2014—2016年华东地区某市活禽市场禽流感流行病学调查与分析

为了解华东地区某市活禽市场中禽流感病毒的污染状况,2014—2016年对该市活禽市场的家禽进行了禽流感流行病学调查。结果显示:该市活禽市场禽流感病毒污染面较广,94.12%的市场存在禽流感病毒污染;H9N2亚型病毒感染率较高,样品总体阳性率为22.66%,场点总阳性率为94.12%;H7N9亚型病毒感染率经历了一个升降过程,2015年上半年达到高峰,之后显著降低;农贸市场中的H7N9亚型病毒分离率显著高于批发市场。本次调查未在活禽市场中检出H5亚型高致病性禽流感病毒。这些数据为深入了解活禽市场中禽流感病毒的污染状况和该病防控措施的制定提供了技术支持。     

2013年广州市活禽农贸市场禽流感流行病学调查

[目的]了解广州市活禽农贸市场禽流感病毒的分布和流行情况,科学制定禽流感的防控措施,于2013年3-11月对广州市91个次的活禽农贸市场进行了禽流感监测,[方法]调查共采集了1064份活禽口咽/泄殖腔棉拭子和环境拭子,并用荧光RT-PCR方法进行了检测,[结果]发现通用型、H7N9和H9亚型禽流感阳性率分别为46.05%、0.09%和19.83%。其中,鸭棉拭子样品中通用型禽流感阳性率最高,达到了58.14%,其次为鸡棉拭子、鹅棉拭子和环境棉拭子样品,分别为46.28%、42.85%和35.19%;H9亚型禽流感阳性率最高的是鸡源样品,达到了28.88%,其次为鸭棉拭子和环境棉拭子样品,分别为12.56%和5.58%;仅从1份鸡棉拭子样品中检测到H7N9亚型禽流感病毒阳性。[结论]本次调查显示,广州地区活禽农贸市场存在较为严重的禽流感污染情况,需立即采取有效的防控措施以降低本地区发生禽流感以及人感染禽流感的风险。     

山东省青岛市2015年禽流感监测分析

[目的]调查青岛市家禽高致病性禽流感免疫水平,测定该地区的禽流感流行率,分析流行的风险因素。[方法]在全市家禽养殖场（户）、农贸市场、屠宰场和野鸟栖息地随机抽样,采用血凝抑制方法测抗体,采用荧光定量RT-PCR方法检测禽流感病原,同时开展禽流感血清学和病原学检测。利用GIS、EXCEL软件,分析青岛市禽流感检测样品的空间分布、免疫抗体水平、病原流行率及分布。[结果]青岛市家禽H5N1禽流感（Re-6）免疫抗体场户合格率为76.3%,个体合格率为74.8%;H5N1禽流感（Re-7）免疫抗体场户合格率为72.5%,个体合格率为71.4%;H5亚型禽流感病原学检测全部阴性;H9亚型禽流感个体流行率为1.18%,全部来源于农贸市场和屠宰场。[结论]青岛市家禽高致病性禽流感的免疫状况良好,在所有家禽和野禽活动场点未发现高致病性禽流感病毒,表明青岛市高致病性禽流感防控效果较好。     

3株H3N2亚型禽流感病毒的基因组特征与演化分析

旨在了解浙江地区家禽H3N2亚型禽流感病毒（AIV）的流行变异情况,采用RT-PCR技术对2021年浙江923份样品进行检测,对AIV分离株进行分子特征及遗传演化分析。结果表明,AIV样品阳性率为7.69%（71/923）;共分离到2株鸡源和1株鸭源H3N2亚型AIVs,其HA和NA基因相似性分别为93.4%～100%和94.0%～99.9%,分离株内部基因片段来源复杂,与H1N2、H1N4、H10N7等亚型亲缘关系密切;遗传进化分析显示,H3N2亚型AIV主要流行于华东地区,鸭是其主要宿主,3株H3N2亚型分离株 HA和NA基因均属于禽源进化分支;分离株HA蛋白裂解位点均为PEKQTR↓GLF,符合低致病性禽流感病毒特征,HA蛋白与受体结合相关位点为226Q和228G,PB2蛋白与哺乳动物适应性相关的氨基酸位点为627E,均不同于人流感病毒对应蛋白的相关位点（226L、228S和627K）,推测其跨种传播至人的潜力较低;分离株PB1蛋白的66位氨基酸突变为S,提示其对哺乳动物的致病性可能增强。综上所述,本研究分离的H3N2亚型AIV符合低致病性禽流感病毒特征,基因片段来源复杂,跨种传播至人的潜力较低,但是否影响对宿主的致病性仍需进一步探究。     

