郑州地区种鸡场鸡白血病的初步调查

调查结果表明，被调查的郑州地区８个父母代种鸡场，有５个为鸡白血病感染阳性场。在调查的８个品种种鸡中，检出的５个阳性品种均为进口，种群，应用羽髓琼脂扩散试验和卵清琼脂扩散试验进行对比检测，结果证明；ＦＭＡＧＤＴ检出阳性率为７．６％－２０％；而ＥＡＡＧＤＴ则为６．３％－１６．６％，前者检出的效果高于后者。     

核基质附着区(MAR)调控的人胰岛素样生长因子(hIGF-1)转基因兔的制备

用ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ双酶解含鸡α－珠蛋白基因５′端核基质附着区（ＭＡＲ）、小鼠金属硫蛋白基因启动子（ＭＴ－１）和人胰岛素样生长因子－１（ｈＩＧＦ－１）基因的ｐＭＴＳＭＣＡＧ质粒，０．６％琼脂糖凝胶电泳，玻璃乳回收纯化ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１片段（３．９ｋｂ），用该片段制备转基因兔。利用水平显微注射系统注射１－细胞兔胚胎４６８枚，移植到３６只受体兔，有８只妊娠，共产下１９只活仔兔。采仔兔耳样提取基因组ＤＮＡ，应用ＰＣＲ技术分析其外源基因整合情况，获得８只阳性兔（显示出约６００ｂｐ外源ＤＮＡ条带）。再对８只阳性兔的ＰＣＲ产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，得到５只整合有ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１外源基因的转基因兔，转基因整合率为２６．３％（５／１９）。用１只阳性转基因公兔（５０２号）繁殖了６窝，共获得４２只仔兔。采仔兔耳样提取基因组ＤＮＡ后，如上用ＰＣＲ分析和做Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，Ｆ１代中有５只整合有ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１融合基因。     

核基质附着区（MAR）调控的胰岛素样生长因子（hIGF—1）转基因兔…

用ＥｏｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ双酶解含鸡α－珠蛋白基因５′端核基质附着区（ＭＡＲ）、小鼠金属硫蛋白基因启动子（ＭＴ－１）和人胰岛素样生长因子１－（ｈＩＧＦ－１）基因的ｐＭＴＳＭＣＡＧ质粒，０．６％琼脂糖凝胶电泳，玻璃乳回收纯化ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１片段（３．９ｋｂ），用该片段制备转基因兔。利用水平显微注射系统注射１－细胞兔胚胎４６８枚，移植到３６中受体兔，获得８只阳性兔（显示出约６００ｂｐ外源ＤＮＡ     

应用改良琼指扩散试验检测鸡传染性法氏囊病病毒的研究

应用加３％ＰＥＧ的改良ＡＧＤＴ检测鸡ＩＢＤＶ，检出率最高，对临诊疑似ＩＢＤ的１６个病例检测结果证明，有改良ＡＧＤＴ检出率为６２．５％，而用常规ＡＧＤＴ法检测的阳性率为４３．７％，前者比后者检出率提高１８．８％，同时，在检出的阳性病例中，用改良ＡＧＤＴ法检出ＩＢＤＶ抗源的滴度比常规法高出１～２个倍比滴度。     

某鸡群马立克氏病毒侵袭及免疫接种失败

某肉用种鸡场在一批已接种过ＨＶＴ－Ｆｃ１２６疫苗的黄羽肉种鸡群中暴发ＭＤ。据统计，从１０３日龄至２２４日龄间肿瘤性疾病发生及死亡数，公鸡１３５只，母鸡１０８９只，死亡率（占存栏数）４５．４％。送检５０只病死鸡，经大体病理剖检、病理组织学检查、鸡胚感染试验及琼脂扩散沉淀试验，诊断为ＭＤ。     

