家兔盲肠微生物总DNA的提取

为了全面了解家兔盲肠中的微生物信息,本文采用非培养技术,通过化学、物理裂解和酶解相结合,建立了直接从家兔盲肠内容物中提取总DNA的方法。结果从1g新鲜的盲肠内容物中提取出5.4μg总DNA;所得的DNA能被核酸限制性内切酶降解;经纯化后能用作模板进行PCR扩增。     

微量水蒸气蒸馏法测定家兔盲肠内容物的酸度

对添加木~10和EA_(3867)两种纤维素曲酶饲喂3个月的家兔,按系统取样原则分为两个试验组和1个对照组,每组8～9只。于屠宰后立即采盲肠内容物10g,用微量水蒸气蒸馏法测定其低碳(1～5C)脂肪酸(VFA)的酸度变化。结果,木~10组和EA_(3/67)组两个试验组家兔盲肠内容物酸度均较对照组高。本法具有取样少、设备简单、操作容易的特点,也可用于测定马、牛等家畜的胃、肠内容物和血液的酸度。     

林肯霉素诱发家兔小腸结腸炎

一群家兔共210只,发生高度流行性急性腹泻,发病2～3小时内衰竭、死亡。病理剖检主要发现盲肠浆膜布满淤血斑点,粘膜充血、肠内容物水样。组织学检查盲肠粘膜出现炎症变化。从全部家兔盲肠内容物均分离出大肠杆菌,厌氧培养梭状芽     

家兔不宜喂青贮饲料

家兔不宜喂青贮饲料山东枣庄市外贸仓库养兔场２７７１０１苟元刚家兔是草食动物，它具有一个特别发达的盲肠，相当于一个大的发酵口袋，里面有大量的微生物。但家兔每天食入的饲料中的粗纤维全靠栖居于盲肠内的微生物分泌的一种酶进行发酵分解来消化；而盲肠内的微生物只...     

家兔饲料中蛋白质的利用

<正> 家免是一种有较大盲肠的食草动物,盲肠是微生物发酵的场所。象反刍动物一样,家兔可以食入大量的纤维素。盲肠消化过程的效率因盲肠内容物的消耗而得以提高,这个过程叫盲肠营养作用。盲肠营养作用使家兔能在盲肠内合成细菌性蛋白质和氨基酸,以及数量充足的所有B族维生素。蛋白质繁殖期和哺乳期家兔对蛋白质的最佳需要量,比生长期家兔的需要量要多。研究证明,日粮中粗蛋白含量为16%即可满足幼兔生长最快时的需要量。而对繁殖和哺乳家兔来说,日粮中蛋白质的最佳含量应达到18%。生长期家兔的氨基酸需要量不易确定,有关哺乳期需要量的材料也很少。对家免生长来说,赖氨     

应用扩增性rDNA限制性酶切片段多态性分析技术研究竹鼠盲肠细菌菌群的多样性

本试验应用扩增性rDNA限制性酶切片段多态性分析(ARDRA)技术研究竹鼠盲肠细菌菌群的多样性。利用免培养的分子生物学技术,从竹鼠盲肠内容物中提取细菌的总DNA,用细菌通用引物F27/R1492扩增出细菌16S rDNA的基因,构建16S rDNA基因文库。采用HaeⅢ和HhaⅠ2种限制性内切酶对阳性克隆子的扩增产物进行酶切,挑选不同的操作分类单元(OTU)测序,通过Blast在线比对,分析竹鼠盲肠细菌菌群的多样性。结果表明:竹鼠盲肠中的细菌菌群大部分是未培养或未知的菌株,在分类学上具有潜在意义的被选菌株,而且存在可能和脂肪代谢有关的微生物群体。同时也有乳酸菌属、芽孢杆菌属、梭形杆菌属和多黏类芽孢杆菌属的分布。从结果中看出,芽孢杆菌属、梭形杆菌属和2个未知菌株的克隆数都大于20个,是优势菌株。     

生长育肥猪胃肠道正常厌氧菌群的数量和分区

采用厌氧微生物学方法，对2头育肥猪的胃、小肠、盲肠、结肠和直肠的固相、液相和粘膜中的总厌氧菌、淀粉分解菌、纤维分解菌和蛋白分解菌的数量分布和比例进行了研究。结果表明，上述总厌氧菌和3种功能菌群的数量在胃和小肠区段固相内容物中占绝对优势，而在盲肠、结肠和直肠内容物中以液相菌群占绝对优势。在胃和小肠区段，固相、液相内容物中3种功能菌群的数量间无明显差异，但在盲肠、结肠和直肠段，固、液相内容物中淀粉分解菌和蛋白分解菌为优势菌群。在各区段胃肠道粘膜中，胃和小肠的3种菌群的数量相对较低。盲肠粘膜中主要菌群数量分布为蛋白分解菌&gt;淀粉分解菌&gt;纤维分解菌(P&lt;O．01)；而结肠和直肠粘膜中以淀粉分解菌占绝对优势。     

