鸡大肠杆菌与葡萄球菌的防治研究

从病鸡肺脏分离得到两株病原菌,经基因序列鉴定分别为大肠杆菌与鸡葡萄球菌.采用试管2倍稀释法检测酒石酸泰乐菌素等7种抗生素对2株菌的抑制性.结果显示,在药品试验浓度范围内,酒石酸泰乐菌素等5种抗生素对大肠杆菌与鸡葡萄球菌无抑菌效果,阿莫西林、盐酸多西环素只有在高浓度下才具有抑菌效果.采用改良的管碟法测定了啤酒酵母菌等9株益生菌对2株致病菌的体外抑菌效果.结果显示,枯草芽孢杆菌等5株益生菌对大肠杆菌和鸡葡萄球菌均无抑制作用,啤酒酵母菌只对鸡葡萄球菌具有抑制效果,植物乳杆菌、干酪乳杆菌与鼠李糖乳杆菌对大肠杆菌和鸡葡萄球菌具有明显的抑制效果.以上结果表明,大肠杆菌与鸡葡萄球菌对多种抗生素具有较高的耐药性,选择乳酸杆菌等益生菌防治致病菌具有重要的意义.     

益生菌在彭泽鲫养殖中的应用研究

本试验在彭泽鲫饲料中添加不同益生菌（枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、戊糖片球菌、光合细菌），研究其对彭泽鲫的增重率、存活率、饵料系数及养殖水体氨氮、亚硝酸盐、化学需氧量（COD）的影响。结果表明：枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和光合细菌能显著提高彭泽鲫的增重率和存活率，并降低饵料系数，其中以地衣芽孢杆菌能力最强，而植物乳杆菌和戊糖片球菌对此无显著差异：在降低水体氨氮、亚硝酸盐、COD含量方面，枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和光合细菌均有显著效果，而植物乳杆菌和戊糖片球菌无显著影响。     

抗鸡源大肠杆菌的枯草芽孢杆菌鉴定及代谢产物理化特性研究

本试验采用鸡源大肠杆菌O2作为指示菌,对29株芽孢杆菌的发酵产物进行了抑菌效果检测,获得了4株抑菌圈在15mm以上的芽孢杆菌;在此基础上,对其代谢产物进行了抑菌谱的测定及理化稳定性试验,发现其中一株芽孢杆菌对革兰氏阳性、阴性细菌及真菌均具有良好的抑菌和杀菌效果,理化性质稳定,对鸡源大肠杆菌抑菌圈达到20mm以上;生理生化鉴定及16S rDNA测序结果显示该菌为一株枯草芽孢杆菌,命名为枯草芽孢杆菌GD株。     

猪源芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

从自然生长的健康猪肠道中分离到13株芽孢杆菌,通过生理生化试验初步鉴定其中9株为枯草芽孢杆菌,2株为巨大芽孢杆菌,1株为地衣芽孢杆菌,1株为凝结芽孢杆菌;对这13株芽孢杆菌分别进行了耐酸性试验、耐胆盐试验、体外抑菌试验和动物安全性试验。结果表明,其中1株地衣芽孢杆菌B7株和1株枯草芽孢杆菌B9株均有较强的耐酸、耐胆盐能力,对致病性大肠杆菌具有较好的体外抑制能力,且均安全无毒,可作为动物用益生菌制剂的候选菌种。     

