影响马胚胎移植成功率的关键因素分析

旨在探讨影响马胚胎移植效率的几种关键因素。本研究统计了国内北京马场、河北马场和山东马场2013-2018年胚胎移植数据,3个马场供体马数量分别为15、21和25匹,受体母马数量分别为56、50和75匹。所有母马年龄为3~12岁。统计供体马冲胚时间对胚胎回收率的影响;胚胎日龄对移植后受体马妊娠率的影响;供、受体母马排卵同期化程度对移植后妊娠率的影响;受体母马居住移植基地时间对移植后妊娠率的影响。结果显示,母马在配种季节注射前列腺素（PG）+GnRH类似物或PG+hCG诱发排卵,发情周期分别为（14.5±0.8）和（14.3±1.1）d,显著低于对照组的（（20.5±2.6）d,P<0.05）;排卵后第8天冲洗子宫的胚胎回收率均高于第7天,但差异不显著;8日龄胚胎移植后受体马的妊娠率均高于7日龄,差异不显著;供体母马排卵比受体母马早1 d时,胚胎移植后的妊娠率最高;受体母马在移植基地居住时间大于1年时,移植后妊娠率高于居住时间小于0.5年的受体马。根据以上结果,本研究得出如下结论,PG与hCG或GnRH类似物联合使用可缩短母马发情周期,母马排卵后第8天的胚胎回收率和移植后妊娠率较高,胚胎移植时选择居住时间大于1年且排卵时间比供体晚1 d的母马作受体。     

影响马胚胎移植成功率的关键因素分析

旨在探讨影响马胚胎移植效率的几种关键因素。本研究统计了国内北京马场、河北马场和山东马场2013-2018年胚胎移植数据,3个马场供体马数量分别为15、21和25匹,受体母马数量分别为56、50和75匹。所有母马年龄为3～12岁。统计供体马冲胚时间对胚胎回收率的影响;胚胎日龄对移植后受体马妊娠率的影响;供、受体母马排卵同期化程度对移植后妊娠率的影响;受体母马居住移植基地时间对移植后妊娠率的影响。结果显示,母马在配种季节注射前列腺素(PG)+GnRH类似物或PG+hCG诱发排卵,发情周期分别为(14.5±0.8)和(14.3±1.1)d,显著低于对照组的((20.5±2.6)d,P0.05);排卵后第8天冲洗子宫的胚胎回收率均高于第7天,但差异不显著;8日龄胚胎移植后受体马的妊娠率均高于7日龄,差异不显著;供体母马排卵比受体母马早1d时,胚胎移植后的妊娠率最高;受体母马在移植基地居住时间大于1年时,移植后妊娠率高于居住时间小于0.5年的受体马。根据以上结果,本研究得出如下结论,PG与hCG或GnRH类似物联合使用可缩短母马发情周期,母马排卵后第8天的胚胎回收率和移植后妊娠率较高,胚胎移植时选择居住时间大于1年且排卵时间比供体晚1d的母马作受体。     

非手术采集和移植骡胚的研究

选择已经配种的供体母马18匹,非手术冲洗子宫20次,其中排卵后4～5天的母马,冲洗5次,冲洗液平均回收率为94.80％,但未采到卵;排卵后5(1/2)～7(1/2)天的,冲洗15次,冲洗液平均回收率为85.66％,采到受精卵(骡胚)14个,采卵率为93.00％。结果表明,在排卵5(1/2)天之前,用非手术子宫采卵法未采到母马受精卵,而排卵5(1/2)天之后,非手术子宫采集马受精卵是有把握的。此外,另选没有配种而确切排卵的母马12匹,于排卵后5(1/2)～9天,回收马的未受精卵,虽冲洗液的平均回收率为89.30％,但也未采到未受精卵。显然,未受精的马卵没有进入子宫角,仍停留在输卵管中。经非手术采卵和二次重复采卵的母马都能按期发情,正常排卵。将14个骡胚中的7个以非手术法移植给7匹受体母马,结果一匹妊娠,妊娠率为14％。妊娠的受体母马生下一匹母骡驹,借腹怀胎350天。排卵同步差为-1(1/2)天。     

布尔山羊超数排卵胚胎移植试验

本试验采用置入炔诺酮阴道栓 FSH 氯前列烯醇同期发情、超数排卵处理方法，对8只布尔山羊(供体羊)、90只洪洞奶山羊(受体羊)进行了同期发情和超排数排卵胚胎移植试验。其结果如下：(1)8只供体羊回收胚胎数量、可用胚胎数量、羊均回收胚胎数量、羊均可用胚胎数量、可用胚比率分别为182枚、172枚、22．8枚、21．5枚、94．5％；(2)90只受体羊共有81只羊达到同期发情效果，发情同期率为90．0％；(3)150枚可用胚胎共移植洪洞奶山羊73只，妊娠51只，产羔80只，妊娠率69．9％，胚胎成羔率53．5％。     

