动物基因免疫的原理与方法

基因免疫又叫核酸免疫或DNA免疫．指用某种力“法将带有目的基因的表达载体转化到家畜体内．诱导机体产生特异性的抗体并5;起相应的免疫应答。这类疫苗称为基因疫苗或裸DNA疫苗。基因免疫的研究始于1990年WOlfTng因治疗试验的意外发现。他们形切M、鼠的骨且观四胞能捕获含外源基因的质粒并在体内较长时间稳定地表达‘”。Tang等（1992）将含生长激素基因的质粒导入小鼠表皮细胞．多数免疫小鼠产生了抗生长激素抗体：二次免疫后抗体水F显著升高门’。这表明外源基因表达产物足以引起机体产生免疫反应。现在用很多病原体抗原基因的重组…     

禽用基因疫苗的研究进展

基因疫苗(genetic vaccine)又称核酸疫苗(nucleicacid vaccine)、DNA疫苗(D NA vaccine),是将带有目的编码蛋白抗原基因的真核重组表达载体直接注射到动物机体中,使外源基因在活体细胞内表达,诱导机体产生抗体并引起特异性的免疫应答,达到顶防和治疗传染病的目的。它包括D NA疫     

基因免疫研究进展及其面临的问题

传统疫苗是基于抗原刺激机体产生特异性抗体的原理，这类疫苗绝大多数是激发机本的体注免疫，很难启动细胞免疫。而基因疫苗能模拟病毒自然感染原提呈的过程，使表达的抗原能在自然的形式被加以提呈给免疫系统，即能产生细胞免疫，又能产生体液免疫，此种免疫不受母液抗体的干扰。自１９９０年报道了其基因治疗研究以来，基因免疫在预防人类某些病毒性、细菌性、寄生虫性疾病等方面取得了突破性进展。笔者就基因免疫的原理、特点、研     

DNA疫苗在猪病防制中的研究应斥及其优缺点分析

一、DNA疫苗的免疫机理 DNA疫苗（DNAvaccine）又称基因疫苗、核酸疫苗,由病原抗原编码基因及质粒载体两部分组成。抗原基因可以是单个基因或完整的一组基因,也可以是编码抗原决定簇的一段核苷酸序列,质粒载体可在真核细胞中表达外源基因。DNA疫苗是将编码目的抗原蛋白基因序列的真核质粒,经各种基因转移途径导入机体细胞,通过宿主细胞转录、翻译、表达出相应的抗原蛋白,     

动物预防用DNA疫苗的研究进展

动物预防用DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，是编码免疫原或与免疫原相关的真核表达质粒DNA(有时也可是RNA)，它可经一定途径进入动物体内，被动物宿主细胞摄取后能转录和翻译表达出抗原蛋白，此抗原蛋白能够刺激机体产生非特异性和特异性两种免疫应答反应，从而起到免疫保护作用。     

基因疫苗在畜禽传染病中的作用

基因疫苗亦称DNA疫苗,是将编码某种蛋白质抗原的真核重组表达载体直接注射机体,在宿主细胞中表达外源基因,诱导特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答,达到预防和治疗疾病的目的。基因疫苗在病毒感染性疾病中有广阔的应用前景,已成为疫苗研究领域的热点之一。基因疫苗被称为第三次疫苗革命。基因免疫已在畜禽传染病,如病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫免疫、抗肿瘤免疫、预防变态反应中发挥了巨大的作用。     

伪狂犬病病毒Ea株糖蛋白gD基因的表达及基因免疫

构建了2个利用人类巨细胞病毒（HCMV）的启动子启动表达伪狂犬病病毒Ea株糖蛋白gD基因的真核表达质粒pCIDI和pcDDI，体外转染BHK－21细胞，用间接免疫荧光法检测，证实糖蛋白gD在细胞中得到表达。用表达质粒pCIDI和pcDDI作为核酸疫苗免疫BALB/c小鼠，ELISA检测小鼠血清中抗伪狂犬病病毒的抗体，结果其滴度为1：128－1：1512。初步证实，用gD基因作为核酸疫苗免疫动物，可以激活机体的免疫应答反应。     

DNA疫苗体内转染方法

DNA疫苗是一种新型的基因工程疫苗.其构建方法是将抗原基因插入到真核质粒表达载体上,转染到动物体内,使抗原基因在活体内表达,从而引起机体的免疫应答.作为一种高效的疫苗,DNA疫苗日益成为疾病防治的重要手段.     