杨树花超声波提取物的抑菌作用及对鸡源性大肠杆菌耐药性的消除作用

以杨树花超声波提取物为研究对象探讨其抗菌活性,观察杨树花超声波提取物对感触培养前后鸡源性大肠杆菌耐药性的影响。采用药敏试验法测试杨树花超声波提取物对大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌效果,利用加有100μmol/L的杨树花超声波提取物溶液培养基进行感触培养,观察感触培养前后辽宁省锦州市某养鸡场分离的致病性大肠杆菌对抗菌药敏感性的变化。杨树花超声波提取物药敏试验结果表明:大肠杆菌对杨树花超声波提取物极度敏感(21.17±0.41),沙门菌和葡萄球菌对其高度敏感(17.87±0.25和17.10±0.37),枯草芽孢杆菌对其中度敏感(13.03±0.54);杨树花超声波提取物感触培养试验结果表明:锦州某养鸡场鸡大肠杆菌分离株对抗菌药物的敏感性发生变化,抑菌直径扩大0.21~5.60 mm,10种抗菌药物的抑菌直径平均提高2.09 mm。抑菌试验结果说明,杨树花超声波提取物对大肠杆菌、沙门菌和葡萄球菌均有明显抑菌作用,且对大肠杆菌的作用效果强于沙门菌和葡萄球菌,对枯草芽孢杆菌的作用效果次之;耐药性消除作用试验结果说明,杨树花超声波提取物可消除鸡源性部分大肠杆菌的耐药性。     

猪源益生菌对胃肠道环境、高温的耐受性以及体外抑菌效果研究

为了研制优良的猪用益生菌制剂,试验对从猪粪便分离得到的7株益生菌(地衣芽孢杆菌S3、产朊假丝酵母Y1、德氏乳杆菌德氏亚种B1、粪肠球菌C1和C2、枯草芽孢杆菌S1和S2)进行胃酸耐受性、肝脏胆盐耐受性、环境温度耐受性以及对大肠杆菌和葡萄球菌的抑制效果研究。结果表明:7株益生菌均能够耐受仔猪胃酸和小肠中胆盐,除芽孢杆菌外其他分离菌株均不耐热,在生产应用时需要考虑选用低温加工法;除S3和Y1外,其他菌株(B1、C1、C2、S1、S2)均有明显的抑菌作用,以S2抑菌效果最强。说明B1、C1、C2、S1、S2可用于益生菌制剂的研制菌种。     

四株耐制粒益生菌对0～3周龄肉仔鸡死亡率、腹泻率及盲肠菌群的影响

为了评价4株耐制粒益生菌(地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、乳链球菌及啤酒酵母制剂)经0.1 MPa,65℃制粒后对0～3周龄肉仔鸡死亡率、腹泻率及盲肠菌群的影响,将自制益生菌粉剂按0.3%添加量与1～21日龄肉仔鸡无抗生素日粮混合,制成试验颗粒料(0.1 MPa,65℃).选用1日龄健康的AA肉仔鸡混雏240只,随机分为5组,分别为对照组、地衣芽孢杆菌组、枯草芽孢杆菌组、乳链球菌组和啤酒酵母组,每组4个重复,每重复12只鸡.试验期为3周.研究表明地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、乳链球菌和啤酒酵母对改善0～3周龄内仔鸡的腹泻率和死亡率有一定作用,地衣芽孢杆茵、枯草芽孢杆菌、乳链球菌可以优化0～3周龄肉仔鸡盲肠茵群结构.     

饲用枯草芽孢杆菌抑菌性能的研究进展

文章综述枯草芽孢杆菌在体内、体外的抑菌性能，旨在保障枯草芽孢杆菌的饲用效果，重点总结3方面：其一，枯草芽孢杆菌抑菌性能评估方法；其二，枯草芽孢杆菌的体外抑菌作用（牛津杯法体外抑菌试验评估）；其三，饲用枯草芽孢杆菌对畜禽肠道菌群的调控效果（体内抑菌试验评估）。体外试验文献显示，枯草芽孢杆菌对肠道有害菌和饲料源有害菌的抑菌报道较多，对肠道有益菌和其他商业益生菌的抑制研究很少，且不同菌株的抑菌性能差异较大，这与饲用枯草芽孢杆菌对畜禽肠道有益菌及个别有害菌调控出现差异化结果相符。文章建议完善枯草芽孢杆菌体外抑菌评估的体系，这有助于筛选安全的菌株及高效地研制单一和复合饲用枯草芽孢杆菌制剂。     

