国产与进口猪伪狂犬病gE基因缺失苗免疫对比试验

为比较国产与进口猪伪狂犬病娅基因缺失疫苗免疫效果,并制定合理的免疫程序,笔者选用国产和进口的猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,用3种不同的免疫程序,对240头母猪和1200头仔猪进行免疫试验。试验期间,定时随机采集免疫猪的血液,用ELISA试剂盒进行抗体检测。结果表明,母猪和仔猪无论免疫国产或进口猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,免疫效果均良好。母猪免疫抗体合格率达100％,仔猪49日龄前免疫抗体合格率达100％,免疫效果差异不显著。但免疫猪群在75日龄后抗体逐渐降低,120日龄后基本消失。为维持猪体免疫力,不给野毒入侵的机会,建议仔猪首免后,在适当时间进行二次加强免疫。     

猪伪狂犬病病毒gE基因缺失苗免疫试验

为了掌握猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗免疫效果,并制定合理的免疫程序,选用国产和进口的猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,用4种不同的免疫程序,对250头母猪和1000头仔猪进行了免疫试验。试验期间,按比例定时采集免疫猪的血液,用ELISA试剂盒进行抗体检测,证明猪伪狂犬gE基因缺失疫苗,无论国产苗或进口苗都可以产生良好的免疫效果;无论跟胎免疫、1年2次普免,每隔4个月定时免疫,效果均良好。种猪免疫抗体合格率达100%,仔猪49日龄前抗体合格率达100%,75日龄后抗体逐渐降低,120日龄后基本消失。为了使猪体免疫力更强,不给野毒入侵的机会,建议仔猪在首免后,适当时间进行二次加强免疫。而只给公猪、母猪春秋两季免疫,不给仔猪免疫组,仔猪在35日龄后抗体降为阴性,不能抵抗野毒的侵袭,这种免疫方法不宜推广。     

伪狂犬病免疫净化方案的评价

从一伪狂犬病阴性场选肉仔猪77头,均在2日龄鼻内接种伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗1头份,免疫前采血,以后每间隔两周采血1次直至18周龄,检测并分析每份血样中的gE和gB抗体。另从一伪狂犬病阴性场选后备母猪50头,于77、147、175日龄肌注伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,于40、60、76、91、114、143、161、173、191、226日龄采血,检测并分析每份血样中gB抗体。结果表明,肉仔猪各周龄伪狂犬病野毒抗体(gE)均为阴性,疫苗母源抗体(gB)随日龄的增加而下降,但在114日龄有5头猪gB抗体阳转;免疫伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗的后备母猪,首免后抗体上升,二免后抗体明显上升、并保持高水平,第3次免疫后抗体较二免后上升不明显。     

两种猪伪狂犬病毒基因缺失疫苗产前免疫母猪对仔猪抗体水平的影响

试验选择广东某规模化猪场怀孕母猪30头及其所产仔猪30头用进口猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗(B苗)和国产猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗(A苗)进行免疫试验.结果表明:各组母猪产前10 天免疫接种后20～30 d的母猪抗体水平接近或达到峰值,其所产仔猪10～60 d获得的母体抗体恰巧达到最佳.根据母猪产仔时抗体水平及其后代母源抗体维持时间的关系,建议母猪产前20～30 d为猪伪狂犬病病毒加强免疫接种的适宜时间,仔猪60日龄为适宜的首免时间;使用B苗和A苗免疫对母猪产前免疫是必要的,有利于控制带毒母猪猪伪狂犬病病毒野毒的排放,降低感染其他猪只的机会,提高仔猪保护率.     