我国长三角和珠三角地区活禽市场H9N2亚型禽流感流行病学调查

为了解目前我国活禽市场H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)流行和增殖情况,2014年在上海、江苏、安徽和广东随机选取58个活禽市场,采集12 635份活禽拭子样品进行病毒分离、RT-PCR和序列测定分析。结果:15.11%拭子样品和98.28%的活禽市场是H9N2亚型AIV阳性。鸡、鸭、鹅、鸽样品阳性率分别为22.98%(1730/7529)、3.62%(94/2594)、4.08%(67/1643)、2.09%(18/861);上海、江苏、安徽和广东的样品阳性率分别为24.11%(688/2853)、8.43%(284/3368)、15.27%(475/3110)、13.95%(461/3304)。活禽零售市场阳性率(34.40%)显著高于活禽批发市场感染率(12.24%)。随着家禽在批发市场内停留时间的延长,H9N2亚型AIV阳性率从11.45%(停留8 h内)上升到29.13%(停留48 h以上)。遗传进化分析表明:所检出的H9N2亚型AIV均属于2007年以来我国H9亚型AIV主要流行分支,即h9.4.2.5分支。这些流行病学调查结果提示我国长三角和珠三角活禽市场的家禽(尤其是鸡)H9N2亚型AIV感染率很高,并且随着活禽在批发市场内停留时间延长,以及向零售市场转移,H9N2亚型AIV存在一个显著增殖和扩散的过程。     

两株H6N2亚型鸡源禽流感病毒的分离鉴定

本研究利用血凝抑制试验(HI)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、基因测序等方法,对广东省某活禽交易市场进行流行病学调查时获得的两株非H5、H9亚型禽流感病毒65株和C7株进行了亚型鉴定。结果表明这两株病毒均具有血凝活性,且能被抗H6亚型禽流感病毒标准阳性血清特异性抑制。用针对禽流感病毒的M基因、H6亚型禽流感病毒HA基因、N2亚型禽流感病毒NA基因特异性鉴定引物对65株和C7株进行RT-PCR扩增,分别获得特异性目的片段。测序及BLAST分析表明两株分离株与H6N2亚型禽流感广东分离株的HA基因和NA基因核苷酸序列相似性均高达95%以上。将该两分离株鉴定为H6N2亚型禽流感病毒,并命名为A/Chicken/Guangdong/65/2009、A/Chicken/Guangdong/C7/2009。     

天门市活禽调运禽流感抗体监测与分析

为监测天门市活禽调运禽流感免疫情况和病毒的分布状况,对该市辖区2018年8月至12月调运送检的禽类养殖场样品,采用血凝抑制试验检测禽流感H7亚型、普通PCR技术检测禽流感通用型及H5、H7亚型,并进行统计学分析。结果共检测1830份血清和对应的禽拭子,样品来源于61个养殖场,禽流感H7亚型免疫阳性率按禽种类分类分别是种鹅100%、蛋鸡90.52%、蛋鸭33.00%;禽流感通用型及H5、H7亚型的病毒核酸阳性率分别为0.18%、0.00%、0.00%。表明该市活禽调运中,水禽禽流感H7N9的免疫抗体群体合格率低,有禽流感通用型病毒存在。加强水禽调运前免疫、运输车辆消毒及宣教工作是预防和控制H7N9禽流感在流通环节发生的有效手段。该结果为及时发现疫情隐患和防控薄弱环节提供了指导依据。     

H6亚型禽流感病毒的分离鉴定与生物学特性分析

为了解低致病性禽流感病毒(LPAIVs)在广西地区家禽中的流行情况,对广西地区活禽市场的家禽进行LPAIVs流行病学监测,分离鉴定出7株H6亚型禽流感病毒(AIV)。通过在广西地区活禽市场采集家禽咽喉和泄殖腔棉拭子样品,将其接种SPF鸡胚,收集尿囊液进行HA和HI试验,结果显示这7株只与H6亚型AIV的阳性血清发生反应,产生血凝抑制现象,初步鉴定为H6亚型AIV。通过HA和NA基因的克隆与测序鉴定,进一步确定为H6亚型AIV,与NA基因存在5种组合,包括H6N1、H6N2、H6N5、H6N6和H6N8。鸡致病性试验表明分离株可感染但不致死SPF鸡,并通过咽喉和泄殖腔排毒,结合HA裂解位点附近的氨基酸序列,表明所分离到的7株H6亚型AIV符合LPAIV的特征。     

