救必应中药血清与抗菌药联合对产ESBLs细菌抑菌效果的研究

本试验主要探讨救必应中药血清与抗菌药联合诱导细菌传代的体外抑菌活性。制备救必应中药血清,采用二倍微量稀释法体外检测抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),然后救必应中药血清与抗菌药联合诱导产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)细菌传代。救必应中药血清与抗菌药联合诱导细菌传代对耐药大肠杆菌有不同程度的抑菌活性。救必应中药血清可明显地增强β-内酰胺类抗菌药、氨基糖苷类抗菌药、喹诺酮类抗菌药和卡巴氧类抗菌药对耐药菌的抑制作用。     

东亚飞蝗抗菌活性物质的萃取及抗菌效应研究

试验研究东亚飞蝗成虫抗菌活性物质的萃取参数与抑菌效应。采用针刺蘸大肠杆菌菌悬液方法,以抗菌活性为指标,用杯碟法测定临床多重耐药菌的抑菌活性,确定最佳诱导时间,初步研究抗菌谱。结果表明,东亚飞蝗抗菌活性物质粗提液对革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)或革兰氏阴性菌(如大肠杆菌、水稻白叶枯病原菌)均有一定的抑制作用。其抗菌谱为:金黄色葡萄球>水稻白叶枯病原菌>枯草芽孢杆菌>大肠杆菌,其中以对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最明显。抗菌活性物质浓度为11.782mg/mL,蝗虫抗菌活性物质收率为8.623%。经纯化后的抗菌活性物质增强对革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌的抑制作用。采用针刺蘸大肠杆菌方式可成功诱导东亚飞蝗抗菌物质的表达,尤其以针刺蘸大肠杆菌诱导后饲养24h得到的抗菌活性物质抑菌活性最强。结果表明东亚飞蝗虫体内含有抗菌活性物质可被诱导表达,其抗菌作用机理有进一步研究。     

不同中药与盐酸恩诺沙星联用对大肠杆菌耐药菌株体外抑菌作用研究

本试验旨在研究不同中药与盐酸恩诺沙星联用对大肠杆菌耐药菌株的体外抑菌作用。采用微量肉汤法测定临床上一种常用药物盐酸恩诺沙星和不同中药对大肠杆菌耐药菌株及其联合使用的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。结果发现,单味中药水提物中侧柏叶、金樱子和五味子的抑菌效果较好,其MIC值分别为3.91、3.91和7.81 mg/mL;单味中药的醇提物中,侧柏叶、马齿苋抑菌效果较好,其MIC值分别为7.81和3.91 mg/mL。盐酸恩诺沙星分别与五味子和金樱子水提物联合作用后,对大肠杆菌耐药菌株的MIC值分别降低到0.0078和0.0039 mg/mL;与马齿苋、赤芍、侧柏叶和金樱子的醇提物联合后,对大肠杆菌耐药菌株MIC值均明显降低。盐酸恩诺沙星分别与鱼腥草水提物、赤芍水提物、椿皮水提物、马齿苋醇提物、苍术醇提物、三颗针醇提物、赤芍醇提物、薤白醇提物、拳参醇提物、侧柏叶醇提物、金樱子醇提物和败酱草醇提物联合作用后,对大肠耐药菌株呈现相加或协同抑菌作用,其FIC值分别为0.75、0.62、0.62、0.27、0.75、0.75、0.31、0.62、0.50、0.53、0.28和0.62。初步认为不同中药中含有能有效降低大肠杆菌耐药性的中药,也含有与盐酸恩诺沙星组合,具有协同或相加作用的中药,为寻找有效防治大肠杆菌病的药物组合来对抗多重耐药菌提供了可能。     

白头翁不同提取物抑菌作用研究

目的：探讨白头翁4种溶剂提取物抑菌作用。方法：采用K-B纸片扩散法测定不同提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、枯草杆菌的抑菌效果。结果：白头翁的不同溶剂提取物均有一定的抑菌效果,且作用效果差异不明显,而其抑菌效果随着浓度的增加而增强,4种提取物对枯草杆菌抑菌效果均较差;高浓度时,除水提组分外,其他3种提取物对金黄色葡萄球菌均表现为中敏。     

