锗—132对健康及人工感染MDV雏鸡肝脏自由基代谢的影响

本文采用电子自旋共振（ＥＳＲ）自旋捕集技术研究了锗－１３２对人工感染马立克氏病毒（ＭＤＶ）雏鸡肝脏自由基代谢的影响。结果显示：健康对照组和健康加锗组雏鸡１０～６０日龄肝脏自由基和锗含量分别为０．４２４±０．０２３３、０．４２７９±０．０２７８×１０１０ｓｐｉｎｓ／ｇ．ｗ．ｗ．和０．０７９８±０．０１３４ｍｇ／ｋｇ、１１．２０１５±０．６９９８ｍｇ／ｋｇ，给雏鸡口服锗－１３２可明显提高肝脏锗含量（Ｐ＜０．０１），但对健康雏鸡肝脏自由基代谢没有影响。攻毒加锗组与攻毒对照组对比结果证实：Ｇｅ—１３２可明显降低人工感染ＭＤＶ雏鸡肝脏自由基产生和脂质过氧化物生成。实验结果从Ｇｅ—１３２抗自由基的角度，为Ｇｅ—１３２抗肿瘤病提供理论依据。     

锗-132对肉用雏鸡免疫功能的影响及其临床应用初探Ⅰ.锗-132对鸡马立克氏病抑制效果的观察

选用1日龄肉用雏鸡150只,随机分为两组,在人工感染鸡马立克氏病病毒(MDV)的基础上,分别饲喂基础日粮加100ppm锗-132(Ⅰ组)和基础日粮(Ⅱ组).临床观察60d,以琼扩试验定期对羽毛囊上皮鸡MDV特异性抗原、血清鸡MDV特异性抗体进行检测,同时进行病理学检查.结果,Ⅰ组的发病率、病死率及死亡率显著低于Ⅱ组,表明锗-132对鸡MD及其肿瘤病变的发生与发展有明显的抑制作用.     

雏鸡感染传染性法氏囊病病毒后血浆肿瘤坏死因子-α和花生四烯酸代谢物的动态变化

选取经传染性法氏囊病病毒(IBDV)弱毒苗免疫和未免疫的AA 鸡120 羽,研究了感染IBDV 强毒后血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和花生四烯酸代谢物水平的动态变化及相互关系。结果表明,攻毒后第1 天,未免疫攻毒鸡(A 组)血浆TNF-α即表现较大的变化,至第3 天,A 组和免疫攻毒鸡(B组)TNF-α显著高于未免疫未攻毒鸡(C组),至第5 天3 个组虽均下降,但A 组仍高于或明显高于B、C组,以后3 组间无明显差异;攻毒后的3～5 d,A 组血浆前列腺素E(PGE2 )上升或明显上升,高于或明显高于B、C组,B组虽也见上升但与C组无明显差异,5 d 后3 组均下降,同期各组相比无明显差异;血栓素B2 (TXB2 )除在攻毒后第3 天C组明显高于A、B组以及攻毒前水平外,其他时间各组间无显著差异;A、B组的6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)在攻毒后头5 d 内升高,但组间无差异。分析3 组TNF-α与几种花生四烯酸代谢物水平间的相关性发现,仅A 组的TNF-α分别与PGE2 、TXB2 和6-keto-PGF1α呈显著正相关。     

禽腺病毒4型感染病理组织学观察

将30只1日龄SPF鸡随机分为2组,其中攻毒组20只,对照组10只。攻毒组按每只0.2mL腹腔注射禽腺病毒4型(FAV-4)病毒液,对照组不做处理,隔离饲养,临床观察2周。攻毒后第3天攻毒组开始出现死亡,将死亡鸡解剖观察各器官大体病变,经聚合酶链式反应(PCR)检测为FAV-4后,采集心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏制作石蜡切片,观察病理组织学变化。结果显示,攻毒组死亡鸡只无明显临床症状而突然倒地死亡;主要剖检病变为心包积液、肝脏肿大,个别可出现脾脏肿大、肺脏淤血、肾脏肿大;病理组织学变化为肝脏、肺脏、肾脏淤血,细胞变性坏死;而对照组无任何异常症状和病理组织学变化。     

