旋毛虫P53ES重组蛋白对小鼠的免疫保护作用

为进一步探讨旋毛虫P53基因原核表达重组蛋白的免疫保护作用,本实验采用纯化的重组蛋白作为抗原免疫小鼠,免疫剂量为50μg/100μL,每隔10d免疫1次,共3次。末次免疫后10d,每只小鼠以200条旋毛虫肌幼虫攻虫。分别检查感染后7d小鼠肠道内成虫数量、体外培养雌虫所产新生蚴数量以及感染后35d肌肉荷虫量。结果显示:小鼠肠道内成虫、新生蚴和肌幼虫的减虫率分别为61.9%、53.45%和71.48%,表明旋毛虫表达P53基因的重组蛋白对小鼠产生了较好的免疫保护效果。     

猪、犬旋毛虫交叉免疫原性的研究

通过在小鼠体内感染猪、犬旋毛虫肌幼虫50条，再用同源免疫和交叉免疫方法攻击感染旋毛虫肌幼虫200条，来检测其肌幼虫的减虫率。试验得到猪旋毛同源免疫的减虫率为87.47%，对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率是86.47%，犬旋毛虫同源免疫的减虫率为83.70%，其对猪旋毛虫的交叉免疫是83.46%。试验表明：旋毛虫肌幼虫自然免疫具有较好的免疫保护作用，交叉免疫的保护率低于同源免疫。     

多拉菌素治疗鸡体内犬蛔虫幼虫试验

为了验证多拉菌素对鸡体内犬蛔虫幼虫的治疗效果,为临床用药提供相关数据,现建立犬蛔虫幼虫感染2日龄的小鸡动物模型,将多拉菌素分别按高(300μg/kg)中(200μg/kg)低(100μg/kg)剂量作用于受感染的小鸡,并设置对照组。在给药后第1、2、3、4、5、6天剖检、分离小鸡肝、肺、肌肉、肾、心、脑等组织,用胃蛋白酶消化其组织并镜检计算减虫率,用统计学的方法分析结果,对比疗效。试验结果表明,高剂量(300μg/kg)的多拉菌素减虫率为89.77%,中剂量组的减虫率为80.12%,低剂量组的减虫率为78.43%,高剂量(300μg/kg)的多拉菌素减虫效果显著,临床用药推荐以高剂量300μg/kg效果好。     

猪、犬旋毛虫新生蚴免疫原性试验

将猪、犬旋毛虫新生蚴制备成免疫原,在小鼠体内进行免疫试验,免疫１周后攻击感染肌幼虫,３５日蝗检查肌幼虫的减虫率。结果表明,猪旋毛虫新生蚴的同源免疫和其对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率分别为８３．１１％和７９．３９％,犬旋毛虫新生蚴的为８１．３７％和８０．６９％。结果揭示,旋毛虫新生蚴具有良好的免疫原性,同源免疫的减虫率比交叉免疫的高,猪旋毛虫新生蚴抗原对犬旋毛虫的交叉免疫与犬旋毛虫新生蚴抗原的同源免疫在减虫率上差异不显著。     

吡喹酮注射剂早期治疗小鼠血吸虫病效果的初步研究

为探索吡喹酮新制剂早期治疗血吸虫病效果,对人工感染日本血吸虫20d的小鼠皮下给药进行减虫率、肝脏减卵率统计,并在不同时间点对口服组和皮下注射吡喹酮新制剂组的未感染小鼠在给药后采集血浆,高效液相色谱法建立药时曲线。结果显示新制剂600mg/kg剂量治疗的3次试验的减虫率分别为72.88%、82.69%和56.7%,肝脏减卵率分别为81.7%、94.8%和70.7%,对感染20d期别的血吸虫有较好效果。而高效液相色谱法检测血药浓度显示,新制剂经皮下给药方式可使有效杀虫浓度(约0.3μg/mL)持续10d以上,具有缓释作用。吡喹酮新注射制剂能杀灭20d童虫,减少血吸虫病的危害,对血吸虫病的防治有较大的意义。     

