五肽胃泌素对瘤胃微生物代谢的影响

胃泌素和IGF -I是动物体内广泛分布的激素。IGF -I已被证实为体内多种组织的促生长因子 ;胃泌素除刺激胃酸分泌 ,也有很强的促消化道细胞分裂 ,促DNA、蛋白质合成功能。然而 ,它们是否存在于瘤胃 ,以及在瘤胃内有什么作用却报道甚少。我们曾发现五肽胃泌素(PentagastrinPG)促进绵羊、山羊瘤胃微生物VFA生成和蛋白质合成 ,然而对其作用途径尚缺乏研究。本文检测唾液和瘤胃液中IGF -I胃泌素样免疫活性物质 ;研究胃泌素对瘤胃微生物挥发性脂肪酸代谢和微生物蛋白合成的影响 ,并应用特异性CCK/gastrin受体阻断剂———丙谷胺(Proglumide)研究胃泌素作用机理。(1)IGF -I和胃泌素放免测定 :唾液和瘤胃液样品收集自4头自由摄食稻草的青年公水牛(平均年龄1岁 ,体重(210±15.8)kg ,用RIA检测。(2)胃泌素对瘤胃微生物代谢的调节 ;晨饲后 ,从3头装有瘤胃瘘管、自由摄食稻草并添加精料(2.5kg/d)的青年公水牛(平均年龄1岁 ,体重(217±18.3)kg)采集瘤胃液 ,经4层纱布过滤 ,取滤液与培养液(含20 %瘤胃液 ,pH7.0)混合(1 :4) ,在39℃厌氧培养。实验分4组 :PG组加入终浓度为10-10M的PG ,丙谷胺组仅加入10-8M丙谷胺 ,PG +丙谷胺组则同时加10-10MPG和10-8M丙谷胺 ,对照组加入同体积缓冲液。结果表明 :(1)唾液和瘤胃液中胃泌     

幼龄反刍动物消化道微生物演替与消化道发育调控

消化道微生物在消化道形态结构和免疫系统发育过程中扮演重要角色。文章在综述消化道微生物演替与消化道功能分化关系的基础上,阐述了日粮和瘤胃微生物移植对幼龄反刍动物消化道微生物演替和消化道发育的调节作用。微生物通过刺激杯状细胞分泌黏蛋白和活性树突状细胞,调节免疫细胞分化,实现其对宿主免疫系统的调节;通过介导缺氧,激活JAK-STAT和JNK途径或胰岛素/胰岛素样生长因子信号途径调节肠道干细胞分化。相比于液体饲料,固体饲料在瘤胃中留存时间较长,能够促进瘤胃微生物定植和瘤胃代谢,进而促进瘤胃发育。瘤胃微生物移植可加速幼龄反刍动物消化道微生物演替和功能分化,但其对瘤胃微生物区系的影响弱于饲料,是一种潜在的免疫增效方法。     

水牛唾液蛋白胃蛋白酶解产物中总阿片样生物活性的测定

研究唾液中的生物活性物质是受人注目的领域。许多研究表明 ,唾液中除含有多种激素和细胞因子外 ,还含有丰富的蛋白质。这些蛋白质(特别是粘蛋白)含有脯氨酸富集片段 ,这些片断抵抗蛋白酶的水解。因而推测 ,唾液进入消化道后有可能解放一些活性肽段。本试验旨在探讨唾液蛋白经胃蛋白酶水解是否有阿片样活性物质产生。自5头体重(450±50kg)公水牛口腔采集混合唾液 ,测定蛋白含量。加入胃蛋白酶 ,在 pH1.4 ,39℃孵育2小时后 ,将酶灭活。以孵育前将酶灭活作对照。调 pH7.2,8500×g离心30分钟。取上清液和1640培养液各5ml与生长旺盛的NG108 -15细胞一起在37℃孵育15分钟。收集细胞 ,提取细胞内cAMP,放免测定cAMP的含量。发现NG108 -15细胞膜上有丰富的阿片受体 ,受体激活后可引起细胞内cAMP减少 ,这种作用可被特异性的阿片受体阻断剂纳洛酮(Nal)反转。因此 ,本试验对照组与试验组分别作加Nal和不加Nal2种处理 ,以细胞cAMP与胞浆蛋白比值变化判定酶解液是否具有阿片样生物活性。试验结果表明 ,试验组细胞cAMP含量 :不加Nal显著低于加Nal(20.103±2.473)ng/mg蛋白质vs(25.850±2.461)ng/mg 蛋白质(P<0.01) ;对照组不加Nal差异不显著(27.177±3.738)ng/mg 蛋白质vs(27.337±3.461)ng/mg 蛋白质(P>0.05)。结果表     

