纳米铝胶佐剂增强猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫的效果

将20头35日龄断奶仔猪随机分为4组,将制备的纳米铝胶佐剂猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)灭活疫苗肌肉注射免疫接种,并以常规铝胶佐剂PPV灭活疫苗组、市售PPV油乳剂灭活疫苗组为疫苗对照,生理盐水组做阴性对照,应用HI和ELISA检测接种猪的体液免疫水平,流式细胞仪检测免疫猪的细胞免疫水平。体液免疫检测结果显示,PPV纳米铝胶佐剂疫苗组能显著提高机体产生抗体的速度,在首免后第2周产生有效保护抗体水平显著高于油乳剂疫苗和常规铝胶佐剂疫苗组(P0.05),在第3周其抗体水平达到峰值;细胞免疫检测结果显示,3种疫苗均能诱导机体产生细胞免疫应答,但各组之间差异不显著(P0.05)。结果表明,以纳米铝胶为佐剂制备的猪细小病毒灭活疫苗,能显著提高机体的免疫水平,并较早刺激机体产生抗体,具有较好的免疫保护效果。     

3种不同类型佐剂的猪圆环病毒2型亚单位灭活疫苗免疫效果的比较研究

为制备猪圆环病毒2型商品化亚单位疫苗选择良好的佐剂,对由水性佐剂GEL 01、白油佐剂以及氢氧化铝胶佐剂分别制备的3种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的免疫效果进行比较研究。本实验选取3~4周龄猪圆环病毒2型抗体阴性猪30头,根据试验疫苗接种情况分为6组,分别为:3种不同佐剂制备的亚单位疫苗(A组、B组和C组)、商品化疫苗(D组)以及空白对照组和攻毒对照组,然后进行临床观察、抗体水平监测和免疫效力评价,观察各组仔猪的不良反应情况、抗体水平以及攻毒保护情况。结果显示:3种不同类型佐剂制备的猪圆环病毒2型亚单位疫苗接种猪后均无任何不良反应、能刺激机体产生良好的ELISA抗体水平和免疫效果,但水性佐剂GEL 01制备的疫苗与另外2种佐剂制备的疫苗相比,综合抗体水平、免疫效果等因素,水性佐剂GEL 01制备的疫苗在临床使用上更具优势,为商品化亚单位疫苗佐剂的选择提供了重要的数据支持。     

PCV2a/2b灭活疫苗与PCV2b亚单位疫苗免疫效力比较试验

比较猪圆环病毒(PCV)2a、PCV2b基因型全病毒灭活疫苗和PCV2b亚单位疫苗对PCV2b基因型强毒株免疫攻毒保护效力。取3种类型PCV2疫苗,分2次免疫PCV2抗原和特异性抗体阴性的BALB/c小鼠和14日龄仔猪,间隔21d,分别于免疫后14、21和35 d进行PCV2特异性ELISA抗体测定。使用临床分离鉴定的PCV2b基因型强毒株进行攻毒,通过攻毒前后临床观察、体温变化、平均相对日增重及PCV2核酸载量检测等对疫苗免疫效果进行评价。结果:不同类型PCV2疫苗免疫BALB/c小鼠后14 d能检测到PCV2特异性抗体,在35 d时抗体水平持续升高,其中PCV2b亚单位疫苗产生抗体水平高于全病毒灭活疫苗;不同类型疫苗均能刺激仔猪产生较好的免疫应答,其中PCV2b亚单位疫苗刺激机体免疫应答强于灭活疫苗;仔猪免疫攻毒试验表明,3种类型疫苗均可刺激机体产生抵御PCV2强毒攻击的特异性免疫应答,免疫组体温变化、相对日增重及PCV2核酸载量检测均与攻毒对照组间存在显著性差异,3种类型疫苗之间差异不显著。试验表明:3种类型PCV2疫苗免疫小鼠和仔猪后均能诱导产生抵御PCV2b基因型强毒攻击的特异性免疫应答反应,有效抵抗PCV2感染和提高猪的生长性能。     

