LRH—A对母驼排卵和受胎效果的影响

为探求LRH—A诱导双峰母驼排卵、受胎效果,应用放射免疫法测定了母驼冷冻精液输精前后外周血清孕酮含量的变化。5峰(头)输精并肌注LRH—A母驼,输精前孕酮值平均为0.15±0.02ng/ml,输精后第3天增加到0.52±0.13ng/ml,第7 天可达1.62 ±0.89ng/ml。怀孕驼第12天孕酮仍维持高水平,为1.72±0.31ng/ml;而未怀孕驼孕酮水平7天开始下降,第12天降为0.32 ±0.06ng/ml(p<0.05)。5峰母驼受胎3峰,产羔3峰。3峰仅输冷冻精液的母驼,输精前后孕酮水平显著低于肌注LRH—A母驼排卵后的孕酮水平(p<0.05),均未受胎,持续发情。     

双峰驼排卵机制的研究Ⅰ.促黄体素(LH)的放射免疫测定技术

本实验以羊参考制剂 NIH—LH—S_(18)为标准品,利用抗羊 LH 血清—放射性碘标记羊 LH 异源放射免疫测定系统(双抗体法)测定了双峰母驼卵泡发育期和精液诱导排卵前后血液中 LH 的水平。对此测定方法的特异性、灵敏度、准确度和精确度均分别进行了相应的检验,证明这一异源放射免疫测定系统可以对双峰驼血液中的 LH 进行测定,为双峰驼排卵机制的研究提供了一种有用的手段。测定时标准曲线的范围为0.125～32.0ng,灵敏度为0.1ng。一次测定内的变异系数为5.84％,测定间的变异系数为17.38％。应用此技术测得两头母驼的4个卵泡发育期中血液内 LH 的基础水平为2.70±1.29ng/ml;两例母驼在人工输精后5～8小时内血液中 LH 的峰值为11.20±4.67ng/ml,约为基础水平的4倍;经直肠检查,在 LH 峰值后40小时左右排卵。     

双峰驼排卵机制的研究——Ⅱ.精液的诱导排卵作用

双峰驼的排卵主要是由精液中的精清诱导发生的,阴道输入洗过的精子没有引起排卵。输精后是否排卵,和公驼精液的诱导作用及母驼个体的生理状况有关,排卵率约为86%。输精后的排卵时间与本交后的排卵时间一致。以2号公驼为例,精液1毫升能够诱导母驼排卵,但0.5毫升未引起排卵。精清中的诱导排卵物质能够耐受长期冰冻保存。公牛精液中也可能存在类似物质。肌肉注射 LH、LHRH 类似物及 HCG 能够引起排卵,但肌注及阴道输入 PGF_(2α)类似物后未排卵。     

宁夏滩羊发情周期血液中促黄体素(LH)、孕酮、雌二醇——17β含量的测定

用放射免疫测定法测定了宁夏滩羊母羊(13只)外周血清中促黄体素(LH)、孕酮及雌二醇—17β的含量及其变化。血清LH的含量,在黄体期,其值很低,为5.0±0.41ng/ml,到发情开始后约6—12小时增至75.13±17.64ng/ml。孕酮含量的变化,在周期的黄体期,其值最高为2.84±0.10ng/ml;而在发情开始到发情后第二天最低0.52±0.06ng/ml。雌二醇—17β的含量是在发情开始前6—24小时时上升的;其值的变化范围是从黄体期的14.86±1.24Pg/ml到发情开始时的38.7±5.8Pg/ml。     

卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素、孕酮、睾酮、雌二醇水平的研究

本试验采用放射免疫法测定了卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素、孕酮、雌二醇和睾酮水平。测定结果,促黄体素水平卵泡囊肿为0.84±0.25ng/ml(n=12),黄体囊肿为0.83±0.23ng/ml(n=5);孕酮水平卵泡囊肿为0.56±0.30ng/ml(n=12),黄体囊肿为2.85±0.64ng/ml(n=5);雌二醇水平卵泡囊肿为28.44±22.47pg/ml(n=12),黄体囊肿为8.14±0.88pg/ml(n=5);睾酮水平卵泡囊肿为84.67±40.40pg/ml(n=12),黄体囊肿为51.98±7.77pg/ml(n=5)。认为卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素水平低于正常期奶牛的水平;卵泡囊肿奶牛血浆中孕酮水平低于1ng/ml,黄体囊肿奶牛血浆中孕酮水平高于1ng/ml;卵泡囊肿奶牛血浆中雌二醇水平较高;卵泡囊肿奶牛公牛相与体内高水平睾酮有关。     

