硒化甘草多糖联合抗生素对奇异变形杆菌体内外抑菌效果以及抑菌机制研究北大核心

试验旨在探究硒化甘草多糖(SeGUP)和甘草多糖(GUP)联合抗生素对奇异变形杆菌(PM)的体内外抑菌效果以及抑菌机制。体内外抑菌效果通过药敏试验、最小抑菌浓度(MIC)、生长曲线、体外协同作用以及SeGUP、GUP对PM感染小鼠的死亡率进行分析。抑菌机制通过PM细胞壁、细胞膜、生物膜、抗氧化酶活性的变化进行分析。结果显示,同浓度SeGUP比GUP抑菌圈大,MIC值小,对PM生长抑制更强;SeGUP与环丙沙星(CI)联合表现为协同,GUP与CI表现为相加;SeGUP能够极显著降低PM感染小鼠死亡率(P<0.01)。与对照组相比,SeGUP、GUP、CI可极显著升高培养液中碱性磷酸酶(AKP)、β-半乳糖苷酶(β-gal)的活性和蛋白含量(P<0.01),极显著降低菌体DNA含量,抑制生物膜形成,降低过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01)。结果表明,SeGUP体内外抑菌效果以及抑菌机制能力均优于GUP。     

乌拉尔甘草种子发芽检测方法研究(简报)

乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)属于豆科蝶形花亚科甘草属,是我国传统的中药材,素有"十方九草"、"国老"之美誉.甘草还是干旱地区维护生态平衡的一种优良冬春牧草[1].     

甘草多糖对鸡体内抗氧化活性的研究

为了研究甘草多糖的体内抗氧化活性,将150只健康罗曼鸡常规饲养到13日龄,随机分为5组,除空白对照组外均用鸡新城疫Ⅳ系疫苗(Lo Sota株)进行免疫,28日龄二免;每次免疫的同时,药物组分别肌肉注射低(1 mg·mL^-1)、中(2 mg·mL^-1)、高(4 mg·mL^-1) 3个浓度的甘草多糖1 m L,免疫组和空白对照组肌肉注射等剂量生理盐水,每天1次,连续3 d,分别于首免后第7、14、21、28和35天采血,测定血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果显示:甘草多糖可以显著提高罗曼鸡的T-AOC、GSH-Px和CAT活性(P<0. 05),且以高剂量组效果最好;除第14天外,3个药物组SOD含量均显著高于对照组(P<0. 05); MDA检测结果显示,甘草多糖组MDA的含量均低于对照组,但在第14和21天,低剂量组和免疫对照组差异不明显(P>0. 05)。结果表明:甘草多糖对鸡体内抗氧化活性的提高有显著作用。     

硒化甘草多糖对雏鸡免疫和抗氧化功能的影响

为研究硒化甘草多糖(Se GUP)对雏鸡免疫和抗氧化功能的影响,采用腹腔注射脂多糖(LPS)建立雏鸡免疫应激模型.将试验鸡随机分为5组,分别为空白对照组、LPS组、LPS+黄芪多糖组、LPS+甘草多糖组、LPS+硒化甘草多糖组.于试验第8、10、12天腹腔注射LPS建立免疫应激模型后,试验组分别注射黄芪多糖、甘草多糖、...     

甘草多糖抗妊娠期暴露代森锰锌致断乳仔鼠肾损伤的作用

为了探讨甘草多糖(glycyrrhiza polysaccharide, GP)对妊娠期暴露代森锰锌(mancozeb, MCZ)致断乳仔鼠肾损伤的保护作用。将50只孕0 d小鼠随机均分为空白对照组、代森锰锌组、甘草多糖低剂量组、甘草多糖中剂量组、甘草多糖高剂量组，每组10只，共5组。从孕0 d起，空白对照组早晚灌服0.1 mL的生理盐水；代森锰锌组早上灌服150 mg/kg的代森锰锌，晚上灌服0.1 mL的生理盐水；甘草多糖低、中、高剂量组每天早上灌服150 mg/kg的代森锰锌，晚上灌服50,100,200 mg/kg剂量的甘草多糖。在仔鼠21 d时处死仔鼠并收集其血液和肾脏组织。计算肾脏指数；HE染色法观察肾脏组织病理切片；检测血清中肌酐、尿素氮水平，肾脏组织中T-AOC、SOD、MDA、GSH-Px水平；ELISA法检测GPX4、FSP1、TGF-β1蛋白水平；qPCR法检测GPX4 mRNA、NOX4 mRNA、NF-κB p65 mRNA转录水平。结果显示，断乳仔鼠的相关指标变化与甘草多糖缓解妊娠期暴露代森锰锌致断乳仔鼠肾损伤保护作用的剂量并不完全呈剂量依赖关系，多数呈非单...     

