MTT法淋巴细胞转化试验最佳条件的筛选研究

淋巴细胞转化试验是利用淋巴细胞与抗原或有丝分裂因子(简称为丝裂原)在体外共同培养,淋巴细胞的代谢和形态发生一系列变化,进一步转化为淋巴母细胞这一特性来反映机体免疫状态的一种试验,是细胞免疫的一个测定指标[1].     

牛外周血T淋巴细胞增殖试验条件的优化

淋巴细胞增殖试验是体外检测T淋巴细胞功能的一种方法.淋巴细胞在体外培养条件下,与特异性抗原或非特异性有丝分裂原共同培养,使淋巴细胞的代谢和形态发生一系列的变化,可以使较小的淋巴细胞转化为体积较大、代谢旺盛,且能进行有丝分裂的淋巴母细胞.转化的淋巴细胞不仅能呈现出成熟的母细胞形态及蛋白质和核酸的增加,还能合成和释放细胞因子.因此可以使用淋巴细胞增殖试验反映机体的免疫状态[1].     

淋巴细胞转化试验作为测定马传贫免疫力指标的应用

近年来由于细胞免疫研究的迅速进展,人们对淋巴细胞的本质和功能有了新的认识,它在机体免疫中的作用已广泛引起人们的重视。目前淋巴细胞转化试验已成为测定细胞免疫力的重要方法之一,根据体外淋巴细胞转化的状况可以作为机体细胞免疫力指标的理论(1)(6)。我们试图应用淋巴细胞转化试验以测定健马淋巴细胞转化率的数据,探索马传贫的细胞免疫指标,为马传贫免疫机理的研究提供依据。     

马针刺麻醉手术前后淋巴细胞转化试验观察

淋巴细胞转化与机体的细胞免疫性有密切关系。目前在医学界淋巴细胞转化试验已应用于机体细胞免疫功能的测定。本试验是根据T-淋巴细胞在抗原的刺激下可能转化成大型淋巴母细胞,采用植物     

复方仙灵脾注射液提高母猪淋巴细胞转化率的试验

体外培养的T淋巴细胞,在受植物血凝素(PHA)等非特异性致有丝分裂素的刺激时,可转化为淋巴母细胞,以反映机体细胞免疫功能状态,这种试验简称淋转试验,已渐趋广泛的用在人医上。本试验则是运用这项新技术,以中兽医扶正固本的理论为依据在本动物上进行的,结果取得了满意效果,现报道于后。     

白花蛇舌草多糖体外免疫活性研究

目的:探讨白花蛇舌草多糖对小鼠胸腺和脾脏体外免疫功能的影响。方法:采用MTT法研究不同浓度(500μg/m L、250μg/m L、200μg/m L、150μg/m L、100μg/m L、50μg/m L、25μg/m L)的白花蛇舌草多糖对体外培养的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的代谢及其与Con A或LPS协同诱导的转化作用、小鼠胸腺和脾脏巨噬细胞吞噬活性及自然杀伤细胞活性的影响。结果:白花蛇舌草多糖可显著提高脾脏巨噬细胞吞噬功能(P0.01),促进脾脏淋巴细胞代谢及其与Con A或LPS协同诱导的转化作用(P0.01),但对小鼠胸腺淋巴细胞代谢及其与Con A或LPS协同诱导的转化作用、小鼠胸腺巨噬细胞吞噬功能无显著性影响(P0.05);白花蛇舌草多糖能够显著增强小鼠胸腺和脾脏NK细胞活性(P0.01),并呈现明显的量效双向作用关系。结论:一定浓度范围内的白花蛇舌草多糖可提高小鼠脾脏和胸腺淋巴细胞、巨噬细胞和NK细胞的体外免疫活性。     

苦芩总多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响

为了探索苦芩总多糖对免疫低下小鼠免疫功能的影响,试验通过对苦芩中总多糖的提取,并将所提取总多糖对免疫低下小鼠进行一系列免疫相关试验,如碳粒廓清指数测定试验、免疫器官指数测定试验、淋巴细胞转化试验、血清溶血素的测定试验。结果表明,苦芩及其总多糖均能显著提高免疫抑制小鼠的吞噬指数α,脾脏指数和胸腺指数,同时还能显著提高免疫抑制小鼠血清溶血素水平以及T、B淋巴细胞转化率。表明苦芩总多糖可以通过调节机体的免疫系统从而增强机体的免疫功能。     

MTT法检测犬外周血淋巴细胞转化功能的研究

淋巴细胞转化试验的原理是利用T淋巴细胞与抗原或有丝分裂因子（简称为丝裂原）在体外共同培养，引起细胞内新的DNA合成及细胞分化，淋巴细胞的代谢和形态从而发生一系列变化，进一步转化为淋巴母细胞这一特性来反映机体免疫状态的一种试验，是细胞免疫的一个测定指标。其常用测定方法有形态学方法、同位素掺入法（^3H—TdR掺入法），形态学方法主观性强，费时费力；     