双峰驼精清诱导排卵活性成分的DEAE—纤维素柱层析分离及其生物活性

选用DEAE－纤维素离子交换柱对双峰驼精清进行分离，各层析组分用于大鼠垂体组织体外培养，并给母驼肌注有活性的组分，以RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。结果表明，驼精清经DEAE－纤维素柱分离后可得到5个蛋白组分（L1－L5），其中L3在大鼠垂体培养时引起LH释放明显增加（P＜0．05），FSH则无明显变化。给卵巢上无大卵泡发育的母驼肌注有活性的组分L3，可引起血浆中LH明显升高，FSH也无变化。由此表明，L3在体内外试验中均具有引起LH释放的生物活性，它可能是诱导排卵的活性因子或其成分之一。     

双峰驼精清诱导排卵活性因子的阴离子交换柱Q Hyper D层析分离及生物活性鉴定

利用阴离子交换柱QHyperD对双峰驼精清进行分离 ,大鼠垂体组织培养及母驼肌注活性组分 ,RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。实验结果表明 ,驼精清经QHyperD柱层析后 ,共得到 6个组分 (F1～F6 ) ,其中F3和F5在大鼠垂体组织培养实验中具有生物活性 ,可引起LH的明显释放 (P <0 .0 5 )。在体实验时给卵巢上有成熟卵泡的母驼分别肌注F3或F5 ,肌注后 5～ 7h ,LH的释放也明显增加 (P <0 .0 5 )。F3可引起母驼发生排卵 ,F5则不能 ,说明F3可能就是驼精清中的诱导排卵活性因子或其成分之一。另外 ,无论是F3或是F5 ,在体内外实验中均未能引起FSH的分泌发生显著变化     

关中驴产后期和发情期血浆17β-雌二醇、孕酮和睾酮浓度的变化

本研究应用放射免疫分析法,测定了关中驴产后期(n=18)和发情期(n=6)血浆17β-雌二醇(E_2)、孕酮(P)和辜酮(T)的浓度。测定结果表明,产后第一次发情前血浆E_2浓度较低(12.22±1.92pg/ml),第一次发情期逐渐上升,排卵前第一天和第二天达到较高水平(19.48±2.16pg/ml和20.41±3.27pg/ml,±SE,P<0.05),排卵后降至基础浓度。产后第一次发情前血浆P浓度较低(2.74±0.51ng/ml),排卵后逐渐上升,第四天和第五天显著和极显著高于排卵前P水平,血浆值为6.19±0.66ng/ml和8.09±1.09ng/ml(P<0.05和P<0.01)。产后第一次发情前血浆T浓度较高,发情期下降,排卵后逐渐上升,第五天和第六天显著和极显著高于发情期T水平,分别为313.11±37.57pg/ml和356.73±46.37pg/ml(P<0.05和P<0.01)。产后第一次排卵前P/E_2和P/T比值均较低,排卵后上升,第五天分别达到861和25.83。产后第一次发情前T/E_2比值较高,发情期下降,排卵后上升,第五天达到33.34。排卵前后间隔6小时采样的分析结果表明,排卵前第30～24小时,E_2浓度急剧上升达到峰值。排卵后P浓度于第78～96小时达到较高水平。血浆E_2与P、E_2与T均呈中等负相关(r=-0.42和r=-0.41)。P与T为极显著正相关(r=0.92)。周期性发情期血浆E_2、P、T浓度的分泌范型和产后第一次发情期基本相似。     