复方中药-益生菌制剂对雏鸡大肠杆菌、沙门氏菌抑制作用的研究

将200羽雏鸡,随机分入4个试验组(红白各半):复方中药制剂组(Ⅰ组)、复方益生菌制剂组(Ⅱ组)、复方中药-益生菌制剂组(Ⅲ组)、对照组(Ⅳ组),进行为期42 d的试验,比较各处理方法对雏鸡肠道大肠杆菌及沙门氏菌的影响。结果表明:试验初期复方益生菌制剂单独应用对鸡肠道大肠杆菌及沙门氏菌抑制作用优于复方中药制剂组及复方中药-益生菌制剂组;试验后期复方中药与从健康白牦牛肠道内分离纯化得到的枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌复方益生菌制剂联合应用对鸡肠道大肠杆菌及沙门氏菌有极明显的抑制作用。     

微量元素对3种益生菌固体发酵的影响

通过在地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、热带假丝酵母培养基中加入不同剂量的氯化钴、亚硒酸钠、碘化钾、硫酸锰 ,探讨同时加入不同剂量的微量元素钴、硒、碘、锰对益生菌固体发酵的影响。结果表明 ,微量元素对地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌的生长均有不同程度的抑制作用。对热带假丝酵母的作用 ,依微量元素剂量组合不同 ,对其生长有的促进 ,有的抑制     

Separation and Preliminary Identification of Intestinal Probiotics of Laying Hens

[Objective] The paper was to isolate and identify probiotics in the intestine of laying hens. [Method] The intestinal probiotics in laying hens at peak period were isolated using conventional separation methods; the physical and chemical properties of target strains and in vitro antibacterial effects were measured. Moreover, the safety test of chicks was conducted. [Result] Four strains of lactobacillus were isolated from the jejunum of laying hens, including Lactobacillus plantarum, Bacillus acidophilus, L. delbrueckii subsp. Delbrueckii and L. delbrueckii subsp. Lactis, and their inhibition zone diameters were 18.30, 16.07, 11.45, 17.26 mm, respectively. One strain of Lactobacillus, L. brevis, was isolated from the cecum, with the inhibition zone diameter of 10.26 mm. Three strains of bacillus were isolated from the cecum, including Bacillus subtilis, B. cereus and B. licheniformis, and their inhibition zone diameters were 9.25, 8.46 and 8.37 mm, respectively. Daily drinking 2 billion units of viable bacteria was the safe dosage for chicks. [Conclusion] Eight strains of probiotics had certain inhibitory effect on Escherichia coli O_2, and had no toxic side effects to chicks. Lactobacillus had strong antibacterial effect on E. coli O_2, while the antibacterial effect of bacillus was relatively weak.     

复合微生物制剂在鸡粪无害化处理中的应用研究

为减少畜禽粪便造成的环境污染,本研究选取不同益生菌对鸡粪进行发酵处理。根据发酵粪便中温度变化、氮含量、pH、总活菌数、大肠杆菌数、干物质损失率和吲哚含量等参数,确定发酵鸡粪的干酪乳杆菌、产朊假丝酵母、粪肠球菌和枯草芽孢杆菌用量分别为0.05%、0.10%、0.05%和0.05%(P0.05)。根据单因素试验的结果,将4种益生菌作为四因素进行响应面回归设计,以吲哚含量高低作为发酵好坏的判定标准,得到4种益生菌的最佳配比,即干酪乳杆菌0.06%、产朊假丝酵母0.15%、粪肠球菌0.07%、枯草芽孢杆菌0.07%。利用此复合微生态制剂发酵鸡粪,使鸡粪中吲哚含量、大肠杆菌数量和pH分别比对照组显著降低87.50%、21.93%和16.72%,对畜禽粪便的无害化处理具有重要意义。     