鸡马立克氏病(MD)与淋巴细胞糖皮质激素受体(GR)相关性研究Ⅰ.MDV对鸡外周血淋巴细胞GR及T细胞转化率的影响

本实验对马立克氏病病毒(MDV)引起鸡外周血淋巴细胞(PBL)糖皮质激素受体(GR)含量及T细胞对丝裂原(PHA)刺激反应的变化规律作了观察,同时比较了注射MD二价疫苗对以上指标的影响.结果表明:(1)攻毒鸡PBL GR含量及T细胞对PHA刺激转化率均明显降低,而且两者变化之间呈现正相关关系(γ=0.8580,P<0.01);(2)攻毒后出现特征性MD肿瘤病变鸡的PBL GR含量较未出现病变鸡的更低,但攻毒鸡不论是否出现特征性病变,其T细胞对PHA刺激转化率均明显降低;(3)注射MD二价疫苗鸡的PBL GR含量及T细胞对PHA刺激转化率都显著高于攻毒鸡;(4)攻毒鸡血浆皮质醇含量不升高,提示攻毒鸡PBL GR含量下降与激素负反馈调节无关.     

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗的安全性和免疫效力试验

用鸡法氏囊病免疫复合疫苗(IBDV-Icx)和常规IBD活疫苗分别免疫1日龄商品鸡和SPF鸡,进行疫苗的安全性及免疫效力比较.免疫后8d检测,IBDV-Icx免疫组鸡的法氏囊未见明显萎缩,而传统弱毒疫苗免疫组鸡的法氏囊萎缩明显;免疫后28d各组用IBDV标准强毒株进行攻击,IBDV-Icx免疫组鸡的攻毒保护率均为10/10,常规IBD活疫苗对照组分别为8/10及9/10.免疫后3个月,IBDV-Icx免疫组血清抗体可达AGP1∶32,攻击强毒仍为10/10保护,而常规IBD活疫苗免疫后2个月抗体AGP为0,攻毒保护率为1/10,免疫后3个月时攻毒10/10发病.     

评价牛型布鲁氏菌疫苗免疫保护力BALB/c鼠模型的建立

为建立评价流产布鲁氏菌疫苗株免疫保护力的小鼠模型,选取6周龄雌性BALB/c小鼠为试验动物,随机分为3组(n=40):A19免疫攻毒组、非免疫攻毒组和PBS对照组。A19免疫组腹腔接种BALB/c鼠A19 5.0×10⁴ CFU,非免疫攻毒组和PBS对照组均接种PBS液0.2 mL。免疫后45 d,A19免疫攻毒组和非免疫攻毒组BALB/c鼠以3.0×10⁴ CFU剂量的2308强毒株攻击,攻毒后15和45 d分别剖杀小鼠,取小鼠脾脏称重、细菌分离、病理组织学检测。结果表明,攻毒后15 d,A19免疫攻毒组与未免疫攻毒组和PBS对照组之间克脾指数差异显著(P<0.05);攻毒后45 d,A19免疫攻毒组与PBS对照组的克脾指数差异不显著(P>0.05),与未免疫攻毒组克脾指数差异显著(P<0.05);免疫攻毒组的小鼠组织病理变化明显轻于未免疫攻毒组。结果表明,用BALB/c鼠为试验动物,以A19为疫苗参考株建立动物实验模型可以应用于牛型布鲁氏菌疫苗免疫保护力评价。     

猪流感(H3N2亚型)油乳剂灭活疫苗的免疫及攻毒试验

用不同剂量的猪流感H3N2亚型油乳剂灭活疫苗免疫15头断奶仔猪,每组5头,四周后二免。另外3头为非免疫攻毒对照组。首免后第10周用同源病毒攻毒,分别在免疫前及免疫后2、3、4、6、8、10、11周采血,分离血清,用HI试验检测其抗体滴度。攻毒后通过免疫猪和非免疫攻毒对照猪临床、病理变化及病毒分离等方面的比较,评价疫苗的保护效果。结果中、高剂量组的抗体滴度明显高于低剂量组;免疫组和对照组攻毒前后体温无显著差异(P>0.05),免疫组病理保护明显好于非免疫攻毒对照组;鼻液和肺中的病毒分离率比较,免疫组明显低于非免疫攻毒对照组。本研究表明,用该疫苗免疫后猪对同亚型的病毒攻击有一定的保护作用。     