移植奶牛胚胎冷冻后分割成的二分胚生产同卵双生犊牛的实验

对解冻后品质优良的Ａ级囊胚进行分割，并将二分胚移植生产同卵双生犊牛。结果表明：９枚Ａ级囊胚切割成１８枚半胚，胚胎分割成功率１００％。单胚移植受体６头。妊娠２头，妊娠率３３．３％；双半胚移植６头，妊娠２头，妊娠率３３．３％。     

胚胎移植技术对绒山羊的应用效果

利用27只辽宁绒山羊作供体，实施山羊胚胎移植130只。供体超排用进口CIDR和宁波产FSH、LH，受体同期用进口海绵栓和赤峰产PMSG，采胚和移植用输卵管手术法，结果：供体发情同期率100％，出现黄体平均10．24个／只，回收胚胎平均lO．28枚／只。可用胚胎平均8．25枚／只；受体发情同期率88．3％，早检妊娠率63．85％，产羔率43．85％。     

绒山羊胚胎移植的应用效果

利用27只辽宁绒山羊作供体，实施山羊胚胎移植130只。供体超排用进口CIDR和宁波产FSH、LH。受体同期用进口海棉栓和赤峰产PMSG，采胚和移植用输卵管手术法。结果显示，供体发情同期率100％。出现黄体平均10．24个／只，回收胚胎平均10．28枚／只，可用胚胎平均8．25枚／只；受体发情同期率88．3％，早检妊娠率63．85％，产羔率43．85％。     

绒山羊胚胎移植技术的研究

利用17只辽宁绒山羊作供体，实施绒山羊胚胎移植120只次，采胚和移植均采用子宫角手术法。结果表明，供体发情同期率88．24％，出现黄体平均10．53个／只，回收胚胎平均9．93枚／只，可用胚胎平均8．07枚／只；受体同期发情率89．2％，妊娠率69．7％，产羔率60．3％。     

猪胚胎移植技术研究

利用外源激素PMSG+HCG处理母猪58头,同期发情有效率和超排成功率分别为89.3％(25/28)和100％(30/30)。14头供体用手采集胚胎,平均每头排卵23.6±6.2个,共获得胚胎218枚,其中可利用胚胎206枚,胚胎可利用率为94.5％。将143枚胚胎移植给10头 受体,平均每头移植14.3±3.6枚,8头受体妊娠并产仔52头,移植妊娠率为80％(8/10),平均每头产仔6.5头,妊娠母猪胚胎存活产仔率为45.6％(总产仔数/胚胎移植总数)。仔猪初生平均体重为1.25±0.28公斤。其中12头供体手术冲卵后,第1个情期发情配种受胎率为91.8％(11/12)。     

弥勒红骨山羊重复超数排卵及胚胎移植研究

①弥勒红骨山羊两次超排间排卵数、回收胚胎数、回收率、可用胚数、可用胚率均无显著性差异(P＞0.05),但第2次超排后的排卵数、回收胚胎数、可用胚胎数的标准差较大,说明供体羊第2次超排效果均匀度较第1次低.②放牧+补饲和全舍饲两种养殖模式奶山羊同期发情率无显著差异(94.12％vs 88.89％)(P＞0.05),但发情受体的利用率差异显著(81.25％vs 56.25％) (P＜0.05).③放牧+补饲条件下饲养的奶山羊和圭山山羊同期发情率无显著差异(94.12％vs 84.85％) (P＞0.05),但圭山山羊发情受体的利用率较奶山羊低(57.14％vs 81.25％),差异显著(P＜0.05).④移植单胚的圭山山羊和奶山羊妊娠率、产羔率、胚胎获得羔羊的效率无明显差别,移植1～3枚胚胎的奶山羊受体,随移植胚胎数的增加,受体妊娠率逐步提高,从单胚的58.33％提高到双胚的65.22％和三胚的88.89％,母羊产羔率也显著提高,但胚胎获得羔羊的效率无明显差别.     

