Effects of Polysaccharides from Ferula sinkiangensis Root on Proliferation of Chicken Peripheral Lymphocyte and Spleen Lymphocyte in vitro

To investigate the effects of Ferula sinkiangensis polysaccharides (FSP) on cell proliferation of chicken splenic lymphocytes and peripheral lymphocyte in vitro. By the method of water extract-alcohol precipitation,total Ferula sinkiangensis polysaccharide (FSP_t) and 30%,50%,70% gradient alcohol precipitation of polysaccharides (FSP₃₀,FSP₅₀ and FSP₇₀) were extracted, and detected by phenol-sulfuric acid method and infrared spectroscopy method. The safe concentration of all classifications of polysaccharide were detected and the effect of FSP on lymphocyte proliferation of chicken spleen and peripheral blood were measured by MTT method. The results showed that the absorption peak of FSP were conformed to belong by polysaccharide compounds. Peripheral blood T lymphocyte proliferation test indicated that FSP_t,FSP₃₀ and FSP₇₀ alone or cooperated with PHA could stimulate T lymphocyte proliferation under a certain concentration,and FSP_t showed a better proliferation effect. Spleen B lymphocyte proliferation test showed that FSP_t,FSP₃₀ and FSP₇₀ alone or cooperated with LPS could stimulate B lymphocyte proliferation under a certain concentration,FSP_t and FSP₇₀ showed a better proliferation effect. In conclusion,FSP showed the strong effect on lymphocyte proliferation of chicken spleen and peripheral blood in vitro,and that would be the materials for further research.     

阿魏根粗多糖对鸡脾脏和外周血淋巴细胞体外增殖作用的影响

为研究新疆阿魏多糖（FSP）对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞增殖作用的影响。本研究用水提醇沉法得到阿魏总多糖（FSP_t）和3种分级多糖（FSP₃₀、FSP₅₀、FSP₇₀）,并通过苯酚-硫酸法和红外光谱对FSP进行检测。通过MTT法测定各级FSP的安全浓度及其对鸡外周血T淋巴细胞及脾脏B淋巴细胞的增殖能力。结果显示,提取的FSP均具有多糖的特征峰,为多糖类化合物。外周血T淋巴细胞增殖试验表明,除FSP₅₀外,所有多糖在一定浓度下均能单独和协同PHA刺激T淋巴细胞增殖,其中FSP_t的增殖作用较强。脾脏B淋巴细胞增殖试验表明,除FSP₅₀外,所有多糖在一定浓度下均能单独和协同LPS刺激B淋巴细胞增殖,其中FSP₇₀和FSP_t增殖作用较强。综上所述,各级FSP中,FSP_t对脾脏B淋巴细胞和外周血T淋巴细胞的增殖作用最强,可以作为进一步研究的材料。     

不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响

试验旨在比较不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用的影响。用不同浓度乙醇醇沉桑叶水提物,制备桑叶粗多糖MLP-1、MLP-2、MLP-3、MLP-4、MLP-5,采用苯酚硫酸法测定各提取物多糖含量。以5种桑叶粗多糖和桑叶水提物（MLAE）为试验药物,采用MTT法比较多糖含量分别在15.625、31.25、62.5、125、250 μg/mL浓度时各提取物单独刺激及协同LPS、PHA共同刺激小鼠脾脏B、T淋巴细增殖的变化。结果显示,多糖浓度在15.625~250 μg/mL范围内,各提取物无论单独还是协同LPS和PHA时均能促进小鼠脾脏B、T淋巴细胞的增殖,其中,MLP-1多糖含量在低浓度时能显著刺激脾脏B淋巴细胞增殖（P<0.05）;MLP-3和MLP-5在低浓度时表现出较强的刺激T淋巴细胞增殖的能力;MLAE协同LPS在大部分浓度点的脾脏B淋巴细胞的增殖能力均显著高于细胞对照组和LPS对照组,可显著提升体液免疫功能（P<0.05）。     

Effect of Different Mulberry Leaf Extracts on Spleen Lymphocyte Proliferation in Mice