青海细毛羊血清运铁蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对４０１只青海细毛羊的血清运铁蛋白多态性进行了研究。结果表明：①青海细毛羊血清运铁蛋白座位上有ＴＦＡ，ＴＦＧ，ＴＦＢ，ＴＦＣ，ＴＦＤ，ＴＦＭ，ＴＦＥ和ＴＦＱ８个等位基因，其中ＴＦＣ（０．３８７８）和ＴＦＡ（０．２４９４）为优势等位基因；②已发现ＴＦＡＡ，ＴＦＡＧ，ＴＦＡＢ，ＴＦＡＣ，ＴＦＡＤ，ＴＦＡＭ，ＴＦＡＥ，ＴＦＡＱ，ＴＦＧＧ，ＴＦＧＢ，ＴＦＧＣ，ＴＦＧＤ，ＴＦＢＢ，ＴＦＢＣ，ＴＦＢＤ，ＴＦＢＭ，ＴＦＣＣ，ＴＦＣＤ，ＴＦＣＭ，ＴＦＣＱ，ＴＦＤＤ，ＴＦＤＭ，ＴＦＤＥ２３种基因型，以ＴＦＡＣ（２０．９５％）的出现频率最高；③ＴＦ座位的基因杂合度为０．７３８１；④在公羊组和母羊组，ＴＦ基因型与体重、毛长和产毛量之间无显著性联系。     

鸡传染性法氏囊病的快速诊断

应用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体及其荧光标记物，对接种ＩＢＤ疫苗、强毒感染和自然病例鸡组织进行直接荧光抗体试验、斑点酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验三种检测方法的比较，结果表明，鸡接种疫苗后１０天内ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ均呈阳性反应，而ＡＧＰ只在接种后６－８天的样品中检出抗原。２２例人工感当鸡和４０例自然发病鸡组织的检测结果表明，ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的敏感性基本一致，且高于ＡＧＰ，它们的     

双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病

作者进行了双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病的试验，试验鸡共５０００只，设９个治疗组，１个对照组，每组５００只ＡＡ肉鸡。试验组鸡群于１～７天，２２～２８天，分别选用敏感抗菌素氟哌酸（ＦＰＡ，５０ＰＰＭ），强力霉素（ＤＯＣ。７５ＰＰＭ，），氯霉素（ＣＭＴ，７５０ＰＰＭ）进行双疗程治疗，取得了满意的效果。ＤＯＣ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＤＯＣ、ＤＯＣ－ＦＰＡ、ＦＰＡ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＦＰＡ、ＤＯＣ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＦＰＡ、ＣＭＴ－ＣＭＴ各试验组的存活率分别为９２．８％、８７．６％、９７．２％、９６．４％、９５．８％、８９．６％、９４．６％、９６．２％、８８．４％。对照组的存活率７９．４％。     

青海藏羊血清运铁蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对青海省三角城种羊场和达日县的１９６份藏羊血样进行了血清运铁蛋白多态性的研究。结果发现：①在被检藏羊的血清运铁蛋白位点上共发现ＴＦ￣Ｉ，ＴＦ￣Ａ，ＴＦ￣Ｇ，ＴＦ￣Ｂ，ＴＦ￣Ｌ，ＴＦ￣Ｃ，ＴＦ￣Ｄ，ＴＦ￣Ｍ，ＴＦ￣Ｅ，ＴＦ￣Ｑ和ＴＦ￣Ｐ１１个等位基因，其中ＴＦＣ（０．３２４０），ＴＦ￣Ｂ（０．２６７９）和ＴＦ￣Ｄ（０．２１６８）为优势等位基因；②共发现ＴＦＩＥ，ＴＦＡＡ，ＴＦＡＢ，ＴＦＡＣ，ＴＦＡＤ，ＴＦＡＭ，ＴＦＧＢ，ＴＦＧＬ，ＴＦＧＣ，ＴＦＧＤ，ＴＦＢＢ，ＴＦＢＣ，ＴＦＢＤ，ＴＦＢＭ，ＴＦＬＣ，ＴＦＬＤ，ＴＦＬＥ，ＴＦＣＣ，ＴＦＣＤ，ＴＦＣＥ，ＴＦＣＱ，ＴＦＣＰ，ＴＦＤＤ，ＴＦＤＭ，ＴＦＤＥ和ＴＦＤＱ２６种基因型，其中ＴＦＢＣ（２０．４１％）、ＴＦＣＣ（１３．７８％）和ＴＦＢＤ（１１．７４％）为优势基因型。     

