抗猪嗜血支原体中药单体的体外筛选

为体外筛选具有杀灭猪嗜血支原体(M.suis)作用的中药单体,应用血液直接PCR扩增中药单体作用不同时间后培养体系中的M.suis,通过比较电泳条带灰度值筛选出具有抗M.suis作用的中药单体;应用qPCR测定所筛选中药单体作用后培养体系中M.suis的拷贝数,通过杀灭率来评估中药单体对M.suis的杀灭效果。结果筛选出丹参酮ⅡA磺酸钠、甘草酸二钾、秦皮甲素、黄芩苷和肉桂酸5种具有体外抗M.suis作用的中药单体,其中在药物作用18h,丹参酮ⅡA磺酸钠、甘草酸二钾和秦皮甲素对M.suis杀灭率分别为76.9%,90.6%和79.2%。体外试验表明,丹参酮ⅡA磺酸钠、甘草酸二钾和秦皮甲素对M.suis的杀灭效果较好,是理想的抗M.suis目标药物,具有潜在的临床应用与研究价值。     

复方中药对猪嗜血支原体感染预防作用的研究

为研究复方中药对猪嗜血支原体(M.suis)感染的预防效果,将复方中药Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和强力霉素分别与M.suis阳性血液在细胞培养液中进行培养,间隔12h用qPCR检测培养物中M.suis拷贝数。选取临床健康的35日龄仔猪进行M.suis PCR检测,将50头M.suis PCR阳性仔猪随机分为5组,每组10头,每组隔离饲养。三个复方中药组采用拌料方式连续喂服7d,强力霉素组拌料喂服5d,对照组饲料中不添加任何药物。分别于用药前、用药后第10、20、30天前腔静脉采血,对血液M.suis拷贝数、红细胞SOD活力、红细胞膜ATP酶(Na+K+-ATPase、Ca2+Mg2+-ATPase)活力、淋巴细胞(T、B)增殖率、血清IgG含量进行检测。结果显示,三种复方中药在体外培养时均可极显著降低培养物中M.suis拷贝数(P0.01);在仔猪预防试验中,与对照组和强力霉素组相比,复方中药Ⅰ可以极显著降低血液中M.suis拷贝数(P0.01),提高红细胞SOD活力与B淋巴细胞增殖率(P0.05或P0.01);复方中药Ⅱ可以提高红细胞SOD活力、Na+K+-ATPase活力与淋巴细胞增殖率(P0.05),但无法长时间抑制M.suis生长;复方中药Ⅲ可以极显著降低血液中M.suis拷贝数(P0.01),显著提高红细胞SOD活力(P0.05)。结果说明:复方中药Ⅰ对M.suis自然感染有良好的预防作用。     

自噬对布鲁氏菌在巨噬细胞内增殖情况的影响

为探究自噬作用对布鲁氏菌(Brucella)在巨噬细胞(Mφ)内增殖活力的影响,本研究将体外培养的Mφ细胞分组,分别采用自噬激活剂雷帕霉素(Ra)或抑制剂3-MA处理细胞,并在不同处理的细胞组中接种表达绿色荧光的重组猪种布鲁氏菌(rB.suis-GFP),在接种后0.5 h~24 h,一方面通过细胞中LC3-Ⅱ含量及Mφ内B.suis数量的测定,另一方面通过激光共聚焦显微镜观察LC3-Ⅱ与B.suis共定位情况。结果显示,感染B.suis后0.5 h,Mφ即可发生自噬作用,并且Ra+Mφ+B.suis组LC3-Ⅱ含量显著高于其它组,表明B.suis的感染能够促进Mφ内LC3-Ⅱ的形成,增强Mφ的自噬作用;另一方面,Ra+Mφ+B.suis组胞内B.suis数量显著高于3-MA+Mφ+B.suis组与Mφ+B.suis组,表明自噬作用能够促进B.suis在Mφ内的增殖;但随着胞内B.suis数量的增加,各组LC3-Ⅱ的水平却逐渐下降,表明B.suis感染Mφ数量达饱和后,Mφ虽然启动自噬作用杀灭了部分B.suis,但却不能完全抑制B.suis在Mφ内大量增殖。本研究为初步确定自噬在B.suis增殖过程中的作用提供了依据。     