反刍动物瘤胃上皮的生长发育及其调节

瘤胃是反刍动物消化代谢和营养吸收最重要的场所之一.瘤胃内分解产生的小分子营养物质大部分通过瘤胃上皮直接吸收,因而瘤胃上皮的生长发育和功能完善直接影响到反刍动物的生产性能.伴随着反刍动物机体的发育,从胎儿期到出生期直至成年,瘤胃上皮的形态结构及生理功能都在持续不断的发展和完善.其生长发育受到日粮营养水平(如日粮营养水平、饲料的精粗料比例、物理性质、代谢产物和饲喂制度等)、瘤胃内代谢产物(如短链脂肪酸、葡萄糖、多胺等)、神经内分泌(如胰岛素、胰岛素样生长因子-1、表皮生长因子、转化生长因子-α、胰高血糖素、生长激素、生长抑素等)等多重因素的影响.笔者主要对瘤胃上皮的生长发育过程及其调节因素进行了综述.     

公水牛睾酮含量和年龄、季节的关系

公水牛迟钝的性欲及其比黄牛短的生殖生命吸引着我们研究它的睾酮情况。应用放射免疫分析技术在一年中的不同季节测定了53头生长水牛和93头屠宰成年水牛的睾酮水平。3月龄水平为1.16±0.54ng/ml,4月龄2.01±1.06ng/ml,8月龄0.31±0.03ng/ml,10月龄0.56±0.21ng/ml,16月龄0.59±0.19ng/ml,3月龄和4月龄较高。睾酮水平和年龄的相关不显著。在成年公水牛中,该激素的最     

超数排卵处理沼泽型水牛血清E_2和P_4浓度变化研究

研究利用3种不同的方法超数排卵处理沼泽型水牛,比较研究不同方法处理时水牛血清雌二醇(E2)、孕酮(P4)浓度变化规律。结果表明:进口FolltropinR○-V、国产FSH和PMSG超数排卵处理沼泽型水牛,血清E2浓度峰值分别出现在氯前列烯醇(PGc)处理后的48 h([142.45±94.66)pg/mL]、72 h([87.78±29.62)pg/mL]、48 h([126.38±92.33)pg/mL];血液中P4浓度最低值分别出现在PGc处理后的48 h([0.76±0.21)pg/mL]、24 h([1.18±0.12)pg/mL]和144 h([0.82±0.06)pg/mL]。     

小麦保护处理对山羊内分泌影响的研究

近年来的研究证明乳汁中酪蛋白在消化道降解过程中能产生酪啡肽(7肽) ,在一些谷物蛋白的酶解过程中也同样能产生这类生物活性多肽。我们的前期工作发现 ,小麦的胃蛋酶水解产物富含阿片肽样活性物质。本文主要研究经保护处理的小麦对反刍家畜采食及内分泌代谢的影响。在4只空怀母山羊进行试验 ,平均体重(24.75±0.73)kg,试验期小麦进行保护预处理 ,精料由88.5 %小麦全粉、10 %磷酸氢钙、0.5 %尿素组成 ,每天喂给400克/头(分2次) ,自由采食青草 ,自由饮水。对照期、试验期各25天。连续取血样结果显示 ,对照期和试验期相关平均值分别为 :采食量(4.656±0.231)、(6.413±0.039)kg/d(P≤0.001) ,血清生长激素总体水平(GH)为(23.170±0.891)ng/ml、(26.792±1.003)ng/ml(P≤0.01);血清胰岛素(18.103±1.035)ng/ml、(23.983±1.600)ng/ml(P≤0.01) ,血清氨基氮(0.102±0.003)mM/ml、(0.140±0.004)mM/ml,血清氨氮(0.206±0.012)mM/ml、(0.086±0.006)mM/ml(P≤0.01)。结果表明 ,小麦经保护处理后能够显著促进采食量并提高内分泌水平。这对于提高饲料利用率、促进生长具有重要意义。     

