水牛发情周期生殖激素变化规律及唾液结晶的分析

试验对水牛发情周期血清和唾液中雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)的浓度变化规律、水牛唾液结晶与卵泡发育变化分别进行了分析研究,为进一步探讨水牛发情规律、指导生产提供依据。采用酶联免疫分析法(ELISA)测定发情母水牛血清和唾液中E_2和P_4的浓度变化,并对血清和唾液的激素变化规律进行相关性分析。结果表明,水牛血清和唾液中的E_2和P_4呈波动性变化。发情前期,唾液中P_4浓度一直维持在6.50～7.10 ng/mL,发情第13天达到11.09 ng/mL,随后快速下降。唾液中E_2浓度在发情第3～5天出现一个峰值178.53 pg/mL,在第14～17天唾液中E_2浓度显著升高,出现第二个峰值179.10 pg/mL。母水牛唾液中E_2和P_4浓度的变化趋势与其在血清中的变化趋势基本一致,均呈显著相关(P<0.05);唾液中E_2与P_4浓度呈极显著相关(P<0.01)。水牛发情当天唾液结晶呈现明显的蕨类作物形状且分维值显著低于其他时间点(P<0.05)。水牛发情周期唾液结晶图形的变化与卵巢卵泡发育基本同步,可作为监测水牛发情及预测排卵的可靠指标之一。     

广西水牛唾液和血清生殖激素在发情周期的变化规律及相关性分析

[目的]对广西水牛发情周期唾液和血液中雌激素(E2)和孕酮(P4)的浓度变化规律及相关性进行了分析,为进一步探讨水牛发情规律来指导生产提供依据。[方法]采用酶联免疫分析方法(ELISA)测定发情母水牛血液和唾液中E2(雌二醇)和P4(孕酮)的浓度变化,并对血液和唾液的激素变化规律进行了相关性分析。[结果]广西水牛血液和唾液中的E2和P4呈波动性变化,结果表明,发情前期,唾液中P4浓度一直维持在6.57.1ng/mL,第13天达到11.09ng/mL以上,随后快速下降。唾液中E2浓度在发情前期第35天出现一个峰值178.528pg/mL,在1417d唾液中E2浓度显著升高,出现第二个峰值达到120.57pg/mL。唾液E2和P4浓度的变化趋势和血清E2和P4浓度的变化趋势基本一致,相关性较好。母水牛唾液和血清样品的P4浓度相关性显著(R=0.4080;P0.05),母水牛唾液和血清标本的E2浓度相关性显著(R=0.5113;P0.05)母水牛唾液E2和P4浓度相关性非常显著(R=0.7754;P0.01)。[结论]唾液和血液中的这两种激素水平起伏变化基本趋于一致,其相关性显著,可以作为监测水牛发情及预测排卵的可靠指标之一。     

水牛发情期唾液生殖激素和结晶与卵泡发育的关系

本研究旨在探明水牛唾液生殖激素、唾液结晶和卵泡发育变化的规律。应用ELISA试剂盒测定水牛唾液和血清中的生殖激素,制作唾液结晶,并分析生殖激素和唾液结晶与卵泡变化的关系。运用唾液结晶法、直肠检查法、唾液结晶+B超法、直肠检查+B超法4种方法在生产中进行验证。结果表明,水牛发情当天唾液雌激素（E₂）的水平为233.51 pg/mL,达到一个峰值,随后开始缓慢降低。水牛唾液中孕激素（P₄）水平在发情前2 d达到16.17 ng/mL,发情当天降到8.91 ng/mL。促卵泡素（FSH）在水牛发情前2 d逐渐下降,从37.91 ng/mL降到34.64 ng/mL,但在发情2 d后逐渐升高,达到61.20 ng/mL。促黄体素（LH）在发情前1 d逐渐下降,从5.15 ng/mL降至发情当天4.12 ng/mL,但在发情1 d后升至5.77 ng/mL。B超监测卵巢卵泡从发情前2 d迅速生长,到发情当天达到20 mm大小,直到破裂排卵卵泡的大小变化不显著。排卵后形成黄体,黄体期一直维持到下次发情前4 d左右,期间在发情后14~17 d的黄体最大,与水牛唾液中LH分泌峰一致。唾液结晶+B超鉴定方法判定的发情率最高（86.67%）,与其他几种方法比较差异显著（P<0.05）;妊娠诊断结果也表明,唾液结晶+B超鉴定方法判定的妊娠率（61.53%）显著高于直肠检查法、唾液结晶法和直肠检查+B超法3种方法鉴定的结果（P<0.05）。综上所述,卵巢上卵泡的发育与唾液中生殖激素的浓度显著相关,发情当天唾液结晶呈现典型的树枝状,唾液结晶+B超法的发情鉴定准确率最高。     

