蜡样芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌发酵条件的优化

研究旨在对动物饲料中添加的蜡样芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌的发酵条件进行优化。利用正交试验对两种杆菌的生长条件进行优化并验证。研究结果表明:蜡样芽孢杆菌培养的最佳条件为葡萄糖1.5%、蔗糖1.5%、淀粉0.5%、牛肉粉0.5%、蛋白胨1.5%、酵母粉1%、硫酸铵0.5%、培养时间18～20 h,活菌数可达1.3×10¹²CFU/mL,较优化之前的8×10¹¹CFU/mL提高了62.5%。嗜酸乳杆菌最佳生长条件为MRS液体培养基中添加1%大豆蛋白胨、2%葡萄糖、20%番茄汁、发酵时间22 h,最大活菌数达1.9×10¹¹CFU/mL,较优化之前的1.3×10¹¹CFU/mL提高了46.15%。使用优化的条件进行蜡样芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌进行发酵,可以极大地提高发酵水平和活菌数,有效降低生产成本。     

饲料中添加三种芽孢杆菌对建鲤生长及肠道菌群比较研究

以平均体重为(14.62±0.11)g的当年建鲤(Jian Carp)作为试验对象,设计4种实用饲料,对照组为基础日粮,试验组为基础日粮中分别添加0.1%的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、0.1%蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、0.1%枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)(芽孢杆菌添加浓度均为1.5×1010个/kg),在室外水泥池中(7 m×7 m×1.5 m)养殖94 d,测定了鱼体的生长及肠道菌群。生长结果表明:与对照组相比,添加0.1%的凝结芽孢杆菌饲料系数下降5.0%(P>0.05),特定生长率增加3.00%(P<0.05);添加0.1%的蜡样芽孢杆菌饲料系数下降2.50%(P>0.05),特定生长率增加0.5%(P>0.05);添加0.1%的枯草芽孢杆菌饲料系数提高5.63%(P<0.05),特定生长率下降3.0%(P<0.05)。与对照组相比,在饲料中添加0.1%的凝结芽孢杆菌使鲤鱼肠道内的细菌总数增加0.15%(P>0.05),大肠杆菌下降8.16%(P<0.05),弧菌下降17.32%(P<0.05),乳酸菌上升6.74%(P<0.05);添加0.1%的蜡样芽孢杆菌使鲤鱼肠道内的细菌总数增加11.13%(P<0.05),大肠杆菌上升10.6%(P<0.05),弧菌下降0.56%(P>0.05),乳酸菌增加0.63%(P>0.05)。添加0.1%的枯草芽孢杆菌使鲤鱼肠道内的细菌总数增加12.17%(P<0.05),大肠杆菌增加8.32%(P<0.05),弧菌总数下降2.23%(P>0.05),乳酸菌下降6.90%(P>0.05)。因此,在鲤鱼饲料中添加凝结芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌对鲤鱼的生长和肠道健康有一定的促进作用,单独添加枯草芽孢杆菌的效果则有待进一步研究。     

蜡样芽孢杆菌YSQ08与角质蛋白酶联合降解羽毛的研究

对蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶、酶菌联合降解羽毛3种方式进行比较,结果表明酶菌联合降解羽毛的效果更突出。深入研究蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶添加顺序、菌培养时间以及酶添加时间对羽毛降解率的影响,结果显示采用菌+酶的方式能降解更多的羽毛,同时数据表明菌液在培养14h时产酶达到高峰,加入菌液后的24h再添加角质蛋白酶能保持其较高的活力。以pH值、羽毛添加量、酶添加量、菌液添加量、培养天数为试验因素,设计L_(16)(4~5)正交试验,结果表明在pH9.0、羽毛添加量3.0%、酶添加量2 000U/g、菌液添加量1.5%、培养时间为96h条件下,发酵结果最优,此时氨基酸含量为223.26mg/L,降解率为81.76%。菌+酶降解羽毛的方式为工业化处理羽毛废弃物提供新的思路。     

蛋鸡饲料混合添加细菌制剂效果研究

在饲料中添加“光合细菌”或“蜡样芽胞杆菌”制剂，提高蛋鸡生产性能已有许多报道。鉴于我省近几年鸡大肠杆菌病危害非常严重，按照有关资料报道的方法，在蛋鸡饲料中单独添加上述某一种细菌制剂，对于提高和改善蛋鸡生产性能、增强鸡体抗病能力、增加收益效果不大，因此进行本试验，旨在探讨蛋鸡饲料中混合添加“光合细菌”和“蜡样芽胞杆菌”制剂对蛋鸡生产性能的影响。1材料和方法1.1“光合细菌”为由上海市交通大学生物技术研究所提供的红假单孢菌属与红螺菌属的十余个菌种的混合菌群，是肉骨粉生产废水敞开系统培养的悬液，含菌4.5×1…     

变质鸡蛋中蜡样芽孢杆菌的分离与鉴定

从山东地区保存超过14 d大范围出现变质鸡蛋中分离到一株细菌,经过培养特性、生理生化鉴定和16S rDNA鉴定,鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus).分别将变质鸡蛋、煮熟的变质蛋、健康鸡蛋进行厌氧培养和细菌计数,发现健康鸡蛋和煮熟的变质蛋无蜡样芽孢杆菌,而变质鸡蛋中的细菌数量达到1.3×108CFU/g.本试验表明,蛋黄中过量的蜡样芽孢杆菌可能与鸡蛋变质有关,应注意过量添加蜡样芽孢杆菌可能影响蛋品的保鲜和食用安全性.     