猪细小病毒BQ株灭活疫苗免疫剂量及免疫持续期的初步研究

为确定猪细小病毒(PPV)BQ株灭活疫苗(PPV-BQ)的免疫剂量及免疫持续期,本研究与市场上销售的2种PPV灭活疫苗A和B进行了比较。试验分6组,每组免疫3头PPV抗体阴性猪,1组～3组分别免疫BQ株灭活疫苗1mL、2mL、4mL,4组～5组按照说明书免疫A、B两种PPV灭活疫苗,6组为阴性对照组(免疫油佐剂)。两周后进行二免,定期检测血清抗体水平。结果表明,注射疫苗组均产生了PPV抗体,都能持续到免疫后24周。免疫不同剂量PPV-BQ各组间抗体水平差异不显著(p0.05),PPV-BQ与PPV-A抗体水平差异不显著(p0.05),与PPV-B抗体水平差异极显著(p0.01),显著优于PPV-B。PPV-BQ1mL免疫剂量即可达到或超过同类产品的免疫效果,是较为理想的PPV灭活疫苗。     

重组猪γ干扰素对猪瘟弱毒疫苗免疫效果的影响

为研究rPoIFN-γ对HCV血清抗体产生的影响,选28日龄健康仔猪16头,随机分为4组,第1组为对照组,2~4组为试验组。各组均免疫HCV疫苗2头份,同时第1组分点肌注生理盐水4 mL/头;2~4组分别分点肌注rPoIFN-γ注射液4万单位/头(4 mL)、40万单位/头(4mL)、400万单位/头(4mL)。结果显示,免疫HCV疫苗后第28d,2组血清抗体水平显著高于第1组(P0.05);试验第21、28d和42d,第3组血清抗体水平显著高于第1组(P0.05);试验至28d和35d,第4组血清抗体水平显著高于第1组(P0.05)。试验结果表明,肌肉注射一定剂量的rPoIFN-γ促进了HCV血清抗体的产生,增强了疫苗免疫效果;适宜注射剂量为40万单位/头。     

猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗临床使用效果评估

为评估猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)灭活疫苗的临床使用效果，选用市售A、B两种PRRS灭活疫苗在陕西省某4 800头规模化母猪场开展对比试验。试验选取180头健康妊娠母猪，随机分为3组，在猪场正常生产管理流程下分别在母猪妊娠8周龄免疫A PRRS灭活疫苗、B PRRS灭活疫苗和灭菌生理盐水(对照组)。通过对试验组和对照组生产成绩、疫苗免疫后的抗体水平变化、分娩仔猪14日龄的PRRS母源抗体水平及仔猪PRRS水平传播能力等综合分析，发现A PRRS灭活疫苗免疫组生产成绩优于B PRRS灭活疫苗免疫组和对照组；A PRRS灭活疫苗免疫组母猪及14日龄仔猪抗体水平均高于B PRRS灭活疫苗免疫组和对照组；A PRRS灭活疫苗免疫组仔猪PRRS的水平传播能力低于B PRRS灭活疫苗免疫组和对照组。说明妊娠8周母猪免疫A PRRS灭活疫苗可提高母源抗体对仔猪的保护力，A PRRS灭活疫苗在一定程度上可阻断PRRS在产房的水平传播。     

