引进美国SPF杜洛克种猪抗腹泻基因检澳及后代选育研究

为在种猪世代选育中加大GG纯合抗性个体的选留比例,建立杜洛克抗性K88（F4）腹泻专门化品系,试验对引进美国SPF杜洛克种猪后代中的43头（其中母猪37头、公猪5头）进行耳朵组织采样,样本送往江西农业大学动物生物技术国家重点实验室培育基地进行抗腹泻基因检测;之后将已检测过抗腹泻基因的种猪分为2组,试验组按GG（♀）×GG（♂）、对照组按GG（♂）×GA（♀）进行配种,并进行后代选育研究。结果发现：杜洛克种猪群GG基因型个体比例高达86．05％,仅有5头GA基因型个体和1头AA基因型个体;在相同的饲养条件下,试验组哺乳仔猪腹泻发生率为2．97％、死亡率为0．99％,30日龄断奶仔猪成活率为97．03％,与对照组差异明显。     

杜洛克种猪抗腹泻新品系选育研究

猪肠毒素性大肠杆菌(ETEC)是引起断乳前后仔猪腹泻的主要致病菌,试验利用分子检测技术鉴别MUC13基因型,选育具有腹泻抗性基因型群体,在种猪世代选育中培育抗腹泻专门化新品系,从种源上提高新生仔猪及断奶前后仔猪抗腹泻能力,降低新生仔猪及断奶前后仔猪腹泻率,最大限度挖掘并提高猪场断奶仔猪成活率的潜能,提高猪场的经济效益和国外引进种猪的使用价值。试验地点为贵州省种畜禽种质测定中心猪场,试验猪群为贵州省种畜禽种质测定中心2007年从美国引进的杜洛克种猪。2016年,对美系杜洛克种猪父母本按照2种组合进行选配:1)GG♂×GG♀,从9窝不同父母本选配所生的F1代中,每窝选留符合种用要求仔猪1~2头,共11头,采耳组织样作MUC13基因型检测,检测结果显示,11头均为腹泻抗性有利基因GG型个体,腹泻有利基因GG型检出率100%(11/11),进一步将F1代按照GG♂×GG♀选配,从1窝F2代仔猪中选出符合种用要求的5头仔猪作为选留后备猪,抗腹泻基因检测结果 5头均为GG型基因个体,说明父母本按照GG♂×GG♀选配方案,其后代可以稳定遗传抗腹泻基因GG型。2)GA♂×GA♀,采用常规选留方法,从1窝杜洛克仔猪中选出符合种用要求的8头作为选留后备猪,抗腹泻基因检测结果 8头均为GA型,未检测出GG、AA型个体。     

大约克种猪抗腹泻新品系导入新血缘

引起断奶前后仔猪腹泻的主要致病菌是猪肠毒素性大肠杆菌(ETEC),而F4ac型是ETEC中流行性最为广泛的类型。试验在贵州省种畜禽测定中心种猪场内进行,试验猪群为已经选育出的美系大约克抗腹泻专门化新品系,试验目的是对已经培育出的美系大约克抗腹泻专门化新品系,导入加系大约克血缘,避免新品系在闭锁选育中出现近亲衰退。2016年7月引种,9月9日对引进的22头加系大约克种猪采样,送往贵州大学动物科学院对猪肠毒素性大肠杆菌(ETEC)F4ac的受体基因MUC13进行基因型鉴别。结果显示,GG基因型频率为13.64%(3/22)、GA基因型频率68.18%(15/22)、AA基因型频率18.18%(4/22),G基因频率0.477 3、A基因频率0.522 7。在保留引进加系大约克血统需要的前提下,将腹泻抗性基因GG型个体直接选入美系大约克抗腹泻新品系群体,同时,尽可能保留繁殖性能较为优秀的GA、AA基因型个体,与原有的美系抗腹泻种猪按照不同选配组合方案进行配种:GA♂×GG♀、GG♂×GA♀、GG♂×AA♀、AA♂×GG♀,在世代选育中逐渐加大后代腹泻抗性有利基因型GG个体选留力度,将腹泻抗性有利基因GG型个体选入抗腹泻新品系中,最终实现腹泻抗性有利基因血缘更新,并纯繁推广。     