细菌性传染病疫苗研究进展

通过疫苗免疫来保护易感群体是控制细菌性传染病的一个重要环节,细菌减毒活疫苗减少了疫苗的副反应,同时还考虑到接种疫苗群体的营养和健康状况,能有效侵入和持续刺激机体产生初次免疫应答和再次免疫应答。重组减毒细菌具有能够在体内稳定表达保护性抗原的能力,将一段基因插入到染色体中可提高其稳定性,但一般抗原表达水平较低,不能刺激机体产生强有力的免疫应答,而使用高拷贝数的质粒载体后,选择标记基因的表达水平将远远超过载体维持的需要,增加了重组疫苗中的能量消耗,过度表达的基因产物进一步致弱了疫苗。同时宿主-载体的重组应使外源抗原产生的免疫应答最大化,细菌载体抗原产生的完全免疫应答最小化。     

基因免疫与动物生殖

基因免疫核心是将外源基因组装到含有必要表达调控元件的真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒导入动物体内，使外源基因在体内表达，从而激活机体的免疫系统，引发免疫反应的．是90年代初开始发展起来的一种新方法。基因疫苗因为制备简单以及良好持久的免疫反应性，便于保存等优点而受到普遍重视，目前已成为分子生物学研究的重点方向之一。本文对基因免疫的的作用机制、方法和基因免疫对动物的生殖影响作一综述。     

基因免疫与动物生殖

基因免疫核心是将外源基因组装到含有必要表达调控元件的真核质粒表达载体上,然后将重组的质粒导入动物体内,使外源基因在体内表达,从而激活机体的免疫系统,引发免疫反应的,是90年代初开始发展起来的一种新方法。基因疫苗因为制备简单以及良好持久的免疫反应性,便于保存等优点而受到普遍重视,目前已成为分子生物学研究的重点方向之一。本文对基因免疫的的作用机制、方法和基因免疫对动物的生殖影响作一综述。     

猪带绦虫六钩蚴TSOL18基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究

为研制新型猪囊尾蚴疫苗,将猪带绦虫六钩蚴阶段编码 TSOL18 的基因定向克隆于真核表达质粒 pVAX1, 经筛选、鉴定及 DNA序列分析正确后,将重组质粒 pVAX1/TSOL18 转染 BHK-21 细胞,通过 SDS-PAGE、Western blotting、免疫荧光试验等方法检测细胞中表达的 TSOL18 抗原。结果表明,重组真核质粒 pVAX1/TSOL18 可在 BHK-21 细胞中表达TSOL18 目的蛋白,表达蛋白能被猪囊尾蚴病阳性血清所识别。动物免疫试验表明,真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫和体液免疫应答,这为猪囊尾蚴病基因疫苗的研究奠定了良好基础。     

犬瘟热病毒小熊猫株H、F和N基因的克隆及表达

根据GenBank中发表的犬瘟热病毒（CDV）的核苷酸序列，设计并合成了扩增CDVH、F和N基因的3对引物，经RT—PCR分别扩增获得了CDV小熊猫株（LP株）H、F和N基因，并对H、F及N基因进行了克隆和序列测定。序列分析表明，CDV LP株属于强毒谱系，与CDV流行株的亲缘关系近．H基因含有较多潜在的糖基化位点．F和N基因相对比较保守。将CDV LP株H、F和N基因克隆入真核表达栽体pVAX1的CMV启动子下游，构建了CDV基因疫苗表达载体pVAXLPH、pVAXLPF、pVAXLPN，体外转染BHK-21细胞．用间接ELISA方法检测到目的蛋白的表达。用构建的3个表达质粒免疫小鼠，从小鼠血清中检测到了抗CDV抗体．初步证实用CDVH、F和N基因作为核酸疫苗免疫动物，可以激活机体的免疫应答。     

基因免疫及其在传染病学中的应用

基因免疫及其在传染病学中的应用沈正达（甘肃农业大学动物医学系,兰州７３００７０基因免疫（ｇｅｎｅｔｉｃｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ）又称ＤＮＡ免疫或核酸免疫,是指利用各种方法将带有目的基因的表达载体转化到体内,诱导机体产生抗体并引起特异的免疫应答。基因免...     