This experiment was aimed to compare the effects of different mulberry leaf extract on spleen lymphocyte proliferation in mice. Mulberry leaf polysaccharides (MLP-1, MLP-2, MLP-3, MLP-4 and MLP-5) were prepared with mulberry leaf aqueous extract (MLAE) by different concentration of alcohol deposit, polysaccharides concentration of all extracts were determined by phenol sulfuric acid method. Five different MLPs and MLAE were as the experimental drug, when polysaccharide concentration was 15.625, 31.25, 62.5, 125 and 250 μg/mL, the changes of spleen B and T lymphocytes proliferation in mice which were stimulated by MLPs and MLAE in single or synergistical stimulation of drugs with LPS and PHA were determined by MTT method. The results showed that when polysaccharide concentration was in the range of 15.625 to 250 μg/mL, MLPs and MLAE in single or synergistical stimulation with LPS and PHA could stimulate the spleen B and T lymphocytes proliferation, MLP-1 at low concentration could stimulate significantly spleen B lymphocyte proliferation remarkably (P<0.05), and MLP-3 and MLP-5 at low concentrations showed strong stimulation ability of T lymphocyte proliferation. When MLAE was in synergistical stimulation with LPS at most concentrations points, the spleen B lymphocytes proliferation in mice were significantly higher than those of the cell control and LPS control groups, which revealed that MLAE could significantly improve the humoral immune function (P<0.05).     

中药成分对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响

为筛选增强免疫作用较好的中药成分和研制新型复方中药成分免疫增强剂，比较了4种浓度的当归多糖（CAPS）、黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、淫羊藿多糖（EPS）、蜂胶多糖（PPS）、淫羊藿黄酮（EF）、蜂胶黄酮（PF）、黄芪皂苷（AS）和人参皂苷（GS）9种中药成分对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明，多数中药成分能促进淋巴细胞增殖，其中APS、EPS、GS和AS等在一定浓度既能单独又能协同ConA或LPS刺激淋巴细胞增殖，以EPS和APS作用最强。同时根据浓度试验结果，选出各药的合适浓度，进一步比较它们作用的差异，发现EPS和GS效果最好。这些中药成分可以作为复方中药成分免疫增强剂的组分药。     

白花蛇舌草提取物对肉鸡淋巴细胞增殖功能的影响

为了研究中药白花蛇舌草对肉鸡免疫力的调节作用,探讨其作用机理。在体外培养的肉鸡血液和脾脏淋巴细胞中加入不同浓度的白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮等成分,观测其对淋巴细胞增殖功能的影响。白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮分别在浓度为4 000 mg/L、1 000 mg/L~2 000 mg/L和5 mg/L~100 mg/L时对鸡血液淋巴细胞有明显的刺激增殖作用(P0.05),在浓度为200 mg/L~800 mg/L、10 mg/L~1 600 mg/L和25 mg/L~50 mg/L时对鸡脾脏淋巴细胞的增殖具有明显的刺激作用(P0.05)。研究结果说明白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮对体外培养的肉鸡淋巴细胞的增殖均有促进作用。     

黄芪多糖和淫羊藿多糖对培养细胞增殖和衰老的影响

将安全浓度范围内的黄芪多糖(astragalus polysaccharide，APS)和淫羊藿多糖(epimedium polysaccharide，EPS)分别加入到培养12h和24h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中，测定加药后CEF增殖率和成层率的动态变化。结果表明，2种多糖均能促进细胞增殖和延缓细胞衰老，EPS的作用强于APS，具有一定的量效、时效关系。     

4种中药多糖对免疫雏鸡黏膜免疫功能的影响

为了探讨4种多糖增强雏鸡黏膜免疫的作用和机理.将450羽罗曼公鸡随机分成9组,14日龄用新支二联弱毒苗点眼滴鼻,同时,8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖(APS)、板蓝根多糖(IRPS)、牛膝多糖(AIRPS)和山药多糖(CYPS)溶液,对照组注射生理盐水,连续注射3 d,1次/d.于免疫后第10 d、20 d、30 d、40 d、50 d和60 d每组随机抽取5羽迫杀,刮取空肠黏液,用ELISA方法测定SIgA的含量;采盲肠扁桃体和十二指肠.用免疫组织化学法测定盲肠扁桃体和肠绒毛SIgA细胞阳性面积.实验结果表明:4种多糖均能显著提高空肠黏液中SIgA的含量和盲肠扁桃体、小肠绒毛的SIgA阳性细胞数,低剂量的APS、IRPS的效果优于高剂量的ARPS、CYPS.提示4种多糖均可以有效地增强黏膜的屏障作用,从而提高机体抗感染能力.     