斑点免疫金测定法检测鸡减蛋综合征抗体的研究

用胶体金标记提纯后的免抗鸡ＩｇＧ，建立了一件以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金作为标记物的检测ＥＤＳ－７６病毒抗体的斑点免疫金测定法（ＤＩＧＦＡ）．该法具有简便、灵敏、快速等优点，全过程于３～５分钟内完成，阳性结果在膜上呈现红色斑点；对鸡ＩｓＧ的最小检测量（灵敏度）为６３×１０－９ｇ；与其它病毒阳性血清无交叉反应。ＤＩＧＦＡ检测ＥＤＳ－７６抗体既可定性，也可定量。检测８０份待检血清，在ＨＩ检出的５６份阳性标本中（效价≥４ｌｏｇ２）用ＤＩＧＦＡ检出阳性标本５５份（效价≥６１ｏｇ２）二者阳性符合率为９８．２％．与ＨＩ比较，ＤＩＧＦＡ平均高２．５（ｌｏｇ２）。本技术为ＥＤＳ－７６和其它禽病的快速诊断和免疫监测提供了一个新的方法。     

分泌抗禽呼肠孤病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定

采用腹腔的接种１次脾内注射禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）蛋白免疫小鼠，经３次融合后，共筛选８株分泌抗禽呼肠孤病毒（单克隆抗体杂交瘤细胞株，这８株ＭｃＡｂ均可与ＡＲＶＳ１１３３株，ＦＤＯ株发生反应，而与ＩＢＤＶ，ＭＤＶ，ＥＤＳ－７６病毒不发生反应，经亚类鉴定，ＡＥ７，ＡＦ８，ＢＤ１，ＤＨ１０，ＥＥ５为ＩｇＧ１；ＡＤ６，ＣＧ４为ＩｇＣ２ａ，ＡＧ７为ＩｇＧ２ｂ。腹水效价在１０＾３～１０＾５之间。     

二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较

分别用血清中和（ＳＮ）试验和单克隆抗体（ＴＧＥｍＡｂ和ＴＧＥ／ＰＲＣＶｍＡｂ）阻断酶联免疫吸附试验（Ｂ－ＥＬＩＳＡ）对８１头美国进口猪血清作猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）抗体检测。ＳＮ试验检出７份阳性血清，检出率为８．６４％；Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于ＳＮ试验     

间接法Dot－ELISA检测鸡败血支原体（MG）抗原的研究

本文首次建立了检测鸡败血支原体（ＭＧ）抗原的间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。ＭＧ抗原的最低检出量为７．８１×１０￣４ＣＦＵ／ｍｌＭＧ人工及自然感染样本的抗原检测结果与ＭＧ分离的符合率分别为８４．６％和９２．９％。间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测抗原经济、快速、操作简便，有较好的敏感性、特异性和重复性，能检出ＭＧ人工及自然感染病鸡的带菌情况，适合于大规模抗原样本的检测，可以用作疫病早期诊断的依据和进行流行病学调查。     

胶乳凝集试验在鸡传染性法氏囊病诊断中的应用（摘要）

本文应用鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体（ＩＢＤＶ—ＭｃＡｂ）致敏的聚苯乙烯胶乳，建立了检测ＩＢＤＶ抗原和抗体的胶乳凝集（ＬＰＡ）和胶乳凝集抑制（ＬＰＡＩ）试验。ＬＰＡ可检测出６μｇ／ｍｌＩＢＤＶ蛋白。作者比较了ＬＰＡ、直接荧光抗体试验（ＤＦＡ）和琼脂扩散沉淀试验（ＡＧＰ）三种方法检测ＩＢＤＶ抗原的特异性、敏感性和相关性，明确了ＬＰＡ和ＤＦＡ试验的检出率高于ＡＧＰ。ＬＰＡ和ＤＦＡ试验结果的符合率为８６％。     