狸獭发情周期中17β-E_2和P_4分泌规律的研究

应用放射免疫分析法(RIA)首次测定了5只雌性成年狸獭发情周期中外周血浆17β-雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)的含量。结果表明,在母狸发情盛期17β-E_2达峰值62.19pg/ml,以后开始下降,并在一定范围内上下波动,到下一个发情周期的发情期就又开始上升。而P_4含量在发悄盛期最低2.48ng/ml,到18天左右峰值达6.26ng/ml,到第二个发情周期前,又迅速下降。二者的这种变化规律与该动物发情周期的表现规律相吻合。     

E_2和P_4浓度在奶牛发情周期中与卵泡发育对比分析

选择从澳大利亚购进的2岁左右发情周期为21天的育成母牛10头,用放射免疫测定法(RIA)测定发情周期血清中孕酮(P_4)和17β-雌二醇(E_2)的浓度,用B-型超声波诊断仪检测发情周期卵巢卵泡发育变化,结果显示:E_2浓度在奶牛发情周期中主要表现出两个波峰,只是其中一个波峰较小,这与卵泡两个发育波态势相似,而P_4在发情周期中却只表现出一个波峰,与卵泡两个发育波部分相似。     

陕北白绒山羊10月龄母羊发情周期血清激素分泌规律的研究

本实验旨在分析陕北白绒山羊10月龄母羊发情周期内卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)的含量变化规律,为研究幼龄陕北白绒山羊母羊的繁殖性能和生殖激素的调控提供理论依据。在一个发情周期内,连续20 d每天对8只10月龄陕北白绒山羊母羊进行颈静脉采血(母羊出现发情表现记为发情第0天);在发情期当天和发情间期第5天,从08:00开始,每间隔15 min连续采血3 h,分离血清,用酶联免疫测定法(ELISA)测定发情期、间情期和发情周期血清中FSH、LH、E_2和P_4的含量。结果表明:在发情期和间情期连续3 h内,FSH、LH、E_2和P_4均呈波动式分泌,FSH发情期比间情期波动频率快。LH发情期较间情期的波动频率低;在发情期血清内E_2含量较间情期高(P0.05);间情期血清内P4含量显著高于发情期(P0.05);在测定的20 d内,FSH、LH、E2血清中浓度值差异不显著(P0.05),而P4浓度在发情当日和发情次日低于发情间期(P0.05)。     