猪伪狂犬病母源抗体衰减规律及适时首免试验

试验采用伪狂犬病gB抗体ELISA试剂盒,分别检测3日龄和1、2、3、4、5、6、7、8、9、10周龄未免疫猪伪狂犬病母源抗体和相应日龄免疫后3周的伪狂犬病gB抗体,以gB抗体阳性率和S/N值分析猪伪狂犬病母源抗体衰减规律和最佳首免时间。结果表明,母猪分娩前1个月免疫伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗,所产仔猪能获得高水平的母源抗体;随着仔猪日龄增加,抗体水平逐渐降低,能维持到10周龄。仔猪在5周龄前免疫伪狂犬病疫苗,母源抗体干扰主动免疫,5周龄后免疫抗体水平均有上升;该场仔猪伪狂犬病最佳首免时间为35~42日龄。     

猪伪狂犬病流行病学的调查

猪伪狂犬病是导致母猪流产,产死胎、木乃伊胎或弱胎的重要疫病之一,尤其会导致新生仔猪出现大量死亡,15日龄内的仔猪死亡率达100%,少数耐过的猪也因为发育不良而成为僵猪,因此,该病一直是制约养猪业发展的重要疫病之一.笔者通过对部分规模猪场猪伪狂犬病的流行病学调查发现,伪狂犬病gE基因缺失疫苗(Bartha-K61株)已免猪场的gB免疫抗体平均合格率可达90.16%,而在已免猪场中还存在gE抗体阳性,平均阳性率为11.76%;通过对已免猪场与未免猪场以及免疫前后的对比和分析,提出单纯依靠疫苗注射并不能完全实现猪伪狂犬病野毒感染率的降低,建立科学的免疫程序,加强防疫管理,实施科学净化才是有效防控猪伪狂犬病野毒感染的重要措施.     

猪伪狂犬病阳性场gE与gB抗体监测及风险评估

采集衡阳某猪场119份血清样品进行伪狂犬病gE-ELISA（酶联免疫吸附试验）与gBELISA抗体检测。gE抗体检测结果表明,该猪场所检测猪群除公猪外都有伪狂犬病野毒阳性,是伪狂犬病阳性场,总阳性率为47%。公猪伪狂犬病野毒抗体阳性率为0,说明公猪暂时还没有感染伪狂犬病野毒,属于阴性猪;母猪群伪狂犬病野毒（gE）阳性率达50%~60%;30~40日龄及60日龄阶段猪群gE抗体阳性率分别为30%和55%,加上可疑的数量达到40%~65%,这阶段野毒抗体阳性估计主要受母源gE抗体的影响,且与母猪阳性背景基本一致,但也不能排除个别仔猪阳性抗体来自病毒感染;90~120日龄阶段gE阳性率不降反升,达到100%,说明90~120日龄阶段猪群是在保育转至肥育舍后被伪狂犬病野毒再次感染,gE抗体S/N值显著下降,抗体水平较高。gB抗体结果表明,该猪场伪狂犬病gB抗体阳性率为98%,公猪伪狂犬病gB抗体阳性率为100%,且公猪的gE抗体阴性,说明公猪gB抗体来源于疫苗免疫;母猪群伪狂犬病gB抗体水平高且整齐,可能是野毒感染和疫苗免疫综合作用的结果;30~40日龄阶段gB抗体水平整齐,这是由于母猪群gB抗体水平高且均匀整齐,其仔猪母源抗体相应较好;60日龄阶段gB抗体水平不整齐,这与母源抗体消退有关;90~120日龄阶段gB抗体水平显著提升,这可能是后期野毒感染所致,因为其gE抗体不降反升。综合该猪场gE和gB抗体检测结果分析表明,该猪场伪狂犬病在种猪群得到了有效控制,生产比较稳定,但种猪带毒且散毒,肥育猪的感染压力加大,造成病毒不断循环,肥育猪伪狂犬病野毒感染的控制成了稳定伪狂犬病阳性场的关键。目前,猪伪狂犬病阳性场应定时监测gE和gB抗体,根据猪场血清学检测结果,结合临床实际情况实时调整免疫程序,以便稳定生产和预防伪狂犬病的暴发。     

山西猪伪狂犬病免疫与野毒感染情况调研

山西2013年以来,即使使用gE基因缺失活疫苗免疫的猪场,也有母猪发生流产、仔猪疑似伪狂犬病病死情况,给养猪生产造成一定的经济损失。2016年、2017年、2018年项目组对山西不同地市的11个规模型种猪场调研证实它们使用的是正规厂家生产的猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗,大部分猪场母猪采取普免,仔猪采取3次免疫;共检测11个猪场母猪血样388头份,野毒感染阳性率为57.94%,最高阳性率为83.33%;仔猪血样727头份,阳性率为34.66%,最高为70.00%,只有一个猪场仔猪没有检出野毒感染抗体。另外,从疑似伪狂犬病病死猪病料检测出猪伪狂犬病病毒阳性19份。初步掌握了山西猪伪狂犬病免疫与感染情况,为有效控制该病流行提供依据。     