2021年云南省玉溪市活禽交易市场禽流感病毒监测

为了解云南省玉溪市活禽交易市场禽流感病毒污染情况,2021年对该市8个县（市、区）活禽市场进行采样检测。全年共采集63场次1 455份棉拭子样品（禽咽喉/泄殖腔双拭子860份、环境拭子317份、运输工具拭子278份）,采用荧光RT-PCR方法进行流感病毒A型、H5/H7/H9亚型流感病毒核酸检测。共检出A型流感病毒核酸阳性435份,未检测到H5和H7亚型病毒核酸阳性;除检出7份未分型阳性样品外,在44场次检出H9亚型病毒核酸阳性428份,场次阳性率为69.84%,样品阳性率为29.42%,其中活禽、环境、运输工具样品阳性率分别为32.56%、25.87%、23.74%,差异具有统计学意义（P＜0.05）。一年四季均能检测到H9亚型病毒阳性,但3—6月份样品阳性率低于年均阳性率,1、2、7、10、12月样品阳性率明显高于其他月份,各月份间样品阳性率差异具有统计学意义（P＜0.01）。各县（市、区）的场次阳性率存在差异（P＜0.05）,但样品阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。结果表明：玉溪市活禽市场H5、H7亚型高致病性禽流感病毒的污染状况得到有效控制,但H9亚型禽流感病毒污染面依然广,污染率较高;不同月份间阳性率差异明显,但季节性差异缩小。结果提示,应继续加强活禽市场H9亚型禽流感病毒污染监测,同时强化活禽市场的检疫监管,严格执行消毒和休市制度,防止活禽市场禽流感病毒传入养殖环节。     

一株鸭源H1N6亚型禽流感病毒的分离鉴定及HA和NA基因序列分析

为了解禽流感病毒（AIV）在广西中越边境地区的流行情况，本研究在该地区活禽市场开展禽流感病原监测。监测过程中分离鉴定出1株H1N6亚型禽流感病毒，命名为A/Duck/Guangxi/F01/2016（H1N6），对其HA和NA基因进行序列测定，并与GenBank中下载的相关参考序列进行比对和遗传进化分析。结果显示，分离株HA基因与A/sparrow/Guangxi/GXs-1/2012（H1N2）的核苷酸同源性最高（96.9%），NA基因与A/Pavo cristatus/Jiangxi/JA1/2016（H5N6）的核苷酸同源性最高（98.2%）。HA基因裂解位点氨基酸序列为PSIQSR↓GLF，符合低致病性禽流感病毒分子特征；与部分N6亚型禽流感病毒一样，分离株NA基因有11个氨基酸缺失。此外，本研究还对分离毒株的受体亲和性进行了测定，结果显示该病毒优先结合唾液酸α-2，3-Gal受体。本研究结果表明A/Duck/Guangxi/F01/2016（H1N6）是一株重组低致病性禽流感病毒。     

我国家禽H7N9和H9N2亚型流感流行病学调查

为调查我国家禽H7N9和H9N2亚型流感流行状况,2018年3—5月,在我国11个省份67个场点,随机采集4 792份咽喉/泄殖腔拭子样品,通过RT-PCR进行流感病毒检测。结果显示:所检测的4 792份样品中,H7N9亚型阳性率为0,H9N2亚型阳性率为25.21%;场点阳性率为80.60%,其中活禽市场场点阳性率(96.30%)显著高于其他场所(15.38%)。与历年流行病学调查数据相比,2018上半年H9N2亚型病毒阳性率显著高于往年同期检测值(P0.05),达到近年来最高点。病毒核酸序列分析显示,检出的H9N2亚型病毒属于2007年以来我国H9亚型主要流行分支,即h9.4.2.5分支。本次调查结果表明,我国实施的H7N9疫苗免疫政策有效遏制了H7N9亚型流感的蔓延,而H9N2亚型流感病毒在我国持续流行多年,感染范围广,感染率有增高趋势,需要采取新的防控策略。     

H3亚型禽流感病毒的分离与鉴定

为了解广西H3亚型禽流感病毒在家禽中的流行情况,对2009~2014年采集的活禽棉拭子样品进行了分离与初步鉴定,共分离纯化出14株H3亚型AIV,通过对HA和NA基因克隆、序列测定,进一步确定11株为H3N2亚型,2株为H3N6亚型,1株为H3N8亚型AIV。对分离株进行鸡胚半数致死量、半数感染量(EID50)的测定与受体亲和性试验,结果显示14株分离株均具有优先结合SA唾液酸α-2,3-Gal受体的能力,属于禽源流感病毒毒株,不具备感染人的潜能。     