动物核酸疫苗的研究现状及发展前景

核酸疫苗是近年来备受人们关注的一种新型疫苗。核酸疫苗以其特有的可诱导机体产生全面的免疫应答,对不同亚型的病原体具有交叉防御作用,以及安全、可靠、生产方便等优点被称之为“疫苗的第三次革命”。核酸疫苗由编码能引起保护性免疫反应的病原体抗原的基因片段和载体构建而成,包括DNA疫苗和RNA疫苗,目前研究较多的是DNA疫苗。DNA疫苗是指含有编码抗原基因的真核表达质粒DNA,经直接接种体内后,可被体细胞摄取,并转录、翻译、表达出相应的抗原,然后通过不同途径刺激机体产生针对此种抗原的应答。作者简单介绍了动物核酸疫苗的特点、免疫机制、免疫影响因素及在畜禽传染病中的应用,此外还分析了核酸疫苗的发展前景等问题,从而为核酸疫苗的发展提供了新思路和新途径。     

基因免疫与基因疫苗

基因免疫是九十年代初发展起来的新兴免疫学技术，它是将编码目的抗原的基因以重组表达载体的形式经各种基因转移途径转入机体细胞，借用容量主细胞表达加工合成抗原分子，以MHC～I或（和）MHC～II类分子抗原处理和输送途径将抗原信息递呈给T细胞和B细胞。全过程模拟了病毒自然感染提呈过程，既产生了体液免疫，又启动了细胞免疫，使得免疫效果极大的改善。因此，基因疫苗也被誉为第三次疫苗革命，它将成为我们今后预防疾病的重要武器。基因免疫的优点是毋庸置疑的，其化学结构是比蛋白质稳定得多的DNA，便于保存和运输，很适合做疫苗…     

DNA疫苗在动物医学上的研究进展

DNA疫苗,又称核酸疫苗或基因疫苗,是指将编码引起保护性免疫应答的目的基因片段插入质粒载体,然后将重组质粒直接导入机体,通过宿主细胞的转录系统表达目的抗原,进而诱生保护性免疫应答的一种生物制剂。目前在动物医学领域,DNA疫苗已经在许多动物身上进行了研究,并取得了一定的     

犬瘟热病毒H、F、N基因试验免疫研究

以构建的真核表达载体pVAXLPH、pVAXLPF和pVAXLPN为基因疫苗,分组进行了免疫小鼠试验,对免疫鼠体内免疫应答水平进行了检测。结果显示:所构建的基因疫苗可以诱导小鼠产生特异性免疫应答反应,pVAXLPH pVAXLPF pVAXLPN 3个基因混合免疫小鼠诱导产生了较强的体液免疫和细胞免疫应答,免疫3次后血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.332,而免疫前为0.158;抗CDV中和抗体效价为1∶(4~16);CD4 T/CD8 T比值为2.05±0.38,而对照组为1.99±0.56;免疫小鼠脾细胞对CDVLP及ConA刺激的增殖反应值分别为0.384和0.356。基因疫苗免疫犬试验中,进行了单用基因疫苗免疫和基因疫苗与CDV弱毒疫苗联合免疫效果的比较研究。结果显示,基因疫苗免疫3次后,血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.296,抗CDV中和抗体效价为1∶(8~32)。基因疫苗免疫2次,再使用弱毒疫苗加强免疫1次,血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.433,抗CDV中和抗体效价为1∶(16~64)。     

禽痘病毒载体疫苗研究进展

禽痘病毒和其它痘病毒一样,基因组的高保守区的非复制域可以整合外源DNA,已成为普遍的表达载体,主要应用于痘病毒分子生物学领域、体外生产和蛋白质功能化研究以及作为活的疫苗或工具用于疫苗研究.禽痘病毒载体疫苗不仅能预防禽痘的发生,而且通过插入多个其它病原的保护性抗原基因以诱导产生抗外来抗原的抗体和细胞毒性T细胞反应,提高对相应病原的免疫抵抗力.由于重组病毒所表达的外源基因在机体内随载体病毒的复制而表达,与灭活疫苗相比,它容易生产,免疫剂量小,接种方法简便,接种一次就能获得长期的免疫效果,大大降低了生产成本.     

DNA疫苗的特点及在不同动物中的应用

1特点 DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，是编码免疫原或与免疫原相关的真核表达质粒DNA（或RNA）。可经一定途径进入动物体内，被宿主细胞摄取后转录和翻译，表达出抗原蛋白，此抗原蛋白能刺激机体产生非特异性和特异性免疫应答反应，从而起到免疫保护作用。