种猪场伪狂犬病净化技术探讨与应用

选择徐州六马种猪科技有限公司种猪场作为伪狂犬病净化创建场,通过开展对种公猪、生产母猪、后备种猪、待售种猪伪狂犬病野毒感染抗体(gE抗体)和疫苗免疫抗体(gB抗体)检测,进行猪伪狂犬病野毒感染情况的本底调查,了解各阶段猪群健康状态、免疫情况、免疫抗体水平和野毒感染状况。根据猪伪狂犬病毒野毒感染状况,采用不同的净化方案,进行猪伪狂犬病净化。通过净化,该场种公猪、生产母猪、后备种猪及待售种猪连续2次以上抽检结果均为伪狂犬病gE抗体阴性且gB抗体合格率70%以上,达到猪伪狂犬病净化创建场标准;同时,猪群的健康状况、母猪生产性能和仔猪成活率均有明显提高,为今后猪场伪狂犬病净化工作的开展提供技术参考。     

实验室检测在规模化猪场伪狂犬病免疫程序调整中的应用

为了对福建宁德某规模化猪场伪狂犬病免疫程序进行调整,应用ELISA法对待配后备母猪、繁殖母猪(怀孕40d母猪、怀孕70d母猪和哺乳母猪)、公猪以及60日龄、90日龄、120日龄和160日龄商品猪血清同时进行猪伪狂犬病gE和gB抗体检测,以掌握不同阶段猪伪狂犬病野毒的感染情况并制定适合本场的猪伪狂犬病免疫程序。免疫程序调整以后的检测结果显示:通过对不同猪群伪狂犬病疫苗程序的调整,商品猪后期和待配后备母猪伪狂犬病野毒感染为阴性,说明目前场内采用实验室检测调整伪狂犬病免疫程序的方法是科学的。     

某规模场仔猪伪狂犬病免疫抗体消长规律初探

为给规模猪场猪伪狂犬病(PR)免疫程序制定提供参考,在贵州省某规模猪场选取3组不同母源抗体背景仔猪群,按照不同的免疫程序进行PR疫苗免疫,然后设置不同的检测时间点,采集猪血清采用ELISA方法进行gE和gB抗体跟踪检测,初步探索仔猪群免疫抗体消长规律。结果显示:在母源gE和gB抗体均为阴性背景下,1日龄初生仔猪活疫苗滴鼻免疫对免疫抗体水平没有影响,15日龄基因缺失疫苗注射免疫后,免疫抗体水平逐渐升高,45日龄基因缺失疫苗加强免疫1个月后,免疫抗体水平达到顶峰,此后逐渐下降,到120日龄时,仍有50%的有效保护率;在gE母源抗体阴性背景下,产前40 d免疫母猪,55日龄进行基因缺失疫苗注射免疫后,仔猪免疫抗体水平持续升高,90日龄时再用基因缺失疫苗加强注射免疫1次,至120日龄免疫抗体水平达到顶峰,150日龄后开始下降,到185日龄时,仍有50%的有效保护率;在母源gE抗体阳性背景下,疫苗免疫不能使仔猪产生有效的免疫保护抗体。结果表明,仔猪母源抗体背景对于仔猪免疫程序的制定具有较大影响,合理的免疫程序要结合母源抗体和免疫抗体检测结果合理制定,并要及时淘汰gE阳性种猪。     

福州市某猪场不同日龄猪伪狂犬病血清学检测与评价

[目的]调查福州市某规模化猪场经常出现伪狂犬病例的原因。[方法]采集血样133份,其中公猪8份、经产母猪25份、后备母猪20份、10~30日龄仔猪20份、40~60日龄小猪20份、80~100日龄肉猪20份、120日龄以上肉猪20份,进行伪狂犬病gB和gE抗体检测。[结果]7组猪伪狂犬病gB抗体阳性率分别为100%、100%、95%、100%、70%、90%和40%;伪狂犬病gE抗体阳性率分别为37.5%、56%、25%、45%、30%、5%和15%。[评价]该猪场种猪伪狂犬病疫苗免疫抗体正常,免疫程序合理;但肉猪的伪狂犬病疫苗免疫抗体不均匀,免疫程序不合理;同时,该猪场存在较严重的伪狂犬病野毒感染,需通过调整伪狂犬病疫苗免疫程序以及淘汰gE抗体阳性种猪来净化猪场的伪狂犬病。     