猪附红细胞体的体外连续培养

临床疑似猪附红细胞体病猪红细胞,经Giemsa染色镜检及PCR扩增,证实感染猪附红细胞体（M．suis）。PCR扩增片段（781hp）与M．suis已知序列（AJ504999）同源性达99．4％。经预试验对红细胞接种量、血清添加量、pH等条件优化后,选用添加新生牛血清、酵母浸出液、葡萄糖等成分的PPLO肉汤,将染虫红细胞接种到细胞培养板上,置于37℃、含5％CO2的培养箱培养,定期更换培养液,约72h后红细胞溶血变为带虫血影（Ghost）。除首次接种外不添加任何红细胞,连续培养达280d以上,染虫率维持近100％。对培养的带虫血影进行了光镜及扫描电镜观察、PCR鉴定、感染阴性红细胞试验、抗生素敏感性试验,证实与接种物为同一病原,并保持有感染阴性红细胞的能力。     

鸡霉形体的分离与药敏试验

选择鸡毒霉形体的敏感药物,为临床防治用药提供理论依据。从鸡场分别取疑似患霉形体病的鸡进行血清学反应、病原分离培养和体外抑菌试验。经分离获得鸡毒霉形体12株,研究鸡毒霉形体对甲磺酸左旋氧氟沙星、阿齐霉素等12种抗生素的抗药性。结果表明,各种药物对毒霉形体的敏感程度不同。     

克林霉素治疗猪肺炎霉形体病的疗效观察

目的:分析在猪肺炎霉形体疾病治疗中应用克林霉素的效果。方法:选择患猪肺炎霉形体病的猪66头,按照治疗方式分成治疗组和参照组,各组33头。参照组采用土霉素治疗,治疗组采用克林霉素治疗,对比治疗的效果。结果:治疗组患猪治疗总有效率和参照组患猪相比,明显高于参照组,P0.05。结论:在猪肺炎霉形体病治疗中应用克林霉素,可以提高治疗效果,值得推广。     

研究克林霉素对猪肺炎霉形体病治疗的效果

猪肺炎霉形体病是猪的常见病,若猪患得肺炎霉形体病,不仅会影响猪的健康成长,还会给养殖户造成严重的经济影响,对此需要加强预防与治疗,确保猪能健康的成长,减少养殖户的损失.对于猪肺炎霉形体病,其治疗常用药为克林霉素,具有显著的治疗效果,能够极大程度上降低猪的死亡率.     

这些方法可治猪肠道线虫病

<正>猪肠道线虫主要有猪蛔虫、猪鞭虫、猪结节虫、猪钩虫和猪杆虫。其中以猪蛔虫和猪鞭虫分布较广,危害严重。1预防措施1.1喂给驱虫性抗生素可饲喂的驱虫性抗生素如潮霉索B和越霉素A,每1000千克饲料中添加5～10克。     

