免疫酶斑点法在区分马传贫 疫苗免疫马与病马上的应用

有关检疫条款规定,马传贫病马的检疫以琼脂扩散为依据,但是阿荣旗的马匹在 1986.1987两年均注射了马传贫驴白细胞弱毒疫苗,1988年停注疫苗,到1990年已停注两年,在这种情况下马传贫的检疫是否仍可以用琼脂扩散试验做为诊断依据?我们采用琼脂扩散试验(ID)与免疫酶斑点(DB)试验相结合的办法进行检疫,现将试验情况报     

抗马传贫病毒单克隆抗体试剂在鉴别诊断上的应用

马传染性贫血(简称马传贫)是对马匹危害较大,无法治疗的慢性传染病。近十几年来,我省采取以注射马传染贫驴白细胞弱毒疫苗为主要预防手段,收到了较好的成效。但是,患本病的马匹和注射本疫苗的马匹,均出现血清学阳性反应,只依现行的免疫扩散试验(ID)等法检查,对二者无法区别。这是注疫苗以来,现地在马传贫病的诊断上的     

马传贫弱毒疫苗免疫马外周血TB淋巴细胞的动力学观察

近年来,研制成功了马传贫驴白细胞弱毒疫苗,在现地广泛用于马传染性贫血病(简称马传贫)免疫收到了良好效果。但是,人们对马传贫的免疫机理,尚不清楚。为此,我们肘接种马传贫弱毒疫苗马进行了外周血TB淋巴纠胞的动力学观测,以期为     

应用单克隆抗体对马传贫弱毒疫苗接种马血清中相应抗原的检测

应用马传贫驴白细胞弱毒株系特异单克隆抗体酶结合物的免疫斑点试验检测证明，自28份马传贫弱毒疫苗免疫马血清中均检出与单抗呈阳性反应的相应抗原，持续期达51个月以上，自19份人工感染传贫马、自然感染传贫马、弱毒疫苗免疫后攻毒马及42份健康马血清中均未检出单抗原，病理学检查表明，弱毒疫苗免疫马无马传贫病理学改变，以弱毒免疫马肝、脾、骨髓材料进行生物学试验表明，弱毒免疫马体内不存在致病性病毒，这阐明该弱毒疫苗的免疫本质提出一个非常值得今后深入加以探讨的课题。     

应用单克隆抗体对马传贫弱毒疫苗接种马血清中相应抗原的检测

应用马传贫驴白细胞弱毒株系特异单克隆抗体酶结合物的免疫斑点试验检测证明,自28份马传贫弱毒疫苗免疫马血清中均检出与单抗呈阳性反应的相应抗原,持续期达51个月以上;自19份人工感染传贫马、自然感染传贫马、弱毒疫苗免疫后攻毒马及42盼健康马血清中均未捡出单抗相应抗原。病理学检查表明,弱毒疫苗免疫马无马传贫病理学改变。以弱毒免疫马肝、脾、骨髓材料进行生物学试验表明,弱毒免疫马体内不存在致病性病毒。这为阐明该弱毒疫苗的免疫本质提出一个非常值得今后深入加以探讨的课题。     

马传贫强、弱毒血清抗体鉴别诊断法在古巴的应用

应用中国抗马传染性贫血驴白细胞弱毒抗原株系特异性的单克隆抗体酶结合试剂，以免疫斑点试验与琼脂免疫双扩散试验相结合的方法，对古巴二省疫苗接种地区的２５６匹马进行了马传贫弱毒疫苗接种马和马传贫自然病马鉴别诊断．结果，检出自然病马２３匹．弱毒疫苗接种马２０９匹，健康马２４匹．表明，本法可用于区别古巴马传贫病马和马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马．     

马传染性贫血的防治历史及消灭状态维持

马传染性贫血简称马传贫,是由马传贫病毒引起的马属动物的一种传染病,该病被世界动物卫生组织定为B类传染病,我国将其列入二类动物疫病。该病1843年在法国发现,随后流行至世界各地。1931年日本侵华时把此病带进我国东北、华北等地,后来由前苏联进口马匹时又将该病传入我国,造成该病疫情严重。1965年,解放军兽医大学首次分离到马传贫病毒,随后成功研制了马传贫补体结合反应和琼脂扩散反应两种特异诊断方法。1975年哈尔滨兽医研究所有成功研制了马传贫驴白细胞弱毒疫苗,该疫苗的推广应用,结合采取“养、检、隔、封、消、处”等综合性防控措施,是我国的疫情得到控制。按照《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020年)》要求,我国将于2020年达到消灭标准。     

