鸡转移因子的制备及其对鸡免疫应答影响的研究

将新研制的鸡脾转移因子（TransferFactor,TF）与鸡新城疫、法氏囊、减蛋综合征疫苗同时应用后,以淋巴细胞转化试验监测细胞免疫应答,血凝抑制试验（HI）监测体液免疫应答。结果表明,应用TF试验组的细胞应答能力和血清抗体效价与对照组比较,差异显著,说明TF与疫苗同时应用时具有协同作用,可显著地提高机体的细胞免疫和体液免疫功能,增强疫苗的免疫效果。     

鸡转移因子的制和协及其对鸡免疫应答影响的研究

将新研制的鸡脾转移因子（TransferFactor,TF)与鸡新城疫、法氏减蛋综合征疫苗同时应用后，以淋巴细胞转化试验监测细胞免疫应答，血凝抑制试验（HI）监测体液免疫应答，结果表明，应用TF试验组的细胞应答能力和血清抗体效价与对照组比较，差异显著，说明TF与疫苗同时应用时具有协同作用，可显著地提高机体的细胞免疫和体液免疫功能，增强疫苗的免疫效果。     

鸡脾转移因子对鸡新城疫、传染性法氏囊病活疫苗免疫效果的影响

鸡脾转移因子(TF)与鸡新城疫活疫苗和法氏囊活疫苗配合使用,免疫雏鸡。结果显示,在ND-HI抗体较低时,TF对新城疫活疫苗有免疫增强作用,而在母源抗体水平较高时,免疫增强作用不明显。本次试验中,TF对法氏囊活疫苗未显示明显的免疫增强作用。     

鸡脾转移因子对鸡新城疫、传染性法氏囊病活疫苗免疫效果的影响

鸡脾转移因子（TF）与鸡新城疫活疫苗和法氏囊活疫苗配合使用，免疫雏鸡。结果显示，在ND-HI抗体较低时，TF对新城疫活疫苗有免疫增强作用，而在母源抗体水平较高时，免疫增强作用不明显。本次试验中，TF对法氏囊活疫苗未显示明显的免疫增强作用。     

犬特异性转移因子的制备及其免疫活性检测

采用冻融-透析法提取了猪脾脏转移因子(TF),并对其理化特性及免疫活性进行了检测。首先,利用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型,通过MTT法比较犬脾特异性转移因子对免疫抑制小鼠、生理盐水接种小鼠和正常小鼠的淋巴细胞转化的作用。结果表明犬脾特异性转移因子和PHA对免疫抑制小鼠的外周血淋巴细胞转化具有明显的免疫增强作用,与对照组相比差异极显著(P0.01),其中犬脾特异性转移因子免疫增强作用显著高于PHA组(P0.01)。而对生理盐水组和正常小鼠的外周血淋巴细胞转化与免疫抑制小鼠基本一致,犬脾特异性转移因子和PHA对生理盐水组和正常小鼠的淋巴细胞均表现出一定的免疫增强活性,犬脾特异性转移因子免疫增强作用显著高于PHA组(P0.01)。     

猪繁殖与呼吸综合征弱毒活疫苗免疫猪脾脏转移因子的制备及其活性分析

从猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒活疫苗免疫猪脾制备转移因子(TF),检测其免疫活性,为开发新型免疫增强剂和有效防制PRRS提供科学依据。用PRRSV弱毒活疫苗免疫健康育成猪,无菌采集脾,通过透析法从脾提取TF。应用磺基水杨酸法、茚三酮反应和硝酸-钼酸铵试验等方法检测TF的主要成分,经高效液相色谱法测定TF中氨基酸种类及其含量;通过鸡红细胞吞噬试验和MTT法,检测TF对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和外周血淋巴细胞增殖活性的调节作用。进而将9头4周龄健康仔猪随机分为A、B和C组,每组3头。A组每头猪左、右侧耳后分别肌内注射1头份PRRSV疫苗和1mL TF;B组每头猪注射1头份PRRSV疫苗与1mL TF的混合液;C组每头猪注射1头份PRRSV疫苗与1mL生理盐水混合液。免疫后20d,通过MTT法检测每组猪外周血淋巴细胞(PBLC)的增殖活性。制备的TF内无蛋白质成分,含有核酸和18种氨基酸,每毫升TF含核酸21.5μg、总氨基酸3.479mg。TF能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬能力和PBLC增殖活性。当TF与PRRSV疫苗分开或混合注射给4周龄仔猪后,能够显著提高仔猪PBLC的增殖能力。从PRRS弱毒活疫苗免疫猪的脾制备了TF,其能显著提高巨噬细胞的吞噬功能和外周血淋巴细胞的增殖活性。     