鸡传染性鼻炎与鸡毒支原体类脂灭活苗的研制

杨树皮类脂(Poplar Bark Lipid)系从杨树皮中提取的一种橙黄色脂溶性物质，富含大量的多糖、有机酸、甾醇、磷脂、甙类及维生素等物质。多糖类具有促胸腺体液反应、刺激网状内皮系统，提高机体特异性免疫反应能力；有机酸具有增强机体免疫功能的作用，能够刺激和促进单核吞噬细胞功能，对抗免疫抑制对免疫器官的抑制作用；甙类能够加速抗体的产生，促进淋巴细胞转化和增强网状内皮系统功能等作用。这些物质在动物体内协调统一，大大提高动物体的免疫机能     

雏鸡接种新城疫Ⅱ系苗后细胞免疫状态及淋巴细胞转化试验较佳测定条件的研究

雏鸡接种新城疫Ⅱ系苗后,细胞免疫功能表现为首免后有增强趋势,二免后升到极显著水平。采用微量全血培养~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法,以植物血凝素(PHA)为刺激原,确定鸡淋巴细胞转化试验的较佳测定条件为:用含5％犊牛血清的RPMI-1640培养液2ml,血量为25μl,刺激管PHA为0.4ml,置41.5℃培养36小时,并在培养结束前18小时加入~3H-TdR。     

旋毛虫排泄/分泌(ES)抗原致鼠胸腺淋巴细胞凋亡的研究

本试验首次以体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞为实验对象,加入旋毛虫（Trichinella spiralis）肌幼虫ES抗原做刺激物,通过对鼠胸腺淋巴细胞DNA损伤、凋亡水平的检测,进而证明旋毛虫肌幼虫ES抗原能够诱导鼠胸腺淋巴细胞发生调亡。掌握这种免疫细胞凋亡（apoptosis）发生的过程,对分析免疫应答的特点和调控,以及探索旋毛虫病（Trichinosis）的发病机制和提供防治对策都具有重要意义。     

急性传贫马的免疫机能及马血液T-淋巴细胞转化率

近几年来关于马传贫和马鼻肺炎等免疫机理的研究,在应用形态学方法和~3H 标记物掺入法所进行的马血液 T-淋巴细胞体外培养转化试验方面有一些报告,但尚未见到马血液 T-淋巴细胞体外培养正常转化率。本实验用人工接种急性传贫马,进行了外周血液 T-淋巴细胞体外培养转化试验、血清免疫球蛋白 IgG 和血清蛋白分类值的测定,以观察急性传贫马在发病前后细胞免疫     

鸡传染性鼻炎与鸡毒支原体类脂灭活疫苗的研制

杨树皮类脂（PoplarBarkLipid）系从杨树皮中提取的一种橙黄色脂溶性物质，富含大量的多糖、有机酸、甾醇、磷脂、甙类及维生素等物质。多糖类具有促胸腺体液反应、刺激网状内皮系统，提高机体特异性免疫反应能力；有机酸具有增强机体免疫功能的作用，能够刺激和促进单核吞噬细胞功能，对抗免疫抑制对免疫器官的抑制作用；甙类能够加速抗体的产生、促进淋巴细胞转化和增强网状内皮系统功能等作用。这些物质在动物体内协调统一，大大提高动物体的免疫机能。副鸡嗜血杆菌（Hpg）作为鸡传染性鼻炎的病原菌，近年来发生率越来越高。由于该病在…     

一种同时测定体液免疫和细胞免疫的方法——Ey混合玫瑰花环形成试验

目前常用的检测机体免疫功能的E—玫瑰花环形成试验、Ea—玫瑰花环形成试验、淋巴细胞转化试验等,只能单一地反映细胞免疫功能或体液免疫功能,不能同时反应两种免疫功能。Ey混合玫瑰花环形成试验是根据T淋巴细胞具有绵羊红细胞受体,B淋巴细胞具有C_(3b)受体的原理,以红细胞(E)和C_(3b)致敏的酵母细胞为粘附物的一     

马齿苋多糖对荷瘤小鼠机体免疫调节作用的研究

为了研究马齿苋(Portulaca oleracea L.)多糖(PHP)抗肿瘤作用的免疫学机制,试验建立荷U14宫颈癌实体瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠随机分为荷瘤对照组、阳性对照组(CTX)、PHP低剂量组、PHP高剂量组,连续给药13 d后,解剖取胸腺和脾脏,测定胸腺指数和脾脏指数,应用碳粒廓清试验测定PHP对荷瘤小鼠免疫吞噬功能的影响;Con A诱导荷瘤小鼠脾淋巴细胞转化试验检测PHP对荷瘤小鼠机体细胞免疫功能的影响;乳酸脱氢酶释放法检测PHP对荷瘤小鼠非特异性免疫功能的影响;血清溶血素测定法检测PHP对荷瘤小鼠体液免疫功能的影响。结果表明:PHP可明显提高荷瘤小鼠免疫器官重量及增强荷瘤小鼠细胞免疫及体液免疫功能。说明PHP抗肿瘤作用的机制可能与提高机体免疫功能有关。     