大约克种猪大肠杆菌F4ac MUC13基因的不同基因型组合选配选育

猪肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起断乳前后仔猪腹泻的主要致病菌,而F4ac型是ETEC中的流行性最为广泛的类型,利用分子检测鉴别MUC13基因型,筛选具有腹泻抗性个体是选育抗腹泻种猪的基本方法。试验在贵州省种畜禽种质测定中心种猪场内进行,试验猪群为美系大约克,且已经检测明确其腹泻相关基因型,根据血统、系谱将不同基因型的种公猪与种母猪进行组合选配,从其不同组合选配的F1代中选留后备种猪,并进行抗腹泻基因检测,选留抗腹泻后代,从而得出抗腹泻后代的最佳选配组合及优秀选配组合。研究结果表明:2窝按照GG♂×GG♀组合选配,其后代符合后备猪预留选条件的16头仔猪中,检出抗腹泻GG型个体16头,GG型个体检出率100%(16/16);3窝按照GA♂×GG♀组合选配,其后代符合后备猪预留选条件的21头仔猪中,检出抗腹泻GG型个体8头,GG型个体检出率38.1%(8/21);3窝按照GA♂×GA♀组合选配,其后代符合后备猪预留选条件的23头仔猪中,检出抗腹泻GG型个体为0头,GG型个体检出率0,说明该组合选配方式其后代抗腹泻基因型GG的检出率极低;因此,选育的最佳组合选配为GG♂×GG♀组合选配,其次为GA♂×GG♀或GG♂×GA♀组合选配。     

环江香猪黏附素13基因多态性及其与仔猪腹泻的相关性分析

试验旨在对环江香猪仔猪腹泻抗性/易感的黏附素13基因（MUC13）单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）/单倍型与仔猪腹泻的相关性进行分析。试验采用高分辨率熔解曲线（high resolution melting,HRM）技术对93头环江香猪腹泻仔猪和95头健康对照仔猪进行基因分型,结合DNA测序对HRM检测结果进行验证,并通过SHEsis在线平台确定其单倍型。结果显示,环江香猪MUC13基因的G224A位等位基因分布频率在腹泻组和对照组间差异显著（P < 0.05）,GG、GA和GG+GA基因型分别与AA基因型相比差异均显著（P < 0.05）。A112G、T170C和G164C位点各基因型频率和等位基因频率在腹泻组和对照组之间差异均不显著（P > 0.05）,腹泻组与对照组E位点均为野生纯合基因型。单倍型Ⅹ（GTAC）在腹泻组的分布极显著高于对照组（P < 0.01）。因此,MUC13基因G224A位点和单倍型Ⅹ（GTAC）与环江香猪仔猪断奶前腹泻相关。     

抗病育种技术在引进美国SPF种猪后代选育中应用探究

为探索利用现代分子育种技术培育抗病新品系种猪,本试验对引进美国的44头杜洛克、138头大约克、28头长白纯种猪进行耳组织采样,采用基因检测技术分别进行氟烷基因（抗应激基因）、抗腹泻基因及KPL2基因（精子短尾基因）检测。结果表明,1）氟烷基因检测：杜洛克种猪检测出氟烷基因型Nn个体（应激易感基因个体）1头,占2.33%（1/44）;大约克种猪检测出氟烷基因型Nn个体2头,占1.45%（2/138）;长白种猪未检测到氟烷基因型Nn个体（0/28）,所检测的28头猪全部为氟烷基因型NN个体（抗应激基因个体）。2）抗腹泻基因检测：杜洛克种猪群中含有抗腹泻GG基因型个体37头,占杜洛克猪检测总数的86.05%（37/43）;长白种猪群中腹泻抗性有利GG基因型个体有11头,占40.74%（11/27）;大约克种猪腹泻抗性有利基因个体有23头,占16.79%（23/137）,3个品种中杜洛克种猪群占有腹泻抗性个体最多,其次是长白种猪,大约克种猪最少。3）KPL2基因检测：所检测的138头大约克种猪,没有检出携带精子短尾遗传疾患的个体。在种猪繁育中,只要加大世代有利纯合抗性个体的选留比例,最终可以建立纯系杜洛克、大约克、长白种猪等抗应激、抗腹泻、无精子短尾症等专门化新品系。     