枫泾和长白青年母猪首次发情周期内血清中5种生殖激素含量变化

放射免疫法测定枫泾(FJ)和长白(L)青年母猪(各4头)首次发情周期内外周血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、17β-雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)、和睾酮(T)的含量。测定结果,初情期开始日龄FJ猪平均为104.3±11.50天,L猪为235.0±1.95天。两猪种首次发情周期内外周血清中同种生殖激素有相似的变化趋势。在首次情期内,FJ和L猪的FSH平均含量分别波动在28.6±8.6～49.4±6.0ng/ml和16.8±2.5～38.9±0ng/ml之间;FSH总平均含量FJ猪组(37.8±2.7)显著高于L猪(27.0±3.1ng/ml)P<0.05;FJ猪发情0～2小时的FSH平均含量(34.4±2.1ng/ml)极显著地高于L猪(22.2±1.7ng/ml)P<0.001。排卵前LH峰均值FJ猪组(5.31±0.75ng/ml)显著高于L猪组(1.83±0.75ng/ml)P<0.05。发情当天(0天)E_2达峰值,FJ和L猪组分别是30.5±3.9和20.4±5.3pg/ml,两者无显著差异(P>0.05)。FJ和L猪组各自的P_4(ng/ml)和T(pg/ml)分泌呈显著正相关,相关系数依次为γ_F=0.71,P<0.05,γ_L=0.95,P<0.01。LH、FSH的含量高很可能是FJ猪高排卵率的重要因素之一。     

关中驴分娩期血浆中孕酮和17β-雌二醇水平的变化

应用放射免疫分析法测定了13头怀驴关中驴分娩期的孕酮和17β-雌二醇水平。临近分娩时(分娩前4～14天),外周血浆17β-雌二醇水平逐渐升高,至分娩前1天出现低幅度波峰;而孕酮于分娩前3天上升之后,及至开口期一直未有特别改变。分娩前3天至胎衣排出期的孕酮和17β-雌二醇水平分别波动于7.10～8.17ng/ml 和30.3～57.6pg/ml 之间,无显著差异(PΚ0.05)。胎衣排出后,外周血浆两种激素的水平骤然下降,到胎儿排出后12小时,孕酮为2.12±0.31ng/ml,17β-雌二醇为13.8±1.6pg/ml,各相当于分娩前1天的26.7%和24.0%。本研究还确定了两种激素在脐静脉血浆与外周血浆中的含量呈平行变化:脐静脉血浆孕酮和17β-雌二醇同外周血浆对应激素的相关系数分别为0.93(P<0.01)和0.71(P<0.05)。此外,还发现尿水和脐静脉血浆17β-雌二醇水平均高于相应的羊水和脐动脉。     

东北梅花鹿发情期血浆中LH,雌二醇含量变化

本文用放射免疫测定法测定了5头发情期东北梅花鹿血浆中促黄体素(LH)和17β-雌二醇的含量。所得结果:LH在发情前(0.288～0.321ng/ml血浆)与发情后(0.364～0.841ng/ml血浆)都处于低稳水平(P>0.05),但发情时出现非常显著的高峰(2.742ng/ml)(P<0.01);雌二醇在整个发情前后没有出现显著的高峰(P>0.05),仅在发情前约24小时发现一小峰(16.4±4.4pg/ml血浆),发情后12小时发现一小峰(24.9±6.1pg/ml血浆)。结果表明,东北梅花鹿发情期血浆LH、雌二醇含量的时相变化与其他已研究过的鹿种及一些反刍家畜基本一致。     