一例农户小型种猪场伪狂犬病的净化

某农户小型种猪场疑似感染伪狂犬病病毒,为了检测出野毒感染猪,净化伪狂犬病,提高猪群健康水平,采用PRV gE抗体ELISA检测试剂盒,对该场免疫了猪伪狂犬病基因缺失疫苗的猪群进行5次野毒感染检测;同时应用实时荧光PCR检测试剂盒,对有临床症状的新生仔猪进行PRV病原检测。经过连续监测、综合防控并适时淘汰,该猪场的PRV野毒感染率降为1.72%,发病仔猪伪狂犬病毒野毒阳性率均降为零。猪场新生仔猪成活率提高,猪群基本无PRV感染,净化效果良好。     

猪伪狂犬病净化技术的研究

在某600头母猪的伪狂犬病阳性猪场,应用猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗对全场所有猪只严格按免疫程序进行强化免疫,8个月后对本场种猪群猪伪狂犬病开展流行病学调查,当抽样检测gE抗体阳性率低于5%时,对全群种猪进行检测并淘汰gE阳性猪只,对免疫后的后备母猪进行逐头检测,gE阴性猪只并入生产群。通过反复检测、淘汰,3年后,该场猪伪狂犬病野毒阳性率由2008年的11.53%下降为0,达到净化标准。     

猪瘟、猪伪狂犬病及猪繁殖与呼吸综合征的免疫试验

选择20日龄仔猪分组后于不同日龄应用猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)及猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗进行免疫,检测猪群免疫前后的抗体水平。结果显示,仔猪免疫猪瘟活疫苗的日龄有待进一步探讨,猪瘟抗体ELISA检测方法比IHA方法可靠;仔猪于20、30、40日龄时免疫猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗,均不会对母源抗体造成干扰;猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗以及高致病性猪蓝耳病灭活疫苗如何使用尚需探讨。     

湖南省部分规模猪场伪狂犬病野毒血清流行病学系统监测与净化分析

自2011年1—11月,先后从湖南省19个规模猪场采集1 096份种猪血清、551份仔猪和肥育猪血清样本,利用gE-ELISA(酶联免疫吸附试验)方法对湖南省19个使用伪狂犬病gE基因缺失疫苗的规模化猪场进行野毒血清抗体的监测与全面分析,结果共检出12份阳性样本,总样品阳性率为0.73%,4个猪场检测到伪狂犬病野毒抗体,猪场阳性率21.05%;显示伪狂犬病仍然在湖南省呈地方性流行,感染压力仍然偏高。种猪野毒总阳性率为0.64%,其中阳性场种猪的阳性率为6.19%,种猪带毒现象仍然普遍。在伪狂犬病阳性场的种猪群中,阳性样本主要集中在后备母猪及胎次较高的母猪群,表明近几年伪狂犬病控制在朝有利的方向发展,但种猪阳性率偏高仍是伪狂犬病控制与净化的关键。在所监测的19个猪场中,仔猪群的样品阳性率和伪狂犬病阳性场仔猪的野毒阳性率都低于对应的种猪群,但有个猪场仔猪伪狂犬病野毒阳性,种猪却没有,表明仔猪野毒感染不容忽视;在仔猪伪狂犬病阳性场中,野毒抗体集中在1～4周龄、17～24周龄。由于仔猪伪狂犬病野毒抗体既可能来自感染,也可能来自母源抗体,因此在进行伪狂犬病野毒血清流行病学调查时应分群、分阶段检测,了解检测样品的来源信息和免疫信息,以准确分析和把握流行动态。结果还表明,生长育成阶段后期有野毒感染,此阶段感染是伪狂犬病流行的重要特点,这与有些规模猪场只重视母猪免疫、忽视仔猪的免疫接种工作有关。目前,疾病呈多重、复杂的趋势,使用优质的gE基因缺失疫苗强化免疫是控制和净化伪狂犬病的重要手段,同时要加强环境消毒,细化生产管理,安全引种混群、注重后备猪的选择、加强定期监测工作,采取综合防控措施遏制湖南省伪狂犬病的流行。     