酶菌联用降解羽毛工艺优化及降解产物对黑水虻幼虫生长性能的影响

试验采用角蛋白酶和蜡样芽孢杆菌联用处理鸡羽毛,以羽毛降解率为指标,研究了不同pH值、酶添加量、细菌接种量、羽毛添加量和发酵时间对羽毛降解率的影响,优化了降解羽毛的工艺条件。之后分别使用三种降解产物和猪粪作为饲料,研究了羽毛降解产物对黑水虻幼虫生长性能的影响,包括平均增重、料重比和存活率等。结果表明,适宜的酶菌联用降解羽毛工艺条件为:pH值9.0、酶添加量2 000 U/g、蜡样芽孢杆菌接种量3.0%(v/v)、羽毛添加量2.5%,发酵5 d。使用发酵上清液干物质作为饲料养殖黑水虻幼虫,能有效提高黑水虻幼虫平均增重、优化料重比、提高存活率。     

四株饲用芽孢杆菌的分离鉴定及其16S-rRNA的序列分析

芽孢杆菌是一类抗性强耐高温的细菌,部分芽孢杆菌有益生作用,在动物肠道内能有效抑制病原菌,促进肠道有益菌的繁殖,维持动物肠道内的微生态平衡。本试验从引进的饲料样品中分离出4株杆菌,分别命名为YB-1、YB-2、YB-3和YB-4,通过表型鉴定及16S-rRNA测序鉴定,YB-1为苏云金芽孢杆菌、YB-2、YB-4为枯草芽孢杆菌、YB-3为蜡样芽胞杆菌。16S-rRNA序列同源分析结果表明:YB-2、YB-4与枯草芽孢杆菌亚种的同源性分别为99.91%和100%;YB-1与苏云金芽孢杆菌亚种的同源性为99.17%,YB-3与蜡样芽胞杆菌亚种的同源性为100%,从样品中分离出两株枯草芽孢杆菌,一株苏云金芽孢杆菌和一株蜡样芽胞杆菌。     

四株单菌及其复配后复合菌剂净水效果初步研究

本研究对目前水产养殖中常用的枯草(Bacillus subtilis,Bs)、蜡样(Bacillus cereus,Bc)、地衣(Bacillus licheniformis,Bl)三株芽孢杆菌和一株粪链球菌(Fecal streptococcus,Fs)进行净水效果初步比较,主要指降解氨氮、亚硝酸盐能力的比较。将菌粉定量添加到自配的模拟污水培养基中摇床培养,不加菌的模拟污水培养基作为对照。结果表明:枯草芽孢杆菌的降氨氮能力优于其他三种菌,5 d后氨氮去除率100%,蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和粪链球菌也均有一定的降解氨氮能力。降亚硝酸盐效果最好的单菌仍是枯草芽孢杆菌,亚硝酸盐去除率第二天为85.60%,第三天为100%。地衣芽孢杆菌和粪链球菌降亚硝酸盐的能力也很好,在第五天亚硝酸盐浓度基本为0。而蜡样芽孢杆菌降亚硝酸盐的效果不如其他3种菌,五天后降解率仅为61.10%。根据单株菌净水效果的结果,做菌种复配净水试验。共得出七种配方复合菌剂,同样在模拟污水培养基中进行培养。结果得出,配方E为最优配方,第三天氨氮去除率为81.33%,第六天时去除率达到93.58%,第五天时亚硝态氮基本降为0,净水效果突出。     

鱼源蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为探究鱼源蜡样芽孢杆菌的致病性和耐药性及指导科学用药,本试验采用形态学观察、生理生化特性分析、16S rDNA基因扩增及系统进化树构建等方法鉴定分离菌,人工感染试验确定分离菌的致病性,耐药基因检测和药敏试验确定菌株耐药性。结果显示,分离菌株形成边缘不规则、不光滑的乳白色菌落,为需氧型革兰氏阳性菌。葡萄糖、硝酸盐、明胶液化等生化反应为阳性,木糖、阿拉伯糖、甘露醇等生化反应为阴性。16S rDNA基因片段长度为1 457 bp,在系统发育树中,分离菌与蜡样芽孢杆菌RTR菌株亲缘关系最近,与蜡样芽孢杆菌的同源性均达到99%以上,从而综合判定分离菌株为蜡样芽孢杆菌。人工感染试验发现,分离菌株对黄颡鱼有一定的致病性。耐药基因检测结果显示,分离菌株中检测出Sul1和Sul2两种耐药基因。药敏试验发现,该菌株对庆大霉素、哌拉西林、米诺环素等敏感,对头孢哌酮中度敏感,对青霉素、头孢曲松、氨苄西林等耐药。本试验结果为有效防控蜡样芽孢杆菌感染的疾病提供了科学参考资料。     

益生菌降低载鸭水体有害菌和内毒素水平提高肉鸭肠道健康和生产性能的研究

为研究降低载鸭水体革兰氏阴性菌和内毒素污染对肉鸭肠道发育和生长性能的影响,将480只1日龄雏鸭随机分成4组,每组4个重复,每个重复30只,在60d的试验期间采用"高床+水池"模式养殖至出栏。试验采用2×2因子试验设计,两处理因子分别为向饲料添加枯草芽孢杆菌和向载鸭水体应用光合细菌。结果表明饲粮添加芽孢杆菌和载鸭水体应用光合细菌均可抑制水体大肠杆菌、沙门菌和志贺氏菌含量(P0.05),降低载鸭水体和鸭血液内毒素和皮质醇水平(P0.05),增加肠黏膜绒毛长度(P0.05),提高肉鸭日增重(P0.05)。表明芽孢杆菌和光合细菌通过降低养殖水体革兰氏阴性菌和内毒素水平促进肠道吸收能力,提高肉鸭生长性能。