甘草多糖对鼠伤寒沙门菌诱导的巨噬细胞氧化-抗氧化平衡紊乱的调解

为了探讨甘草多糖对鼠伤寒沙门菌诱发巨噬细胞氧化-抗氧化平衡紊乱的调节作用。将0、1、20和100 mg/L甘草多糖4个质量浓度组与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育,同时每组按1∶1加入鼠伤寒沙门菌SL1344;利用ELISA试剂盒检测各组丙二醛(malondialdehyde,MDA),活性氧(reactive oxygen species,ROS),一氧化氮(nitricoxide,NO),诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSHPX),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)变化情况;利用荧光显微镜和荧光酶标仪观察甘草多糖对鼠伤寒沙门菌引起巨噬细胞产生ROS的影响;利用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)细胞毒性试剂盒检测巨噬细胞上清LDH水平。结果表明,鼠伤寒沙门菌可诱导小鼠腹腔巨噬细胞发生氧化损伤,导致NO(4.65±1.07)μmol/L、iNOS(15.46±0.92)U/mL、MDA(3.46±0.39)nmol/L和ROS(3.69±0.31)U/mL氧化水平以及LDH水平显著升高,而GSH-PX(15.58±1.35)nmol/L、SOD(13.32±0.92)NU/mL和T-AOC(8.36±0.60)U/mL抗氧化水平显著降低。荧光显微镜和荧光酶标仪检测显示,鼠伤寒沙门菌感染小鼠腹腔巨噬细胞ROS水平显著升高。甘草多糖呈剂量依赖明显降低细胞氧化水平和增强抗氧化水平。甘草多糖作为重要的免疫调节剂,能够调节鼠伤寒沙门菌引起的巨噬细胞氧化损伤,维持细胞氧化-抗氧化平衡。     

乌拉尔甘草组培再生体系的研究

甘草是兼具生态和经济双重价值的重要植物资源,人工培育以野生变家种为主,尚未开展系统的育种工作。本研究以内蒙古杭锦旗的野生乌拉尔甘草为材料,研究了外植体、基本培养基、NAA、TDZ和蔗糖对丛生芽诱导的影响以及微繁体系的建立。结果表明,适合甘草丛生芽诱导的外植体为生长4~7 d的无菌苗子叶节,培养基为MS TDZ 0.1 mg/L NAA 0.1 mg/L 蔗糖20~30 g/L;将带1叶的茎段在改良MS NAA 0.1 mg/L 6-BA1.0~2.0 mg/L的培养基中培养,其增殖倍数可稳定达到25倍;在1/2MS 核黄素2.0 mg/L中生根,炼苗3 d移栽到蛭石中,成活率达96%以上。1个带腋芽茎段培养3个月可获得13 906棵生根试管苗,成活13 350株,繁殖效率高达85%。     

硒化乌拉尔甘草多糖的抗炎活性研究

为了探究硒化乌拉尔甘草多糖(Se-GPS)的抗炎活性,试验以地塞米松为阳性对照,给小白鼠灌服低剂量(100 mg/kg)、中剂量(200 mg/kg)、高剂量(300 mg/kg)Se-GPS和低剂量(100 mg/kg)、中剂量(200 mg/kg)、高剂量(300 mg/kg)GPS 0.2 m L/只,连续给药10 d,观察其对二甲苯和醋酸所致炎症的抗炎效果;用脂多糖(LPS)建立小鼠炎症模型,分别给小鼠灌服低剂量(100 mg/kg)、中剂量(200 mg/kg)、高剂量(300 mg/kg)LPS+Se-GPS和低剂量(100 mg/kg)、中剂量(200 mg/kg)、高剂量(300 mg/kg)LPS+GPS0.2 m L/只,连续给药10 d,测定小鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量变化。结果表明:各剂量Se-GPS均能显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀,显著降低醋酸致小鼠毛细血管的通透性增加,抑制炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌,其抗炎活性略强于甘草多糖,且高剂量Se-GPS抗炎效果最好。说明Se-GPS具有明显的抗炎活性。     