瘤胃上皮细胞增殖和物质转运分子机制的研究进展

瘤胃作为反刍动物特有的消化器官,对饲粮营养消化利用具有重要作用。近50年来,人们对瘤胃上皮细胞发育和物质转运做了大量研究,重点聚焦于瘤胃上皮细胞增殖分子机制及相关转运蛋白调控通路的探索,如胰岛素样生长因子(IGF)和表皮生长因子(EGF)参与调控葡萄糖的转运,钠氢交换蛋白(NHE)、单羧酸转运载体(MCTs)和G蛋白偶联受体(GPR)参与瘤胃上皮细胞短链脂肪酸(SCFA)的转运等。尽管如此,我们对于瘤胃发育的内在机制了解非常有限,本文针对反刍动物瘤胃上皮细胞增殖和物质转运分子机制的研究进展进行了综述,对于进一步理解瘤胃上皮细胞发育过程及建立最佳的反刍动物营养供给策略具有重要意义。     

开食料对犊牛生长发育的影响

利用20头8日龄黑白花公犊研究开食料中添加乙酸钠和瘤胃酶制剂对其生长发育的影响,持续60天。结果表明:开食料及添加剂对公犊生长有明显的促进作用。试验组总增重、胴体、腓肠肌重以及瘤网胃重量均显著高于对照组,分别为:31.3±1.33kg,37.2±1.16kg,0.624±0.02kg,1.30±0.07kg。而对照组相应为:26.70±0.95kg,33.3±1.16kg,0.555±0.01kg,1.06±0.04kg。肌肉组织代谢分析表明:开食料及添加剂具有加强组织代谢,促进肌肉蛋白合成之功效。试验组腓肠肌总RNA 和 RNA/干重比对照组分别提高20.89%(P<0.01)和10.83%(P<0.01),GPT/DNA 增加46.32%(P<0.05)。血清三碘甲腺原氨酸(T_3)浓度提高14.28%(P<0.05)。提示:开食料中添加乙酸钠和瘤胃酶制剂能促进瘤胃发育,改善代谢过程,提高生长速度。     

真胃唾液灌注对山羊门静脉引流区营养物质吸收和肝脏代谢的影响

传统观点认为反刍动物的唾液进入瘤胃而调节水盐平衡 ,影响瘤胃消化代谢 ,但近来研究表明有相当大一部分唾液直接进入真胃发挥作用。进入真胃的唾液对反刍劝物胃肠运行的影响已有报道 ,但对营养物质的吸收是否有作用 ,还未见报道。本试验经真胃灌流唾液观察其对山羊门静脉引流区营养物质吸收的影响。在体重(15.4±2.5kg)6头羯山羊上安装门静脉、肝静脉、肠系膜静脉和股动脉慢性血管瘘和真胃瘘管。动物自由采食青干草 ,每天每头补喂精料200g(早晚各100g)。采用自身对照试验设计 ,分试验期和对照期。试验期从9 :00到12 :00经真胃瘘管均匀灌注唾液 ,而对照期是灌注与唾液 pH相同的人工唾液。灌流量500ml/3h。从8 :00到13 :00每隔1h采血样一次。同时用PAH法测门静脉引流区血流量。结果显示 ,试验期门静脉引流区总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸(C2)、丙酸(C3)的净流量分别比对照期提高11.96 %(2.34vs2.06mmol/min,P<0.05)、5.61%(1.86vs1.76mol/min,P<0.05)、13.76 %(0.372vs0.32mmol/min,P<0.01) ;游离脂肪酸(FFA)和葡萄糖净流量分别提高16.42%(0.716vs0.615mmol/min,P>0.05)和4.49%(4.124vsA4.039mmol/min,P>0.05) ;而氨氮净流量下降7.37 %(2.172vs2.233mmol/min,P<0.05)。肝脏TVFA、C2、C3 和FFA净流量均明显     

