禽霍乱CA等弱毒菌株对A型(群)猪肺疫的免疫研究

1981——1983年,我们以 Carter 和 Namioka 等人方法,对从本省各地分离,收集的116株猪杀性巴氏杆菌进行了血清型的研究,共得5∶A 和8∶A 血清型菌株70株、占已定群菌株的84.3%,证明这两个血清型在我省广泛存在,它们是引起我省猪肺疫的重要血清型。这两个血清型不但对猪,而且对鸡毒力都很强;它们与我国广泛使用的猪肺疫弱毒菌苗(血清型为6∶B)无交互免疫,但却与禽霍乱弱毒菌株有较好的交互免疫。因此,两年来,我们以我国常用禽霍乱弱毒菌株1号、2号、3号、4号和5号、(本课     

福建及邻近省份禽源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

本研究收集2007~2013年福建省及邻近省份的疑似禽霍乱病死亡鸡、鸭、鹅,进行细菌分离,PCR进行种和荚膜群的鉴定,琼脂扩散试验鉴定其Heddleston氏耐热菌体抗原型。结果共分离鉴定多杀性巴氏杆菌95株,其中鸭源74株,鸡源17株,鹅源4株。其荚膜群全为A型,1型耐热菌体抗原型占67.4%。与20世纪80年代以来我国已有的报道相同,禽源(不含火鸡)多杀性巴氏杆菌血清型仍然以A:1为主。     

禽多杀性巴氏杆菌血清型与外膜蛋白型相关性研究

为了解禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)分离菌株的荚膜血清型、菌体血清型与外膜蛋白型之间的相关性,首先对自行分离的10个菌株采用间接血凝试验和琼脂扩散试验进行鉴定(均为A:1);然后采用超声波破碎、高速离心和十二烷基肌氨酸钠提取外膜蛋白,通过SDS-PAGE电泳的方法对上述10个菌株与C48-1(A:1)、X73(A:1)、P1059(A:3)、CU(A:3,4)等一起进行外膜蛋白(Outer membrane proteins,OMP)分型研究。结果表明:14个禽多杀性巴氏杆菌菌株以2个主要蛋白OmpH和OmpA的差异为依据分为3种主要OMP型;依据次要蛋白的差异,OMP-1,3菌株进一步分为OMP型1.1,1.2和3.1,3.2,其中OMP型1.1有6个菌株,OMP型1.2有5个菌株;OMP型2有1株(YZ7031);P1059为OMP型3.1;CU为OMP型3.2;另外,血清型为A:1的12个菌株中有11个菌株外膜蛋白型均为OMP-1型,血清型为A:3、A:3,4的菌株外膜蛋白型属于3型。说明禽多杀性巴氏杆菌血清型与特定的外膜蛋白型具有很强的相关性。     

禽优势血清型大肠杆菌部分相关毒力基因的检测

为研究禽大肠杆菌的致病性及相关生物特性,试验对湖北省各地方养殖场送检的病料,通过分离培养及生化鉴定,分离得到232株禽大肠杆菌。18个O因子血清鉴定结果显示,优势血清型为O_(20)(19)、O_(78)(27),这两种血清型菌株合计46株,占血清型定型菌株的25.99%(未定型菌株为55株)。对优势血清型禽大肠杆菌菌株进行毒力基因检测,结果表明fimH、iroD、iucD、estA和ibeA基因携带率分别为87.88%、57.58%、48.49%、36.37%、0%。研究结果为湖北地区大肠杆菌防控和疫苗的研制提供数据支撑,并为阐明大肠杆菌的致病机理奠定基础。     