芬苯哒唑对兔人工感染豆状囊尾蚴的驱虫效果评价

目的:评价芬苯达唑粉剂对兔人工感染豆状囊尾蚴的驱虫效果。方法:选择60只56日龄的新西兰大白兔,每只人工感染豆状带绦虫的虫卵(2 000个/只),感染30天后将所有试验兔分为4组(15只/组),试验1、2、3组用芬苯达唑粉剂分别按10mg/kg体重、20mg/kg体重、30mg/kg体重,混饲,连用3天;对照组不用药;用药结束后的第12天对所有试验兔进行剖检,检查记录兔体内各部位的豆状囊尾蚴数量,以减虫率评价芬苯达唑对兔豆状囊尾蚴的驱虫效果。结果:在对照组和试验1组兔的大网膜、肠系膜、直肠浆膜和肝脏部位均检出豆状囊尾蚴,而在试验2、3组兔的各个部位均未检出豆状囊尾蚴。试验1组兔大网膜、肠系膜、直肠浆膜和肝脏部位的平均减虫率分别为91.78%、50.92%、96%和100%;试验2、3组兔各部位的减虫率均为100%。芬苯达唑粉剂按20mg/kg、30mg/kg,混饲,连用3天对兔豆状囊尾蚴均具有高效的驱虫效果。     

微量多拉菌素与伊维菌素对牦牛皮蝇幼虫驱除效力的研究

应用多拉菌素注射剂和伊维菌素浇泼剂微量给药,对自然感染皮蝇幼虫的犊牦牛进行驱虫效力研究。结果:给药后28~34d剖检和翌年3、5月份两次摸背检查远期防治效果,多拉菌素注射剂5μg/kg剂量组驱净率分别为85.0%和92.1%,驱虫率分别为93.6%、93.7%;10、20μg/kg剂量组均为100.0%。伊维菌素浇泼剂12.5μg/kg。剂量组驱净率分别为85.0%和91.2%,驱虫率分别为93.3%和93.2%;25、50μg/kg剂量组均为100.0%。对照组牦牛皮蝇1期幼虫感染率85.0%,平均感染强度29.7条;背部皮下瘤疱和皮肤虫孔的平均感染率84.1%,瘤疱和虫孔总数205个。试验证明供试两种药物使用微量驱除牦牛皮蝇1期幼虫高效安全经济,多拉菌素的最佳剂量为10μg/kg,伊维菌素的最佳剂量为25μg/kg。     

阿苯达唑干混悬剂驱除绵羊线虫的效力与安全性试验

应用阿苯达唑干混悬剂按10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg剂量驱除绵羊线虫,并设药物对照组和空白对照组。粪检结果:阿苯达唑干混悬剂三个试验剂量组对羊消化道线虫虫卵转阴率分别为83.3%、93.3%和96.7%,减少率分别为95.2%、98.8%和99.9%;对原圆科线虫幼虫转阴率分别为63.3%、83.3%和93.3%,减少率分别为76.1%、87.5%和94.2%。剖检结果:三个剂量组对线虫的总计驱虫率分别为96.9%、98.3%和99.4%。阿苯达唑原料药15mg/kg剂量对羊消化道线虫虫卵转阴率、减少率分别为90%和98.5%,对原圆科线虫幼虫转阴率、减少率分别为83.3%和86.9%,总计驱虫率98.5%。绵羊能耐受80mg/kg剂量。试验证明:阿苯达唑干混悬剂的驱虫活性及安全性与阿苯达唑原料药、片剂等无明显差异,均有良好驱虫效果,临床驱除绵羊线虫使用剂量以15mg/kg为宜,干混悬剂使用方法简便,特别适用于高原牧区,具有推广价值。     