鸡胚源疫苗中污染霉形体的对策 Ⅰ.污染疫苗中霉形体分离株对抗生素的敏感性和以抗生素控制疫苗的霉形体污染

应用从活疫苗中分离的鸡毒霉形体,滑液霉形体16个分离物和3株对照株进行了对8种抗生素敏感性测定,结果表明,这些霉形体株对北里霉素(柱晶白霉素)和泰妙霉素最为敏感,最小抑制量≤0.2微克/毫升。但分离株对链霉素,泰乐霉素和庆大霉素有明显的抗药性,尤其对链霉素的抵抗力极为强大,最小抑制量竟高达1000微克/毫升,为对照株的数十到数百倍。在五批人工实验感染霉形体的新城疫疫苗样品中,分别加入北里霉素、红霉素和四环素,有效地控制了霉形体污染。经过冰箱温度(5—10℃)保存2.5个月疫苗即将失效前,北里霉素和红霉素依然保持着完全的控制作用。加入四环素的有两批样品中尚有微量的霉形体存活。加入这些抗生素对疫苗效力没有影响。作者们认为,在尚未能普遍应用SPF鸡胚培养制造活疫苗以前,应用抗生素控制疫苗的污染,仍不失为一种控制污染的可行的应急方法。     

介绍变通的Friis兔肉汤培养基的应用效果

Friis 兔肉汤培养基已在国外广泛用于分离培养猪肺炎霉形体和絮状霉形体及大量制备猪肺炎霉形体浓缩抗原。但其成分相当繁多,价格昂贵,制备过程复杂,且又难以购买。因此,研制了一种变通的 Friis培养基,使更适用于生产和教学。现将结果简介于后。     

单味中药对猪嗜血支原体黏附红细胞的影响

研究单味中药对猪嗜血支原体(M.suis)黏附红细胞作用的影响,筛选具有抑制M.suis黏附红细胞作用的中药。应用悬滴镜检法、血液直接PCR法筛选M.suis阳性血液和M.suis阴性血液;利用qPCR技术研究单味中药与M.suis阳性红细胞、M.suis、红细胞作用后,红细胞黏附M.suis的拷贝数变化。结果显示,青蒿、黄芩、槟榔、甘草、秦皮、苦参、丹参作用于M.suis阳性红细胞,可极显著降低红细胞黏附M.suis的拷贝数(P0.01);青蒿、黄芩、槟榔、甘草、秦皮、苦参、丹参作用于M.suis可极显著减少红细胞黏附M.suis拷贝数(P0.01);青蒿、黄芩、槟榔、甘草作用于红细胞,可极显著抑制红细胞黏附M.suis拷贝数(P0.01)。结果表明,青蒿、黄芩、槟榔、甘草、秦皮、苦参、丹参可抑制M.suis对红细胞的黏附,可用于预防和治疗M.suis感染和猪附红细胞体病中药的研发。     

简便、快速分离猪肺炎霉形体的方法

将25头份气喘病病猪肺渗出液分别接种于江苏2号—变通的Switz培养基或Friis免肉汤培养基,培养48小时,分离到23株猪肺炎霉形体(另两头份因污染杂菌。未分离出),分离率为92％。抽取8株回归健猪,均发病。对特异抗体血清作微粒凝集为阳性。此法是一种简便、快速分离猪肺炎霉形体的方法。     

双芽巴贝斯虫体外培养技术初探

应用双芽巴贝斯虫染虫血和液氮保藏株,进行体外培养技术初步研究,获得了生长、增殖和保种效果。双芽巴贝斯虫在牛红细胞内带虫率达５％,低染虫率的连续培养已超过２５ｄ。奠定了双芽巴贝斯虫培养技术应用基础。     

克林霉素对猪肺炎霉形体病的效果观察

目的:克林霉素对猪肺炎霉形体病的治疗效果观察。方法:选择养殖场90头患猪肺炎形体病生猪,分为试验组与对照组各45头,试验组选择克林霉素,对照组选择高敏药物土霉素,对比两组生猪治疗效果。结果:试验组生猪康复后体重差5.24±1.5kg,有效率97.78%,差异具有统计学意义(P<0.05)。对照组生猪体重偏差约4.20±1.22kg,有效率为73.33%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:克林霉素对治疗猪肺炎霉形体病具有积极作用,治疗效果良好,值得推广应用。     

猪支原体肺炎的诊断与综合防治

猪支原体肺炎即猪地方流行性肺炎(swine enzootic pneumonia),俗称猪喘气病.因其病原为霉形体,所以又叫做猪霉形体肺炎(mycoplasma hyopneumoniae或M.suipneumoniae).     