广西水牛唾液和血清生殖激素在发情周期的变化规律及相关性分析

[目的]对广西水牛发情周期唾液和血液中雌激素(E2)和孕酮(P4)的浓度变化规律及相关性进行了分析,为进一步探讨水牛发情规律来指导生产提供依据。[方法]采用酶联免疫分析方法(ELISA)测定发情母水牛血液和唾液中E2(雌二醇)和P4(孕酮)的浓度变化,并对血液和唾液的激素变化规律进行了相关性分析。[结果]广西水牛血液和唾液中的E2和P4呈波动性变化,结果表明,发情前期,唾液中P4浓度一直维持在6.57.1ng/mL,第13天达到11.09ng/mL以上,随后快速下降。唾液中E2浓度在发情前期第35天出现一个峰值178.528pg/mL,在1417d唾液中E2浓度显著升高,出现第二个峰值达到120.57pg/mL。唾液E2和P4浓度的变化趋势和血清E2和P4浓度的变化趋势基本一致,相关性较好。母水牛唾液和血清样品的P4浓度相关性显著(R=0.4080;P0.05),母水牛唾液和血清标本的E2浓度相关性显著(R=0.5113;P0.05)母水牛唾液E2和P4浓度相关性非常显著(R=0.7754;P0.01)。[结论]唾液和血液中的这两种激素水平起伏变化基本趋于一致,其相关性显著,可以作为监测水牛发情及预测排卵的可靠指标之一。     

双峰驼排卵机制的研究——Ⅲ输精诱导排卵前后外周血浆促黄体素、孕酮和17β-雌二醇的变化

为了研究双峰驼精液诱导排卵的机制,本文用放射免疫测定法对双峰母驼人工输精诱导排卵前后外周血浆促黄体素(LH)孕酮(P)和17β一雌二醇(E_2)的含量进行了测定。母驼在卵泡发育周期中,LH的基础水平为2.7±1.2ng/ml。输精后4小时LH达到高峰,峰值为6.9±1.0ng/ml,约为基础水平的2.6倍。输精后30～48小时内排卵。在卵泡自然萎缩前一天也出现一个LH小峰(5.3±2.5ng/ml)。 在卵泡发育周期中,血浆孕酮处于低水平(0.36±0.28ng/ml)。诱导排卵后第3天增加到1.73±0.74ng/ml,第8天可达2.40±0.86ng/ml。血浆雌二醇在卵泡发育周期中平均为26.8±9.0Pg/ml,到卵泡成熟时可达30.8±5.1pg/ml,排卵后立即下降到19.0±4.1Pg/ml。但在排卵后3天又上升到29.8±6.5Pg/ml,在其它家畜中未见这种情况。 实验中设置7种对照组,证明双峰驼的排卵仅仅是由具有生殖能力的公驼精液诱导产生的,表明在这样的精液中可能存在着与排卵有密切关系的诱导排卵因子。     

卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素、孕酮、睾酮、雌二醇水平的研究

本试验采用放射免疫法测定了卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素、孕酮、雌二醇和睾酮水平。测定结果,促黄体素水平卵泡囊肿为0.84±0.25ng/ml(n=12),黄体囊肿为0.83±0.23ng/ml(n=5);孕酮水平卵泡囊肿为0.56±0.30ng/ml(n=12),黄体囊肿为2.85±0.64ng/ml(n=5);雌二醇水平卵泡囊肿为28.44±22.47pg/ml(n=12),黄体囊肿为8.14±0.88pg/ml(n=5);睾酮水平卵泡囊肿为84.67±40.40pg/ml(n=12),黄体囊肿为51.98±7.77pg/ml(n=5)。认为卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素水平低于正常期奶牛的水平;卵泡囊肿奶牛血浆中孕酮水平低于1ng/ml,黄体囊肿奶牛血浆中孕酮水平高于1ng/ml;卵泡囊肿奶牛血浆中雌二醇水平较高;卵泡囊肿奶牛公牛相与体内高水平睾酮有关。     