绒山羊超数排卵和胚胎冷冻技术的初步研究

为了建立适合于绒山羊的超数排卵方法和胚胎冷冻程序，为开发绒山羊胚胎移植技术奠定物质基础，使用两种ＦＳＨ制剂（宁波生物制剂厂生产的ＦＳＨ和中科院动物所生产的ＦＳＨ）对３７只供体羊进行了超排处理，每种制剂使用两种不同剂量。超排结果如下：每组供体平均排卵数分别为９．５０±４．４４（１３８ＩＵ），１２．４０±５．１８（１５０ＩＵ）和８．１４±３．９８（２．４ｍｇ），１１．２９±１．８７（２．７ｍｇ）。每组可用胚胎数分别为７．５０±４．２１（１３８ＩＵ），７．８０±１．３２（１５０ＩＵ），４．２９±３．５４（２．４ｍｇ），５．５９±４．５４（２．７ｍｇ）。宁波产ＦＳＨ对绒山羊的超排效果好于中科院产ＦＳＨ。共冷冻１０７枚胚胎，其中孵化囊胚３１枚、紧缩桑椹胚至扩张囊胚期胚胎７６枚。解冻６３枚胚胎进行了移植，包括１８枚孵化囊胚和４５枚有透明带的胚胎。解冻胚胎的存活率分别为３３．３％（孵化囊胚）和８４．４４％（其它胚胎）。移植妊娠率分别为５０．００％（孵化囊胚）和５９．２６％（其它胚胎）。这说明绒山羊胚胎移植技术是一项具有较大经济潜力的实用技术，通过对各个技术环节进一步改进，可以进行产业化开发。     

牛胚胎快速冷冻技术的研究

我们对牛胚胎快速冷冻技术进行了研究。１９９２年８月一１１月间在木兰县，共移植受体母牛９９头，有４６头受体母牛妊娠，妊娠率为４６．５％，有２９头受体牛产犊，产犊率为２９．３％。通过研究得知，牛胚胎快速冷冻技术可以应用于生产。     

内蒙古白绒山羊超排及鲜胚移植技术的研究

以 １３８ＩＵ、１５０ＩＵ、１６２ＩＵ ３种剂量 ＦＳＨ，在供体羊发情的第 １５、１６、１７ｄ开始超排，３４只供体超排结果如下：排卵点平均数为１３．４１±６．７０个；胚胎回收平均数为１２．５６±６．３０枚；可用胚胎平均数为１０．２４±６．１４枚。第１６，１７ｄ起针，剂量为１５０ＩＵ组的超排效果最好，但无显著差异（Ｐ＞０．０５）。将２６９枚胚胎移植到 ２４９只受体，妊娠率为 ７０．２８％；产羔率为 ６７．０６％；共接 １７８只羔羊。受体羊与供体羊发情同期化程度、黄体质量、胚龄等因素对妊娠率影响较大，但统计学上无显著差异（Ｐ＞０．０５）。用氯前列烯醇诱导发情不影响受体妊娠率。     

波尔山羊供体和受体异地饲养鲜胚移植研究

为了进一步扩大良种波尔山羊的推广,提高胚胎移植效率,该文就饲养在不同牧场间的供体和受体实现鲜胚移植进行了系统研究,得到了以下结果:①洪体运输1h、2～3 h、＞4h、0h(对照)收集胚胎,分别得到可用胚胎数为15.8枚±4.3枚、13.0枚±5.7枚、13.8枚±6.6枚和14.2枚±6.3枚,不同运输时间回收可用胚胎数之间无显著性差异(P＞0.05).回收可用胚胎移植后,受体妊娠率分别为71.6％、67.6％、76.7％和80.7％,胚胎成羔率分别为74.1％、67.2％、69.9％和71.5％,供体不同运输时间回收胚胎移植妊娠率和胚胎成羔率无显著差异(P＞0.05).②胚胎在20℃,36.5℃和38.5℃运输2h后移植,受体妊娠率分别为42.0％、64.5％和66.7％,胚胎成羔率分别为41.7％、63.6％和66.7％.20℃运输胚胎受体妊娠率和胚胎成羔率显著低于36.5℃和38.5℃下运输胚胎(P＜0.01);胚胎在36.5℃分别运输0.5 h、1h、2h后移植,受体妊娠率分别为72.5 ％68.7％和64.9％,胚胎成羔率分别为69.1％、67.8％和63.0％,受体妊娠率和胚胎成羔率之间无显著性差异(P＞0.05).③受体在手术前2～4h通过卡车运输到另一畜牧场,运输时间分别为0.5 h、1h、≥2h,胚胎移植后受体妊娠率分别为61.2％、49.6％和42.0％.随着受体运输时间的延长,受体妊娠率呈下降趋势,运输时间超过2h的妊娠率显著低于运输0.5 h的妊娠率(P＜0.05).胚胎成羔率分别为60.9％、45.6％和32.0％,随着受体运输时间的延长,胚胎成羔率显著下降(P＜0.05或P＜0.01).从以上研究得出以下结论:山羊供体和受体饲养在不同饲养场,欲进行鲜胚移植,选择供体运输是最好的方法,其次为胚胎运输后移植.受体运输对胚胎移植效果(即受体妊娠率及胚胎成羔率)均有不利影响,不宜在生产中采用.     