黄芪多糖药理作用及在动物生产中的应用研究进展

中药黄芪有增强机体的免疫、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老等多种功能,能影响动物胸腺、脾脏和法氏囊等免疫器官的发育,促进淋巴细胞转化和增殖及巨噬细胞吞噬功能,提高动物机体的细胞免疫和体液免疫能力。黄芪多糖是黄芪中含量最多、免疫活性较强的一类物质。文中就黄芪多糖的药理作用研究进展及在动物生产中的应用现状作一综述。     

MTT方法检测肉鸡淋巴细胞增殖条件的优化

细胞的增殖水平是衡量宿主适应性细胞免疫应答的重要指标之一。免疫系统中淋巴细胞增殖是机体对非己抗原刺激产生免疫应答的重要过程,通过淋巴细胞与抗原或丝裂原在体外培养下,其代谢和形态发生变化,来反映机体细胞的免疫状态[1]。检测淋巴细胞反应的方法主要有MTT比色法、3H-TdR掺入法和BrdU标记法等,这些方法在小鼠和灵长类上得到很好的应用[2,3]。淋巴细胞转化试验中最常使用的T细胞丝裂原是植物血凝素     

MTT法检测番鸭外周血淋巴细胞转化功能的研究

为了建立番鸭淋巴细胞转化检测的MTT法 ,筛选细胞浓度、刀豆蛋白ConA浓度和培养时间 3个参数对试验条件进行了研究。结果确定了MTT法检测番鸭淋巴细胞转化能力的最佳培养条件 ,细胞浓度 5× 1 0 6个 /mL在 2 0 μg/mLConA的RMPI 1 640完全培养基 40℃培养 60h。试验表明 ,该方法可用于番鸭体外细胞免疫功能的检测     

蛋白酶解物对10日龄仔猪淋巴细胞转化的影响

试验用大豆蛋白酶解物、面筋蛋白酶解物和酪蛋白酶解物作为刺激因子 ,在体外对经PHA诱导的 1 0日龄的 4头仔猪淋巴细胞进行培养。旨在观察这 3种蛋白酶解物对仔猪淋巴细胞的分裂增殖的影响 ,以便为研究其在体内是否对机体免疫功能有影响提供一定的依据。试验结果表明 :与对照组 (自体对照 )相比 ,尽管研究的 4头仔猪间个体差异比较明显 ,但总体趋势是 3种蛋白酶解物 ,均能不同程度地刺激经PHA诱导的 1 0日龄仔猪外周血淋巴细胞的转化 ,且大豆蛋白酶解物的促淋巴细胞转作用最强。大豆蛋白酶解物组的刺激指数比对照组分别提高了 2 0 96倍、 1 1 65倍、 0 74倍和 0 39倍 ;面筋蛋白酶解物组的刺激指数比对照组分别提高了 1 0 96倍、 8 85倍、 2 41倍和 0 63倍 ;酪蛋白酶解物组的刺激指数比对照组分别提高了 1 82倍、 1 96倍、 1 54倍和 0 73倍。     

水溶性苜蓿多糖对肉仔鸡T、B淋巴细胞体外增殖的影响

为探讨水溶性苜蓿多糖(WSAP)对体外培养的肉仔鸡淋巴细胞增殖的影响。本研究将不同浓度的WSAP分别加入到体外培养的用伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激的肉仔鸡外周血、胸腺、脾脏淋巴细胞中和用细菌脂多糖(LPS)刺激的肉仔鸡外周血、脾脏、法氏囊淋巴细胞中,培养48h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定淋巴细胞增殖的变化。结果显示:(1)在本试验中,当WSAP在一定浓度范围(4～20μg·mL-1)内时,T、B淋巴细胞的OD值比对照组高,且随着多糖浓度的增加,数值先增高(1～20μg·mL-1)后降低(100～200μg·mL-1);(2)同浓度WSAP对肉仔鸡外周血及不同的免疫器官的刺激强度不同,相同日龄时,肉仔鸡外周血和脾脏T、B淋巴细胞的OD值分别小于胸腺和法氏囊的OD值;(3)WSAP对相同日龄的肉仔鸡外周血及不同的免疫器官的最佳刺激浓度不同,对外周血的最佳刺激浓度为20μg·mL-1,脾脏为8μg·mL-1,法氏囊和胸腺为15μg·mL-1。本试验中WSAP对肉仔鸡体外淋巴细胞增殖的刺激浓度在8、15、20μg·mL-1时效果较好,这些结果表明一定浓度的WSAP可以促进肉仔鸡淋巴细胞的增殖,且存在一定的量效、时效关系和组织特异性。