利福昔明对家兔肠道菌群的影响

本实验就利福昔明对家兔肠道菌群的影响进行了研究。将利福昔明按25、50、100mg，kg三个剂量组分别给40日龄家兔口服，连续用药3d，并于首次用药后第4、7、10d剖杀家兔，取盲肠和回肠内容物进行乳酸杆菌和大肠杆菌的选择性培养并计数，以此评价利福昔明对家兔肠道菌群数量的影响。结果显示：利福昔明高、中、低剂量组对回肠和盲肠的大肠杆菌菌群数目与空白对照组相比数量减少，其中，高剂量组（100mg，k曲在首次用药后第7、10d对家兔回肠大肠杆菌影响差异显著（P〈0．05）。利福昔明高、中、低剂量组对回肠和盲肠的乳酸杆菌与空白对照组相比差异不显著（P〈0．05）。     

犊牛盲肠微生物总DNA的提取方法

采用反复冻融法、玻璃珠法和超声波+反复珠磨的方法提取犊牛盲肠的微生物总DNA,并对以上三种方法进行比较,从中确定最佳的方法,以实现普通实验条件下成功提取符合PCR扩增要求的DNA.经紫外分光光度分析表明,超声波+反复珠磨的方法所得的DNA的A<,260>/A<,280>的比值为1.81,0.8%琼脂糖凝胶电泳结果显示,所提DNA片段分子量大于20 kb,适于酶解和PCR扩增要求.以提取的DNA样品为模板,利用细菌通用引物,对其16S rDNA进行PCR扩增,获得了1.7 kb大小特异性很好的预期条带.这是研究犊牛盲肠微生物的关键一步.     

乳糖饲料对沙门氏杆菌生长繁殖的影响

一批肉用大雏鸡泄殖腔内接种鼠伤寒沙门氏杆菌(St)然后观察乳糖饲料是否影响St在盲肠内的生长繁殖。本试验分:空白对照鸡;经口接种从成鸡盲肠内容物中分离出的厌氧培养物(AC);接种AC并给予乳糖饲料三组。在饲喂10天、15天时测得,乳糖饲料能显著降低盲肠内容物中的St数量(每克内容物下降2—4个数     

水貂肠炎病毒的提纯及部分生化特性分析

应用高速离心—PEG沉淀—蔗糖和氯化铯密度离心—氯化铯平衡密度梯度离心等方法,从水貂肠炎病毒猫肾细胞培养物中提纯病毒粒子。提纯的病毒粒子分为氯化铯浮密度为1.32～1.36g/ml的空壳病毒粒子和氯化铯浮密度为1.40～1.42g/ml的实心病毒粒子。应用SDS—PAGE分析,实心病毒粒子有结构蛋白3种,(VP_1,VP_2、VP_3),空壳病毒粒子有2种(VP_1、VP_2);从第5d培养物中提纯的实心粒子的VP_3含量少于第7d培养物的量。从第7d培养物中提纯的实心病毒粒子经尿素、NP_(40)、TritonX—100裂解后,在薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳中出现4条蛋白带。从感染48h的细胞培养物中提取到水貂肠炎病毒线状双股复制型DNA(RF—DNA)。通过琼脂糖凝胶电泳测定,该RF—DNA大约有5000个硷基对。经限制性内切酶分析,RF—DNA有2个HindⅢ酶切点,1个PstⅠ酶切点和1个ECoRⅠ酶切点。     

提取家蚕肠道微生物总DNA的2种方法的比较研究

为寻找提取家蚕中肠道微生物总DNA的方法,比较研究了2种方法:①直接提取家蚕中肠道内容物的总DNA,再选择性研究其中来源于微生物的DNA;②先分离家蚕中肠道的微生物,再提取其总DNA.结果表明,方法②所得到的DNA数量较少,但纯度较高;方法①的数量多,种类齐,但杂质多.2种方法分别适合于不同的研究目的.     

瘤胃微生物总DNA快速提取法研究

本文介绍了一种简便快速地提取瘤胃微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取植物的CTAB法进行改进而成。与经典反复冻融 SDS/蛋白酶K裂解法相比,该法可在数小时内高效地提取瘤胃内容物总DNA,经琼脂糖凝胶电泳对所提取瘤胃微生物总DNA进行检测,证明所获得的瘤胃总DNA符合分子生物学操作要求。     

鸡、鸭消化道pH和消化酶活的比较研究

为阐明鸡、鸭对营养物质利用率差异的原因，比较了8只公鸡和8只公鸭消化道内容物酸碱性及体内主要蛋白质消化酶、碳水化合物水解酶和脂肪水解酶活性的差异。结果表明：（1）鸭消化道前段除口腔pH比鸡的高（P〈0.01），食管膨大部、腺胃和肌胃的pH均比鸡低（P〈0.05或P〈0.01），而后段消化道从空肠开始到直肠，鸭的pH均比鸡高（P〈0.05）。（2）鸡和鸭消化道内主要蛋白酶活性存在差异。鸭肌胃内容物中胃蛋白酶的相对活性和总量都极显著高于鸡的（P〈0.01）；鸭十二指肠、空回肠和盲肠内容物以及胰腺组织中胰蛋白酶的相对活性和总量高于鸡（P〈0.05或P〈0.01）；鸭空回肠内容物中糜蛋白酶的活性显著高于鸡（P〈0.05）。（3）鸭胰腺组织中脂肪酶相对活性极显著高于鸡（P〈0.01），脂肪酶总量显著高于鸡（P〈0.05）；肠道内容物中脂肪酶的活性也大多数高于鸡。（4）鸡和鸭消化道内可溶性碳水化合物水解酶活性差异没有很强的规律性，但鸭空回肠内容物中纤维素酶的相对活性高于鸡（P〈0.01），盲肠内容物中纤维素酶的总量显著高于鸡（P〈0.05）。消化道中消化酶活性差异是鸡鸭对饲料养分消化利用差异的原因之一。     