绵羊胚胎移植技术在内蒙古的研究和应用

家畜胚胎移植技术是家畜繁殖学领域一项高新生物技术。从１９９１年至１９９６年,对９个品种４０８只供体羊超数排卵处理,获Ａ、Ｂ级胚胎４００２枚,平均９．８１±４．６４枚。移植受体３１２９只,历年移植妊娠率平均达７４．０２％,产羔率达６１．９７％。同时,得出以下研究结果,１．在内蒙古的羊胚胎移植技术的最佳季节是１０月中旬至１１月下旬。２．采用ＦＳＨ－ＬＨ和ＦＳＨ－ＣＬ－ＬＨ（ＣＩ－氯前列烯醇）法对发情周     

母牛超数排卵与胚胎移植技术

正胚胎移植是利用价值高的供体母牛获得多枚胚胎,然后移植给价值低的受体母牛的过程。足月妊娠所产的全同胞(兄弟和姊妹)具有供体母牛和与配种公牛的遗传水平,受体母牛不影响其所怀犊牛的遗传水平,而是仅仅作为一个孵化器。应用这项技术,可以在推荐配种日期前对产后母牛冲胚胎,这样就可以利用正常的等待期而不会耽误配种计划。奶农还可以利用有发情表现并可正常排卵但不能受孕的老龄高产母牛来冲胚,提高其后代产量的价值肯定超过胚胎移植     

皖系粗毛兔超数排卵及胚胎移植的研究

采用国产激素,以ＦＳＨ＋ ＬＨ、ＦＳＨ＋ ＨＣＧ、ＰＭＳＧ＋ ＬＨ、ＰＭＳＧ＋ ＨＣＧ ４种不同的处理方法对３２ 只皖系粗毛兔进行超排处理,旨在筛选确立皖系粗毛兔最有效的超排方法及胚胎移植的最佳时期。结果表明：４种超排方法处理后的排卵数分别为４２．５０枚、４６．２５ 枚、３０．６３ 枚、３３．３８ 枚;回收胚胎数分别为２７．６３ 枚、３１．２５ 枚、２２．３７ 枚、２０．７５ 枚;有效胚胎数分别为２０．５０ 枚、２４．１３枚、１７．６３枚、１５．２５枚。这３ 项指标均以ＦＳＨ＋ ＨＣＧ组最高。将收集到的２３７枚胚胎移植给２４只受体,每只受体移植胚胎１０枚左右。结果表明：２－ ,４－ ,８－ １６ 细胞期及桑椹胚移植后的妊娠率、产仔率及窝产活仔数分别为５０％ 、１６．６％ 和３．３ 只,６６．７％ 、２０．６％ 和３只,６０％ 、２４．５％ 和４．３ 只,７１％ 、４０．９％ 和５．４只。其中以桑椹胚组指标最高     

鲁西黄牛体细胞克隆保种技术的研究

以体外培养的鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞作核供体，研究利用体细胞克隆技术保存我国地方黄牛优良品种的技术方法。通过组织块培养法建立的鲁西黄牛（1♂，4♀）成纤维细胞系，作为核移植供体细胞，利用屠宰场母牛卵巢卵母细胞经体外培养成熟后作为核受体进行核移植，试验结果表明：重构胚的融合率为62．5％（242／387），分裂率为63．6％（154／242），体外培养第7天囊胚发育率为42．9％（66／154）。体外培养第7天的囊胚的内细胞团细胞（ICM）与滋养层细胞数平均为37和47，ICM占44．2％。体外发育到7d的囊胚新鲜胚胎的移植妊娠率（新鲜胚胎）移植受体10头，60d妊娠率为20％（2／10）。     

显微注射生产转人胰岛素原基因奶山羊

将构建的绵羊β－乳球蛋白基因（BLG）调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因奶山羊。同期化超排处理供体奶山羊15只，排卵262枚，回收卵221枚，移植206枚注射卵，移植受体68只，怀孕21只（妊娠率33％，其中成年母羊妊娠率为58．62％，周岁母羊为9．4％），产羔33只，其中母羊羔8只，公羔25只。经PCR检测及酶切分析，证明有5只为阳性，阳性整合率15．15％，但5只全为雄性。     

波尔山羊胚胎移植技术研究

FSH－PG法超排供体波尔山羊14只，于发情第7日手术法子宫采卵。有超排反应14只，超排反应率100％，采卵成功13只，采卵成功率98.86%。获卵总数121枚，只均获卵9.31枚。可用胚119，胚胎可用率98.35%，只均可用胚9.15枚。以氯前列烯醇处理受体白山羊210只，72h内同期发性率97.11%。手术法子宫内鲜胚移植受体母羊116只，两情期移植成功率54.31％。产羔61只，产羔率96.82%。羔羊出生重平均4.26kg.