马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒和驴强毒基因核苷酸序列测定

本项研究马传贫驴白细胞弱毒疫苗病毒感染后总ＤＮＡ和驴强毒感染驴中血病毒ＲＮＡ为起始材料,应用ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ的方法,分段扩增马传贫弱毒疫苗病毒和驴毒各基因,并将各基因克隆后进行测序列,根据与国外马传贫病毒核苷酸序列比较,推导出马传贫疫苗毒和马传贫驴强毒全基因组核苷酸序列。     

马传贫弱毒疫苗免疫马诊断盒的研制

应用马传贫驴白细胞弱毒株系特异性单克隆抗体(McAb),以免疫斑点试验(DB)与免疫扩散试验(ID)相结合的方法,已成功地用于马传贫自然病马与马传贫弱毒疫苗免疫马的鉴别诊断。为方便推广应用,我们在上述成果的基础上研制了马传贫弱毒疫苗免疫马诊断试剂盒,经与原法比较,结果稳定,方法简易,适于现地使用。现将结果报告于后。     

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所马病专家赵立平

赵立平(1955-)，哈尔滨人，大专，实验师。70年代参加了马传染性贫血病的研究工作，80年代以后，主要进行马传染性贫血病驴胎皮肤细胞弱毒疫苗和马传染性贫血病琼扩抗原的研究。1995年、1999年先后两次赴古巴进行国际合作进行马传贫驴白细胞弱毒疫苗的生产，打开了该疫苗在欧美的国际市场。     

马传贫白细胞弱毒疫苗接种马攻击强毒后病理学和免疫形态学变化的探讨

本试验对46例马传贫白细胞弱毒接种后3～55个月的马用中国马传贫强毒辽系和美国马传贫强毒Wyoming株攻击,攻击3个月后迫杀,经剖检、组织学和组织化学观察和比较,基本可归纳为三种类型的形态学改变:Ⅰ型有典型的马传贫规律性病变,免疫活性细胞减少,其变性、坏死程度较强毒攻击对照马略轻;Ⅱ型无马传贫规律性病变,免疫活性细胞活化、增殖,但肝内有铁反应;Ⅲ型无马传贫病理性损伤,免疫系统明显活化、增殖。疫苗接种马经两强毒株攻击后出现各型变化的马匹比例数有一定差异,但80％以上疫苗接种后强毒攻击的马均呈Ⅱ、Ⅲ型形态学改变,即这些马均处于免疫状态,从而对攻毒马建立了病理形态学和免疫形态学相结合的检测手段。此外,本研究也提出了马传贫白细胞苗的免疫持续期可长达3年以上的形态学根据。     

马传贫云南强毒及其攻击弱毒苗接种马的形态学观察

本试验观察了4匹马传贫云南强毒接种马和13匹用云南强毒攻击的弱毒苗接种马的形态学改变。4匹强毒马均出现急性型马传贫病理变化,但免疫器官中免疫活性细胞的坏死程度远不及我国辽毒急性型传贫马那样严重。甚至较美同Wyoming株毒也差。13匹接种弱毒苗的攻毒马形态学有三种类型变化。第一类型具有铁逆转,组织球,淋巴样细胞反应和网内系增生等较典型的马传贫病理变化,免疫活性细胞少,且变性,坏死。第二种类型无马传贫规律性病变,免疫活性细胞活化,增殖。但肝铁反应增强,脾铁反应明显增生。第三种类型无马传贫病理性损伤,免疫系统明显活化,增殖。依此衡量,10~(-3)lml攻毒试验马中出现Ⅰ型变化的占4/7,显然弱毒苗保护效果不够理想。10~(-4)2ml攻毒马Ⅰ、Ⅱ型变化的占5/6,表明我国研制的弱毒苗对云南毒有预防作用,可用于云南马传贫防制工作。但其中Ⅱ型变化的占3/5,Ⅲ型变化在各弱毒接种马中仅占1/3,比辽毒和Wyoming株毒攻击的弱毒接种马出现Ⅲ型反应的比数均低,结果很不一致。显然云南分离到的马传贫强毒接种马的病理变化及再攻毒马形态学改变与辽寝和Wyoming株毒有差异。本试验对这种差异进行了讨论,认为云南马传贫毒可能是又一个毒株。     