~(60)Co-γ辐照对Na_2SO_4胁迫下乌拉尔甘草种子发芽特性的影响

采用不同剂量(0~300 Gy)的60Co-γ射线辐照乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)种子,研究辐照处理对乌拉尔甘草种子在不同浓度Na2SO4(0~400 mmol·L-1)胁迫下发芽率、累积发芽率和发芽指数的影响,以期筛选出能够提高乌拉尔甘草种子耐盐性能的最佳辐射剂量。结果表明,随着盐浓度的升高,种子的发芽率和发芽指数呈下降趋势,发芽时间延迟,高盐浓度溶液对种子萌发率的影响较为强烈。但60Co-γ辐照处理的乌拉尔甘草种子在高盐环境中的萌发率(GP=12.22%)极显著(P=0.00)高于对照(GP=0)。说明60Co-γ辐照处理确实能够有效提高乌拉尔甘草种子在Na2SO4胁迫下的发芽率,尤以经100 Gy辐照处理的乌拉尔甘草种子作用效果最好,对Na2SO4胁迫表现出了较好的耐性。     

乌拉尔甘草离体再生与遗传转化技术的研究

研究乌拉尔甘草离体再生受体系统和遗传转化技术方法,为甘草基因工程育种提供前期实验基础。以乌拉尔甘草茎段为外植体,试验筛选最适不定芽分化培养基和增殖壮苗培养基; 以乌拉尔甘草茎段为受体,利用农杆菌介导法对乌拉尔甘草进行GUS和GFP基因的遗传转化研究。结果表明,以乌拉尔甘草去腋芽茎段为外植体,其不定芽最适分化和增殖培养基配方为MS+0.1 mg/L TDZ+0.1 mg/L 6BA+0.1 mg/L IBA,不定芽分化率达38.8%,增殖倍数3.67,适宜的壮苗培养基为MS+0.5 mg/L NAA。与去腋芽茎段相比,带腋芽茎段的不定芽分化率达100%,能够在含抗生素的选择培养基MS+0.1 mg/L TDZ+0.1 mg/L 6BA+0.1 mg/L IBA+50 mg/L Kan+250 mg/L Car上存活,确定为最适转化受体;带腋芽茎段在分化培养基上预培养7 d后,经OD₆₀₀=0.6的菌液侵染10 min,共培养3 d,在选择培养基上培养20 d,其不定芽分化率为43.75%,经GFP荧光检测可得到78.88%的GFP基因瞬时表达率;随机选取5株再生转化植株,经PCR检测,均有GFP和GUS基因的目的条带,GFP基因表达较强烈,初步获得了5个株系的阳性转化植株。     

乌拉尔甘草茎叶营养成分含量及其表观消化率的测定

甘草(Glycyrrhizauralensis Fisch)具有抗寒、耐热、耐旱、抗盐碱等优良特性，而甘草茎叶作为甘草的地上部分(尤其是乌拉尔甘草茎叶)含有多种氨基酸、常量元素、微量元素以及粗蛋白质等多种成分，且含量均较高，是干旱、半干旱地区家畜的辅助性草料，为一种较好的豆科牧草，应用前景十分可观。为了更好地利用甘草茎叶饲料资源，对乌拉尔甘草茎叶营养成分含量及其表观消化率进行了测定。     

甘草多糖对断奶仔猪生长性能、血常规、血清生化指标及抗氧化性能的影响

试验旨在研究饲粮中添加不同浓度的甘草多糖对断奶仔猪生长性能、血常规、血清生化指标及抗氧化性能的影响。选用体重接近、健康状况良好的35日龄“长×大”二元杂交断奶仔猪300头,完全随机分为5组,每组6个重复,每个重复10头仔猪,公母各半。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加500、1 000、2 000 mg/kg和5 000 mg/kg的甘草多糖。预试期5 d,正试期16 d。结果表明：(1)与对照组相比,饲粮中添加1 000 mg/kg和2 000 mg/kg甘草多糖显著提高断奶仔猪的平均日增重（ADG）(P<0.05),添加1 000 mg/kg和2 000 mg/kg甘草多糖显著降低断奶仔猪的腹泻率和料重比（F/G）(P<0.05);(2)饲粮中添加1 000 mg/kg甘草多糖显著升高断奶仔猪血液中白细胞数（WBC）、红细胞数（RBC）、中性粒细胞数（Neut#）和血小板数（PLT）(P<0.05);(3)饲粮中添加1 000 mg/kg和2 000 mg/kg甘草多糖显著提高断奶仔猪血清中碱性磷酸酶（ALP）含量（P<0.05）,显著降低血清中...     

