H9N2亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备及其表位鉴定

[目的]制备H9N2亚型禽流感病毒单克隆抗体和鉴定表位。[方法]选取H9N2亚型禽流感病毒(AIV)WD-1株的纯化抗原免疫BALB/c小鼠,对获得2株抗H9N2亚型禽流感病毒的特异性单抗4C10和6E3表位进行鉴定。[结果]单抗4C10和6E3分别属于IgG1和IgG2b亚型,ELISA检测效价分别为1∶10~3和1∶10~5;HI效价分别为2~(15)和2~(14);2株单抗均具有鸡胚中和活性。利用噬菌体展示表位技术对2株单抗的抗原表位进行鉴定,结果显示均为针对HA蛋白的1个线性表位。[结论]该研究为禽流感病毒快速诊断方法的建立提供了依据。     

鸭坦布苏病毒鸡胚弱化毒株的选育

【目的】将鸭坦布苏病毒BZ_2010株在SPF鸡胚上进行连续传代致弱;旨在选育安全性高、免疫原性好的活疫苗候选毒株。【方法】以SPF鸡胚为增殖宿主,将BZ_2010株连续传代,直至第120代;以1日龄雏鸭和30周龄的产蛋种鸭为试验对象,对第120代次毒株(命名为VC2)的安全性进行评价;以1d雏鸭为试验对象,对VC2株的返强情况进行评价;以18周龄的种鸭为试验对象,对VC2株免疫后的中和抗体进行监测;以25周龄的种鸭为试验对象,对VC2株免疫后的保护效果进行评价;利用RT-PCR方法分别扩增BZ_2010株和VC2株的E基因和N54A基因,进行测序分析。【结果】传代病毒对鸡胚的平均死亡时间逐渐缩短,而病毒毒价有逐)渐提高的趋势,ELD_(50)由第20代的10~(-5.3)/0.1 mL提高到第120代的10~(-5.8)/0.1mL,而且第80代之前提高较快,后期基本稳定。将VC2株通过颈部皮下接种1d雏鸭和肌肉接种30周龄产蛋种鸭,接种后试验鸭无异常临床表现,肝脏也无明显病理变化,这说明VC2株具有良好的安全性。将VC2在1d雏鸭进行连续5次传代,未发现试验鸭有任何异常症状,将第5代组织悬液接种1d雏鸭,采集肝脏进行病理切片观察,发现无明显病理变化,这说明VC2株具有良好的稳定性。基因测序分析结果显示,VC2株E蛋白的第86、157、189、301和312位氨基酸发生改变,而NS4A蛋白只有一个氨基酸发生突变,即第54位氨基酸由F变为L。VC2免疫种鸭后抗体水平上升很快,第4周即可达到高峰,并且维持较长时间;VC2免疫后于第2周和第50周利用强毒株进行攻毒试验,结果VC2免疫组在攻毒后未出现异常症状,粪便正常,产蛋率保持正常,这说明VC2株免疫可对强毒株的攻击产生完全保护。【结论】通过鸡胚连续传代成功获得了一株安全性高、免疫原性好的鸭坦布苏病毒鸡胚弱化毒株。VC2免疫种鸭后抗体水平上升很快,可维持较长时间。攻毒试验结果表明,VC2株免疫可对强毒株的攻击产生完全保护。     

一例肉鸡肾型传染性支气管炎的诊治

<正>近年来,肾型传染性支气管炎在我国一些地区普遍流行,发病严重,发病率和死亡率高,严重地影响着养禽业的生产。肾型传染性支气管炎不仅仅是由病毒引起的一种独立性疾病,它是在特定环境条件下,某些嗜肾性传染性支气管炎病毒对鸡的全身性感染过程中在肾脏的一种病理表现。     

蛋鸡感染H9亚型禽流感的诊断与防治

<正>近年来山东许多地区的鸡场相继发生一种以呼吸道症状为主的传染性疾病,鸡群主要表现为咳嗽、呼噜、采食与饮水量减少以及蛋鸡的产蛋率下降等等。该病常混合或继发感染大肠杆菌,造成肉鸡死亡率高,蛋鸡虽     

肉品中莱克多巴胺残留的酶联免疫快速检测方法的建立

用自主制备的莱克多巴胺特异性抗体建立了猪肉样品中莱克多巴胺药物残留的间接竞争酶联免疫检测方法,对该检测体系的灵敏度、准确度、精密度、特异性等性能进行了测定,并将该检测系统与高效液相色谱法(HPLC)进行了对比分析。结果显示:莱克多巴胺药物残留的酶联免疫检测体系的检测范围为1～100 ng,灵敏度为0.12 ng/mL,检测限为1 ng/mL,回收率为80%～100%,与同类药物如盐酸克仑特罗、硫酸特布他林及硫酸克仑特罗的交叉反应率均小于0.01%;采用HPLC方法进行莱克多巴胺药物残留的检测时,其检测范围为10～200μg/mL,检测限为1μg/mL,回收率为83%～100%。该方法与高效液相色谱法相比灵敏度较高,特异性强,检测结果准确度相近,但是在检测结果稳定性方面逊于HPLC方法。     

不要用生大豆饼粕喂肉仔鸡

生大豆及其饼粕中含有影响消化的胰蛋白酶抑制因子，现在仍然有人用豆饼(夯砸大豆饼、圆饼、生大豆饼)配料喂肉仔鸡。肉仔鸡吃这种饲料后消化不好、拉软粪、粪中可能有未消化的饲料。因为蛋白质和氨基酸的利用率不高，肉仔鸡生长慢。用豆饼喂幼猪也引起消化不良。     

兔副伤寒的诊断

本文报道了以怀孕母兔流产和新生仔兔死亡为特征的由鼠伤寒沙门氏菌引起的兔副伤寒的诊断．     

植酸酶对肉仔鸡生产性能、免疫功能及肠道微生物的影响

比较在营养水平相同的情况下,使用植酸酶日粮与普通日粮的鸡群在各阶段生产性能、淋巴细胞比率、免疫器官指数及盲肠内容物中大肠杆菌数量的变化。结果显示,添加植酸酶后,试验组较对照组平均日增重提高12%,其中雌性试验组与雌性对照组相比出栏体重增加396 g,平均日增重提高22.6%,差异极显著(P<0.01);植酸酶的使用能够有效降低盲肠大肠杆菌数量,雄性植酸酶组与雄性对照组相比在27,34,41日龄大肠杆菌数量降幅分别达到23%,34%和50%,而雌性植酸酶组与雌性对照组相比除34日龄外平均降幅达到50%。添加植酸酶后肉鸡巨噬细胞吞噬指数、免疫器官指数均出现不同程度下降。     

嗜水气单胞菌检验程序的研究

本试验系统研究了嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ,Ａｈ）的细菌学及毒力因子检测。对不同来源菌株的细菌作分离及生化鉴定,确定了Ａｈ的六项生化鉴定指标,同时比较确定了ＡＨＭ和ＲＳ作为Ａｈ的选择培养基。检验中氧化酶阳性反应是Ａｈ重要的鉴别指标。比较Ａｈ毒素、蛋白酶及Ｓ蛋白三种毒力因子的常规检测及免疫学检测,根据检测结果选出毒力因子分布各异的Ａｈ菌株作动物致死性试验,最终在Ａｈ三项毒力因子指标中选择蛋白酶一项作为检测指标,具有代表性,同时简化了检验程序,使Ａｈ的检测实际可行。