江苏省猪伪狂犬病流行病学调查及两种疫苗免疫效果评估

为了掌控江苏地区规模化猪场伪狂犬病野毒的感染情况及其流行性趋势,比较变异株猪伪狂犬病疫苗(C株)和Bartha-K61疫苗的免疫防控效果。于2017年5月份至2019年1月份对江苏地区59个规模场进行采样,通过间接ELISA方法检测猪群中的gE抗体来鉴定猪群是否被伪狂犬病野毒感染。另外,在一猪伪狂犬病阳性的规模猪场进行变异株猪伪狂犬病疫苗(C株)和Bartha-K61疫苗的防控效果的实验,通过检测猪伪狂犬病gE,gB抗体及中和抗体来判定猪群的猪伪狂犬病抗体保护水平。显示4 608份检测血样中,gE阳性1 681份,阳性率36%,母猪群gE阳性率46%,育肥猪群gE阳性率28%,59个猪场中育肥阶段gE阳性的猪场22个,占比37%。在其中一个商品猪群gE抗体100%阳性猪场进行2组猪伪狂犬病疫苗的实验,通过实验2组商品猪gE抗体18周龄至出栏前均为阴性,同时检测发现变异株疫苗(C株)对经典株和变异株的中和抗体效价均高于Bartha-K61疫苗。结果表明,江苏地区猪伪狂犬病感染压力较大,另外C株疫苗相对于进口的Bartha-K61株疫苗在本场的免疫效果更佳。     

猪伪狂犬病基因缺失活疫苗(SA215)免疫母猪后仔猪母源抗体消长规律及首免日龄

在研究猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 (SA 2 15 )免疫接种母猪所产仔猪母源抗体消长规律 ,并绘制其消长曲线的基础上 ,确定了仔猪首免日龄。对免疫母猪所产仔猪于不同日龄进行抗体检测结果表明 ,全部仔猪均获得了高水平母源抗体 ,7日龄高达 2 8.56 ,6 0日龄降至 2 2 .56 ;随着日龄增长 ,抗体水平呈逐渐降低趋势 ,2次大幅下降出现在 14～ 2 1日龄、30～ 6 0日龄。对免疫母猪所产仔猪分别于不同日龄免疫接种 1头份剂量疫苗 (SA2 15 ) ,7d后采血进行抗体检测 ,结果表明 ,7日龄、14日龄、2 1日龄免疫接种仔猪均未引起明显抗体水平升高 ,反而较同期仔猪略有降低 ,30日龄和 6 0日龄免疫接种仔猪则出现了抗体水平的升高 ,其中以 6 0日龄仔猪升高幅度为大。结合母源抗体消长规律 ,确定猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 (SA2 15 )免疫母猪所产仔猪的首免日龄为 30日龄     

南平市延平区部分规模猪场猪伪狂犬病血清学初步调查

为了了解延平区规模养殖场猪伪狂犬病（PR）野毒感染情况,2013年1-6月从本地大部分使用猪伪狂犬gE基因缺失疫苗免疫的10个规模猪场共采集了366份血清,应用酶联免疫吸附试验,进行猪伪狂犬病gE抗体检测。结果表明,猪场抗体阳性率为70％（7／10）,样品阳性率为18．03％（66／366）,说明延平区本地规模猪场不同程度受到猪伪狂犬病的野毒感染。     

规模猪场猪伪狂犬病的净化研究

猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的多种动物共患传染病．可引起仔猪大量发病死亡，母猪流产、死胎等繁殖障碍，育肥猪生长发育缓慢，经济损失惨重。为净化规模猪场的猪伪狂犬病，试验采用综合性的净化措施，除淘汰病猪及抗体检测阳性猪、加强饲养管理等技术措施外，采用猪伪狂犬病弱毒疫苗免疫试验，结果母猪一次免疫合格率为90．74％，仔猪二免后的免疫合格率为94．44％。