枫泾和长白青年母猪首次发情周期内血清中5种生殖激素含量变化

放射免疫法测定枫泾(FJ)和长白(L)青年母猪(各4头)首次发情周期内外周血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、17β-雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)、和睾酮(T)的含量。测定结果,初情期开始日龄FJ猪平均为104.3±11.50天,L猪为235.0±1.95天。两猪种首次发情周期内外周血清中同种生殖激素有相似的变化趋势。在首次情期内,FJ和L猪的FSH平均含量分别波动在28.6±8.6～49.4±6.0ng/ml和16.8±2.5～38.9±0ng/ml之间;FSH总平均含量FJ猪组(37.8±2.7)显著高于L猪(27.0±3.1ng/ml)P<0.05;FJ猪发情0～2小时的FSH平均含量(34.4±2.1ng/ml)极显著地高于L猪(22.2±1.7ng/ml)P<0.001。排卵前LH峰均值FJ猪组(5.31±0.75ng/ml)显著高于L猪组(1.83±0.75ng/ml)P<0.05。发情当天(0天)E_2达峰值,FJ和L猪组分别是30.5±3.9和20.4±5.3pg/ml,两者无显著差异(P>0.05)。FJ和L猪组各自的P_4(ng/ml)和T(pg/ml)分泌呈显著正相关,相关系数依次为γ_F=0.71,P<0.05,γ_L=0.95,P<0.01。LH、FSH的含量高很可能是FJ猪高排卵率的重要因素之一。     

湘西黄牛发情周期生殖激素变化规律

为了了解生殖激素分泌规律,研究其作用机理,进一步提高家畜的生产性能,试验采集湘西黄牛母牛的血液样品,通过酶联免疫吸附技术测定其在发情周期中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)等激素的水平。结果表明:湘西黄牛的发情周期中,FSH浓度水平为4.92~7.31 m IU/m L,呈先下降后上升的变化趋势;LH浓度水平变化相对平缓,浓度为4.23~6.98 m IU/m L;E2水平变化相对平缓,浓度为16.75~24.33 pg/m L;P4浓度变化非常明显,大致呈先上升后下降的趋势,浓度为0.36~14.85 ng/m L。说明在发情周期中湘西黄牛血清中FSH和孕酮变化规律较明显,而LH和E2水平较平稳。     

牛和绵羊在超数排卵情况下排卵受阻的卵巢组织学和内分泌研究

乏情母牛50头、有周期活动母绵羊38头,超排处理引起发情后的4(羊)或7～8(牛)天摘取卵巢进行组织学研究。观察到排卵阻断的5种类型:(1)典型黄体但包含未排的卵母细胞,(2)由未破卵泡黄体化而形成的非典型黄体,(3)纤维性结缔组织团块,其中有散在性黄体细胞(仅见于牛),(4)具备葛拉夫氏泡典型结构的滞留卵泡,(5)颗粒膜已黄体化的滞留卵泡。50头牛中共有滞留卵泡(≥10mm)127个、正常黄体29个、非正常黄体20个。严寒和饥饿可能是卵泡囊肿普遍发生的主要原因。试验牛曾用18甲基炔诺酮药管处理9天。在植入和取出药管时各注射1次(共2次)PMSG的母牛,具有很高的(28/30)早期反应率(出现≥3个卵泡的母牛数/接受处理的母牛数),而仅在去管时1次注射PMSG者,反应微弱(4/20)。试验羊中,只有单一用FSH处理者,在发情当天血清E_2—17β浓度形成峰值(168.1pg/ml),而且正常黄体数亦略高(P<0.1)于用FSH加LH处理者。发情后4天血清P_4浓度则以后者为高(P<0.05)。绵羊滞留卵泡表现为孕酮优势,卵泡液中E_2—17β对P_4的浓度比为1∶46。     