鬼臼多糖的分离纯化及药理学活性

目的：分离纯化鬼臼多糖（PEP）,测定PEP的单糖组成,观察PEP对小鼠脾脏、胸腺指数、溶菌酶含量及脾脏淋巴细胞增殖的影响.方法：用热水抽提及醇沉法纯化鬼臼多糖,采用纸层析法和红外光谱对PEP的组成进行研究,用比浊法测溶菌酶含量,用MTT法研究PEP对脾脏淋巴细胞增殖的影响.结果：PEP的得率为60%,PEP含有葡萄糖、果糖、甘露糖、和阿拉伯糖,红外光谱扫描表现出一般多糖类物质的特征吸收峰.PEP能够提高脾脏指数,但对胸腺指数和血清中的溶菌酶含量的影响不明显.MTT结果显示,PEP能够显著刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖,且与ConA有协同作用.     

不同日龄鸡脾脏中T淋巴细胞增殖功能的动态观察

本研究采用四甲基偶氮唑盐淋巴细胞转化实验法对不同时期鸡的脾脏中T淋巴细胞的增值功能进行检测。结果发现,在胚胎20日龄和出壳后1日龄刀豆蛋白刺激组的A值很小,但到4日龄时A值迅速增大,到7日龄时达到最大,随后又减小,直至35日龄时趋于稳定。由于T淋巴细胞的增殖功能与其鸡免疫功能呈正相关,所以说脾脏中T淋巴细胞的细胞免疫功能随着日龄增长基本呈现逐渐增强的趋势,并在7日龄时达到成熟水平。     

中药多糖对雏鸡淋巴细胞转化和新城疫抗体水平的影响

观察不同浓度的复方多糖、黄芪多糖（APS）、当归多糖（ASP）及淫羊藿多糖（EPS）对正常罗曼雏鸡免疫功能的影响。将260只1d龄健康罗曼雏鸡随机分为13组,每组20只。分别于1d龄皮下注射生理盐水以及复方多糖、APS、ASP、EPS,连续注射7d。于7、14、21、28、35、42、49、56d龄采血,检测淋巴细胞转化率和ND—HI抗体效价。试验结果表明：使用复方多糖、APS、ASP、EPS后,各试验组外周血淋巴细胞转化率和ND—HI抗体效价明显升高。复方多糖可使外周血淋巴细胞转化率和ND—HI抗体效价显著高于其他各多糖组。复方多糖、APS、ASP、EPS均可提高鸡的外周血淋巴细胞转化率和ND—HI抗体效价,其中复方多糖效果最好。     

复方中药成分对新城疫疫苗免疫雏鸡外周血T淋巴细胞转化和血清抗体效价的影响

选择4种中药成分（黄芪多糖、淫羊藿多糖、峰胶黄酮、人参皂甙）组成2个复方，各按3个剂量水平与新城疫疫苗混合后免疫雏鸡，以无佐剂苗和油乳苗为对照，分别于免疫后7、14、21、28、35、42d采血，用MTT法和微量血凝法测定T淋巴细胞转化和血清抗体效价的动态变化。结果表明。中药佐剂能显著促进淋巴细胞转化。提高血清抗体效价，多数时间点与油佐剂的效果相当，部分时间点显著强于油佐剂。综合判定方1高剂量和方2中剂量的效果最好。     

怀牛膝多糖对雏鸡疫苗免疫效果的影响

150羽14日龄蛋公鸡随机均分成3组,用新支二联弱毒苗点眼滴鼻免疫的同时,2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的怀牛膝多糖溶液,对照组注射生理盐水,每天注射1次,连续注射3次。分别于免疫后第7、14、21、28、35和42天各组随机抽取8只鸡翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制（HI）抗体效价,于免疫后第10、20、30、40和50天每组随机抽取5只鸡心脏采血,分离淋巴细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖的动态变化,流式细胞仪双染色法检测CD^4＋、CD^8＋T淋巴细胞含量,并放血致死称取体重和胸腺、脾脏、法氏囊的质量,计算器官指数。结果表明,怀牛膝多糖高剂量组的HI抗体效价、CD^4＋/CD^8＋比值和免疫器官指数都明显高于对照组,并且高剂量怀牛膝多糖可以显著促进T淋巴细胞增殖。提示怀牛膝多糖对鸡新支二联疫苗的免疫效果有明显的增强作用。     