猪舍温度对仔猪生长和腹泻发生率的影响

本试验选择两批哺乳仔猪823头作为试验组，25栋舍生产的两批（第三、四批）哺乳仔猪936头作为对照组，观察温度对哺乳仔猪的影响。19栋舍（试验组）第二周、第三周、第四周的平均温度分别为19．2℃、17.0℃、17．6℃，25栋舍（对照组）第二周、第三周、第四周的平均温度分别为26．8℃、25．2℃、24．3℃，2栋分娩舍的温差很大，范围为5℃～14．7℃。两栋舍生产的2组4批哺乳仔猪（每组2个重复）30日龄断奶，对哺乳期内仔猪死亡率、腹泻发生率、平均断奶重进行了比较。结果试验组和对照组哺乳期内死亡率、腹泻发生率、30日龄平均断奶重均差异显著（P〈0．05）。     

抗仔猪断奶前腹泻猪专门化新品系的培育

利用江西农业大学获国家发明专利和国家技术发明二等奖的“仔猪断奶前腹泻(ETECF4ac)抗病基因育种技术”结合常规育种技术,历时6 年培育了BN101系、BN102 系和BN103 系3 个抗仔猪断奶前腹泻基因(MUC13 基因)抗性型(GG)纯合的瘦肉型抗仔猪断奶前大肠杆菌(ETEC)F4ac 腹泻猪专门化新品系。3 个新品系仔猪断奶前腹泻发生率均显著低于常规未经选育群体,且其生长、繁殖、产肉以及体型外貌等性状均表现优良,达100 kg 平均日龄分别为155.43 d、158.21 d 和159.27 d,100 kg 体重平均活体背膘厚分别为:8.96 mm、9.47 mm 和9.52 mm,经产母猪平均总产仔数分别为:10.43 头、12.31 头和12.79 头,料肉比分别为:2.38、2.44 和2.48,且变异系数都在10% 以下。这些专门化新品系的成功培育实现了我国抗病种猪培育的新突破。     

仔猪抗腹泻基因型与表型的研究

本研究通过对仔猪的父母进行抗腹泻基因检测,对拉稀的仔猪进行统计,研究拉稀仔猪的父母是否含AA、GA腹泻易感基因,父母都含有利基因GG的仔猪是否拉稀。本试验对824头公猪母猪进行检测,统计9个月拉稀仔猪共325头,其中父母都经过检测的拉稀仔猪298头,其中有部分仔猪为同窝,即父母相同,共208窝仔猪有父母检测记录。经过统计分析得出,含GG抗性基因的仔猪未出现拉稀,含GA、AA易感基因的仔猪易出现拉稀。     

爽乐神(Stalosan F)对哺乳仔猪健康和生长性能的影响

在存栏3600头生产母猪的猪场中．选择预产期相近的60头临产母猪．随机分成三组。在整个泌乳期内，试验Ⅰ组用“爽乐神”．试验Ⅱ组用“百毒杀”．试验Ⅲ组用“迪威”对环境进行消毒处理，观察三种消毒剂对哺乳仔猪腹泻率、死亡率、日增重及雄性仔猪阉割后创口感染率的影响。结果表明试验Ⅰ组的仔猪断奶平均个体重显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅰ组（P〈0．05）：试验Ⅰ组的仔猪腹泻率极显著低于试验Ⅰ组和试验Ⅲ组（P〈0．01）；试验Ⅱ组和试验Ⅰ组仔猪的断奶平均个体重、腹泻率均未达到显著差异（P〉0．05）；公仔猪阉割后创口感染率．3组之间均无显著差异（P〉0．05）。结果表明：爽乐神能通过降低仔猪腹泻率和提高仔猪健康水平，达到提高仔猪日增重的作用。     