瘤胃微生物总DNA快速提取法研究

本文介绍了一种简便快速地提取瘤胃微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取植物的CTAB法进行改进而成.与经典反复冻融＋SDS/蛋白酶K裂解法相比,该法可在数小时内高效地提取瘤胃内容物总DNA,经琼脂糖凝胶电泳对所提取瘤胃微生物总DNA进行检测,证明所获得的瘤胃总DNA符合分子生物学操作要求.     

不同培养基对家兔盲肠细菌生长的影响

用不同的培养基对健康家兔盲肠内容物进行培养,并对菌群进行初步鉴定。结果表明:在MRS肉汤培养基的基础上添加10%的软粪浸出物可获得更多的细菌种类,并可培养出更多有利于家兔健康的有益菌。     

兔盲肠与牛瘤胃中内容物的酶相

盲肠在家兔营养利用过程中起重要作用,消化道中约80％以上消化物存在于胃和盲肠中。兔盲肠与胃的容积几乎相同。盲肠消化主要靠微生物的发酵作用。许多研究征实,盲肠中的代谢与瘤胃中的相类似。但有关盲肠与瘤胃消化的生物化学比较还缺乏报道。现在,酶标已应用于研究和比较大分子与尿素水解作用可能的途径,以及在免盲肠和牛瘤胃中氨的同化作用和转运。材料和方法新西兰白兔饲喂维持日粮,含粗蛋白18％、粗纤维13％和绿Biul叶,自由采食。用人工瘘管采得成年阉牛瘤胃液。阉牛自     

不同抗凝剂对新疆卡拉库尔羊外周血液中总DNA提取的影响

为了分析不同抗凝剂对新疆卡拉库尔羊外周血液中总DNA提取的影响，本试验采用肝素钠、枸橼酸三钠、EDTA-Na2三种抗凝剂、以不同时间对血样进行抗凝处理，然后提取血液总基因组DNA。结果表明，三种抗凝剂处理0.5h后，对外周血液总基因组DNA的提取无影响，均可获得典型DNA标本。同时，随着处理时间的延长，。这三种抗凝剂对血液中总DNA的提取有比较大的差异，其中构橼酸三钠的效果最为稳定；同种抗凝荆在不同抗凝时间内对血液中总DNA的提取无明显影响。     

凤阳大骨鸡消化道内容物淀粉酶活性的比较研究

为了了解凤阳大骨鸡消化道不同部位内容物淀粉酶活性有无差异,笔者采用碘-淀粉比色法测定10只凤阳大骨鸡肠道内容物淀粉酶活力,检测样本是十二指肠、空肠、回肠、盲肠、直肠。试验所测定的十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠内容物淀粉酶活力分别为4026.88 U/g±2099.50 U/g、6250.05 U/g±445.28 U/g、5128.77 U/g±1488.42 U/g、2191.78 U/g±1546.80 U/g和471.75 U/g±146.98 U/g。研究表明,凤阳大骨鸡消化道不同部位内容物淀粉酶活性存在显著差异。     

基于16S rDNA测序分析柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群的影响

为探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群的影响,采集对照组和球虫感染组雏鸡盲肠内容物,提取DNA,16S rDNA测序分析鸡盲肠菌群丰度、多样性的变化,采用粪菌移植验证正常鸡肠道菌群对柔嫩艾美耳球虫感染的保护作用。16S rDNA测序结果显示,柔嫩艾美耳球虫感染后盲肠内菌群丰度、多样性显著降低。在门水平上,感染前,两组雏鸡盲肠的优势菌门均为厚壁菌、变形菌、放线菌;感染后厚壁菌门丰度下降,变形菌门、放线菌门的丰度上升,差异显著(P<0.05),感染组出现了拟杆菌门。在属水平上,与对照组相比,感染组鸡盲肠微生物菌群中乳杆菌属、埃希菌-志贺菌属、拟杆菌属、罗姆布茨菌属、棒状杆菌属、肠球菌属、变形杆菌属丰度增加但差异不显著(P>0.05),毛螺菌科未定属、瘤胃球菌属、梭菌UCG-014、瘤胃球菌科未定属丰度显著下降(P<0.05),GCA-900066575丰度降低但差异不显著(P>0.05)。粪菌移植结果显示,与生理盐水移植组相比,盲肠内容物移植组和粪便菌移植组能显著减轻柔嫩艾美耳球虫感染后鸡增重降低的影响,减轻盲肠损伤,卵囊产量显著下降(P<0.05)。盲肠内容物...