PRRSV变异株活疫苗和灭活疫苗免疫特性的研究

为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株疫苗的免疫机理和明确PRRSV变异株活疫苗和灭活疫苗各自的免疫特性,本实验分别采用PRRSV变异株(HuN4)活疫苗和PRRSV变异株(JXA1)灭活苗免疫PRRSV抗原和抗体阴性的健康断奶仔猪,免疫后21d用PRRSV变异株HuN4强毒攻毒,ELISA方法检测血清中PRRSV特异的抗体水平及TNF-α、IFN-α、IL-1、IL-6和CRP细胞因子水平,荧光定量RT-PCR方法检测病毒血症的发生和持续情况,并取主要器官进行病理组织学观察。结果表明:HuN4活疫苗组免疫后14d便可检测到PRRSV特异性抗体,攻毒后5d各细胞因子水平升高,攻毒后21d病毒血症完全消失,免疫后各器官没有明显病理变化,攻毒后临床症状和各组织器官病理变化轻微;JXA1株灭活苗组免疫期间没有检测到PRRSV特异性抗体,攻毒后5d～9d各细胞因子水平升高,攻毒后病毒血症持续存在,免疫后各器官有轻微病理变化,攻毒后临床症状和各组织器官病理变化比HuN4活疫苗组严重,但比对照组明显减轻。本实验表明,HuN4活疫苗能够快速有效的激发机体的体液免疫反应,在抵抗PRRSV变异株HuN4强毒攻毒时,临床症状明显优于JXA1灭活苗。     

珍珠鸡用马立克强毒攻击后的病理学观察

１日龄伊莎珍珠鸡和对照组红波罗雏鸡经腹腔用鸡马克强毒攻击，另设不攻毒珍珠鸡作对照，分别卫离饲养至１０周龄。对试验期死亡的鸡及试验结果时扑杀的鸡及珍珠鸡剖检，用肉眼观察大体病变及病理检查。结果表明，红波罗鸡于试验期内死亡率为４０％，并均可肝、肠、睾丸、卵巢等处到肿瘤，珍珠鸡则无一死亡，也不表现肿瘤。病理切片观察到攻毒珍珠鸡部分器官只出现少量的淋巴细胞炎性浸润。初步认为这是珍珠鸡对马立克病毒的一种防御     

鸡传染性支气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LT95Ⅰ株病毒攻击的免疫保护

将共表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)SI基因和鸡干扰素.丫基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγ S1)接种4周龄SPF鸡,免疫3周后用同源(LX4株)及异源强毒株(LTJ951)攻毒,评价重组疫苗对异源病毒的保护作用.结果显示,重组疫苗接种1周后,免疫鸡产生抗IBV的抗体;而且外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞的含量略高于非免疫对照组;攻毒后,异源强毒株攻毒的免疫组CD4+T淋巴细胞呈下降趋势,并且该组低水平CD4+的状态一直持续到试验结束,而其他组CD4+T淋巴细胞均迅速上升,峰值达到14.5%;同源强毒株攻毒的免疫组CD8+T淋巴细胞呈高水平的表达,而其他组攻毒后均无明显变化;保护率结果显示,同源强毒株攻毒免疫组的发病率和死亡率为21.43%和0%,与其他各组相比均有显著差异;另外同源强毒株攻毒的免疫组病理损伤与异源强毒株攻毒的试验组相比明显减轻,其排毒时间和排毒量也均有所减少;强毒攻毒后所有试验组体重无显著差异.以上结果可以说明,重组疫苗能对同源强毒株产生较好的免疫保护,但不能对遗传关系较远的强毒株产生有效的免疫应答.     