4种藏兽药组方抗腹泻作用研究

试验旨在了解4种藏兽药提取物抗细菌性腹泻病的效果,指导兽医临床治疗该类疾病。采用K-B纸片扩散法和肉汤微量稀释法检测纤毛婆婆纳、松萝、苦参、独一味4种藏兽药提取物对维氏气单胞菌、金黄色葡萄球菌、痢疾志贺氏菌、屎肠球菌、中间耶尔森氏菌、黏质沙雷氏菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯、肠沙门氏菌肠亚种、粪肠球菌、阪崎肠杆菌、普通变形杆菌、阴沟肠杆菌阴沟亚种14种常见致泻性菌的抑菌效果,再利用正交设计软件对纤毛婆婆纳、苦参、松萝和独一味4味藏兽药进行组方优选,同时利用临床分离菌布利丹沙门氏菌建立小鼠细菌性腹泻模型。根据4种藏兽药优选组方的LD₅₀将组方分为高（0.060 g/mL）、中（0.030 g/mL）、低（0.020 g/mL） 3个剂量组对建立的小鼠细菌性模型进行治疗。结果表明,4种藏兽药对大部分试验致泻性细菌有很好的抑制作用,其中松萝对所有试验菌都有较好的抑制作用,4种藏兽药的优选组方高剂量对小鼠细菌性腹泻表现出最好的治疗作用,有利于临床该类疾病的治疗。     

鸡血藤不同极性段提取物制备及体外抑菌作用初步研究

采用水、丙酮和乙醇等不同极性溶剂对鸡血藤有效成分进行提取,测定了鸡血藤不同极性段提取物对鸡大肠埃希菌、鸭大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌等常见病原菌的体外抑菌效果。结果表明,鸡血藤的各种提取物对鸡大肠埃希菌的抑菌圈直径均小于13 mm,属低度敏感;对鸭大肠埃希菌有较好的抑制作用,属中度敏感,其抑菌圈直径大于13 mm,小于19 mm;对金黄色葡萄球菌为高度敏感,其抑菌圈直径在19 mm以上。鸡血藤微波提取物对鸡大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,700 mL/L乙醇提取物对鸭大肠埃希菌的抑菌作用最强,最小抑菌浓度均为15.63 mg/mL。     

Effect of bambermycins, in vitro, on plasmid-mediated antimicrobial resistance

The potential of bambermycins (a growth-promoting antimicrobial approved for turkeys, broilers, and swine) to overcome or control plasmid-mediated antimicrobial resistance was determined in a series of in vitro experiments. Four possible modes of action of bambermycins were studied: synergistic effect with 12 other antimicrobials, elimination of resistance (R) plasmids from Escherichia coli, selective killing or inhibition of E coli carrying R plasmids, and inhibition of R plasmid transfer. Bambermycins had no synergistic activity with the other drugs tested and had little effect on eliminating plasmids from host bacteria. Dependent on plasmid type, bambermycins decreased or increased transfer frequency of R plasmids. Bambermycins also selectively inhibited growth of bacteria harboring certain R plasmids.     

中药与抗菌药物联用对猪源大肠杆菌耐药性的抑制作用

为了探讨中药与抗菌药物联用对大肠杆菌耐药性的作用效果，本研究对河南部分地区采集的样品（50份）进行分离鉴定、生化试验及致病性试验，对分离鉴定后的致病性猪大肠杆菌选用12种中药采用K-B法进行耐药性检测，将筛选出来的中药与抗生素进行中西联用对致病性大肠杆菌做体外抑菌试验，并分析中西药联用对大肠杆菌的抑制作用。结果显示，采集的50份样品有23株菌符合大肠杆菌的分离培养特性和生化特性，且23株菌均为致病性大肠杆菌；通过耐药性检测，23株试验菌株对测试的中药均有不同程度的耐药性，其中试验菌株对甘草耐药率最高（82.6%），其次为生地（78.2%），而对黄柏（17.3%）和白头翁（21.7%）耐药性较低，具有一定的敏感性；体外抑菌试验结果发现，中药与抗生素联用均有不同程度的抑菌效果，其中黄柏、白头翁与抗菌药物联用的抑菌效果最明显。以上结果说明中药与抗菌药物联用不仅可以抑制大肠杆菌的耐药性，还可以延缓大肠杆菌耐药性的产生。     