盐酸克林霉素对猪肺炎霉形体病的疗效试验

进行了克林霉素对猪肺炎霉形体病的疗效试验,并与卡那霉素、泰乐菌素、土霉素、恩诺沙星进行了比较。结果:盐酸克林霉素组的死亡率、有效率、治愈率和相对增重率分别为0、100%、96.67%和82.5%;卡那霉素组分别为6.67%、73.33%、67.67%和79.1%;泰乐菌素组分别为10%、60%、50%和65.4%;土霉素组分别为16.67%、63.33%、53.33%和76.7%;恩诺沙星组分别为0、80%、80%、78.2%。经统计学分析,盐酸克林霉素组和恩诺沙星组的死亡率明显低于感染对照组(P<0.01),治愈率、有效率显著高于感染对照组(P<0.01)。表明盐酸克林霉素对猪肺炎霉形体病的治疗有很好的疗效,在猪肺炎霉形体病防治中有很好的应用前景。     

强力霉素

强力霉素(Doxycycline)是一种四环素族抗菌素,发现于1966年,目前使用的是一种半合成品.现国内已有生产和供应,并开始应用于禽病防治上.强力霉素有如下几方面的优点:1.抗菌范围较广,对溶血性链球菌、葡萄球菌等革兰氏阳性菌,多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌等革兰氏阴性菌以及霉形体均有较强的抑制作用.2.一些对金霉素、土霉素、四环素等抗菌素有抗药性的细菌,对强力霉素仍然敏感.3.口服后易吸收,在血液中维持有效浓度的时间较长.4.吸收后易渗入胸腔、腹腔内,对慢性呼吸道病的有关病原如鸡败血霉形体、大肠杆菌有直接的抑制作用.     

治疗猪附红细胞体病用这些药

四环素、卡那霉素、强力霉素、土霉素、黄色素、血虫净(贝尼尔)、氯苯胍、砷制剂(阿散酸)等可用于治疗猪附红细胞体病,四环素和砷制剂效果较好。对猪附红细胞体病进行早期及时治疗可收到很好的效果。     

替米考星(Tilmicosin)对鸡败血霉形体感染的药效学

以试管二倍稀释法测定替米考星 (Tilmicosin)及对照药物强力霉素、红霉素、泰乐菌素对鸡败血霉形体的最小抑菌浓度分别为 0 .0 0 6 2 5、0 .0 2 5、0 .0 2 5、0 .1m g/ L ,进行了替米考星对鸡败血霉形体的体内药效学研究。结果 ,替米考星以 5 0、75、10 0 mg/ L 饮水给药 5 d,对实验性感染鸡败血霉形体有显著疗效 ,用药组增重均显著高于对照组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,并能明显减少抗体阳性反应率 ,极显著地减少气囊损伤记分 (P<0 .0 1)     

国内火鸡体内霉形体的分离与鉴定

从北京和呼和浩特市4个火鸡场的95只火鸡、50只火鸡胚和42份精液样品中分离到15个分离物,用国际霉形体分类分会推荐的生化、遗传学和血清学方法证明其中有两个分离物是两种霉形体混合物,共17株霉形体。所有分离物在无抑菌剂的培养基上连续传代5次未出现细菌形态、对毛地黄皂苷敏感、不水解尿素、DNA的G C含量介于26-34mol％之间。生长抑制试验和间接表面免疫荧光技术的试验结果将其中的15个株分属于霉形体属的5个种,即鸡毒霉形体(Mycoplasma gallisepticum)4株、滑液霉形体(M.synoviae)2株、衣阿华霉形体(M.iowae)1株、鸡霉形体(M.gallinarum)和雏鸡霉形体(M.pullorum)各4株。其余2株也属霉形体属,但尚未鉴定到种。