本地毛形线虫49 ku ES重组蛋白诱发小鼠保护性免疫的研究

目的研究本地毛形线虫肌幼虫49ku ES重组蛋白对小鼠的免疫保护作用。方法以表达的本地毛形线虫肌幼虫49ku ES重组蛋白免疫小鼠,共免疫3次。末次免疫后10d,每只小鼠攻击感染200条本地毛形线虫感染性肌幼虫,检测本地毛形线虫7日龄成虫数、雌虫体外产新生幼虫数以及感染35d肌幼虫数,并且计算减虫率,应用自制的ELISA方法测定各组小鼠血清抗体OD值。结果成虫减虫率、新生幼虫减虫率、肌幼虫减虫率分别为9.4%、70.2%和71.3%,免疫组血清抗体水平远远高于佐剂对照组和感染对照组（P〈0.01）。结论本地毛形线虫肌幼虫49ku ES重组蛋白诱导小鼠产生较好的抗本地毛形线虫的保护性免疫。     

芬苯达唑微晶体临床药效学试验

本试验以家兔为试验动物,观察芬苯达唑微晶体对动物肠道寄生虫的影响。50只人工感染猪蛔虫的家兔随机分成5组,每组10只,第Ⅰ组、Ⅱ组按体重5 mg/kg、10mg/kg不同剂量的芬苯达唑微晶体对家兔口服饲喂驱虫,同时第Ⅲ组、Ⅳ组按体重10mg/kg芬苯达唑及0.2 mg/kg伊维菌素口服给药作药效对照,并设空白组,分别于用药前3d和用药后5d取粪便进行虫卵计数。结果表明,各剂量组药物对肠道蛔虫虫卵减少率分别为99.6%,100%,98.8%,99.7%,虫卵转阴率分别为100%、100%、90%、90%,芬苯达唑微晶体组对兔肠道寄生虫驱除作用要优于其他用药各组,10 mg/kg体重最佳,表明芬苯达唑微晶体能提高芬苯达唑的驱虫效果,提高其生物利用度。     

不同储存方法对鼠肉内旋毛虫幼虫感染性影响

旋毛虫阳性小鼠的肌肉经不同方法储存后,为观察其对小鼠感染性的变化,取健康小白鼠20只随即分作4组,每组分别喂食新鲜、4℃冷藏、及-18℃冷冻,及腌制＋冷藏一定时间的旋毛虫阳性的小鼠腿肌肉约1g。饲养1～2周,剖杀,取其膈肌、腿肌镜下观察是否呈旋毛虫囊包阳性。结果显示,喂食新鲜旋毛虫阳性鼠肉的小鼠和喂食经过冷藏的阳性鼠肉的小鼠都感染了旋毛虫,而喂食经冷冻的和经腌制＋冷藏的鼠肉的小鼠均未感染旋毛虫,可见,将肉类冷冻或严格冷藏储存一定时间可杀死其中的旋毛虫,减弱其致病性,降低因食用疫肉而患病的风险。     

青海省部分地区商品猪旋毛虫感染的血清学调查

以旋毛虫肌幼虫排泄分泌)抗原作为检测抗原,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法,分别对采集自青海省西宁市张氏生猪屠宰场、互助县屠宰场、平安县屠宰场的商品猪血清进行旋毛虫抗体检测,共检查猪血清1 065份.结果阳性血清为19份,阳性率为1.78％.可见在青海省商品猪中旋毛虫具有一定的感染率,动物卫生监督以及肉品检疫部...     