In vitro antimicrobial activity of Combretum molle (Combretaceae) against Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae isolated from crossbred dairy cows with clinical mastitis

Following the rapidly expanding dairy enterprise, mastitis has remained the most economically damaging disease. The objective of this study was mainly to investigate the in vitro antibacterial activities of ethanol extracts of Combretum molle (R.Br.Ex.G.Don) Engl & Diels (Combretaceae) against antibiotic-resistant and susceptible Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae isolated from clinical cases of bovine mastitis using agar disc diffusion method. The leaf and bark extracts showed antibacterial activity against S. aureus at concentrations of 3 mg/ml while the stem and seed extract did not show any bioactivity. Although both leaf and bark extracts were handled in the same manner, the antibacterial activity of the bark extract against the bacterial strains had declined gradually to a lower level as time advanced after extraction. The leaf extract had sustained bioactivity for longer duration. The susceptibility of the bacteria to the leaf extract is not obviously different between S. aureus and S. agalactiae. Also, there was no difference in susceptibility to the leaf extract between the antibiotic-resistant and antibiotic-sensitive bacteria. Further phytochemical and in vivo efficacy and safety studies are required to evaluate the therapeutic value of the plant against bovine mastitis.     

大蒜挥发油对猪鸡四种常见致病菌的抗菌效果

本试验旨在研究大蒜挥发油(GO)能否作为安全优质的饲料添加剂广泛应用于畜禽养殖生产.采用试管倍比稀释法研究本实验室开发的2种精制大蒜挥发油制剂(G0-Ⅰ和GO-Ⅱ),以及市售天然大蒜油、合成大蒜油对养殖生产中常见的致病性鸡大肠杆菌、鸡沙门氏菌、猪大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的体外抗菌效果.结果发现:2种制剂对供试菌都有较好抑菌作用且效果均优于天然大蒜油和合成大蒜油;精制大蒜挥发油GO-Ⅱ(含二烯丙基二硫化物(DADS)比例高)对猪大肠杆菌和鸡大肠杆菌最低抑菌浓度(MIC)为62.5 μg/mL,对鸡沙门氏菌和金黄色葡萄球菌MIC为31.3μg/mL;GO-Ⅰ对鸡沙门氏菌和金黄色葡萄球菌MIC与GO-Ⅱ相同.本研究提示GO制剂中有效成分DADS与二烯丙基三硫化物(DATS)的比例不同抗菌效果不同.     

常用中草药对水产动物致病菌体外抑菌效果研究

试验旨在探讨黄柏、诃子、知母、苏木等常用中草药对水产动物致病菌的体外抑菌效果,为今后水产养殖细菌性疾病的防控提供参考。以美人鱼发光杆菌、嗜水气单胞菌、哈维氏弧菌、创伤弧菌临床分离株为试验菌株,以抑菌圈直径、最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）及联合抑菌指数（FICI）作为检测指标,研究常用中草药对水产病原菌的抑菌活性。采用水提法提取中草药有效成分,并通过琼脂平板打孔法测定中草药对水产致病菌抑菌圈,微量肉汤稀释法测定中草药MIC和MBC及微量肉汤棋盘稀释法测定联合抑菌指数（FICI）。结果显示,16种中草药对水产致病菌具有不同程度的抑菌作用。药敏试验结果显示,苏木、女贞子、夏枯草、青皮对4种水产致病菌均具有抑菌效果,抑菌圈直径在10.5~29.0 mm之间,而4种病原菌对马齿苋均表现为耐药;MIC检测结果显示,苏木、女贞子、夏枯草、青皮对4种病原菌的MIC值为7.81~250.00 mg/mL;MBC检测结果显示,苏木、女贞子、夏枯草、青皮对4种病原菌的MBC值为7.81~500.00 mg/mL;联合抑菌试验结果显示,苏木与夏枯草、女贞子及青皮联用仅对美人鱼发光杆菌起到协同抑菌作用,对嗜水气单胞菌、创伤弧菌及哈维氏弧菌均无抑菌作用,女贞子和青皮组合仅对哈维氏弧菌抑菌作用为相加作用,该组合在抑菌效果上对其他病原菌表现为无关或颉颃作用,其他药物组合在抑菌效果上对4种病原菌则表现为无关或颉颃作用;联合抑菌圈测定结果表明,中草药联合使用对4种病原菌抑菌作用不一。本试验结果表明常用中草药对水产动物致病菌具有一定程度的抑菌作用。     

