16S r DNA序列测定,鉴定出L1和L3为枯草芽孢杆菌,L2为蜡样芽胞杆菌。3株菌均具有良好的芽孢形成能力,芽孢形成率分别为82%、93%、91%。应用硫磷铁比色法对3株菌的体外降胆固醇能力进行测定,结果显示L1降胆固醇能力较弱,而L2、L3具有较强的胆固醇降解能力,其中L2在48 h内胆固醇降解率可达50%以上,这为相关降胆固醇药品和保健品的开发奠定了良好的基础。     

猪源益生菌的分离筛选及部分生物学特性研究

经形态、染色特性观察,从健康仔猪肠道分离出5株杆菌、1株链球菌及3株芽孢杆菌,初次筛选出产酸及抑菌效果好的杆菌、芽孢杆菌各2株,链球菌1株,经生化鉴定为乳酸杆菌2株,乳酸链球菌1株,地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌各1株,对其进行了耐酸、耐胆汁及动物安全性试验。结果表明,筛选菌株有较强的产酸、耐酸及耐胆汁特性,对常见肠道致病菌抑制作用明显,动物使用安全,可作为猪用益生素制剂的候选菌种。     

鸡源乳杆菌的分离鉴定及其益生特性研究

利用选择性培养、革兰氏染色、芽孢染色、糖发酵试验、经典生理生化试验、耐酸和耐胆盐试验等方法,成功地从健康鸡的肠道中分离、鉴定并筛选出1株耐酸和耐胆盐能力较强的乳杆菌,命名为乳杆菌L3株。采用雏鸡安全性试验和肠黏液糖蛋白黏附性试验对乳杆菌L3株的安全性和黏附能力进行检测,证明所筛选的乳杆菌不仅对酸和胆盐的耐受性较好,且具有良好的安全性和肠道黏附能力。     

内蒙古锡林郭勒牧区自然放养家畜肠道中乳酸菌的分离鉴定与潜在益生特性的筛选

乳酸菌是动物肠道内重要的生理性菌群,本研究以内蒙古锡林郭勒盟牧区自然放养的牛、马、山羊和绵羊为研究对象,对其肠道中的乳酸菌进行分离和16S rRNA鉴定,并对38株罗伊氏乳杆菌进行耐酸性、模拟胃肠液转运和胆盐耐受性试验。乳酸菌分离鉴定结果显示共分离到乳酸菌纯培养物96株,包括双歧杆菌属、肠球菌属、乳杆菌属和链球菌属四个菌属,其中乳杆菌属数量最多,为所有分离株的82.29%;乳杆菌属中罗伊氏乳杆菌所占比例最大,为48.10%。益生特性筛选试验结果显示菌株IMAU10240、IMAU10230和IMAU10256具有良好的耐酸、耐胃肠液和胆盐特性,可作为潜在益生菌进行进一步的益生功能研究。     

鸡源微生态乳酸菌的分离与鉴定

本试验以健康商品鸡盲肠为菌源,对附着其上的乳酸菌进行分离与鉴定,就所获得的菌株的耐酸耐胆汁、粘附特性、抑菌性进行初步研究.试验结果表明,从商品鸡盲肠当中分离出的菌株经乳杆菌属的生化鉴定,初步确定为短乳杆菌.     

四株猪源乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

本试验旨在筛选优质猪源乳杆菌,为养猪生产过程中微生态制剂的开发奠定基础。通过16S r RNA分析鉴定,本试验从健康成年猪粪中成功分离出四株猪源乳杆菌,并对这四株菌的生长性能、生理生化特性、耐酸、耐高温、耐胆盐和耐药性进行了综合测试。结果表明：ZLgz1227具有最优的综合性能,其耐胆盐性能最强,过胃存活率分别高于其他三种菌株110.56%、44.3%、4.98%。研究表明这四株菌都有制成益生菌制剂的潜能,为实际生产提供一些后备益生菌菌株参考。     

具有益生特性的小尾寒羊肠道正常菌群的分离、鉴定及筛选

为了获得适合生产的羊源益生菌株,本试验从健康成年小尾寒羊肠道内分离出5株菌落形态各异、生长良好的菌株。通过革兰染色、生理生化鉴定及16SrDNA分析,5株菌分别为M1(干酪乳杆菌)、M2(植物乳杆菌)、E1(粪肠球菌)、E2(屎肠球菌)、L1(枯草芽孢杆菌)。细菌生长曲线、耐酸、耐胆盐、抑菌试验等益生特性分析结果表明,M1、M2和L1具有生长速度快,耐酸、耐胆盐,明显抑制大肠杆菌、鸡白痢沙门菌和金黄色葡萄球菌等肠道常见致病菌的益生特性,可以作为研制羊用微生态制剂的候选菌株。     

