SPF级BALB/cC57BL/6小鼠繁殖性能及生长发育的比较研究

为提高SPF级实验动物的质量,选择10周龄BALB/c C57BL/6小鼠各50只（雌雄各半）,采取雌雄1？1近亲交配繁殖,并统计其生长发育和繁殖性能指标。BALB/c小鼠1～3周龄的平均窝重及离乳后的体重增长明显大于C57BL/6小鼠（p〈0.01）。第1胎交配分娩间隔,第1和第3胎离乳育成率品系间差异均有显著性（P〈0.05及P〈0.01）。BALB/c小鼠的体格比C57BL/6小鼠大,带乳能力比C57BL/6小鼠强但产仔能力比C57BL/6小鼠弱。     

C57BL/6NcGAS基因敲除鼠的构建及对猪伪狂犬病病毒增殖的影响

胞质DNA感受器环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase, cGAS)能够识别胞质中的双链DNA(double stranded DNA,dsDNA),从而激活Ⅰ型干扰素信号通路抵御外界病原微生物的感染。为研究cGAS基因对猪伪狂犬病病毒(PRV)增殖的影响，本试验首先利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建cGAS基因敲除小鼠，通过H&E染色检测C57BL/6N小鼠和C57BL/6N-cGAS^-/-小鼠肺脏和脑组织形态差异及感染PRV后肺脏组织中炎性浸润的影响；Q-PCR检测C57BL/6N小鼠和C57BL/6N-cGAS^-/-小鼠感染PRV后对PRV-gB、PRV-TK、IFN-β、ISG15和ISG20基因mRNA表达水平的差异；Western blot及免疫组化检测C57BL/6N小鼠和C57BL/6N-cGAS^-/-小鼠感染PRV后PRV-gB和PRV-gE蛋白表达水平；最后利用病毒PFU法检测cGAS敲除鼠对PRV子代病毒滴度的影响。Western blot检测结果显示...     

3种SPF级小鼠生长曲线及主要脏器重量的测定

为了测定兰州大学实验动物中心饲养的SPF级Balb/c、C57BL/6和DBA/2小鼠的生长曲线及其主要脏器重量、系数,试验采用随机挑选70-80日龄的Balb/c、C57BL/6和DBA/2小鼠各36只按1:1近亲交配的方式进行繁殖,统计其子代的生长发育和主要脏器指标的方法.结果表明:从3周龄离乳到10周龄Balb/...     

肠道病毒71型感染C57BL/6小鼠模型的初步建立

以1日龄C57BL/6乳鼠作为试验对象,分别通过颅内和腹腔注射肠道病毒71型(EV71)福建株感染,观察记录小鼠体重和体征,定期采集小鼠大脑、小肠、肺、肌肉4种组织,分析病毒载量,通过HE染色和免疫组化观察各种组织病理变化。结果:2种感染途径的C57BL/6乳鼠均于不同时间出现竖毛、弓背和消瘦症状。经腹腔注射感染的乳鼠能在肌肉组织中检测到病毒RNA,经颅内注射感染的乳鼠可在肌肉和肺组织中检测到病毒RNA。病理学及免疫组化结果显示:EV71福建株在骨骼肌中大量增殖,并可导致肌肉组织水肿和坏死、肺组织水肿充血以及神经元坏死等多种组织器官炎症反应。综上,初步建立通过颅内和腹腔注射感染EV71的C57BL/6乳鼠模型,为研究EV71病毒感染机制、建立更优的动物模型提供参考。     

C57小鼠和C57BL/6 FMR1 KO小鼠剖宫产手术及其仔鼠生长情况的比较研究

目的 C57BL/6小鼠和C57BL/6 FMR1 KO小鼠剖宫产手术及其仔鼠生产情况的比较。方法将C57和FMR1两种小鼠分成两组,每组雌雄按1:1配对,通过剖宫产手术取得仔鼠,C57母鼠作为代乳母鼠,分别比较两种小鼠的妊娠时间、成功受孕时间、7 d成活率、产仔数、离乳率。结果 FMR1小鼠在成功受孕时间、7 d成活率、离乳率上与C57小鼠存在显著差异。结论通过剖宫产净化手术获得FMR1小鼠,为后续开展保种和育种工作提供重要保障。     