穿心莲水提物与10种临床常用抗菌药联用的体外抑菌试验

为研究穿心莲水提物与临床常用10种抗菌药联用对鸡致病性大肠杆菌的体外抑菌效果,本试验采用传统的水提法制备穿心莲中药液并浓缩至浓度为1 g/mL,用琼脂平板稀释法测定穿心莲水提物分别与阿莫西林、头孢曲松等10种常用抗菌药物联用对临床分离的10株鸡致病性大肠杆菌的体外抑菌作用。结果表明,穿心莲和头孢曲松、穿心莲和氟苯尼考联用100%呈现协同作用;穿心莲和头孢噻呋联用90%呈现协同作用,10%呈现无关作用;穿心莲和大观霉素联用80%呈现协同作用,20%呈现无关作用;穿心莲和林可霉素联用50%呈现协同作用,40%为无关或颉颃作用,10%为无关作用;穿心莲与阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、多西环素、恩诺沙星联用以无关或颉颃作用为主。以上结果表明,在体外,穿心莲与头孢曲松、头孢噻呋、大观霉素、氟苯尼考联用对鸡致病性大肠杆菌呈现协同作用,与阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、林可霉素、多西环素、恩诺沙星联用呈现无关或颉颃作用。     

中药水提物及其复方对大肠杆菌的体外抑菌效果

为了评价中药及其复方对大肠杆菌的体外抑菌效果,取乌梅、五倍子、山茱萸、黄芩等30种中药,通过试管二倍稀释法测定中药水提物对大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）与最小杀菌浓度（MBC）,并筛选出抗菌作用较强的中药水提物与其他中药水提物组成复方,测定中药复方对大肠杆菌的体外抑菌效果。结果表明,五倍子、乌梅、金银花、大青叶、黄芩、薄荷、五味子、青蒿、秦皮对大肠杆菌有明显的抑制作用,其中五倍子对大肠杆菌的抑菌活性最强（MIC为6.25 mg/mL）,而五味子和乌梅对大肠杆菌杀菌活性最强（MBC为50 mg/mL）。选取9种中药水提物作为主药与其他中药水提物分别组成复方后,大部分复方对大肠杆菌的抑制作用明显增强。     

蒲公英提取物联合多种抗生素对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的体外协同抑菌实验

为研究蒲公英提取物联合多种药物对奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的体外协同抑菌效果,以期应用于临床,减少抗菌药的使用量,降低细菌耐药性和兽药残留。试验选取3种来源(河北,东北,北京)的蒲公英提取物,通过高效液相色谱仪对3种不同来源的蒲公英提取物的主成分及含量进行测定并分析,选取后期试验所需的蒲公英提取物来源。并应用微量肉汤稀释法测定多种抗生素对金黄色葡萄球菌的MIC值(最小抑菌浓度),随后测试蒲公英提取物与抗菌药物联合用药,是否对金黄色葡萄球菌具有协同效果。试验结果表明,不同来源的蒲公英提取物主成分含量差异较大,含有单咖啡酰酒石酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸,但含量比例不同。随之测得不同来源蒲公英提取物对金黄色葡萄球菌的敏感程度也有差异,临床用药前有必要进行药敏试验科学精准的选择更合适的药物。蒲公英提取物与金霉素、恩诺沙星、阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋、头孢喹肟等联合用药,对金葡菌的体外抑菌实验有良好的协同作用,体外能显著降低抗菌药物的用量。     