预防犊牛腹泻复合微生态制剂3株菌种的配比优化

试验旨在研究预防犊牛腹泻复合微生态制剂3株菌种的配比优化。通过研究嗜酸乳杆菌、布氏酵母菌、枯草芽孢杆菌不同浓度人工胃液、人工肠液、牛胆盐的耐受性及其对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑菌性,确定其生物学特性;以大肠杆菌K99为指示菌,研究3种益生菌不同配比对大肠杆菌K99的抑菌效果,以确定其最佳组合。结果表明:(1)3种益生菌在不同pH人工胃培养条件下都具有较好的耐受性,其中嗜酸乳杆菌、芽孢杆菌在pH为5时,存活率达到了118.75%、142.24%,布氏酵母菌对不同pH均表现成活率达到了100%以上。(2)3种益生菌在人工胃液中9 h存活率较高,与0 h的OD600相比,布氏酵母菌、枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌存活率分别为108.7%、129.73%、96.37%。(3)在含有不同浓度的牛胆盐培养基中,布氏酵母菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌存活率较对照组的存活率最高为60.49%、85.1%、47.42%。(4)3株益生菌按照不同配比在培养12 h后,试验组第2、4、8组较对照组相比差异显著(P<0.05);培养24 h后,试验组第3、4、5、6较对照组差异显著(P<0.05),组间差异不显著(P>0.05);第8个处理组在培养12 h后对大肠杆菌K99的抑菌效果较好。综合分析,3株益生菌对人工胃液、人工肠液、牛胆盐具有较好的耐受性,并具对大肠杆菌K99、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌均有一定的抑菌特性。嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、布氏酵母菌最佳的优化配比为3:3:1。     

高效降解游离棉酚并改善棉籽粕营养品质的菌株筛选

本试验旨在利用枯草芽孢杆菌和植物乳酸菌发酵棉籽粕,研究其对棉籽粕中游离棉酚降解率的影响,并对发酵前后棉籽粕的营养品质指标如活菌数、中性蛋白酶活性、酸溶蛋白质含量、pH、游离棉酚含量等进行比较。结果发现:可高效降解棉籽粕中游离棉酚的枯草芽孢杆菌菌株为BLCC1-0039,可有效改善发酵风味的植物乳酸菌菌株为BLCC2-0092。综合上述2株益生菌的优点,筛选出最优复配发酵方式为植物乳酸菌BLCC2-0092与枯草芽孢杆菌BLCC1-0039按照1∶1比例接种,37℃需氧发酵24h再厌氧发酵。与空白对照组相比,最优复配发酵组各发酵阶段发酵棉籽粕的pH显著降低(P0.05),厌氧发酵72h时pH降至5.27;酸溶蛋白质含量显著提高(P0.05),厌氧发酵72h时酸溶蛋白质含量达到23.54%;游离棉酚含量显著降低(P0.05),需氧发酵24h时游离棉酚降解率达到52.12%,厌氧发酵72h时游离棉酚降解率达到61.58%。由此可知,植物乳酸菌BLCC2-0092与枯草芽孢杆菌BLCC1-0039复配发酵可有效降低发酵棉籽粕中的游离棉酚含量并改善其营养品质。     

中药与抗菌药物联用对猪源大肠杆菌耐药性的抑制作用

为了探讨中药与抗菌药物联用对大肠杆菌耐药性的作用效果，本研究对河南部分地区采集的样品（50份）进行分离鉴定、生化试验及致病性试验，对分离鉴定后的致病性猪大肠杆菌选用12种中药采用K-B法进行耐药性检测，将筛选出来的中药与抗生素进行中西联用对致病性大肠杆菌做体外抑菌试验，并分析中西药联用对大肠杆菌的抑制作用。结果显示，采集的50份样品有23株菌符合大肠杆菌的分离培养特性和生化特性，且23株菌均为致病性大肠杆菌；通过耐药性检测，23株试验菌株对测试的中药均有不同程度的耐药性，其中试验菌株对甘草耐药率最高（82.6%），其次为生地（78.2%），而对黄柏（17.3%）和白头翁（21.7%）耐药性较低，具有一定的敏感性；体外抑菌试验结果发现，中药与抗生素联用均有不同程度的抑菌效果，其中黄柏、白头翁与抗菌药物联用的抑菌效果最明显。以上结果说明中药与抗菌药物联用不仅可以抑制大肠杆菌的耐药性，还可以延缓大肠杆菌耐药性的产生。     