在日粮中添加葡萄糖氧化酶和植物血凝素防治仔猪早期断奶腹泻症的试验

[目的]研究在日粮中添加葡萄糖氧化酶和植物血凝素防治仔猪早期断奶腹泻症的效果,探讨其对仔猪生产性能和肠道健康等方面所产生的作用。[方法]选用120头断奶仔猪,随机分为对照组、试验组Ⅰ和试验组Ⅱ3组,分别饲喂常规断奶仔猪基础日粮、添加0.5%的葡萄糖氧化酶日粮以及添加0.5%的葡萄糖氧化酶和0.1%植物血凝素日粮,采用统一的饲养管理模式。记录每日腹泻次数、采食量、死亡数以及试验开始和结束时每头仔猪空腹体重;计算平均日增重、腹泻率、平均日采食量、饲料转化率及死亡率。[结果]试验期内仔猪平均日增重,试验组Ⅰ和试验组Ⅱ分别比对照组提高25.0%和26.8%,差异极显著(P<0.01);仔猪料肉比,试验组Ⅰ和试验组Ⅱ分别比对照组下降17.2%和18.7%,差异极显著(P<0.01);仔猪腹泻率,试验组Ⅰ和试验组Ⅱ分别比对照组下降56.0%和65.5%,差异极显著(P<0.01);仔猪成活率,试验组Ⅰ比对照组提高7.4%,差异不显著(P>0.05),试验组Ⅱ比对照组提高13%,差异极显著(P<0.01)。[结论]在日粮中添加葡萄糖氧化酶和植物血凝素可明显提高饲料转化效率和仔猪成活率,明显降低仔猪腹泻率。     

不同类型复合酸化剂在断奶仔猪饲料中的应用研究

将72头断奶1周的杜×长×大仔猪(35日龄)随机分成3组,包括1个对照组和2个试验组。各组的基础日粮相同,对照组为不添加酸化剂的基础日粮,试验1、2组分别添加0.15%普通复合酸化剂和0.15%缓释复合酸化剂,进行28 d的饲养试验。结果表明,添加0.15%缓释复合酸化剂可显著提高仔猪的日增重,降低料肉比、腹泻率和死亡率。     

百饲康(复合微生物制剂)对仔猪生长性能的影响

试验基于研究百饲康(以丁酸梭菌为主的益生菌)在仔猪上的应用效果设计,选取三元杂(杜×长×大)仔猪,在三个猪场分别进行饲养实验。通过平均增重、料肉比、腹泻率等指标探讨百饲康(复合微生物制剂)的作用效果。结果表明:仔猪产房(0～28日龄)及保育猪(29～60日龄),配合饲料中添加0.05～0.1%的百饲康,与抗生素组相比,提高了饲料转化率,腹泻率显著降低,肠道内乳酸菌、丁酸梭菌含量显著提高,pH值降低,大肠杆菌含量显著降低。     

猪SLA-DRA基因外显子2多态性及其与仔猪腹泻的关联分析

为探索SLA-DRA基因作为猪抗病育种分子标记的可能性,本研究采用PCR-SSCP和克隆测序方法对大白、长白和杜洛克共216头猪的SLA-DRA基因外显子2进行了多态性研究,分析了该基因与仔猪腹泻的关联性。结果,在SLA-DRA外显子2上检出了3个等位基因和6种基因型;6种基因型(AA、AB、BB、AC、BC和CC)在大白猪和长白猪中都存在,而在杜洛克猪中只检出4种基因型(AA、BB、AB和BC)。杜洛克猪与大白猪和长白猪间基因型分布均差异极显著(P<0.01);3个品种的基因型分布均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。最小二乘法分析表明,品种和性别对仔猪腹泻影响不显著(P>0.05),基因型与仔猪腹泻显著相关(P<0.05);AA和BB基因型个体腹泻评分的最小二乘均值均显著高于AC和CC基因型个体(P<0.05)。本研究表明,SLA-DRA基因不同基因型对仔猪腹泻有着重要的影响,可作为猪抗病育种应用中的一个潜在遗传标记。     

灭菌散对仔猪腹泻的防治研究

仔猪腹泻是一种主要由大肠杆菌引起的危害严重的疾病,在养猪生产中,特别是采用仔猪早期断奶技术后普遍存在.本试验根据中兽医学的基础理论和仔猪腹泻的临床表现,研制了一种中药制剂-灭菌散.选择以黄连、黄柏、黄芪、甘草、白头翁、干姜和大蒜等20多种中草药为主组成的灭菌散制剂,煎成1g/mL的中药汤剂,以0.2%的比例添加到日粮中.选择(28±1)日龄杜长大断奶仔猪60头,随机分成2组,每组30头.2组均饲喂基础日粮,试验组另添加0.2%的中药汤剂.给药后8 d,每组选择5头,前腔静脉采血做血液学和免疫学指标检测.试验结果表明,0.2%中药汤剂能有效预防仔猪腹泻,并能提高RBC、TP、IgG的数量和水平,腹泻率较对照组下降33.7%(P＜0.01).灭菌散是一种能有效防治仔猪腹泻的候选制剂.     