栽培乌拉尔甘草根中黄酮类和皂甙类化合物的提取与分析

采用冷浸乙醇提取法对兰州人工引种栽培的6年生乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis根中的总黄酮和总皂甙类化合物进行了提取分离,并且采用重量法和3种紫外-可见分光光度法对乌拉尔甘草根中总黄酮含量进行了测定和比较分析。结果表明,3种分光光度测定方法中,黄酮含量以直接测定法为最高,硝酸铝显色法次之,氯化铝显色法最低,直接测定法测定样品中的黄酮含量因不受显色剂干扰,测定结果相对更为准确可靠。人工栽培乌拉尔甘草相对野生甘草有效成分的含量较低,但仍可作为野生药用甘草的替代品。     

甘草多糖及其脂质体增强免疫活性的比较

提取甘草多糖(GP),制备甘草多糖脂质体(GPL),比较了GPL和GP的免疫增强活性。体外试验,将安全浓度范围内5个浓度的GPL和GP分别加入到鸡外周血淋巴细胞的培养体系中,用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化;体内试验,雏鸡用新城疫疫苗免疫的同时,分别注射高、中、低剂量的GPL和GP,测定免疫后不同时间点外周血淋巴细胞增殖和抗体效价的变化。结果显示,GPL和GP在合适的浓度均能单独或协同PHA、LPS显著刺激淋巴细胞增殖,GPL的作用显著优于GP;在体内,GPL高、中剂量能够显著促进淋巴细胞增殖,增强抗体效价,作用显著强于GP(P0.05),结果表明,脂质体能显著提高甘草多糖的免疫增强活性。     

甘草多糖对肉鸡肝脏抗氧化能力的影响

试验旨在研究甘草多糖（glycyrrhiza polysaccharide,GCP）对肉鸡生长性能、血清生化指标及肝脏抗氧化能力的影响。选用288只体重相近、健康状况良好的1日龄AA肉鸡（全部为公雏），随机分成4个组，每组6个重复，每个重复12只。对照组饲喂基础饲粮，试验组饲喂分别在基础饲料中添加300、600、900 mg/kg的甘草多糖的试验日粮，试验期42 d。结果表明：(1)与对照组相比，1～21日龄，600、900 mg/kg组平均日增重显著增加（P<0.05），料重比显著降低（P<0.05）;22～42日龄，600、900 mg/kg组平均日增重显著增加（P<0.05）;1～42日龄，600、900 mg/kg组平均日增重显著增加（P<0.05）,600 mg/kg组料重比显著降低（P<0.05）。(2)与对照组相比，21日龄时，600 mg/kg组血清葡萄糖（GLU）含量显著提高（P<0.05）。(3)与对照组相比，21日龄时，各试验组肝脏T-AOC显著升高（P<0.05），丙二醛（MDA）含量显著降低（P<0.05）;42...     

干旱胁迫对甘草幼苗光合特性及根系吸水的影响

甘草(Glycyrrhiza uralensis)为豆科甘草属多年生草本植物,具有极高的药用价值,是我国干旱、半干旱地区重要的经济和生态作物。土壤水分是限制甘草生长的主要环境因素之一,研究其抗旱适应性表现对甘草资源可持续利用具有重要意义。本研究采用聚乙二醇6000 (PEG-6000)模拟干旱胁迫,研究胀果甘草(G. inflata)和乌拉尔甘草(G.uralensis)幼苗的光合特性和根系吸水能力对干旱胁迫的响应。结果表明：干旱胁迫7 d后胀果甘草和乌拉尔甘草幼苗地上部干重和根系干重均显著降低,其中地上部干重分别降低56.10%、62.50%,地下部干重分别降低16.67%和28.57%,而根冠比均有所增加。干旱胁迫均造成了胀果甘草和乌拉尔甘草幼苗叶片净光合速率(P_n)、蒸腾速率(T_r)和气孔导度(G_s)的降低,与对照相比,其下降幅度分别为41.73%、67.22%,62.21%、75.38%,66.02%、82.60%。干旱胁迫下甘草幼苗荧光特性也被显著抑制(P <0.05),其中胀果甘草幼苗的光系统Ⅱ潜在活性...     