不同动物种类转移因子对家禽免疫效果影响的对比性研究

为了验证猪、鸡、牛三种转移因子(transfer factor, TF)对家禽免疫效果的影响,试验以鸡新城疫(newcastle disease,ND)血凝抑制试验的抗体效价为判定指标,比较三种转移因子的免疫增强效果。将162只鸡随机分为4组采血并接种鸡新城疫弱毒疫苗,其中猪转移因子组、鸡转移因子组和牛转移因子组(各50只鸡)分别口服猪、鸡和牛转移因子各1 mL,对照组(12只鸡)口服生理盐水1 mL;之后第1,3,5,7,9,11,14,21天采血,用血凝抑制试验检测抗体效价。结果表明:三种转移因子对鸡新城疫弱毒疫苗的免疫效果均有增强作用,其中鸡转移因子组增强作用最明显,猪转移因子组次之,牛转移因子组虽有一定免疫增强作用但效果不如另外两组。说明临床应首选鸡转移因子,其次可选择猪转移因子,牛转移因子需酌情使用。     

猪脾转移因子增强几种重要禽疫苗免疫效果的测试研究

为研究猪脾转移因子(TF)对禽疫苗的免疫增强作用,采用血凝抑制(HI)试验和琼脂凝胶扩散沉淀(AGP)试验方法测试了TF分别与鸡新城疫(ND)病毒活疫苗、禽流感(AI)病毒灭活疫苗、鸡传染性支气管炎(IB)病毒灭活疫苗、鸡传染性法氏囊病(IBD)病毒活疫苗联合接种SPF鸡后抗体效价(log2x)动态变化(共4个试验组),同时运用ELISA法评估了所采用免疫程序(上述前3种疫苗与TF同时接种后第7天,进行上述第4种疫苗与TF的联合接种)对SPF鸡外周血IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的影响(试验组5),于接种上述第4种疫苗后的7,14,21,28,35,42d检测细胞因子,均设立对照组(上述禽疫苗单独接种)和空白组(非疫苗接种)。结果显示,接种后7,14,21,28,35,42d,试验组的ND血凝抑制(HI)、AI HI、IB HI和IBD琼脂扩散沉淀(AGP)抗体效价均显著高于对照组(P<0.05),分别提高了1.1~1.4,1.0~1.3,0.7~1.4,0.9~1.6;试验组的IL-2、IFN-γ和IL-4浓度分别于接种后7,14,21d显著高于对照组和空白组(P<0.05),各组的IL-10浓度差异不显著。研究结果表明,TF可增强NDV活疫苗、AIV灭活疫苗、IBV灭活疫苗和IBDV活疫苗的免疫效果。     

鸡和猪脾转移因子活性组分的提取及免疫活性研究

采用Sephadex G-25柱层析法分离提取鸡、猪脾转移因子(Transfer Factor,TF)各组分。利用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型,通过MTT法比较鸡脾TF各组分及TF原液对免疫抑制小鼠和正常小鼠的淋巴细胞转化的作用,同时比较了不同来源的鸡脾和猪脾TF各组分及原液对正常小鼠淋巴细胞转化的作用。结果表明鸡脾和猪脾TF均由三大组分构成,其中鸡脾TF三大组分及原液均对免疫抑制小鼠的外周血淋巴细胞转化具有明显的免疫增强作用,与对照组相比均表现差异显著(P<0.01),其中组分Ⅲ的淋巴细胞转化最佳,组分Ⅰ与组分Ⅱ接近,但均优于原液。而对正常小鼠的外周血淋巴细胞转化却表现不同的结果,其中组分Ⅰ和原液具有显著的免疫增强作用(P<0.05),组分Ⅱ作用不显著,组分Ⅲ则起到极显著的抑制作用(P<0.01)。而不同来源的猪脾和鸡脾TF各组分及原液对正常小鼠的淋巴细胞均表现出一致的免疫活性。     