速康解毒口服液对家兔茎直黄芪中毒的疗效研究

以茎直黄芪人工饲喂2月龄实验家兔中毒,设置对照组、攻毒组、攻毒解毒治疗组,每组实验家兔4只,建立中毒及解毒病理模型,在28d、45d(中毒死亡)、49d(解毒组及空白组处死),研究实验家兔体内的病理变化规律,并对速康解毒口服液治疗效果进行评估。实验结果表明,攻毒组、攻毒解毒解毒组实验家兔在18d左右出现中毒症状,攻毒组Ⅱ号在28d中毒死亡,在第29d时对解毒组利用速康口服液解毒治疗均成活。病理学切片观察表明,攻毒组试验家兔表现为大部分脏器均出现淤血、炎症、坏死等病理变化,解毒治疗组出现轻度淤血、轻度的细胞变性。研究表明速康解毒口服液能有效提高α-甘露糖甙酶活性,解毒组试验家兔病理组织学观察结果表现轻微,证实速康解毒口服液具有较好的解毒效果。     

雏鸡在感染IBDV后红细胞免疫功能变化的研究

在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０～５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后红细胞免疫功能的变化。结果表明：从以ＩＢＤＶ攻毒前１天到攻毒后头５天内,未免疫攻毒鸡（Ａ组）和免疫攻毒鸡（Ｂ组）ＲＢＣ－ＣＲ１花环率降低或显著降低,而未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）没有类似变化,高于Ｂ组,明显高于Ａ组,以后Ａ和Ｂ组逐渐回升到攻毒前水平。Ａ和Ｂ组ＲＢＣ－ＩＣ花环率在ＩＢＤＶ攻毒后第５天明显降低,均显著低于Ｃ组水平,以后Ａ组仍处于较低水平上变动,Ｂ组即逐渐回升,三组比较,Ａ组仍低于Ｃ组,同时也低于Ｂ组。     

雏鸡在感梁IBDV后血浆cAMP,cGMP和IL—2水平变化

在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０－５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ＩＬ－２水平动态变化。结果表明：示免疫攻毒鸡（Ａ组）、免疫攻毒鸡（Ｂ组）和未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）在ＩＢＤＶ攻毒前１天血浆ＣＡＭＰ和ＣＧＭＰ水平Ｂ组明显高于Ａ和Ｃ组,ＣＡＭＰ／ＣＧＭＰ幽会同样是Ｂ组高于或明显高于Ａ和Ｃ组,ＩＬ－２水平三组之间无明显差异。在攻毒后的头５天内,Ｂ和Ｃ组ＣＡＭＰ明显升高,而Ａ组     

鸡马立克氏病发生与细胞内HSP70 mRNA转录水平相关性研究

通过人工攻毒建立鸡马立克氏病肿瘤模型。利用荧光定量RT-PCR方法，研究肿瘤发生、发展过程中，HSP70 mRNA转录水平的变化。结果显示：攻毒21d后，试验鸡肝脏和脾脏内HSP70 mRNA的转录水平极显著升高，而疫苗组和空白组鸡肝脏和脾脏内HSP70 mRNA的转录水平差异不显著(P>0.05)。     

SW-BSA人工抗原疫苗对山羊的免疫评价

10只山羊随机分为攻毒对照组和免疫攻毒组。免疫攻毒组山羊经过2次免疫,检测血清效价达到较高后,2组山羊同时饲喂甘肃棘豆草粉,进行攻毒饲喂试验。攻毒组山羊出现明显中毒症状后处死,进行病理组织学观察。免疫攻毒组继续饲喂试验,以观察疫苗的保护效果。分别测定血液中各项生化指标,并进行病理组织学检查。结果显示,攻毒组山羊于饲喂草粉的第15~20天出现典型的中毒症状,免疫攻毒组于第50~55天出现中毒症状,比攻毒对照组延缓30~40d;攻毒后,攻毒对照组山羊血液中生化指标迅速改变,而免疫攻毒组表现渐进性变化,其中苦马豆素（SW）浓度、AST、ALP、LDH、BUN、α-mannosidase活性分别比攻毒对照组延缓27、24、27、30、24、30d达到较高或较低点;中毒山羊组织器官出现以急性中毒性缺血、缺氧和空泡变性为特点的病理变化。结果表明,SW-BSA人工抗原疫苗对山羊疯草中毒有一定的免疫保护作用。     