不同组合益生菌对0～8周龄犊牛生长性能及血清生化指标的影响

本试验旨在研究益生菌对犊牛生长性能和血清生化指标的影响.选取24头新生荷斯坦犊牛,随机分为4组,每组公母各1/2,分别饲喂基础饲粮(A组,由代乳粉、开食料和羊草组成)、基础饲粮+地衣芽孢杆菌(B组)、基础饲粮+地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的复合菌(C组,复合菌中各菌菌数比例为1∶1)、基础饲粮+地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳酸杆菌的复合菌(D组,复合菌中各菌菌数比例为1∶1∶1).每头牛食入益生菌总数为2×1010 CFU/d.试验期共8周,分0～2周龄、2～4周龄、4～6周龄和6～8周龄4期.每2周空腹称重、测量体尺、采血1次,每天记录采食量和粪便评分情况.试验0～8周龄,B组的平均日增重显著高于A组(P＜0.05),试验各组的料重比差异不显著(P＞0.05);第8周龄时,B组和D组的体躯指数均显著高于A组(P＜0.05);试验各组采食量和犊牛粪便评分差异不显著(P＞0.05);血清生化指标不受本试验处理因素影响(P＞0.05).结果表明,饲粮中添加地衣芽孢杆菌单菌提高了犊牛0～8周龄的平均日增重和8周龄的体躯指数,添加地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌和植物乳酸杆菌的复合菌提高了犊牛8周龄的体躯指数,添加益生菌对犊牛血清生化指标没有显著影响.     

苜蓿青贮优势菌种筛选及应用效果

本试验旨在筛选自然发酵苜蓿青贮的优势菌种,应用于高水分苜蓿青贮的调制,研究不同微生物及组合对高水分苜蓿青贮品质的影响。试验先调制自然发酵苜蓿,青贮30 d后,从中筛选优势菌种并进行鉴定。根据优势菌种筛选结果,组合了9组发酵菌种用于苜蓿青贮的调制,分别为:以植物乳杆菌与乳酸片球菌为发酵菌种,活菌数比例分别为1∶1、1∶2和2∶1,编号为1、2、3组;以植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和乳酸片球菌为发酵菌种,活菌数比例分别为2∶1∶1、1∶1∶1和4∶1∶1,编号为4、5、6组;以植物乳杆菌、解淀粉芽孢杆菌和乳酸片球菌为发酵菌种,活菌数比例分别为2∶1∶1、1∶1∶1和4∶1∶1,编号为7、8、9组;以不加任何菌种的自然苜蓿青贮作为对照。每组3个重复,发酵60 d后,对苜蓿青贮进行感官评定,并测定氨态氮/总氮(NH3-N/TN)、总酸含量和pH。结果表明:用MRS、LB和NA 3种培养基从自然发酵苜蓿青贮中筛选到微生物菌种31株,对其中18株进行了分子鉴定,主要菌种为植物乳杆菌9株、乳酸片球菌1株、粪肠球菌2株、各种芽孢杆菌6株。感官评分结果表明乳酸菌(植物乳杆菌和乳酸片球菌)比例大的各组评分等级显著高于对照组和添加了添加枯草芽孢杆菌的各组(P<0.05)。对于NH3-N/TN、总酸含量和pH等指标,乳酸菌比例较低的2、5、8和对照组与其余各组差异显著(P<0.05)。综上所述,植物乳杆菌和乳酸片球菌是苜蓿青贮主要菌种,用于苜蓿青贮有利于青贮品质的提高。枯草芽孢杆菌会影响苜蓿青贮的气味,解淀粉芽孢杆菌为菌种会改善苜蓿青贮风味,但比例太高会增加NH3-N含量。     