重组猪γ干扰素对猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗免疫效果的影响

为了研究重组猪γ干扰素(r Po IFN-γ)对疫苗免疫效果的影响,试验选取35日龄健康仔猪16只,随机分为4组,1组为对照组,2,3,4组为试验组。各组均免疫PRRS弱毒疫苗1头份,同时1组分点肌肉注射生理盐水4 m L/头;2,3,4组分别分点肌肉注射r Po IFN-γ注射液4万单位(4 m L)/头、40万单位(4 m L)/头、400万单位(4 m L)/头,研究r Po IFN-γ对PRRS弱毒疫苗血清ELISA抗体和中和抗体产生的影响。结果表明:在免疫PRRS弱毒疫苗后第14天,3组ELISA抗体水平显著高于其他组(P0.05);试验至第35天,2,3,4组ELISA抗体水平显著高于1组(P0.05)。免疫PRRS弱毒疫苗21 d后,试验组血清中和抗体水平高于对照组,但各组差异不显著(P0.05)。说明肌肉注射一定剂量r Po IFN-γ增强了疫苗免疫效果。     

鸭坦布苏病毒病-H9亚型禽流感二联灭活疫苗免疫佐剂筛选

为筛选出理想的鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗免疫佐剂,将灭活的坦布苏病毒液和禽流感病毒(H9亚型)尿囊液分别与白油佐剂、卡波姆佐剂、铝胶佐剂、蜂胶佐剂制成抗原含量相同的TMUV-AIV二联灭活疫苗。应用阻断ELISA方法和血凝抑制方法测定免疫鸭血清中坦布苏病毒和禽流感病毒抗体,比较不同佐剂疫苗对试验鸭的免疫效力。结果表明,以白油作为佐剂的灭活疫苗组免疫效果最好,抗体产生快、抗体水平优于其他各组,免疫2周后60%(6/10)血清样品HI抗体可达1∶8以上,80%血清样品呈TMUV抗体阳性,是制备鸭TMUV-AIV(H9亚型)二联灭活疫苗的理想佐剂。     

不同IBD灭活疫苗在1日龄SPF鸡上的免疫效果评价

为了评价市场上不同厂家IBD全病毒或亚单位灭活苗的免疫效果,本研究用4种商品化疫苗(A、B、C、D,A为IBD亚单位灭活联苗,B～D为IBD全病毒灭活联苗)免疫1日龄SPF鸡,并采用AGP抗体、ELISA抗体和攻毒保护指标进行评价。结果显示表明不同IBD灭活疫苗之间的免疫效果是存在差别的,D苗最好,C苗次之,A苗、B苗较差;IBD灭活疫苗所产生的ELISA抗体水平和AGP抗体水平与攻毒保护呈正相关,且ELISA抗体与AGP抗体产生趋势基本一致。     

表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白的重组假型杆状病毒对SPF鸡的免疫原性分析

本研究旨在对本实验室所构建的表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV) S1蛋白的重组假型杆状病毒(Ac-V-S1)的免疫保护效果进行探讨.以2×109 pfu剂量的重组假型杆状病毒(Ac-V-S1)腿部肌肉注射7日龄SPF雏鸡,21日龄加强免疫1次.血清抗体检测表明,灭活疫苗组诱导的IBV特异性ELISA抗体水平最高,极显著高于其它试验组(P＜0.01),其次是Prime-boost组(先免疫Ac-V-S1后免疫poly156S1亚单位疫苗)和Ac-V-S1组;但在细胞免疫水平方面,Ac-V-S1免疫组表现出较强的优势,免疫应答反应极显著的高于其它免疫组(P＜0.01),然后是Prime-boost组和杆状病毒野毒对照组.二免后2周用IBV M41强毒进行攻毒保护试验.结果表明,Ac-V-S1、Ac-V-EGFP、poly156S1亚单位疫苗组的保护率分别为55％(6/11)、27％(3/11)、37％(4/11),而采用Prime-boost免疫组的保护率为64％(7/11),略低于免疫保护率为73％的常规灭活疫苗(8/11).结果显示:重组杆状病毒Ac-V-S1具有较好的免疫效果,而且在细胞免疫方面具有较强优势,可以弥补重组杆状病毒在体液免疫水平的不足,而Prime-boost免疫策略能更进一步提高重组杆状病毒免疫效果,为将重组杆状病毒发展为经济有效的IBV基因工程疫苗奠定基础.