鸡防御素Gal-13对雏鸡淋巴细胞增殖功能的影响

为观察鸡防御素Gal-13对雏鸡淋巴细胞增殖功能的影响,以Gal-13为研究对象,在体外培养雏鸡淋巴细胞,运用MTT法首先研究不同质量浓度的Gal-13对抗原刺激的雏鸡外周血淋巴细胞增殖功能的影响,然后选取1mg/L的Gal-13饲喂雏鸡,观察其各免疫器官和外周血淋巴细胞增殖功能的变化.结果发现:体外Gal-13(0.625～1.250 mg/L)提高淋巴细胞的增殖功能,但过高剂量的Gal-13(5～10 mg/L)抑制淋巴细胞的增殖.1 mg/L的Gal-13能够提高雏鸡中枢免疫器官淋巴细胞增殖功能,抑制脾脏淋巴细胞的增殖功能.结果表明,Gal-13能够提高中枢免疫器官的免疫反应,对免疫器官的作用具有一定选择性.     

芝芪菌质多糖的制备及其增强免疫活性的初步研究

为研究芝芪菌质多糖体外免疫活性增强作用,本研究采用水提、醇沉、离子交换层析等方法纯化芝芪菌质多糖,并对各多糖组分(GAP-1、GAP-2、GAP-3、GAP-3)进行小鼠脾细胞增殖、NK细胞活性以及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性的测定。结果表明:纯化的4种芝芪菌质多糖在10-3mg/mL～10-1mg/mL浓度范围内均能够显著增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应;在25mg/kg～100mg/kg剂量范围内均能够显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性,而且呈剂量依赖性,其中以GAP-3效果最为明显;对NK细胞活性也有不同程度的增强作用,其中,GAP-3在浓度为100μg/mL时,NK细胞的杀伤率为27%,与IL-2阳性对照组比较,有显著增强作用(p0.05)。本研究证明,纯化的芝芪菌质多糖具有较好的体外增强免疫活性,为芝芪菌质作为增强机体免疫力的饲料添加剂提供了理论依据。     

一定纯度中药复方多糖对鸡细胞免疫和体液免疫的影响

为筛选对鼠免疫增强效果显著的一定纯度中药复方多糖(cCHMPS)对雏鸡的最佳免疫增强剂量,本试验将300只1日龄雄性良凤青脚麻鸡随机分为6组,即空白对照组、盐酸左旋咪唑组、黄芪多糖组及cCHMPS高、中、低剂量组,每组各50只.分别于8日龄皮下注射生理盐水、盐酸左旋咪唑、黄芪多糖及不同剂量的cCHMPS,连续7 d,在免疫后第8、14、21、35、42天采血,测定外周血中T、B淋巴细胞增殖活性及血清中新城疫病毒抗体含量.试验结果表明,黄芪多糖和不同剂量cCHMPS均能显著或极显著促进外周血T、B淋巴细胞增殖(P<0.05;P<0.01),提高新城疫病毒抗体浓度,增强机体细胞免疫和体液免疫水平,且中剂量的cCHMPS的免疫增强效果最好.     

黄芪多糖对肉鸡外周血淋巴细胞与颈静脉内皮细胞间黏附的影响

本试验旨在研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharin,APS)对肉鸡外周血淋巴细胞(peripheral lymphocyte,PLC)与颈静脉内皮细胞(jugular vein endothelial cells,JVEC)间黏附的影响。以4种剂量的APS (0、200、600和1000 μg/mL)分别处理肉鸡JVEC和PLC,观察二者间黏附量的变化;以白介素-1(IL-1,1000 U/mL)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α,1000 U/mL)分别与4种剂量的APS(0、200、600和1000 μg/mL)共同处理JVEC和PLC,观察不同剂量APS对PLC与JVEC间黏附的影响,及对JVEC表面细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和PLC表面CD4⁺变化的调节。结果表明,600 μg/mL APS处理JVEC,可显著增加PLC与JVEC间的黏附(P<0.05);IL-1与高剂量的APS(1000 μg/mL)共同处理JVEC或IL-1与3种剂量的APS(200、600和1000 μg/mL)共同处理PLC,均能显著增加PLC与JVEC间的黏附(P<0.05);与对照组相比,TNF-α单独处理JVEC后可显著增加PLC与JVEC间的黏附(P<0.05);与对照组相比,IL-1与高剂量APS (1000 μg/mL)共同处理JVEC后可显著增加JVEC表面ICAM-1值(P<0.05),IL-1与高剂量APS (1000 μg/mL)共同处理PLC后可显著增加PLC表面CD4⁺阳性细胞百分率(P<0.05)。综上所述,APS调控PLC与JVEC间黏附受其剂量的影响,在本试验条件下,中、高剂量APS(600和1000 μg/mL)单独或与IL-1、TNF-α协同作用可增加肉鸡外周血淋巴细胞与颈静脉内皮细胞间的黏附,同时高剂量APS(1000 μg/mL)可通过改变血管ICAM-1和T淋巴细胞亚群CD4⁺的分泌(表达)发挥其免疫调节作用。     