水牛发情周期生殖激素变化规律及唾液结晶的分析

试验对水牛发情周期血清和唾液中雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)的浓度变化规律、水牛唾液结晶与卵泡发育变化分别进行了分析研究,为进一步探讨水牛发情规律、指导生产提供依据。采用酶联免疫分析法(ELISA)测定发情母水牛血清和唾液中E_2和P_4的浓度变化,并对血清和唾液的激素变化规律进行相关性分析。结果表明,水牛血清和唾液中的E_2和P_4呈波动性变化。发情前期,唾液中P_4浓度一直维持在6.50～7.10 ng/mL,发情第13天达到11.09 ng/mL,随后快速下降。唾液中E_2浓度在发情第3～5天出现一个峰值178.53 pg/mL,在第14～17天唾液中E_2浓度显著升高,出现第二个峰值179.10 pg/mL。母水牛唾液中E_2和P_4浓度的变化趋势与其在血清中的变化趋势基本一致,均呈显著相关(P0.05);唾液中E_2与P_4浓度呈极显著相关(P0.01)。水牛发情当天唾液结晶呈现明显的蕨类作物形状且分维值显著低于其他时间点(P0.05)。水牛发情周期唾液结晶图形的变化与卵巢卵泡发育基本同步,可作为监测水牛发情及预测排卵的可靠指标之一。     

水牛发情周期生殖激素变化规律及唾液结晶的分析

试验对水牛发情周期血清和唾液中雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)的浓度变化规律、水牛唾液结晶与卵泡发育变化分别进行了分析研究,为进一步探讨水牛发情规律、指导生产提供依据。采用酶联免疫分析法(ELISA)测定发情母水牛血清和唾液中E_2和P_4的浓度变化,并对血清和唾液的激素变化规律进行相关性分析。结果表明,水牛血清和唾液中的E_2和P_4呈波动性变化。发情前期,唾液中P_4浓度一直维持在6.50～7.10 ng/mL,发情第13天达到11.09 ng/mL,随后快速下降。唾液中E_2浓度在发情第3～5天出现一个峰值178.53 pg/mL,在第14～17天唾液中E_2浓度显著升高,出现第二个峰值179.10 pg/mL。母水牛唾液中E_2和P_4浓度的变化趋势与其在血清中的变化趋势基本一致,均呈显著相关(P<0.05);唾液中E_2与P_4浓度呈极显著相关(P<0.01)。水牛发情当天唾液结晶呈现明显的蕨类作物形状且分维值显著低于其他时间点(P<0.05)。水牛发情周期唾液结晶图形的变化与卵巢卵泡发育基本同步,可作为监测水牛发情及预测排卵的可靠指标之一。     

蛋白发酵产物外啡肽的构成与活性研究

利用人工瘤胃装置,选用经定向培育的瘤胃细菌体外发酵面筋蛋白,并适时提取发酵液进行了植物外啡肽构成与活性的研究。结果显示体外发酵11h,外啡肽的生物学活性最强,肽浓度也相对较高。以超滤结合纸层析法检测外啡肽的构成,所显示的色带表明为10～27肽。人工瘤胃装置的发酵参数pH6.412±0.207、总脱氢酶活性(TDHA)(1.037±0.045)U/mL,D600(细胞菌生长量)1.410±0.065,氨氮(NH3-N)(1318.36±140.68)mg/L,微生物总蛋白(MCP)(6.213±1.014)g/L。采用所制备的植物外啡肽对AA肉鸡肌肉注射不同剂量,同时注射新城疫疫苗,结果显示,试验组新城疫血凝抑制抗体滴度显著性高于对照组,7～35日龄的体增重也显著高于对照组,血清中生长激素(GH)、胰岛素(Ins)、三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)的浓度也显著高于对照组。每周每公斤体质量2mL的外啡肽剂量肌肉注射效果最好。     