同期排卵-定时输精程序对后备母猪繁殖性能的影响

本研究旨在从配种次数、配种时间以及促排卵药物的使用3个方面对后备母猪同期排卵-定时输精技术方案进行优化。将后备母猪随机分成6组：(1)自然发情对照组：母猪自然发情、配种;(2)简式定时输精组：使用烯丙孕素性周期同步化后母猪自然发情配种;(3)传统定时输精组：母猪性周期同步化后,经过孕马血清促性腺激素和戈那瑞林处理使得卵泡发育和排卵同步化,无需查情,固定时间输精;(4)两点式查情定时输精组：在传统定时输精的基础上增加了注射促排卵药物时和配种后24 h 2个查情、配种时间点;(5)诱导发情促排实时输精组：性周期和卵泡发育同步化后,母猪发情时注射戈那瑞林促排卵,实时输精;(6)诱导发情实时输精组：母猪性周期和卵泡发育同步化处理后,实时输精。使用B超监测各组母猪卵泡发育和排卵情况,评价不同程序对母猪发情时间、排卵集中度、卵泡囊肿和繁殖性能的影响。结果显示：与简式定时输精组相比,注射外源促性腺激素改变了卵泡生长速度和排卵时间,缩短了最后一次饲喂烯丙孕素到发情的间隔时间,但是并没有改变发情-排卵间隔时间和排卵前卵泡大小。诱导发情促排实时输精组母猪妊娠率（93.52%vs 76.85%）和分娩率（8...     

利用雌二醇处理,诱使产后肉用母牛排卵

利用201头乏情肉用母牛研究埋植雌二醇对诱发产后卵巢周期的影响。选自4个农场有2个泌乳期以上的母牛,用雌二醇和产后时期作为主要处理,以2×3因子排列进行试验。在同一农场内依产犊资料随机抽取母牛,耳根埋植17β—雌二醇21天, 不埋植的作为对照。在埋植时,把产后时期划分为。产后≤25,26—39和≥40天,这3个阶段反映了下丘脑—垂体对雌二醇敏感性的潜在变化。在埋植嵌入时,埋植后14天,取去埋植(21)、取去埋植后14天(35天)分别采血样测定孕酮和对卵巢进行直肠检查,以估测处理对排卵反应。在处理14天时,对照和雌二醇处理母牛的血中,雌二醇浓度平均分别为3.2±1.0和23.1±4.7pg/ml。在试期内,在产后26天用雌二醇处理的和对照组母牛比较,可提高排卵母牛的比例。母牛第一个检测有排卵的产后平均天数似乎没有差异。     

中国美利奴军垦型细毛羊繁殖周期中NAG活力与发情排卵的关系

1998～1999年测定了中国美利奴军垦型细毛羊正常繁殖周期中血清N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活力与孕酮(P4)浓度,并探讨了它们与发情排卵的关系.结果表明,母羊在休情期的NAG活力为26.98U/L±1.65U/L,P4平均含量小于0.1ng/ml.发情排卵当天(0天)NAD活力为51.12U/L±5.43U/L,P4平均含量为0.236ng/ml±0.07ng/ml.发情后1天(+1天)NAG活力为38.35U/L±3.78U/L,P4平均含量为5.256ng/ml.经t检验,0天和+1天的NAG活力和P4含量差异十分显著(P＜0.01).提示NAG活力变化可以作为简便、快速预测母羊发情排卵的指标.     

双峰驼精添诱导排卵活性因子的阴离子交换柱Q Hyper D层析分离及生物活性鉴定

利用阴离子交换柱Q Hyper D对双峰蛇精清进行分离，大鼠垂体组织培养及母驼肌注活性组分，RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。实验结果表明，驼精清经Q Hyper D柱层析后，共得到6个组分（F1－F6），其中F3和F5在大鼠垂体组织培养实验中具有生物活性，可引起LH的明显释放（P＜0.05）。在体实验时给卵巢上有成熟卵泡的母驼分别肌注F3或F5，肌注后5－7h，LH的释放也明显增加（P＜0.05）。F3可引起母驼发生排卵，F5则不能，说明F3可能就是驼精清中的诱导排卵活性因子或其成分之一。另外，无论是F3或是F5，在体内外实验中均未能引起FSH的分泌发生显著变化。     

雌酮主动免疫对美利奴母羊发情产羔和生殖内分泌的影响

20头母羊在配种季节开始前6周和3周,用雌酮免疫原免疫2次(E组),13头不作处理为对照(C组)。免疫不影响母羊正常发情,可使母羊产羔率由115.38％提高到156.25％,发情当天的LH水平显著提高(3.06±0.61对1.93±0.88miu/ml);发情周期黄体期的孕酮水平亦增加,周期12天时差异显著(9.31±3.53对3.71±0.92ng/ml);整个发情周期内E组的睾酮水平显著高于C组,而17β-雌二醇水平两组间无差异。     