阻断淋巴细胞糖皮质激素受体对鸡免疫功能的影响

为进一步证明糖皮质激素受体（ＧＲ）在介导淋巴细胞免疫功能中的作用,观察ＧＲ阻断鸡对马立克氏病病毒（ＭＤＶ）的感受性,用ＲＵ４８６阻断鸡淋巴细胞ＧＲ,当ＧＲ被阻断６０％以上时（ＲＵ４８６剂量为５０ｍｇ／ｋｇ）,鸡脾细胞诱生ＩＬ－２和ＩＦＮ活性及Ｔ、Ｂ细胞丝裂原刺激增殖活性均明显降低;外周血淋巴细胞、单核细胞、ＡＮＡＥ＋细胞减少;脾脏、法氏囊、胸腺重量与体重之比的相对重量减轻,淋巴细胞系统免疫功能呈低下状态。此时雏鸡对ＭＤＶ的易感性增高。当ＧＲ被阻断不足３５％时（ＲＵ４８６剂量为２５ｍｇ／ｋｇ）,对淋巴细胞系统免疫功能无影响。     

米糠多糖对健康雏鸡外周血T淋巴细胞转化和体液免疫的影响

为探讨米糠多糖对鸡免疫功能的影响,选用100只10日龄京白939蛋雏鸡,随机平均分为4组。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组从10日龄起分别灌服低、中、高3个剂量米糠多糖(50、100和200mg/(kg.d)),每天一次性灌服规定剂量,连续5d;Ⅰ组同时灌服生理盐水作为对照,1mL/只。在灌服米糠多糖前1d和灌服后7、14和21d,分别测定雏鸡外周血T淋巴细胞转化能力和血清IgG、IgA和IgM含量。在雏鸡14日龄时,对照组和米糠多糖处理组均实施新城疫(ND)疫苗免疫,间隔1周后进行禽流感(AI)疫苗免疫。分别在ND疫苗和AI疫苗免疫前1d和免疫后7、14和21d测定ND抗体和AI抗体效价。结果显示:(1)雏鸡灌服3个不同剂量米糠多糖后的7、14和21d,外周血T淋巴细胞转化能力均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),且以100mg/(kg.d)剂量组效果最好。(2)雏鸡服用3个剂量组米糠多糖后7、14和21d,血清IgG含量均高于对照组(P<0.05或P<0.01);血清中IgA含量,在14d时,低剂量组与对照组无显著差异,中、高剂量组显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);IgM含量在灌服米糠多糖后7d时,Ⅳ组高与对照组无差异(P>0.05);14d时,Ⅲ组与对照组无差异(P>0.05);米糠多糖其他剂量组在7和14d,血清IgM含量均高于对照组(P<0.05或P<0.01);21d时,米糠多糖处理组与对照组比较无显著差异。(3)雏鸡服用米糠多糖可以提高ND疫苗和AI疫苗免疫后的特异性抗体效价,且免疫效果与米糠多糖剂量呈正相关。试验结果表明,米糠多糖能够从促进蛋雏鸡外周血T淋巴细胞转化功能、提高血清免疫球蛋白含量以及提高疫苗免疫特异性抗体效价等方面调节健康雏鸡的免疫功能。     

黄芪多糖分级组分对鸡脾淋巴细胞增殖影响

目的：探讨黄芪多糖分级组分对鸡脾淋巴细胞增殖的影响。方法：将黄芪多糖经过不同浓度的乙醇进行分级沉淀,得到3个分级组分：A1、A2、A3;将320只鸡随机分为8组,分别皮下注射A1、A2、A3、A1＋A2、A1＋A3、A2＋A3、A1＋A2＋A3和蒸馏水,每隔7d各组随机捕杀鸡4只,培养脾淋巴细胞,NTT法测定黄芪多糖分级组分对鸡脾淋巴细胞增殖的影响。结果：A2、A3、A2＋A3、A1＋A2＋A3能显著促进淋巴细胞增殖。结论：黄芪多糖免疫功能的有效部位为A2、A3,尤以A2作用显著。