防治家禽腹泻的复方中药筛选及其提取工艺研究

为筛选能够有防治家禽腹泻的复方中药,选择对大肠杆菌有抑菌效果的单味中药,配置14种复方,结合对金黄色葡萄球菌、致病性沙门菌的抑菌能力,筛选出一个复方中药,通过正交试验确定该复方中药最佳提取工艺。结果显示:筛选的复方中药乙醇提取物(1 g/mL,200μL)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡大肠杆菌、鸭大肠杆菌、鸡致病性沙门菌、鸭致病性沙门菌(指示菌浓度1×10^8cfu/mL)的抑菌圈直径分别为24.21mm、31.36mm、25.19mm、24.12mm、25.00 mm、25.49 mm;硫酸新霉素对上述致病菌的抑菌圈直径分别为23.61 mm、26.52 mm、14.69 mm、16.00 mm、24.11 mm、25.49 mm。经正交试验优化的最佳提取工艺为:15倍溶剂、提取时间60 mim、乙醇浓度90%、提取2次。优化后提取物体外抑菌试验(O78)的抑菌圈均值为26.65 mm。研究表明:筛选的复方中药对引起家禽腹泻的主要致病菌具有良好抑菌、杀菌作用,正交试验确定的提取工艺稳定可行。     

益生菌对0～52周龄中国荷斯坦后备牛生长发育的影响

本试验旨在研究地衣芽孢杆菌及其复合菌对后备牛生长发育的影响。选取24头新生荷斯坦犊牛,随机分为4组,每组公母各半,分别饲喂基础饲粮(A组,断奶前基础饲粮由代乳粉、开食料和羊草组成,断奶后由精料、羊草和全株青贮玉米组成)、基础饲粮+地衣芽孢杆菌(B组)、基础饲粮+地衣芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的复合菌(C组,复合菌中各菌菌数比例为1:1)、基础饲粮+地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和植物乳酸杆菌的复合菌(D组,复合菌中各菌菌数比例为1:1:1)。每头牛食入益生菌总数为2×1010CFU/d。试验期共52周,每4周空腹称重、测量体尺一次。结果表明,添加地衣芽孢杆菌的B组日增重和末体长显著高于A组,末体重有高于A组的趋势;但添加益生菌对后备牛的体高和胸围没有显著性影响。添加地衣芽孢杆菌对后备牛的生长发育有一定的促进作用。     

补饲复合微生态制剂对泌乳期伊犁母马血液生化指标及抗氧化能力的影响

试验旨在研究补饲复合微生态制剂对泌乳期伊犁母马血液生化指标及抗氧化能力的影响.根据年龄、胎次、泌乳月龄相近的原则选择泌乳期伊犁母马24匹,随机分为4组,分别为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组.对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在饲喂基础日粮的基础上分别补饲0.05 g枯草芽孢杆菌(活菌数为2.0×10¹¹ CFU/g)和0.133 g植物乳杆菌(活菌数为3.0×10¹⁰ CFU/g)、0.10 g枯草芽孢杆菌和0.266 g植物乳杆菌、0.15 g枯草芽孢杆菌和0.399 g植物乳杆菌.结果表明,与对照组相比,补饲复合微生态制剂对泌乳期伊犁母马血液中总蛋白、白蛋白、血尿素氮含量和谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性的影响均差异不显著(P> 0.05);但补饲复合微生态制剂泌乳期伊犁母马血液中总蛋白、白蛋白含量和超氧化物歧化酶活性呈升高的趋势;试验Ⅱ组泌乳期伊犁母马血液中球蛋白含量显著高于对照组和试验Ⅰ组(P <0.05),其他各组之间差异不显著(P> 0.05).过氧化氢酶的活性试验Ⅱ组显著高于对照组和试验Ⅲ组(P <0.05),试验Ⅰ组与其他各组之间差异不显著(P> 0.05);总抗氧化能力试验Ⅱ组显著高于试验Ⅰ和Ⅲ组(P <0.05),其他各组之间差异不显著(P> 0.05).因此,补饲植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌复合物对泌乳期母马增强免疫机能,改善氮沉积,提高机体抗氧化能力起到了一定作用,且补饲0.10 g枯草芽孢杆菌和0.266 g植物乳杆菌复合物时效果较为明显.