种鸭大肠杆菌性生殖器官病的研究 Ⅱ、鸭大肠杆菌血清型鉴定

本研究对四川省10个县(市)的鸭大肠杆菌性生殖器官病分离的534株细菌进行了血清型鉴定,其结果是:1、鉴出的253株大肠杆菌分属于12个O抗原组,其中主要为08,占76.3%(193/253),其次为O1、O15g和O28;2、在253株大肠杆菌中,44株具有K88抗原,占17.4%,38株具有K99抗原,占15.0%;3、在253株大肠杆菌中,106株无运动力,占41.9%,有运动力的147株,占58.1%,分属于17个H抗原组,主要是H38 (29.2%)、H7 (12.9%)和H3 (12.1%),其次H24、H29和H37;4.O8∶H-(56株)、O8∶H38(25株)、O8∶K88∶H-(15株)、O8∶H7(12株)等血清型为本次传染病的常见致病血清型。     

我国111株由家禽分离的多杀性巴氏杆菌的血清型

为了确定在我国家禽中流行的多杀性巴氏杆菌的血清型,我们鉴定了111株,分离到的禽源菌株,其中102株是由死禽中分离到的,另9株是已致弱的菌株。在荚膜定群中,105株菌株属于A群,6株未能被定群。由我国分离的多杀性巴氏杆菌菌株第一次进行了菌体型的鉴定,发现111株菌株中110株都是05,仅1株属08。因而总的血清型:104株为5:A,6株为5:一,1株为8:A。     

副鸡禽杆菌A、B、C 3个血清型菌株外膜蛋白的差异分析

为了探索不同血清型副鸡禽杆菌菌株外膜蛋白的差异,本试验采用FOCUSTM Global Fractionation试剂盒制备副鸡禽杆菌A(221株)、B(0222株)、C(Modesto株)3个血清型参考菌株的外膜蛋白,进行SDS-PAGE凝胶电泳。结果表明,不同血清型参考菌株的电泳图谱相似,经凝胶定量软件分析,结果显示,主要条带均有7个,其分子质量相似,分别占A、B和C蛋白质总量的70.85%、68.6%和65.71%。此外共有3个蛋白质条带分子质量相似,但蛋白质含量差异显著(P<0.05)。本试验为副鸡禽杆菌外膜蛋白的进一步研究提供了理论依据。     

猪源沙门氏菌毒力基因检测及脉冲场凝胶电泳分型研究

为了解上海及周边地区猪源沙门氏菌的血清型分布、毒力基因及分子分型情况,我们对21株临床分离到的猪源沙门氏菌用沙门氏菌属诊断血清鉴定血清型;采用多重聚合酶链式反应,检测17个主要的毒力基因;应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行分子分型,探寻21株沙门氏菌之间的亲缘关系。结果显示,21株沙门氏菌中,19株血清型为7∶c∶5,1株为4∶i∶2,1株未鉴定出;21株沙门氏菌的17个毒力基因中检出16个,菌株之间无差别;经PFGE后,每个菌株产生13~18条电泳条带,用Bionumerics软件进行聚类分析表明,21株猪源沙门菌相似度在77%~100%,可分为2种不同的基因型,其中A型有19株、B型2株,亲缘关系较近。本次实验分离的沙门氏菌血清型以7∶c∶5为主,含有16个主要的毒力基因,A型为优势基因型。     

鸭疫里默氏菌一个可能新型的鉴定

用玻片凝集试验、试管凝集试验和琼脂扩散沉淀试验，对13个鸭疫里默氏菌分离株进行了血清型鉴定。玻片凝集试验中，这些菌株只与8型抗血清发生强凝集反应，试管凝集试验中，其代表菌株C882与8型参考菌株之间仅存在单向低度交叉凝集反应，且与1～19型中的其他18个血清型参考菌株无可见的交叉凝集反应；用C882吸收可消除8型抗血清与C882等菌株之间的交叉凝集反应，但不影响8型抗血清的同源凝集反应和沉淀反应能力。琼扩试验中，C882与1～19型参考菌株之间不产生可见的交叉沉淀反应。沉淀反应模式表明，以C882为代表的13株细菌的热稳定抗原具有同一性。结果表明，13株待检菌株可能属于一个新的血清型。     