母犬发情周期血中生殖激素变化规律的研究

为研究自然发情和诱导发情的母犬发情期体内促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和孕酮(P4)的分泌规律,将25只母犬随机分成2组:对照组为自然发情组,试验组为诱导发情组。对6只自然发情母犬和5只诱导发情母犬采血制备血浆,放射免疫分析法(RIA)测定FSH、LH、E2、P4的含量,采血时间为出现发情表征的第1、3、5、6、7、8、9、10、11、13、17、24天。对照组母犬FSH、LH和E2最低含量均值分别为(4.35±1.98)ng/m L、(4.95±2.22)ng/m L和(1.33±1.04)pg/m L,FSH、LH和E2峰值均值分别为(134.44±20.97)ng/m L、(117.56±17.49)ng/m L和(6.22±2.16)pg/m L,P4含量均值变化范围是(0.24±03)~(12.51±1.76)ng/m L;试验组母犬FSH、LH和E2最低含量均值分别为(4.19±2.12)ng/m L、(5.64±3.84)ng/m L和(1.57±0.76)pg/m L,FSH、LH和E2峰值均值分别为(172.98±56.40)ng/m L、(159.12±35.87)ng/m L和(6.08±1.16)pg/m L,P4含量均值变化范围是(0.24±0.06)~(12.51±3.95)ng/m L。结果表明:自然发情和诱导发情的母犬体内LH、FSH、E2和P4变化比较复杂,但仍有规律可循;E2对FSH的分泌具有一定的抑制作用,P4的含量变化在LH峰后的显著变化,P4稳定性和规律性更强;外源性PG-CI和FSH激素诱导发情的母犬的方法显著性提高了整个发情周期LH和FSH水平(P0.05),而对发情周期内E2和P4分泌水平均没有显著性影响(P0.05)。     

沼泽型水牛卵泡发育波及其生殖激素变化的试验研究

运用B超跟踪观察经同期发情处理后的沼泽型水牛的卵泡发育动态,并应用放射免疫测定法(RIA)测定其发情周期中血清促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)等生殖激素的含量,分析了沼泽型水牛的卵泡波情况,并比较了四种生殖激素在发情周期不同时间段及不同卵泡波类型之间的差异性。发现沼泽型水牛的发情周期由2个或3个卵泡波组成,以2个卵泡波为主;2个或3个卵泡波中各个波征集、选择的卵泡数之间无显著差异;血清FSH、LH、E2、P4水平在表现为不同卵泡波类型的青年水牛无显著差异(P>0.05)。     

白香猪发情周期外周血清P4、E2和LH含量的变化

用放射免疫分析法(RIA)测定了10头白香猪发情周期外周血清孕酮(P4)、17β-雌二醇(E2)和促黄体素(LH)含量的变化。血清孕酮的含量,在发情周期的第2d逐渐升高,峰值为21.25ng/ml±2.00ng/ml;E2含量的变化较特殊,在发情当天出现一个峰值,但最高值却出现在发情周期的第11d～13d,为79.48pg/ml±10.77pg/ml;促黄体素的含量在发情当日达到最高值以后逐渐下降。     

屡配不孕的尾根脂积症奶牛外周血浆P_4和17β-E_2水平的变化

应用放射免疫分析方法(RIA),首次研究了13头屡配不孕的尾根脂积症(adipopexis of tail head,简称ATH)奶牛和14头非尾根脂积症(non-adipopexis of tail head,简称NATH)奶牛外周血浆孕酮(P_4)和17β-雌二醇(17β—E_2)的水平。结果表明:成年母牛在发情周期第5—17天、青年母牛在发情周期第7—17天的血浆P_4水平,在屡配不孕的ATH牛显著或极显著地低于NATH牛(P<0.05或P<0.01至P<0.001);成年母牛在发情周期第3—5天的血浆17β-E_2水平,在屡配不孕的ATH牛显著和极显著地高于NATH牛(P<0.05和P<0.01);成年母牛在发情周期第5—17天的血浆17β—E_2(pg/ml)/P_4(ng/ml)的比值,在屡配不孕的ATH牛显著或极显著地高于NATH牛(P<0.05或P<0.01至P<0.001)。青年母牛在发情周期第5—11天的血浆17β—E_2/P_4的比值,在屡配不孕的ATH牛较明显地高于NATH牛,到第13—17天,前者显著地高于后者(P<0.025)。根据上述结果,作者认为17β—E_2/P_4比例的失调是导致ATH牛早期胚胎死亡和附植失败,而表现为屡配不孕的重要原因。     