转移因子对猪流行性腹泻疫苗免疫效果的影响

为了验证转移因子(transfer factor,TF)对猪流行性腹泻疫苗的免疫增强效果,试验用猪转移因子与猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗对猪只进行联合免疫,采用ELISA方法检测免疫后不同时间血清中猪流行性腹泻病毒(Pporcine epidemic diarrhea virus, PEDV)特异性IgG变化情况,并测定不同阶段血液内淋巴细胞比率。结果表明:转移因子与活疫苗联合免疫时抗体水平极显著高于单纯疫苗免疫(P0.01),且高水平表达时间持续较长。另外,经联合免疫的猪只淋巴细胞比率明显增加(P0.05)。说明转移因子可以作为猪流行性腹泻活苗的免疫增强剂。     

鸡新城疫、传染性法氏囊病二联活疫苗和单苗研究

用实验室研制的鸡新城疫(La Sota株),鸡传染性法氏囊病(NF8株)单苗和二联活疫苗分别免疫7日龄SPF鸡以及有母源抗体的雏鸡研究其免疫效力。结果表明:用二联活疫苗免疫SPF雏鸡后,NF8株与La Sota株间不产生明显的相互干扰作用,攻毒保护率与各自的单苗相比无明显差异。用二联活疫苗免疫有母源抗体的雏鸡后,只进行一次免疫,新城疫免疫效果较好,但法氏囊免疫效果稍差,不能完全保护;一免后10天再进行第二次加强免疫,其抗体水平、攻毒后的保护率与各自的单苗相比无明显差异,具有完全保护效力。     

几种法氏囊活疫苗对鸡法氏囊损伤及免疫抑制作用的比较

探讨了鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）活疫苗对鸡新城疫活苗免疫的影响。将四种ＩＢＤ活苗分别接种３０日龄ＳＰＦ公雏,４天后再免疫鸡新城疫ＬａＳｏｔａ系活疫苗,同时法氏囊损伤情况。试验结果表明,所选ＩＢＤ活疫苗对雏鸡法氏囊均有不同程度地损伤,并且诱导产生ＮＤ－ＨＩ抗体的时间被推迟。     

鸡新城疫和传染性法氏囊病灭活疫苗抗原量对鸡细胞免疫的影响

将不同抗原含量的鸡新城疫和传染性法氏囊病油乳剂灭活疫苗分别免疫１７日龄雏鸡，测定了疫苗抗原含量与细胞免疫应答之间的关系。经Ｔ淋巴细胞转化试验结果表明，两种疫苗的抗原含量－细胞免疫应答曲线是一致的，随着抗原量的增加，活化的Ｔ淋巴细胞数量也相应增多，但是细胞免疫应答的可测时间是暂时的，于免疫７天达高峰，１７天后下降接近正常水平。     

新城疫分离株疫苗免疫保护试验

用经过鉴定的新城疫病毒分离株按国家兽医生物制品质量标准制备油乳剂灭活疫苗，与标准的La Sota疫苗分别免疫带有新城疫母源抗体的白来航鸡，免疫后每7d采血监测新城疫抗体，并于免疫后21，28，35d用鸡新城疫分离毒和F48E9分别进行人工感染试验。结果显示，分离株灭活苗对鸡新城疫分离株的免疫保护效力优于La Sota灭活苗。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病三联弱毒疫苗的试制

用同胚培养的鸡新城疫Lasota株和传染性支气管炎H120（或H52）株以及用鸡胚成纤维细胞增殖的传染性法氏囊弱毒株以适当比例混合为抗原,用蔗糖脱脂乳作保护剂,经真空冷冻干燥制成三联弱毒疫苗。通过三批疫苗室内外各项指标的测试,表明该三联疫苗安全性能可靠,免疫效果确实,使用方法简便。在实验室进行的物理性状检验、无茵检验、支原体检验、剩余水分检验、真空度检查均符合国家标准;用10倍大剂量接种15日龄雏鸡无不良反应;以常规量颈部皮下接种免疫后,7d产生免疫力,免疫后14d抗鸡新城疫、鸡传染性支气管炎、鸡传染性法氏囊病三株强毒攻击的保护率均为,100％。对15日龄雏鸡首免,其免疫期至少为30d,在-25℃保存期为1年。     