2008—2017年我国部分地区禽源沙门氏菌流行状况及耐药分析

为了解我国禽源沙门氏菌的流行和耐药情况及其血清型、ST型和耐药性之间的关系，对2008—2017年，在我国部分地区分离的90株禽源沙门氏菌，用血清凝集方法鉴定其血清型，用微量肉汤稀释法对部分菌株进行药物敏感性试验；经PCR扩增、测序和比对查询，得到90株菌的ST型，并用BioNumerics 7.6分析MLST分型及其亲缘关系；利用统计学方法，对分离株的血清型、ST型和耐药性进行差异显著性和相关性分析。血清型鉴定结果显示：90株禽源沙门氏菌可分为16种血清型，其中S. Enteritidis为优势血清型。71株菌株的药物敏感性试验结果显示：多重耐药菌株占比90.14%（64/71），对氨苄西林（78.87 %）和磺胺异噁唑（77.46 %）的耐药率较高，仅S. Indiana菌株的ST17型对头孢他啶耐药。其他相关分析结果显示：分离菌株对氨苄西林等7种药物的耐药率显著上升（P＜0.05），而对黏菌素耐药率下降极显著（P＜0.01）；鉴定出14种ST型，其中ST11为优势型；最小生成树显示，仅有一个ST complex，菌株来自7个省市；S. Indiana的耐药率显著高于S. Enteritidis（P＜0.05），且其ST17所耐药物种类多于其他ST型。结果表明：我国禽源沙门氏菌的优势血清型是S. Enteritidis，优势ST型为ST11，其血清型和ST型有一定的相关性，且不同地区分离株之间有一定的亲缘关系；分离株对不同药物的耐药性存在差异，且耐药谱和耐药率与血清型相关，S. Indiana菌株与S. Enteritidis相比更易形成耐药菌株。     

天津地区鸡致病性大肠杆菌血清型分布及其优势血清型的外膜蛋白型研究

从天津地区各区县养鸡场分离 ,鉴定出 45株鸡致病性大肠杆菌。对 45株致病性大肠杆菌进行血清型鉴定 ,共定型出 3 1株 ,分属 1 4个血清型 ,其中 O78、O88、O2 、O4 5、O53、O14 5为优势血清型 ,占定型菌株的 58.3 %。提取 O78、O88、O2 、O4 5、O53和O14 56个血清型 1 8个分离株的外膜蛋白 ( Outermembrane protein,OMP) ,测定外膜蛋白型 ( Outmembrane protein patterns,OMPS) ,SDS-PAGE分析表明这些分离株共产生了 3个 OMP型 ( 1～ 3型 )。 OMP-1型为 O78、O88、O2 、O53、O14 55个血清型分离株所共有 ,OMP-2型为 O78、O4 5、O14 53个血清型分离株所共有。这表明同一血清的菌株可能属于完全不同的 OMP型 ,而血清型不同的菌株也可能为同一 OMP型。     

云南部分地区仔猪大肠杆菌分离鉴定

采自云南昆明、曲靖、楚雄、大理、玉溪、保山等州(市)规模化养猪场疑似仔猪黄、白痢的病(死)猪直肠棉拭子、十二指肠和肠系膜淋巴结病料,分离158株大肠杆菌。通过40种主要致病性大肠埃希氏菌O抗原的血清型鉴定,除46株未能定型、6株自凝外,鉴定出106株分离株的O抗原血清型。这些分离株覆盖了23个血清型,其中O24、O119、O88、O8、O9、O85这6种血清型的菌株占总分离菌株的39.24%、占定型菌株的58.49%,为分离株的优势血清型。这些血清型与已报道的常见血清型间存在一定差异,O24、O119作为猪致病性大肠杆菌优势血清型在我国少见报道。     