黄芪提取物对常见致病菌的体内外抑菌活性测定

为了研究黄芪提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌的抑菌活性,采用试管二倍稀释法,测定黄芪提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌活性;采用相同浓度致病菌灌胃小鼠后,分别用黄芪提取物灌胃治疗,测定小鼠十二指肠、空肠、回肠和盲肠中肠道菌群数量,以确定黄芪提取物的体内抑菌活性.结果表明,无论是在体外还是在体内,黄芪提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有抑制作用,对大肠杆菌的抑制作用最强,对沙门氏菌的抑制作用最弱;且通过灌注黄芪提取物,显著降低了各种致病菌致病后小鼠的死亡率.通过研究可以得出,黄芪提取物对常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌具有较明显的体内外抑菌作用.     

重组鹅β-防御素7蛋白的原核表达及其生物学特性分析

为探讨鹅β-防御素7(Av BD7)的生物学特性,将鹅Av BD7基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体p Pro EX HTa的EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD7,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对其菌液进行诱导表达。经N-三(羟甲基)甲基甘氨酸十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)分析,该重组蛋白大小为10~15 ku,与预期大小结果一致。重组鹅Av BD7蛋白纯化后,通过菌落计数的方法测定其体外抗大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其对鸡红细胞的溶血活性。结果显示,重组鹅Av BD7蛋白对所测定的5种细菌均有显著抗菌活性(P0.05),且其抑菌活性随蛋白浓度的增加而增强。高浓度盐离子(150 mmol/L)显著抑制重组鹅Av BD7蛋白的抗菌活性(P0.05)。重组鹅Av BD7蛋白对鸡红细胞没有溶血活性(P0.05)。由此可见,重组鹅Av BD7蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶血活性。     

不同方法对鸭里默氏杆菌体外抑菌活性比较研究

目的：筛选对鸭里默氏杆菌具有较强抑菌活性的药物,为指导临床合理用药及开发新型药物制剂提供理论依据。方法：应用试管二倍稀释法和平皿二倍稀释法测定不同种抗生素对临床分离的里默氏杆菌的体外抑菌活性。结果：不同种抗生素对里默氏杆菌均有不同程度的抑菌作用,其中青霉素及氟苯尼考的抑菌活性最为明显,而林可霉素抑菌效果最不明显。结论：青霉素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、土霉素、环丙沙星及强力霉素对里默氏杆菌均有不同程度的抑菌作用,而林可霉素对其抑菌效果最不明显。     

8味中药对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验

选用金银花、连翘、蒲公英等8味中药分别采用乙醇回流法进行提取,用试管二倍稀释法测定来自奶牛乳房炎的3种主要致病菌(金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌)的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果显示,以金银花和连翘对金黄色葡萄球菌抑菌效果最强,MIC值均为15.63mg/mL,其MBC值为31.25mg/mL和62.5mg/mL;芙蓉花对大肠杆菌和无乳链球菌的效果最强,MIC值为31.25mg/mL和15.63mg/mL,MBC值为62.5mg/mL。本试验结果,对临床用药选取合适的中药有直接的指导意义,同时为体内用药的浓度提供参考依据。     

马齿苋对猪大肠埃希菌抑菌作用观察

按常规方法制备马齿苋水提取物,以试管二倍稀释法测定马齿苋水提取物对猪大肠埃希菌的体外最小抑菌浓度;以小鼠为试验动物,观察马齿苋对猪大肠埃希菌体内抗菌作用。结果显示,马齿苋对猪大肠埃希菌有较好的体外抑制作用,最小抑菌浓度为0.25g/mL;小鼠体内抗菌作用提示,马齿苋在小剂量时对猪大肠埃希菌无抗菌作用,增大药物剂量其本身的毒副作用会致死小鼠。