母水牛发情周期卵泡发育动态初步研究

运用B-型超声波仪观察了自然发情的6头河流型母水牛和6头沼泽型母水牛的卵泡发育动态,发现河流型母水牛的发情周期由2个卵泡发育波组成;沼泽型母水牛以2个卵泡发育波为主(66.7%,4/6)。河流型水牛2个卵泡波分别在发情周期的第1.3、12.2天出现,其第1波征集、选择卵泡数分别为14.8和2.5个,第2波分别为14.2和3.2个;沼泽型水牛2个卵泡波分别在发情周期的第1.1、11.0天出现,其第1波征集、选择卵泡数分别为8.0和1.0个,第2波分别为7.8和1.5个。以上数据的各波征集卵泡数和选择卵泡数中,河流型水牛和沼泽型水牛之间差异显著(P0.05)。     

银狐繁殖期血浆主要激素变化及其对繁殖功能的调控

通过放射免疫测定技术测定母银狐发情前期和发情期外周血浆雌二醇-17β[E2]、孕酮(P4)浓度以及公狐睾酮(T)浓度,并分析这些技术的变化及其对繁殖功能的调控.结果表明,银狐初配前2～3d,E2浓度达峰值(240.85±39.98)pg/mL,在母狐接受跨时E2浓度降至(146.95±38.21)pg/mL,而在发情前期和发情期,其孕酮浓度范围是0.91～77.43ng/mL,峰值是(54.77±23.66)ng/mL,在雌二酮峰值时,孕酮浓度为(28.57±21.21)ng/mL,配种时,P4浓度(33.12±22.56)ng/mL,初配后4d(排卵结束),P4达(48.28±34.84)ng/mL.公狐配种期,T浓度范围(127.2±444.4)pg/mL,,峰值是(341.2±103.2)pg/mL.     

不同卵泡波类型水牛生殖激素变化的试验研究

为了了解不同卵泡波类型水牛的生殖激素变化情况与卵泡波之间的关系,试验对已探明卵泡波类型的6头沼泽型水牛采集经同期发情处理后的血样,采用放射免疫测定法(RIA)测定其血清生殖激素浓度,分析比较不同卵泡波类型水牛的生殖激素变化情况。结果发现3个卵泡波青年水牛的促卵泡素(FSH)水平在发情周期第15 d后明显高于表现为2个卵泡波的青年水牛(P<0.05);黄体素(LH)水平则相反,在第15 d前,2波周期的青年水牛其黄体素(LH)水平明显高于3波周期的青年水牛。3波周期的青年水牛,其E2、P4水平要高于2波周期的青年水牛。血清促卵泡素(FSH)、黄体素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)水平在表现为不同卵泡波类型的水牛中并不存在显著差异(P>0.05)。     

关中驴产后期和发情期血浆17β-雌二醇、孕酮和睾酮浓度的变化

本研究应用放射免疫分析法,测定了关中驴产后期(n=18)和发情期(n=6)血浆17β-雌二醇(E_2)、孕酮(P)和辜酮(T)的浓度。测定结果表明,产后第一次发情前血浆E_2浓度较低(12.22±1.92pg/ml),第一次发情期逐渐上升,排卵前第一天和第二天达到较高水平(19.48±2.16pg/ml和20.41±3.27pg/ml,±SE,P<0.05),排卵后降至基础浓度。产后第一次发情前血浆P浓度较低(2.74±0.51ng/ml),排卵后逐渐上升,第四天和第五天显著和极显著高于排卵前P水平,血浆值为6.19±0.66ng/ml和8.09±1.09ng/ml(P<0.05和P<0.01)。产后第一次发情前血浆T浓度较高,发情期下降,排卵后逐渐上升,第五天和第六天显著和极显著高于发情期T水平,分别为313.11±37.57pg/ml和356.73±46.37pg/ml(P<0.05和P<0.01)。产后第一次排卵前P/E_2和P/T比值均较低,排卵后上升,第五天分别达到861和25.83。产后第一次发情前T/E_2比值较高,发情期下降,排卵后上升,第五天达到33.34。排卵前后间隔6小时采样的分析结果表明,排卵前第30～24小时,E_2浓度急剧上升达到峰值。排卵后P浓度于第78～96小时达到较高水平。血浆E_2与P、E_2与T均呈中等负相关(r=-0.42和r=-0.41)。P与T为极显著正相关(r=0.92)。周期性发情期血浆E_2、P、T浓度的分泌范型和产后第一次发情期基本相似。     