猪丹毒杆菌的血清学特性

近年来,不断发现猪丹毒杆菌新血清型菌株,对不同血清型菌株的致病性、诊断与免疫等,引起了研究者的重视。我国对丹毒杆菌血清型的研究,早在五十年代马闻天等以Dedie,k的方法,检查了从我国各省区搜集的丹毒杆菌107株,其中A型46、B型40、N型21株。以各型的代表株经琼扩沉淀反应检查结果,证明有不同的抗原构造,崔治中1979年报告在河北省馆陶县除分离到A、B、N型外,并有他命名的G_1,G_2及G_3型。1980—1982年中监所搜集到了国外现有的22个血清型的参考菌株,经分别制成了免疫血清,初步检查我国各地从急性病例分离的丹毒杆菌148株,结果1a型占81.0%,2型占18.2%,但从15头健康猪分离的菌株,除1a型和2型外,还有5、6、8、3、11及21型。而且出现有用同一菌株制的抗原对2或3个型血清有反应。据荣昌畜牧兽医学院佘永建等人用免疫血清作培养凝集试验,对1及2型均有凝集。R.L.Wood报告用1型茵制的菌苗,对9及10型免疫力低或无免疫力。为此,猪丹毒杆菌的血清型与流行病学和免疫的关系如何有待深入研究。为了有助于开展这方面的工作,我们将阐述较全面的1975年Howard.w.Dunne的《猪病学》第四版猪丹毒杆菌血清学特性一章全文译出,供参考。     

陕西省部分禽源性大肠杆菌的外膜蛋白型

从陕西省部分优势血清型的禽源性大肠杆菌中提取外膜蛋白 (outer membrane protein,OMP) ,用 SDS- PAGE进行 OMP分型。 18株菌共产生了 3种 OMP型 ,其中 4株 O1菌株 ,4株 O2菌株 ,4株 O78菌株和 3株 O89菌株各属2个 OMP型 (OMP- 1,2型 ) ;3株 O75菌株属 3个 OMP型 (OMP- 1,2 ,3型 )。结果表明 ,陕西省分离的优势血清型禽源大肠杆菌具有多样性的 OMP型 ,且多种血清型间具有共同的 OMP型。     

临沂市鸡源致病性大肠杆菌的优势血清型监测及其致病性试验

为了查清我市禽大肠杆菌的血清型及其致病性,对我市不同区域的23个规模化养鸡场及60个养鸡户的412份疑似大肠杆菌病病例进行了细菌分离,并对其进行了生化试验、致病性试验、血清学鉴定。结果:(1)412份病料中分离出了362株大肠杆菌,分离率为87.9%;⑵不同区域的鸡场流行的血清型有较大差异,在362个分离株中,除了27株未能定型、12株自凝外,共鉴定出323个分离株的O型血清型,占分离株的89.2%,这些定型菌株覆盖了36个血清型;(3)优势血清型为O1、O78、O18、O11、O88、O24,这6种血清型共占定型菌株的56.3%;⑷6种优势血清型均具有致病性,其中O1、O78、O18、O11、O24为高致病性菌株,O88为中致病性菌株。     

上海市动物源性食品中单增李斯特菌的流行病学及生物被膜形成能力研究

为了解上海市动物源性食品中单增李斯特菌的污染状况,在上海市不同超市和农贸市场采集479份动物源性食品样品,依据国标方法进行菌株分离,并对分离菌株的耐药性、血清型及生物被膜形成能力进行测定。结果共分离鉴定34株单增李斯特菌,分离率为7.1%(34/479)。药敏试验结果显示单增李斯特菌分离株的耐药率虽然不高,但日趋严重,对氨苄青霉素和万古霉素均敏感,对头孢曲松的耐药性最高(55.88%),林可霉素次之(41.18%)。血清型鉴定表明单增李斯特菌分离株以血清型1/2a(3a)型为主(76.47%),血清型1/2c(3c)次之(17.65%),而致病性强的血清型4b(4d、4e)仅占2.94%。生物被膜形成能力实验表明,所有的菌株均能形成生物被膜,其中76.47%(26/34)分离株生物被膜形成能力微弱。上海市动物源性食品中单增李斯特菌污染情况较为严重,主要流行1/2a(3a)血清型,耐药率日趋严重,均可形成生物被膜。因此,应加强对动物源性食品中单增李斯特菌的监控。     