鸡源耐镉乳酸菌株的分离与鉴定

本试验旨在从鸡肠道中分离筛选出耐镉(Cd)的乳酸菌,为将其开发应用于防控家禽饲料重金属Cd污染提供理论基础。取鸡肠道内容物的样品进行乳酸菌分离,以耐受100 mg/L的Cd为标准筛选乳酸菌,采用分子生物学方法鉴定菌株。对筛选出的乳酸菌株进行生长性能、耐Cd性能及Cd吸附性能等测定。结果表明:本试验共筛选出5株耐Cd乳酸菌,分别为1株约氏乳杆菌Cd3-1和4株卷曲乳杆菌Cd1-1、Cd5-2、Cd4-5和Cd8-2。其中Cd3-1、Cd5-2和Cd8-2菌株最高可耐受1 000 mg/L的Cd,而Cd1-1和Cd4-5菌株最高可耐受400 mg/L的Cd。各菌株对50 mg/L Cd的吸附率随溶液pH的升高而增加,在pH为6.0和7.0时Cd的吸附率均显著高于pH为2.6时Cd的吸附率(P<0.05)。5株乳酸菌均可耐受0.3%的胆盐,且可抑制金黄色葡萄球菌的生长。综合上述结果,本试验从鸡肠道中分离筛选鉴定出5株耐Cd乳酸菌,包括1株约氏乳杆菌和4株卷曲乳杆菌,在pH接近中性的条件下,对Cd的吸附率可达30%。     

短乳杆菌的分离鉴定及其对鸡肠粘膜SlgA分泌的影响

用MRS培养基,从SPF鸡的消化道分离到1株乳酸杆菌.该菌生长速度快,耐酸,耐胆汁,对肠道粘膜有较强的粘附力,能提高鸡肠粘膜的SIgA滴度.对该菌的形态特征、培养特性、生理生化特性、药物的敏感性及G+C等进行试验,证明该菌为短乳杆菌.该菌可作为禽用益生素的候选菌株.     

一株嗜酸乳杆菌的分离鉴定及其生物学特性研究

为丰富猪源微生态制剂菌种,研究从健康猪肠道内容物中分离获得5株疑似乳杆菌菌株,通过生理生化和分子生物学鉴定方法,综合确定其中一株菌为嗜酸乳杆菌,命名为HEW-A701;对其耐酸性能、耐胆盐性能和对致病菌颉颃性能进行研究,表明菌株HEW-A701具有较强的耐酸性、耐胆盐性及对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌有较强的颉颃性。     

呕吐毒素降解菌的筛选、鉴定及应用

为了筛选出对呕吐毒素(DON)具有降解能力的菌株,试验从土壤、发霉秸秆和动物粪便、肠道内容物等不同环境中采集样品10份,分别在LB、NA和MRS培养基中添加DON,制成改良固体培养基进行菌种初筛,将初筛得到的菌株在改良液体培养基中培养,用ELISA方法测定改良培养基中DON的降解率并对菌种进行复筛,对降解率高的呕吐毒素分解菌进行形态学和16S rDNA保守序列分析鉴定,组合所筛选和鉴定的菌种对麸皮中的天然DON进行降解试验。结果表明:通过初筛和复筛,筛选到DON降解率分别为19.1%、51.3%、66.7%的菌种3株;通过菌落特征、菌体特征等形态学观察和16SrDNA保守序列比对的分子鉴定,最终确定3株呕吐毒素降解菌分别为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌;枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌组合对麸皮发酵处理,DON降解率最高,可达71%。     

一株乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

以鸡肠道和泡菜为分离源,采用常规微生物学方法分离乳酸菌,筛选到一株产酸性能良好的菌株W7。结合对菌株的形态观察、生理生化试验以及16S rRNA基因序列分析,对菌株进行鉴定,并对W7进行特性试验研究。结果表明,W7为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,在培养22h时,活菌数最高;耐酸效果好,在pH值为2.0时,存活率仍然为100%;在胆盐浓度为0.30%时,仍然可以生长;抑菌效果较好;黏附率为79.9%。     

牛瘤胃乳酸菌的分离与鉴定

为分离筛选用于牛活菌制剂的乳酸菌菌株,试验采用API 50CHL对从牛瘤胃中分离的60株乳酸菌进行生化鉴定,对鉴定出的菌株进行耐酸耐碱、生长温度、耐氧、耐药和抑菌性测定。结果显示,经生化鉴定出的3株菌分别为嗜酸乳杆菌（L.acidophilus）、发酵乳杆菌（L.fermentum）和乳明串珠菌（L.holzapfelii）,分别命名为L1、L2和L3。其中,L1耐酸性最强,L2耐碱性最强,L1在37～40 ℃之间均生长良好且兼性厌氧;L1、L2、L3耐药率为60%～100%;3株乳酸菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用,其中L1抑菌效果最好,抑菌圈直径分别为18.30和16.40 mm。提示,L1、L2可作为抗性乳酸菌活菌制剂的候选菌株。     