PCR检测感染早期小鼠血液中旋毛虫幼虫的研究

为了研究PCR检测感染小鼠血液中旋毛虫DNA的敏感性,应用旋毛虫1.6 kb重复序列为扩增靶序列对旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)和南方旋毛虫(T7)肌幼虫DNA进行PCR扩增,并检测小鼠感染20、100、300条T1肌幼虫后不同时间的外周血.结果表明,T1、T4和T7肌幼虫可扩增出特异性目的条带(510 bp),而T2和T3无扩增产物;1、0.04和0.02条T1、T4和T7肌幼虫均能扩增到清晰的目的条带(510 bp).20条幼虫感染小鼠后5 d～6 d,PCR阳性率均为7.69%;100条幼虫感染小鼠后5 d～12 d可检出旋毛虫DNA,其中感染后5 d～7 d的阳性率分别为30.77%、38.46%及30.77%;300条幼虫感染小鼠后5 d～15 d可检出旋毛虫DNA,感染后7 d的阳性率为61.54%,感染后6 d与8 d～10 d的阳性率均为53.85%. 3组旋毛虫感染小鼠PCR阳性率间的差异有统计学意义(p<0.01),PCR阳性率随感染剂量的增加而升高(p<0.01),100条与300条感染小鼠感染后不同时间的PCR阳性率与检测时间有相关性(p<0.01).以上实验结果表明PCR检测感染小鼠血液中旋毛虫DNA的敏感性与感染程度和检测时间有关,对感染早期旋毛虫抗体阴性宿主有一定诊断价值.     

旋毛虫各隔离种雌虫生殖能力的实验研究

本试验对旋毛虫各隔离种雌虫体外产新生幼虫能力进行了研究。结果显示，猪旋毛虫和旋毛形线虫(Trichinella spiralis)雌虫体外培养24h平均产新生幼虫数分别为66.00±7.34和76.20±7.57，而犬旋毛虫和本地毛形线虫(Trichinella nativa)分别是28.80±4.30和22.00±3.22，前者在雌虫体外产幼虫能力上明显高于后者。研究结果表明，黑龙江猪旋毛虫相当于旋毛虫形线虫，犬旋毛虫相当于本地毛形线虫。     

Clinical, haematological, biochemical and economic impacts of Trichinella spiralis infection in pigs

The purpose of this work was to assess the clinical, haematological and biochemical responses of pigs experimentally inoculated with Trichinella spiralis. Groups of three pigs were inoculated per os with 100, 500 and 5000 T. spiralis muscle larvae, two pigs were used as control. Clinical evaluation of disease in pigs included daily examination, rectal temperature measurements and cardiac and respiration rates. Haematological studies included: hematocrit (%), hemoglobin (g/dl), and white cell, neutrophil, lymphocyte and eosinophil counts. Blood biochemistry included: bun (mg/dl), creatinine (mg/dl), AST (UI/l), ALT (UI/l), CPK (UI/l) and ALP (UI/l). No significant differences were observed in rectal temperature and in cardiac and respiration rates between inoculated animals and the control group (p> or =0.05). Significant differences were detected (p< or =0.05) in the values of % hemoglobin, and eosinophils, as well as in the values of CK, ALP, AST and ALT. The variations observed in some cases were related to the number of T. spiralis larvae inoculated and varied with the number of days post-infection. Inoculated pigs showed significant differences (p< or =0.05) in weight gain when compared with uninoculated controls. This study has clinical, haematological, and enzyme alterations in Trichinella infected pigs provides a better understanding of acute and chronic trichinellosis in pigs.     

寄生虫抗肿瘤研究进展

虽然旋毛虫抗肿瘤的分子机制仍不清楚,但旋毛虫具有抗肿瘤的效应却已被许多实验所证实。小鼠感染旋毛虫后对肿瘤细胞在体内的增殖或对移植进体内的肿瘤生长的抑制作用,其可能的机理是旋毛虫感染机体后激发宿主免疫网络系统促使机体产生多种免疫活性细胞因子,发挥特异性和非特异性抗肿瘤免疫功能;或者是由于寄生虫本身就具有能够分泌排泄一些抗肿瘤活性物质而发挥抗肿瘤效应;或者是由于寄生虫感染诱导肿瘤的基因表达发生变化而产生了抗肿瘤的效应。     