马传染性贫血病荧光抗体的制备及其初步应用效果的报告

马传染性贫血病(以下简称马传贫)弱毒疫苗的问世,为研究马传贫工作带来许多新的任务。尤其是免疫机制问题,正吸引着越来越多的科学工作者从各自不同的角度进行着深入的探索。我们为了解决马传贫病毒抗原定位和免疫发生,从病理形态学角度应用荧光抗体法进行了试验。     

疫区马匹注射马传贫疫苗后发病情况观察

某地为马传贫老疫区,自1963年以来,连年均有马传贫发生。为了观察马传贫疫苗对疫区马匹的使用效果和安全性,在接种前,对该地712匹马骡用琼扩试验进行了两次检疫,其中103匹(占15.4％)呈阳性反应。然后应用哈尔滨兽医研究所研制的驴白细     

四川省马传染性贫血病防控的回顾与思考

马传染性贫血病（简称马传贫）是严重危害马属动物的一种传染病。四川省于1989年在凉山州越西、昭觉两县发现了阳性马匹,经确诊后,即采取了普查、检疫、免疫注射、扑杀等综合性防控措施,1998年全省达到稳定控制马传贫标准,2003年达到消灭马传贫标准。从2003年至今,各项防控措施不停,监测表明均未发现阳性病例,成效显著。     

两项科研成果通过省局级鉴定

1986年12月29日吉林省畜牧局组织省内、外有关专家对吉林省兽药厂的“马传贫驴白细胞弱毒疫苗生产方法的改革”和延边农学院的“试产副结核菌素及其应用的研究”两项科研成果进行了鉴定。“马传贫驴白细胞弱毒苗生产方法的改革”是将原制造马传贫驴白细胞弱毒苗     

马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒和驴强毒全基因核苷酸序列测定

本项研究以马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒感染细胞总ＤＮＡ和驴强毒感染驴外周血病毒ＲＮＡ为起始材料,应用ＰＣＲ和ＲＴＰＣＲ的方法,分段扩增出马传贫弱毒疫苗毒前病毒和驴强毒各基因,并将各基因克隆后进行测序。根据与国外发表的马传贫病毒核苷酸序列比较,推导出马传贫疫苗毒和马传贫驴强毒全基因组核苷酸序列。     

马传染性贫血病毒中和抗体的研究进展

马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia vi- rus,EIAV)与人类免疫缺陷病毒(HIV)同属反转录病毒科、慢病毒属的重要成员,具有高度的传染性,传播迅速、广泛,直接危及动物或人类健康的特点。至今,只有我国研制成功了马传贫驴白细胞(EIAV DL)弱毒疫苗,此疫苗是经过在驴白细胞体外培养继代、培育驯化,致使对马、驴毒力明显减弱而制成的一种减毒活疫苗。通过对该疫苗的使用已有效地控制了马传贫在我国的猖獗流行。这一创新成果轰动了兽医界,并引起医学界的高度关注。     

韩国从国外进口活马的卫生要求

韩国提出了从国外进口活马的卫生要求，出口国政府兽医机构须出具卫生证书，证明：l在出D前两年内出D马匹的地区（国家）未发生过非洲马盛、委内瑞拉马脑脊回失、马群疫、马鼻疽及马永抱住日炎，出口韩国马匹未接种前述疫病的疫苗。2在出口前六个月内，出口马原产地未发生过马传贫、马触传性子宫炎、马梨浆虫病（焦虫病）、马病毒性动脉炎、马晚疫、狂犬病、马痘、马疥痹、马流产沙门氏菌病、恶性贫血、流行性淋巴管炎、炭疽。3出日格应3．l证书应表明马匹在出口前已在政府兽医机构的兽医官员批准并监督下的隔离场所至少连续隔离7天；3．2…     

马传染性贫血病毒自然感染马LTR序列分析

我国从20世纪70年代开始使用EIAV弱毒疫苗后,在全国范围内基本控制了马传贫的发生,我们从现地少数EIAV琼扩阳性马外周血中扩增并克隆了二株EIAV前病毒5'LTR序列,并与国内外毒株5'LTR序列进行了比较分析,发现中国EIAV LTR特有的特异性细胞转录因子结合基序,同时发现PEA2位点不是强毒特有的基序,在弱毒中亦发现该基序.