硒化甘草多糖对雏鸡肠道消化酶活性的影响

为了研究硒化甘草多糖(Selenium Glycyrrhiza Polysaccharide,SeGUP)对雏鸡肠道消化酶活性的影响,笔者选用300只1日龄的京红1号雏鸡,随机分为4组(空白对照组、黄芪多糖组、甘草多糖组、硒化甘草多糖组),每组5个重复。其中I组为空白对照组,注射生理盐水;II组、III组、IV组为试验组,分别肌肉注射1mL黄芪多糖、甘草多糖和硒化甘草多糖,试验期45 d。结果表明,各组雏鸡十二指肠中胰蛋白酶的含量呈上升趋势,多糖组中胰蛋白酶的含量高于空白组。第15、22、29、36天,IV组胰蛋白酶的含量显著高于甘草多糖组(P0.05);第15、22天,多糖组中淀粉酶的含量显著高于空白对照组(P0.05);IV组淀粉酶的含量显著高于III组(P0.05)。各多糖组中脂肪酶的含量较空白对照组均有不同程度的提高。第15、22、29、36天,IV组脂肪酶的含量显著高于III组(P0.05)。雏鸡空肠,回肠,盲肠中胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶含量与十二指肠消化酶含量变化趋势相似,硒化甘草多糖组消化酶的含量不同程度地高于其他组。上述结果表明,硒化甘草多糖对雏鸡肠道消化酶的活性具有促进作用,其效果优于甘草多糖。     

磷酸化乌兹别克甘草多糖的体外免疫增强活性研究

为了探究磷酸化乌兹别克甘草多糖(pGPS)的免疫增强作用，以鸡外周血T淋巴细胞和小鼠骨髓源树突状细胞为靶细胞，用MTT法和形态观察法测定了pGPS对鸡外周血T淋巴细胞增殖、对小鼠树突状细胞分化和增殖以及对淋巴细胞和树突状细胞细胞因子分泌的影响。结果显示：对于鸡外周血T淋巴细胞，在39.062～625μg/mL浓度的pGPS单独刺激时，淋巴细胞增殖率显著高于细胞对照组(P<0.05);在78.125～156.25μg/mL的pGPS与植物血凝素(PHA)共同刺激时，淋巴细胞增殖率显著高于PHA对照组(P<0.05);pGPS在39.062～312.5μg/mL时显著增加淋巴细胞分泌的干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)(P<0.05)。对于小鼠树突状细胞，pGPS组树突状细胞的刺突明显多于空白组；pGPS在0.977～15.625μg/mL时，未成熟树突细胞的增殖率显著高于脂多糖(LPS)对照组，并且显著促进树突状细胞IFN-γ和TNF-α的分泌(P<0.05)。结果表明：pGPS在合适的浓度能单独或协同PHA显著促进外周血T...     

旱盐双重胁迫对乌拉尔甘草幼苗 生理生化特性的影响

以一年生乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)为材料,采用盆栽试验研究旱盐双重胁迫对乌拉尔甘草生长量,可溶性糖和脯氨酸含量,超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,以及原生质体DNA的影响。结果显示,在旱盐双重胁迫下,乌拉尔甘草株高、鲜重、干重下降。在NaCl浓度小于400mmol·L-1时,乌拉尔甘草生长量在轻度与中度干旱处理间无显著差异(P0.05)。轻度、中度干旱胁迫下,随盐分含量增加,甘草幼苗脯氨酸含量和可溶性糖含量明显升高,幼苗叶片SOD活力与MDA含量持续上升,幼苗原生质体DNA尾长、尾矩、Olive尾矩持续升高(P0.05)。测定结果表明,乌拉尔甘草具有适应一定程度旱盐双重胁迫的能力,其适宜的胁迫条件为NaCl浓度小于400mmol·L-1,中度干旱胁迫。与干旱相比,盐分是影响甘草生长量的主导因子。     

芪苓制剂多糖对环磷酰胺所致免疫损伤小鼠血清SOD和MDA的影响

探讨芪苓制剂多糖对环磷酰胺所致免疫损伤小鼠血清SOD和MDA的影响。将75只体重18-22 g的雄性昆明小鼠随机均分为5组,即空白对照组、环磷酰胺(CY)组和芪苓制剂多糖低、中、高剂量组,芪苓制剂多糖3个剂量组小鼠分别灌服低(200 mg/kg)、中(400 mg/kg)、高(600 mg/kg)剂量芪苓制剂多糖,空白对照组和CY组分别灌服等量的蒸馏水,1次/d,连续19 d。试验第20天,空白对照组小鼠腹腔注射生理盐水,其余4组均腹腔注射100 mg/kg CY,24 h后,各组小鼠摘除眼球采血,检测小鼠血清SOD活性和MDA含量。结果表明,与CY组相比,芪苓制剂多糖3个剂量组小鼠血清SOD活性均极显著升高(P<0.01),MDA含量均极显著降低(P<0.01)。结果表明,芪苓制剂多糖能改善环磷酰胺所致免疫损伤小鼠的抗氧化能力。