Differential detection of Trichinella papuae, T. spiralis and T. pseudospiralis by real-time fluorescence resonance energy transfer PCR and melting curve analysis

Trichinellosis caused by nematodes of Trichinella spp. is a zoonotic foodborne disease. Three Trichinella species of the parasite including Trichinella spiralis, Trichinella papuae and Trichinella pseudospiralis, have been etiologic agents of human trichinellosis in Thailand. Definite diagnosis of this helminthiasis is based on a finding of the Trichinella larva (e) in a muscle biopsy. The parasite species or genotype can be determined using molecular methods, e.g., polymerase chain reaction (PCR). This study has utilized real-time fluorescence resonance energy transfer PCR (real-time FRET PCR) and a melting curve analysis for the differential diagnosis of trichinellosis. Three common Trichinella species in Thailand were studied using one set of primers and fluorophore-labeled hybridization probes specific for the small subunit of the mitochondrial ribosomal RNA gene. Using fewer than 35 cycles as the cut-off for positivity and using different melting temperatures (T(m)), this assay detected T. spiralis, T. papuae and T. pseudospiralis in muscle tissue and found the mean T(m) ± SD values to be 51.79 ± 0.06, 66.09 ± 0.46 and 51.46 ± 0.09, respectively. The analytical sensitivity of the technique enabled the detection of a single Trichinella larva of each species, and the detection limit for the target DNA sequence was 16 copies of positive control plasmid. A test of the technique's analytical specificity showed no fluorescence signal for a panel of 19 non-Trichinella parasites or for human and mouse genomic DNA. Due to the sensitivity and specificity of the detection of these Trichinella species, as well as the fast and high-throughput nature of these tools, this method has application potential in differentiating non-encapsulated larvae of T. papuae from T. spiralis and T. pseudospiralis in tissues of infected humans and animals.     

旋毛虫各隔离种对小鼠的感染性研究

比较研究了黑龙江省猪、犬旋毛虫及国际标准虫种旋毛形线虫(Trichinella spiralis)和本地毛形线虫(Trichinella nativa)对小鼠的感染性异同。结果表明，四者对小鼠的感染力存在着显著差异，猪旋毛虫和旋毛形线虫在小鼠体内的繁殖力指数(RCI)分别为121.01±7.80和149.86±7.47；而犬旋毛虫和本地毛形线虫的RCI分别为60.98±5.05和55.15±4.69。由实验结果可认为黑龙江省的猪旋毛虫相当于旋毛形线虫，而犬旋毛虫相当于本地毛形线虫。     

旋毛虫死活快速鉴别的实验研究

为了寻找快速鉴别旋毛虫死活的染色方法。用0．03％美蓝、美蓝-伊红-硼砂染液(M．E．B)和1％中性红3种染液，对死或活旋毛虫幼虫和成虫进行染色。结果3种染液均能使死亡旋毛虫幼虫在1分钟内着色，活虫则不着色。3种染液对旋毛虫死、活成虫均不着色。结论认为3种染液染色均可快速鉴别旋毛虫幼虫死活。     

阿魏倍半萜类对日本血吸虫作用研究

观察小鼠体内不同发育阶段日本血吸虫童虫与成虫对阿魏倍半萜类的敏感性。用定量日本血吸虫尾蚴感染小鼠,感染2 h,1、3、7、12、14、16、25、35、42 d后分别一次性灌服阿魏倍半萜类500 mg/kg。给药后4周剖检小鼠,采用门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率。结果显示,阿魏倍半萜类对1、3、7、12、14、16、25、35、42 d龄童虫或成虫的减虫率分别为16.9%、18.0%、71.3%、50.2%、36.9%、31.3%、45.3%、58.0%、26.4%,其中以7-35 d龄虫对该药最敏感。该结果提示,阿魏倍半萜类对小鼠体内不同发育阶段日本血吸虫均有杀灭作用,对7-35 d龄虫体杀灭效果更为明显。