新生仔猪口服屎肠球菌对其肠道菌群组成及化学屏障的影响

随机选择24头出生时间相近的健康杜×长×大外三元仔猪,分为2个组,每组3个重复;每个重复4头。分别在仔猪刚出生、3日龄及5日龄灌服10％灭菌脱脂奶（对照组）或含有屎肠球菌活菌（5×10。～6×10。CFU／mL）的10％脱脂奶重悬液（处理组）,每次2mL／头,仔猪25日龄断奶。记录哺乳期仔猪腹泻发生率。断奶当天屠宰仔猪,采集肠道内容物及黏膜样品,检测盲肠内容物主要菌群的数量、各肠段pH值和结肠内容物乳酸含量,用实时定量PCR检测空肠黏膜化学屏障相关基因的表达量。结果显示,屎肠球菌使仔猪盲肠的乳酸菌比率升高8．98％,致病性肠杆菌的数量和比例分别下降28．68％（P〈0．05）和13．01％,仔猪腹泻率也下降了43．21％,但不影响细菌总数和乳酸菌数量,也不影响肠道pH值、结肠乳酸含量以及空肠黏膜MUC2、pBD-1和PMAP-37mRNA的表达量,却显著下调LYSmRNA的表达。结果表明,口服屎肠球菌改善哺乳期仔猪肠道菌群组成,促进肠道健康,同时它对溶菌酶基因表达的抑制作用可能是维持乳猪肠道微生态稳定的重要因素之一。     

Association Analysis of MUC13 Gene Polymorphisms with Diarrhea in Huanjiang Miniature Pigs

The purpose of the study was to analyze the association between MUC13 gene polymorphisms and piglet diarrhea in Huanjiang miniature pigs.93 diarrhea piglets and 95 healthy controls were included in the study.The MUC13 gene polymorphisms were determined using high resolution melting (HRM),and the results of HRM were verified by direct sequencing.Mutations were compared between diarrhea piglets and healthy controls.SHEsis online platform was used to calculate the haplotypes.There were statistically significant association on G224A site showed significant difference between diarrhea piglets and healthy controls by allele frequencies (P < 0.05),and there were also statistically significant differences between the two groups by genotypes among GG,GA,GG+GA and AA (P < 0.05).But no statistically significant association was found between polymorphisms of A112G,T170C and G164C sites and piglet diarrhea risk (P > 0.05).However,haplotype Ⅹ (GTAC) in the distribution of diarrhea group was extremely significantly higher (P < 0.01).The present data revealed that MUC13 gene G224A site and the haplotypes Ⅹ (GTAC) were associated with reduce risk of piglet diarrhea.     

抗仔猪腹泻新药Receptorase临床作用研究

通过对162头平均24日龄的健康二元（长×大）杂交断奶仔猪的腹泻防治试验和120头3日龄仔猪的饲养试验,评价猪用Receptase粉对断奶仔猪腹泻的疗效和促生长作用。结果显示,猪用Receptase粉在治疗仔猪腹泻时,2 d内治愈率为94.50%,2 d及以上无效率为5.50%;Receptorase组的平均增重明显高于抗生素对照组。表明Receptorase能够有效防治仔猪腹泻,促进仔猪生长,提高平均增重。     

加味二术散对断奶仔猪血液流变学和腹泻率的影响

观察加味二术散对断奶仔猪血液流变学和腹泻率的影响,为防治断奶仔猪应激综合征提供理论依据。将75头断奶仔猪随机分为：加味二术散高（5‰剂量组）、中（3‰剂量组）、低（2‰剂量组）剂量组、对照组和抗生素组。观察1周内各组仔猪腹泻率。于试验第7天,采集各组仔猪的血液,并测定其血流变学指标。结果显示,与对照组相比低剂量加味二术散对仔猪的全血粘度、血浆粘度和红细胞变形指数改善作用不明显（P〉0.05）,纤维蛋白原的含量显著降低（P〈0.05）;高、中剂量加味二术散对断奶仔猪均具有不同程度改善以上指标的作用。各组红细胞压积差异不显著（P〉0.05）。抗生素组仔猪的红细胞聚集性指数与对照组相比显著增高（P〈0.05）,其他各组差异均不显著（P〉0.05）。各组仔猪的腹泻率与对照组相比都降低,加味二术散高、中剂量组和抗生素组的腹泻率显著降低（P〈0.01）。结论,二术加味改善血液流变学且可降低断奶仔猪的腹泻率。