肉仔鸡病原大肠杆菌地方分离株的血清型鉴定

从河北的三河、滦南、乐亭、卢龙及昌黎等地 2 9个养鸡场 (户 )分离鉴定了 82株病原大肠杆菌 ,用 54种常见动物病原大肠杆菌单价 O抗血清进行了血清型鉴定。结果 82株分离菌有65株被鉴定出了相应 O血清群 (占鉴定菌株的79.2 6%) ,分属 6种不同血清型 ,其中以 O78和O45两种为优势血清型 (占定型菌株的64.61 %) ,其余 4种 O血清群占定型菌株的 3 5.3 9%,尚有 1 7株未能定型 (占鉴定菌株的 2 0 .74%)     

张家口地区鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定与耐药性监测

从张家口地区鸡场怀疑患大肠杆菌病的病死鸡的肝脏、心包等组织中分离鉴定出27株大肠杆菌,对其进行大肠埃希菌O群抗原鉴定,共有6种O型血清型,O18、O78、O76为优势血清型,未定型菌3株,占待检菌株的11.1%;对27株分离菌进行抗生素敏感性试验,所有菌株对硝基呋喃类抗生素(NFT)和头孢菌素类抗生素(CFZ、CED)极度敏感,对其它抗生素的敏感性则各不相同。     

铜绿假单胞菌的血清分型、鞭毛分型和脉冲场凝胶电泳分型

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种重要的人畜共患病原菌,给人畜健康带来威胁。细菌分型是揭示病原菌流行规律、传播机制以及制定相应防控措施的基础。选取水貂、人和羊源PA共78株分别进行O-抗原血清分型、H-抗原鞭毛分型以及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果显示,60株水貂源PA主要流行血清型为G型(73.3%),其次为I,M,B,E型;鞭毛A型和B型分别占91.7%和8.3%。16株人源PA以血清型E型(25%)为主,其他型别G,M,I,B,D,F,H零散分布,鞭毛A,B型分别占68.8%和31.2%。2株羊源PA血清型为I型(100%),且均为鞭毛B型。PFGE分子分型共分为14个谱型,24个亚型,其中B1、F3、G1、H1这4个亚型的菌株同源性达到100%。结果表明,水貂源PA感染与血清G型和鞭毛A型高度相关(P0.01);人源PA感染优势血清型为E型且与鞭毛A型显著相关(P0.01);2株羊源PA感染均为血清I型和鞭毛B型;不同来源的PA菌株其PFGE分型呈现多样化和复杂性,相同来源的菌株其PFGE谱型有的完全相同,显示同一个克隆传播的可能,有的差异很大,显示不同分子克隆传播。本试验有助于阐明山东省3种来源PA的分子流行特征,为开展PA相关风险评估、控制及疾病诊治提供依据。     

共和县地区猪场仔猪致病性大肠杆菌血清型鉴定

采集青海省共和县不同地区4个猪场仔猪粪样316份,并采用玻板凝集法进行了O抗原血清型鉴定。结果发现:316份仔猪粪样经分离鉴定出致病性大肠杆菌176株,155株鉴定出抗O血清型。该地区流行优势血清型为O11(13株)、O60(12株)、O119(10株)、O137(9株)、O141(10株)、O144(12株)、O147(12株)和O149(8株),分别占8.38%、7.74%、6.45%、5.81%、6.45%、7.74%、7.74%和5.16%。8种优势血清型占总定型菌株的53.5%(83/155)。