优势卵泡选择、细胞功能转变和排卵

一、动物优势卵泡的选择 哺乳动物每个发情周期中有多个卵泡生长发育,腔前卵泡阶段不需要FSH的作用,可进行性地发育到有腔卵泡形成时期,FSH促使其形成腔。排卵前FSH的唯一作用是刺激雌二醇致敏的腔前卵泡~(1-4),同时使上个周期的有腔卵泡迅速发育起来,但并非所有的卵泡都能排卵,这就涉及到哪些卵泡终将成为优势卵泡的问题。 牛在每个发情周期中,有2～3个卵泡发育波,每个波中只有1～2个卵泡变为优势卵泡,其它卵泡则闭锁~(5-9)。目前认为FSH不足以支持所有排卵前卵泡发育,尽管同一时间发育的卵泡受相同血液循环供应,但每个卵泡微环境仍有差异,健康卵泡具有较高雌二醇/雄激素转换比率和较多FSH及LH等受体~(10-,11)。排卵前的     

姜曲海母猪发情周期性腺激素及其子宫受体含量的变化规律

以长白猪为对照,测定了姜曲海母猪发情周期血浆中雌二醇和孕酮及其子宫受体含量。发现发情期血浆雌二醇的峰值为58.3±3.9pg/ml,与长白猪比差异不显著。间情期孕酮的最高水平和平均水平均比长白猪高(23.25±1.36对14.28±1.42ng/ml和18.56±1.42对11.76±0.57ng/ml,P<0.01)。发情期和间情期的细胞质雌二醇受体(CER)分别为 410±30.3和367±14.2fmol/mgDNA,其kd值分别为4.8±0.65和4.0±0.8nmol;细胞核雌二醇受体(NER)分别为1390±195.3和620±28.9fmol/mgDNA,其kd值为6.6±2.1和4.4±1.3nmol;细胞质孕酮受体(CPR)分别为364±56.0和147±46.0 fmol/mgDNA;细胞核孕酮受体(NPR)分别为337±51.8和184±67.0fmol/mgDNA。发情期和间情期子宫NER含量较长白猪高(P<0.05),说明此时姜曲海母猪子宫对雌二醇具有较高的敏感性。     

银狐繁殖期血浆主要激素变化及其对繁殖功能的调控

通过放射免疫测定技术测定母银狐发情前期和发情期外周血浆雌二醇-17β[E2]、孕酮(P4)浓度以及公狐睾酮(T)浓度,并分析这些技术的变化及其对繁殖功能的调控.结果表明,银狐初配前2～3d,E2浓度达峰值(240.85±39.98)pg/mL,在母狐接受跨时E2浓度降至(146.95±38.21)pg/mL,而在发情前期和发情期,其孕酮浓度范围是0.91～77.43ng/mL,峰值是(54.77±23.66)ng/mL,在雌二酮峰值时,孕酮浓度为(28.57±21.21)ng/mL,配种时,P4浓度(33.12±22.56)ng/mL,初配后4d(排卵结束),P4达(48.28±34.84)ng/mL.公狐配种期,T浓度范围(127.2±444.4)pg/mL,,峰值是(341.2±103.2)pg/mL.     

湖羊、三北羊发情期外周血液中促黄体素、雌二醇和孕酮含量的变化

用放射免疫法测定了湖羊和三北羊发情周期外周血液的LH、17β-雌二醇和孕酮的含量。发情的LH峰值:湖羊为126.54±7.71ng/ml,三北羊为123.38±9.6ng/ml(1)>0.05)。发情开始时间距LH峰值在两种羊之间有显著差异(P<0.01)。整个情期湖羊雌二醇含量高于三北羊(P<0.05),湖羊为36.18±1.52pg/ml,三北羊为28.72±1.92pg/ml,两种品种羊在周期1—3天孕酮含量维持低水平,周期的5—13天有一峰值,湖羊为7.92±0.18ng/ml,三北羊为6.10±0.1ng/ml,有极显著性差异(P<0.01)。在第13天孕酮含量开始下降,第16天下降到最低值。