SPRN转基因小鼠脏器质量和动物行为学的比较分析

采用统计学计算Tg(Mosprn-B)/C57BL/6转基因小鼠与C57BL/6野生型小鼠雌雄两性的主要脏器质量与系数,并利用水迷宫观察游泳路径及时间以探讨SPRN基因对小鼠生理结构、生长发育等影响。结果表明,相同年龄的Tg(Mosprn-B)/C57BL/6转基因小鼠,雄性的体质量及心、肺、肝、肾质量显著大于雌性(P<0.01),脑质量差异比较显著(P<0.05);比较脏器系数,脑和肝的差异比较显著(P<0.05)。与C57BL/6野生型小鼠相比较,Tg(Mosprn-B)/C57BL/6转基因小鼠脑更重(P<0.01);比较脏器系数发现,脑差异极显著(P<0.01),肺、肾、脾差异较显著(P<0.05)。水迷宫定位航行结果显示,Tg(Mosprn-B)/C57BL/6转基因小鼠的逃避潜伏期小于野生型小鼠,第4天的潜伏期具有显著差异性(P<0.05);在空间搜索试验中,Tg(Mosprn-B)/C57BL/6转基因小鼠第1次穿越平台时间小于C57BL/6野生型小鼠,穿越平台的次数大于C57BL/6野生型小鼠。     

绵羊肺炎支原体及其脂质相关膜蛋白通过Toll样受体2激活MAPK信号通路诱导小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α表达的研究

为验证绵羊肺炎支原体(M. ovi)或脂质相关膜蛋白(LAMPs)是否通过Toll样受体2(TLR2)诱导小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的表达,本研究利用不同浓度的M.ovi或LAMPs刺激C57BL/6J WT小鼠及Tlr2~(-/-)基因缺失小鼠的腹腔巨噬细胞12 h后,利用荧光定量PCR(qPCR)检测Tlr2和TNF-α基因的转录水平。结果显示,C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞中Tlr2和TNF-α基因的转录水平均不同程度上升,而Tlr2~(-/-)基因缺失小鼠巨噬细胞TNF-α基因的转录水平明显受到抑制。进一步以终浓度为1×10~7cfu/mL M.ovi或8μg/mL LAMPs分别刺激C57BL/6J WT小鼠和Tlr2~(-/-)基因缺失小鼠的巨噬细胞,不同时间后利用qPCR检测Tlr2和TNF-α基因的转录水平;利用流式细胞术检测C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞中TLR2蛋白的表达水平;采用ELISA方法检测两种小鼠巨噬细胞上清液中TNF-α的分泌水平;利用western blot检测细胞中MAPK信号通路的激活。qPCR结果显示,以M. ovi或LAMPs经不同时间刺激的C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞中Tlr2和TNF-α基因的转录水平均不同程度上升,而Tlr2~(-/-)基因缺失小鼠巨噬细胞中TNF-α基因的转录水平均明显受到抑制;流式细胞术检测结果显示,C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞在受到M. ovi或LAMPs刺激后,TLR2蛋白的表达水平均不同程度上升;ELISA结果显示,C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞在受到M. ovi或LAMPs刺激后,TNF-α蛋白的表达水平均不同程度上升,而Tlr2~(-/-)基因缺失小鼠巨噬细胞中TLR2蛋白的表达则明显受到抑制;Western blot结果显示,C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞经M. ovi或LAMPs刺激后MAPK信号通路中各信号蛋白(Erk、p38、JNK)均发生磷酸化反应,而Tlr2~(-/-)基因缺失小鼠巨噬细胞在受到这两种物质刺激后MAPK信号通路明显受到抑制。上述结果表明,M. ovi及其LAMPs可通过小鼠腹腔巨噬细胞的TLR2激活MAPK信号通路,继而引起细胞因子TNF-α的分泌增多。本研究首次证实M. ovi及其LAMPs是通过TLR2及MAPK信号通路引起小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的分泌水平发生变化,为进一步明确巨噬细胞参与抗M. ovi天然免疫应答的机制奠定基础。     