新城疫病毒F48E8株融合蛋白基因的克隆

以提纯的我国标准ＵＤＶＦ４８Ｅ８强毒株基因组ＲＮＡ为模板、化学合成的融合蛋白（Ｆ）基因特异寡核苷酸为引物，反转录合成Ｆ基因ｃＤＮＡ，并采用同聚物加尾的方法克隆到细菌质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（－）。经ＡＩＸ平板筛选和酶切分析，并用Ｆ基因片段核酸探针作ｄｏｔ－ｂｌｏｔ检测，共获得插入片段长度在０．６￣２．８ｋｂ之间的阳性克隆３４个，其中插入片段大于１．５ｋｂ的阳性克隆８个。用多种限制性内切酶对阳性克隆ｐＦ７     

不同大豆加工产品对早期断奶仔猪饲用价值的研究

２１日龄平均体重的５．８５ｋｇ的断奶仔猪３２头,按随机区组设计分２组,分别饲喂豆粕（ＳＢＭ）和膨化全脂大豆（ＥＦＳ）型日粮。试验结果表明：０～１４ｄ间,ＳＢＭ组平均日增重（ＡＤＧ）和平均日采食量（ＡＤＦＩ）分别比ＥＦＳ组显著提高４５．９％和２５．８％（Ｐ〈０．０５）;１５～２８ｄ间,ＳＢＭ组ＡＤＧ比ＥＦＳ组显著提高７．７％（Ｐ〈０．０５）。全期试验（０～２８ｄ）ＳＢＭ组ＡＤＧ和ＡＤＦＩ分别比ＥＦＳ     

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原I型特异性和群共同性决定簇的…

用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体，以Ｉ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的１株单克隆抗体细胞株，定义名ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ｉ，ⅡⅢ型ＭＤＶ均呈阳     

应用ELISA检测种鸡白血病病毒群特异性抗原

禽白血病是由病毒引起的一种肿瘤性传染病，在自然界中鸡广泛发生的是淋巴细胞性白血病（ＬＬ）。本病在世界各地均有发生，感染率高，发病率低，是危害养鸡业的主要疾病之一。我国５０年代在甘肃省兰州市发现可疑病例，７０年代有１４个省市自治区发现此病［１］。随着养鸡业向集约化高密度饲养的转化，８０年代，北京市有５个县呈散发流行［２］，据抽测某种鸡场禽白血病阳性率高达２８．２％。北京市于１９８５年开始用禽白血病琼脂扩散试验检疫种鸡群，对阳性鸡淘汰处理。１９９７年至１９９８年上半年用ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ方法对本市２…     

RT—PCR与夹心ELISA检测粪便及饲料中IBDV的研究

将ＩＢＤ病鸡粪便及饲料经ＰＥＧ浓缩处理后用ＲＴＰＣＲ与单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ进行ＩＢＤＶ检测。在ＲＴＰＣＲ试验中，粪便和饲料的阳性检出率均为１００％（８／８）；在夹心ＥＬＩＳＡ试验中，粪便的阳性检出率为１００％（８／８），而在饲料中末检出ＩＢＤＶ（８／８％。试验结果证明，ＲＴＰＣＲ是ＩＢＤＶ流行病学特别是传播途径研究的首选方法。     

鸡传染性法氏囊病快速诊断方法的研究

本文报道了一种既可以检测ＩＢＤ囊毒抗原，又可以检测ＩＢＤ抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）双抗体夹心法。用本方法检测ＩＢＤ阳性法氏囊样品１２２份，结果检出阳性１２０份，符合率为９８．４％。检测阴性法氏羹样品８８份，均为阴性。本方法与琼脂扩散试验方法比较，共检测人工感染发病的病死鸡法氏囊９７份，结果琼脂扩散检出阳性法氏囊４９份（５０．５１％），阴性４８份（４９．４８％），而用本方法检测结果，全为阳性，检出阳性率为１００％，比ＡＧＰ法检出率高４９．４８％。检测高免蛋黄液的抗体。１６个样品（以２倍递增进行稀释），结果本方法比琼脂扩散试验高１～２个滴度。试验证明该方法特异、敏感，并且快速简便，试验在室温条件下进行，不需要任何仪器设备，用肉眼观察颜色的变化就可判断试验结果，试验反应时间仅需１０分钟左右。