中药对雏鸡感染IBDV前后法氏囊相对重量及血清γ—球蛋白动态变化的影响

在雏鸡日粮中添加1%的中药,于30日龄时进行人工感染 IBDV 强毒,其结果添加中药组攻毒后3天法氏囊相对重量增加不明显(P>0.05),而未添加中药组却明显增加(P<0.05)。攻毒后10天时中药纽法氏囊的相对重量接近正常(P>0.05)。此外,攻毒后3～10天中药组血清γ-球蛋白的百分含量显著提高(P<0.05),且攻毒后10天与攻毒前相比差异极显著(P<0.01)。     

乳腺炎大鼠肺组织肥大细胞变化的研究

应用组织化学的方法,对正常及攻毒不同时相大鼠肺组织肥大细胞的数量、活力、分布范型和组化性质的动态变化进行了研究.结果表明,攻毒后大量的炎性细胞浸润肺泡隔、细支气管及肺小血管内壁和周围.并随攻毒时间的延长,急剧增多,均极显著高于攻毒前(P＜0.01),且在攻毒后24h达到最高峰,此时造成肺小血管的内皮细胞偶见脱落;同时不同时相肺组织肥大细胞及其脱颗粒的变化趋势与炎性细胞相吻合,除攻毒后12h为显著外(P＜0.05),二者其余均极显著高于攻毒前(P＜0.01).表明肥大细胞参与乳腺炎病理过程中所致肺组织损伤的病理进程.     

超强马立克病病毒株的致病性研究

拟对一株超强马立克病病毒(MDV)SD2012-1株的致病性进行研究。将60只SPF鸡平均分成未免组、HVT免疫组和CVI988疫苗免疫组3组。于1日龄时对其进行马立克病(MD)疫苗免疫,于10日龄时进行SD2012-1攻毒;每天观察攻毒鸡临床症状,对病死鸡进行病理剖检和组织学观察;用PCR反应对感染鸡进行MDV跟踪监测。病理学研究结果显示:攻毒后第2周,试验鸡有轻微组织病变;攻毒后第6周,试验鸡有眼观病变,镜检有散在的肿瘤细胞团块;攻毒后第9周,试验鸡有明显的眼观肿瘤病变,镜检有大量肿瘤细胞聚集;SD2012-1可以突破CVI988疫苗免疫,引起高达30%的鸡发病。PCR跟踪监测结果显示:攻毒后第5天,未免组和HVT免疫组可检出MDV;攻毒后第10天,未免组和HVT免疫组阳性检出率均为100%,CVI988免疫组阳性检出率为30%;攻毒后第20天,3组试验鸡阳性检出率均为100%;用PCR检测病死鸡的肝、肾、肌胃、肠系膜、十二指肠、心和法氏囊样品的结果均为MDV阳性;攻毒300d后,健康存活鸡的羽髓PCR检测结果均为MDV阳性。结果表明,HVT疫苗对于SD2012-1株几乎无保护作用,超强马立克病病毒SD2012-1株能够长期在免疫鸡体内存在,突破免疫保护,引起发病,这对国内防控鸡马立克病提出了严峻挑战。     

MDV对雏鸡血浆MDA含量与SOD活性的影响

为探讨丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)在雏鸡马立克病(MD)发病过程中的作用,研究了雏鸡在人工攻毒后血浆MDA含量与SOD活性的动态变化.结果表明,攻毒组接种马立克病病毒(MDV)后第14天,血浆中MDA的含量显著高于对照组(P＜0.05),第7天和第28天高于对照组,第56天时基本接近;血浆中SOD活性在第7天时对照组显著高于攻毒组(P＜0.05),第14天和第28天高于攻毒组,但差异不显著.表明雏鸡在感染MDV后血浆中MDA含量显著升高,SOD活性明显降低,对雏鸡MD的发病诊断有重要的指导作用.