低温环境下禁食对小鼠自发运动及腓肠肌中PGC-lα、ERRα表达的影响

应用旷场试验测定不同时长4℃冷暴露下采食和禁食C57BL/6小鼠的自发运动,并结合骨骼肌中PGC-lα与ERRα表达水平,探讨低温环境下禁食对C57BL/6小鼠自发运动的影响。结果显示,低温环境下禁食对C57BL/6小鼠的自发运动并无显著性影响,但焦虑情绪12 h差异显著(P<0.05),探索行为8 h和12 h差异极显著(P<0.01);腓肠肌中PGC-1α表达在4,8 h时差异极显著(P<0.01),12 h差异显著(P<0.05);ERRα表达在4,6 h时差异极显著(P<0.01)。结果表明,低温环境下禁食对C57BL/6小鼠自发运动未出现明显影响,而对小鼠焦虑情绪、探索行为和腓肠肌中PGC-lα、ERRα表达存在不同程度的影响,相比于禁食而言,冷刺激对小鼠机体的影响更大。     

肺炎克雷伯菌ST23流行株皮肤脓肿感染及肥大细胞动态变化观察

为了解肺炎克雷伯菌(KP) ST23型流行株经小鼠皮肤脓肿感染后的脓肿形成过程及肥大细胞动态变化。本研究将60只SPF级C57BL/6小鼠随机分为3组:PBS对照组、KP常规感染组与免疫抑制KP感染组,同时取20只My D88KO小鼠接种KP作为免疫功能缺失感染组。除对照组外所有感染组小鼠均分别皮下接种50μL ST23型KP菌株悬液(5×10~8cfu/只),对各组小鼠皮肤变化进行时相性观察;同时取各组小鼠皮肤组织进行组织病理学检查;采用免疫组化技术分析比较肥大细胞在小鼠体内释放的主要介质的分布与变化。结果显示,所有接种KP的小鼠皮肤均有典型脓肿形成,并且随着感染时间延长,皮肤脓肿体积逐渐增大;接种KP的正常C57BL/6小鼠皮肤脓肿较快自愈,而My D88KO小鼠皮肤脓肿自愈延后;组织病理学显示感染KP后常规组与免疫抑制剂处理的小鼠真皮层胶原纤维消失,大量炎性细胞浸润,脓肿区域有明显的肥大细胞及主要炎性介质的分布;同时显示My D88KO组小鼠皮肤有明显的组织病理损伤;而PBS对照组各方面均正常。本研究建立了KP小鼠皮肤脓肿感染模型,可为进一步研究KP皮肤感染的病原特性和发病机制等提供小动物模型。     

MKR转基因小鼠生物学特性的初步探讨

试验旨在测定MKR转基因2型糖尿病小鼠生物学特性数据,为2型糖尿病研究提供技术平台。由美国国立卫生研究院（NIH）授权使用引进的MKR鼠,经自然交配后繁殖的子代作为研究对象,测定MKR鼠的体重、血糖、记忆力、抗疲劳、耐缺氧、麻醉耐受试验,同期采用昆明小鼠和C57BL/6J小鼠作为对照。结果表明,新生MKR鼠自出生3周开始,血糖增高,体重随年龄的增加而减慢,与对照组小鼠同期比较,具有非常显著性意义,MKR鼠抗疲劳、耐缺氧、麻醉耐受能力比昆明小鼠差（P<0.01）。因此,MKR鼠是一种良好的2型糖尿病的动物模型。