中国美利奴军垦型细毛羊正常发情周期内血清孕酮含量的变化

采用放射免疫测定法(RIA),对中国美利奴军垦型细毛羊血清中孕酮(P4)浓度进行了检测,结果表明,繁殖母羊在休情期小于0.1ng/mL,发情排卵当天(0d)为0.236ng/mL,发情后(+1d)孕酮水平显著增高,达到5.25ng/mL,(0d)和(+1d)的孕酮含量差异十分显著(P＜0.01).提示该品种羊发情周期中卵巢的机能活动或生殖特性,可能与其它细毛羊存在一定差异.     

绵羊卵泡期卵泡颗粒细胞FSHR差异剪接体的表达

为探讨卵泡期卵泡颗粒细胞促卵泡素特异性受体(FSHR)差异剪接体表达的变化,选择30只道寒杂交一代育成母羊肌注PG+埋植CIDR+肌注PG进行同期发情处理,选取9只发情母羊屠宰,取两侧卵巢组织,按小卵泡(≤3.0 mm),中等卵泡(3.0～5.0 mm)和大卵泡(≥5.0 mm)级别分别收集卵泡液和颗粒细胞,采用放射性免疫法测定类固醇激素(E_2和P_4)和FSH浓度,实时定量PCR检测不同直径卵泡颗粒细胞FSHR差异剪接体表达水平。结果表明,小卵泡和中等卵泡中FSHR1和FSHR3 mRNA的表达量极显著高于FSHR2和FSHR4(P0.01),在中等卵泡中FSHR3 mRNA的表达量显著高于FSHR1(P0.01);大卵泡中FSHR2 mRNA的表达量显著高于FSHR1、FSHR3和FSHR4(P0.01),FSHR1、FSHR3和FSHR4 mRNA的表达量差异不显著(P0.05)。大卵泡中雌激素浓度极显著高于小卵泡和中等卵泡(P0.01),孕酮浓度无显著性差异(P0.05),E_2/P_4比值与大卵泡中FSHR3 mRNA的表达量呈极显著负相关(P0.01)。由结果可知,卵泡发育过程中FSHR1和FSHR3可能是小卵泡和中等卵泡颗粒细胞增殖的2种主要剪接形式。     

沼泽型水牛发情周期卵泡发育波的发育动态观察

用B-型超声波观察9头沼泽型母水牛的卵泡发育动态,发现沼泽型母水牛的发情周期由2个或3个卵泡发育波(简称卵泡波)组成,以2个卵泡波为主。在2个卵泡波的母水牛中,波的长度为19.29d,青年牛第1、2波分别在发情周期的第1.25、9.75天出现,第1、2波征集、选择的卵泡数分别为6.25、3.25和5.725、3.5个;经产牛第1、2波分别在第1.0、第12.33天出现,其征集、选择的卵泡数分别为8.0、4.67和6.67、4.33个。3个卵泡波的母水牛,波的长度为23.5d,3个波分别在发情周期的第1.5、8.0和15.5天出现,征集、选择的卵泡数分别为11.0、4.0,12.5、4.5和12.0、5.5个。以上这些数据之间同类比较均无显著性差异(P>0.05)。左右卵巢上各类卵泡数量统计无显著差异(P>0.05),排卵优势卵泡出现在左卵巢的机率较大,占77.8%,青年牛发情后48h排卵多达66.7%,经产牛在24h内排卵较多。