青海湖耐盐微生物分离及对盐碱降解率的研究

为了合理改良和开发利用盐碱地资源,研究耐盐微生物对盐碱降解的作用,试验采用纯化分离法、菌株耐盐碱度和降盐降碱率测定法对青海湖水样中的菌种进行耐盐微生物的分离及降盐降碱特性研究,最后对菌株RM3与RM25 16S r DNA序列进行测定。结果表明:纯化分离后获得43株菌,其中细菌31株、真菌7株、放线菌5株;菌株RM1、RM2'、RM3、RM8、RM14、RM25、RM40可在氯化钠浓度为100 g/L的培养基中生长,属于中度嗜盐微生物,分离到4株嗜碱菌RM3、RM8、RM14、RM25;菌株RM3的降盐率和RM25的降碱率最高,降盐率达到17.30%,降碱率达到7.60%;对菌株RM3与RM25 16S r DNA序列进行测定显示,RM3属于芽孢杆菌属,RM25属于嗜盐单胞菌属。说明青海湖部分耐盐菌具有降盐、降碱特性。     

牛瘤胃乳酸菌的分离与鉴定

为分离筛选用于牛活菌制剂的乳酸菌菌株,本试验采用API 50CHL对从牛瘤胃中分离的60株乳酸菌进行生化鉴定,对鉴定出的菌株进行耐酸、耐碱、耐氧、生长温度、耐药和抑菌性测定。结果显示,经生化鉴定出的3株乳酸菌分别为嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、发酵乳杆菌(L.fermentum)和乳明串珠菌(L.holzapfelii),分别命名为L1、L2和L3。其中,L1耐酸性最强,L2耐碱性最强,L1在37~40℃均生长良好且兼性厌氧;L1、L2、L3耐药率分别为80%、67%、53%;3株乳酸菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用;L1抑菌效果最好,抑菌直径为18.3mm和16.4mm。结果表明,L1、L2可作为抗性乳酸菌活菌制剂的候选菌株。     

猪源乳酸杆菌的分离鉴定及生物学特性分析

乳酸杆菌制剂可以替代抗生素,用于预防和治疗细菌性腹泻。为获取可作为微生态制剂的候选菌株,从健康仔猪肠道分离到5株乳酸杆菌,经抑菌试验、生长曲线测定、耐酸、耐胆盐、耐胰酶试验等,筛选到1株对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌有较好的抑制作用,对低pH值、高胆盐、胰酶均有一定耐受能力的乳酸杆菌,命名为LY7。经PCR鉴定,该菌株为约氏乳杆菌。     

熊猫粪便中乳酸菌的分离鉴定与降胆固醇作用研究

为筛选出高效降胆固醇乳酸菌,试验利用MRS培养基从熊猫粪便中分离得到7株乳酸菌,采用硫磷铁比色法对7株乳酸菌的体外降胆固醇能力进行测定,并利用经典分类法对所分离的乳酸菌菌株进行系统的细菌学鉴定.结果表明:得到1株编号为X1的乳酸菌,该菌能够耐受pH值为3.0的酸性环境和0.3%的胆盐,在对数生长期降胆固醇能力最强,胆固...     

东北地区传统手工奶酪中具有益生特性乳酸菌的分离与筛选

为了筛选出既具有高抗氧化活性又能耐酸、耐胆盐、耐胰蛋白酶的优良菌株,试验以东北地区传统手工奶酪为分离源,采用常规微生物学方法分离纯化乳酸菌,并结合镜检观察、生化试验以及16S r DNA基因序列分析对菌株进行鉴定,筛选出产酸性能良好的乳酸菌,并对其进行耐酸、耐胆盐、耐胰蛋白酶、抑菌、抗氧化等特性试验。结果表明:筛选出的59株产酸性能良好的乳酸菌中,有19株耐酸、耐胆盐、耐胰蛋白酶且对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌和李氏杆菌均有抑制作用,其中筛选出的植物乳杆菌B5-1-1-1和干酪乳杆菌B4-2-11-5不仅具有还原性,而且在清除羟基和自由基方面均具有较高能力,有望成为具有益生特性的乳酸菌资源,从而为东北地区奶酪选育优良乳酸菌奠定基础。