鸡新城疫病毒抗原超滤技术研究

应用分子筛过滤技术超滤浓缩鸡新城疫病毒,并就ＮＤＶ抗原量对鸡免疫应答的和了动态研究,试验结果显示,将ＮＤＶ对外开放尿囊毒浓缩４倍体积,ＨＡ效价提高了２个滴度,病毒回收率达１００％;病毒活性亦未发生改变。免疫１１天后,ＮＤ浓缩苗和ＮＤ－ＩＢＤ二联苗组鸡的ＮＤ－ＨＩ抗体水平远远高于免疫对照组,差异极显著。结果表明,所建超滤技术适用于ＮＤＶ怕的浓缩应用;适量增另ＮＤＶ怕量能够加快鸡的体液免疫应答,增强鸡     

鸡新城疫、禽流感二联灭活疫苗与同类产品的免疫效力比较

将鸡新城疫、禽流感（H9亚型,SY株）二联灭活疫苗与市售同类对照苗分不同剂量皮下注射接种30日龄SPF鸡,免疫后定期采血,分离血清,通过检测血清中ND和AI的HI抗体水平比较各组鸡抗体产生期、抗体高峰及免疫持续期,并进行不同血凝抗原检测HI抗体结果的对比。试验鸡血清样品检测结果显示,免疫鸡抗体产生期为免后2周内,免后8周和5周ND和AI的HI抗体滴度分别达到峰值,抗体至少可持续28周以上,两种灭活苗之间免疫效果基本相当。     

Effect of the Immunity Efficacy of IBD Immune Complex Vaccine on ND La Sota Vaccine

1-day-old SPF chickens and commercial Jingfen chickens were vaccinated with IBD immune complex(IC) vaccine, NDV La Sota vaccine were inoculated simultaneously every one week and every two weeks.NDV La Sota immunization alone was as the control group.At the 2nd, 3rd, 4th and 5th week post inoculation, blood samples were taken and the ND HI antibody were tested.Experimental chickens were challenged with high virulent NDV at the 5th week post inoculation, the protective rate of each group was calculated.The results showed the ND HI antibody were not significant different in the combined immunization of IBD IC vaccine priming and NDV La Sota vaccine boost and NDV La Sota vaccine alone immunization (P>0.05).The results indicated that IBD IC vaccine has no immunosuppression on NDV La Sota vaccine in SPF chickens and commercial Jingfen chickens.     

鸡传染性法氏囊病活疫苗（B87株 CA株 CF株）安全性及免疫效果评价

通过观察疫苗免疫后鸡群的生长情况和临床症状,检测免疫后不同时期鸡群的ELISA抗体水平和攻毒保护率以及对鸡新城疫（ND）疫苗免疫后不同时间鸡群的HI抗体水平,评价和检测鸡传染性法氏囊病活疫苗（B87株 CA株 CF株）在石家庄地区临床应用的安全性、免疫效果、免疫持续期以及是否会产生免疫抑制。结果表明,试验疫苗接种蛋鸡和肉鸡后,均没有观察到因疫苗引起的不良反应,对蛋鸡和肉鸡均安全。疫苗接种蛋鸡后14 d、28 d、42 d、60 d和90 d,接种肉鸡后14 d、21 d、36 d攻毒保护率均达80%以上;商品蛋鸡接种疫苗后90 d其ELISA抗体水平仍高达6500以上。ND HI抗体检测结果表明,试验疫苗接种后对ND疫苗的免疫应答无显著影响,不引起免疫抑制。结论：试验疫苗安全、有效,质量稳定,适用于预防鸡传染性法氏囊病。     

感染CAA雏鸡ND免疫后三种体液中HI抗体变化

对１日龄感染ＣＡＡ雏鸡接种Ｌａｓｏｔａ弱毒疫苗后，其血清、泪液、胆汁中ＨＩ抗体滴度的变化进行了研究。结果发现，感染ＣＡＡ雏鸡Ｌａｓｏｔａ疫苗免疫后，三种体液中ＨＩ抗体滴度明显低于未感染ＣＡＡ的照雏鸡。