母鹅抱窝期间血浆中PRL、P和17β—E2水平的变化

选择表现抱窝行为的母鹅7只,通过RIA方法测定了母鹅在抱窝期间PRL(催乳素)、P(孕酮)和17β—E2(雌二醇)水平的变化。抱窝伊始P、17β—E2含量分别为3.28±0.27ng/ml、71.74±6.45pg/ml。抱窝第11天17β—E2水平降至49.07±8.48pg/ml(P>0.05),而P水平略有升高直至第18天才出现显著下降(1.864±0.12ng/ml)。雏鹅孵出后P、17β-E2水平分别回升至2.71±0.29ng/ml(P>0.05)、142.86±19.00pg/ml(P<0.01)。休产期间P、17β—E2水平均表现一定程度的降低。血浆中PRL水平第一天为214.24±19.73uU/ml。以后呈缓慢上升趋势,抱窝第25天达到高峰395.89±29.75uU/ml(P<0.01),雏鹅孵出后PRL下降至276.32±16.10uU/ml(P<0.05),抱窝结束后PRL水平进一步降低,休产期间PRL降至最低点55.94±15.35uU/ml(P<0.01)。研究表明:PRL可以诱导以及维持母鹅表现抱窝行为,并可抑制卵巢性腺激素的生成与释放。     

反刍动物瘤胃内环境的调控

瘤胃在反刍动物营养代谢过程中有着不可代替的重要作用,大部分营养物质在瘤胃中消化,然后被消化道吸收利用。因此,为提高营养物质的利用率,对瘤胃内环境的调控是一个研究热点。本文综述了瘤胃在反刍动物三大营养物质代谢中的重要作用、神经内分泌对瘤胃代谢的调节以及影响瘤胃内环境的人工因素。     

中国水牛瘤胃纤毛虫分布与挥发性脂肪酸的研究

对中国广西西林水牛和摩拉水牛瘤胃纤毛虫种类分布进行了鉴定检测,并测定了其瘤胃液挥发性脂肪酸浓度,同时进行了比较研究。全部检出17属63种25型瘤胃纤毛虫,比以前进行的8种反刍动物瘤胃纤毛虫分布研究中出现的总数和每个宿主个体中出现的平均纤毛虫种数多,种类构成最复杂,其纤毛虫构成特点类似于东南亚地区水牛瘤胃纤毛虫构成特点。其中广西西林水牛中检出了Entodinium biconcavumsp n,是至今从未鉴定记载过的认为是新种的特殊种类。广西西林水牛检出13属54种20型、摩拉水牛检出16属45种11型瘤胃纤毛虫。广西西林水牛瘤胃纤毛虫平均密度为2.13×105/mL,摩拉水牛瘤胃纤毛虫密度为3.43×105/mL。中国水牛瘤胃纤毛虫属别构成中Entodinium属出现率最高,但两个水牛品种间存在明显差别,其他属别构成也不尽一致。这与不同品种原来的地理环境分布与饲养管理条件有关。广西西林水牛瘤胃总VFA浓度为75.60 mmol/mL,摩拉水牛的为58.74 mmol/mL。瘤胃总VFA含量中均为乙酸含量最高,属于典型的粗饲料发酵类型。     

饲粮中纤维的定义分类和功用

<正>充足的纤维是反刍动物唾液分泌、反刍、瘤胃缓冲和瘤胃壁健康所需要的。为了维持正常的瘤胃发酵功能,在反刍动物的饲粮中必须含有一定量的纤维物质。当饲粮中纤维含量过低时,就会引起低乳脂率、蹄病或低饲料转化率等问题。粗纤维、酸性洗涤纤维和中性洗涤纤维是饲