广州市活禽批发市场禽流感病毒污染状况调查

[目的 ]了解广州市活禽批发市场禽流感病毒的污染情况,为广州市制定有针对性的防控措施提供技术支持。[方法 ]2015年2月—2016年1月,按照随机抽样原则,对广州市2个活禽批发市场进行调查,每月采集1次棉拭子样品(共3 090份),并对所采集的样品进行禽流感病毒荧光RT-PCR检测。[结果 ]在该期间内,2个活禽批发市场的样品禽流感总阳性率为52.50%(1 625/3 090);禽流感病毒检出阳性率较高的月份是4月和9—12月,较低的是6—8月;水禽的禽流感感染风险是鸡的1.6倍,环境中存在禽流感病毒的风险是鸡的1.39倍;各月份中,1月、3月、11月和12月环境样品的禽流感病毒阳性率显著高于家禽样品(P0.01),而6月份家禽样品的禽流感病毒阳性率显著高于环境样品(P0.01);来自广东省内(广州市除外)的活禽样品禽流感病毒阳性率最高,为49.31%,来自外省市的禽流感通用型阳性率最低,为31.43%(P0.01)。[结论 ]调查发现,广州市活禽批发市场的禽流感高发期为春夏及秋冬交替季节;活禽批发市场中的水禽和批发市场环境是禽流感病毒流行的关键危险因素。调查结果提示,今后要加强春夏和秋冬交替季节的禽流感防控工作,加强对批发市场水禽的禽流感防控和批发市场环境的清洗、消毒,以切实降低活禽批发市场的禽流感污染水平。     

2017—2018年西藏拉萨市养殖场及活禽交易市场禽流感流行病学调查

为了解拉萨市禽流感流行情况,2017年11月—2018年3月,在拉萨市6个养殖场和11个活禽交易市场,随机采集1 394份棉试子进行禽流感病毒分离和分型鉴定。结果显示： H9亚型禽流感病毒阳性率为2.87%,未检出H3、H5、H6、H7等其他亚型病毒;活禽市场H9亚型阳性率（4.64%）显著高于养殖场阳性率（0.35%,P<0.01）。结果表明,拉萨市高致病性禽流感流行风险较小,低致病性禽流感流行以H9亚型为主,且流行率不高,但应进一步加强养殖环节的防疫、检疫,以及活禽市场的清洗、消毒等工作,防止禽流感传入和流行。     

一起人H3N8亚型流感病例相关的禽间紧急流行病学调查

2022年4月26日国家卫生健康委通报,河南省上蔡县发现一例人感染禽源H3N8亚型流感病毒病例。为探究感染病原来源,了解禽间H3N8亚型流感病毒感染情况,对该病例所在村庄及关联场点开展了禽间H3N8亚型禽流感紧急流行病学调查。在关联场点“诚信鸡店”的禽口咽-泄殖腔拭子中检出H3N8亚型流感病毒核酸阳性,推测该病例的感染可能与密切接触携带病毒的家禽相关;“诚信鸡店”售卖的禽只来自驻马店市驿城区“众信市场”,而该市场活禽大多来自外省份,因此病原通过农贸市场由外地传入的可能性较大,但不排除通过野禽传入的可能。本地家禽中未检出H3N8亚型流感病毒核酸阳性,说明病毒在本地禽群中流行的风险较低。调查提示,禽流感病毒在当地活禽交易市场存在一定的污染,且不同亚型病原共存,需进一步加强流行病学调查、监测和禽群免疫工作,通过积极宣传引导,提升养殖场户的生物安全水平。     

H7、H5禽流感的流行动态及防控

正一、我国禽流感流行病学调查简况国家禽流感参考实验室从2008年开始每年进行大量的禽流感流行病学调查工作,主要是在活禽交易市场、屠宰场和养殖场等采集鸡、鸭和鹅等各种禽类喉头与泄殖腔棉拭子以及血清样品。2013年从24个省份采集了30 109份病原学检测样品和12 877份血清学检测样品。监测结果表明,我国存在的禽流感病毒亚型较多,分到的禽流感病毒有H5、H9、H7、H6、H3、H4、H10、H11、H1、H2、H8等多种亚型。其中,几乎所有的H5亚型和H7亚型禽流感病毒均分自活禽交易市场或屠宰场;从     

2015—2016年湖南省长沙市活禽批发市场禽流感流行病学调查

为了解当地活禽批发市场的禽流感病毒污染状况,提升禽流感防控针对性,2015—2016年先后4次对长沙市两大活禽批发市场进行了禽流感流行病学调查,共在35个摊位分离到禽流感病毒,发现群阳性率为43.6%,禽流感病毒总分离率为14.24%,分离到H3、H5、H6、H7、H9和H10等6种亚型禽流感病毒。其中,H9和H5亚型禽流感病原阳性率较高,分别为8.7%和3.8%。调查结果表明,长沙市活禽批发市场中的禽流感病毒污染面较广。建议加强活禽市场管理,特别要做好市场的清洗消毒工作。     

禽流感H5N1亚型不同株抗原抗体相互检测相关性试验

禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIV）是禽流行性感冒（简称禽流感,Avian Influenza,AI）的病原。其中高致病性的H5N1亚型AIV可以造成鸡群的大批死亡,对家禽养殖业影响严重,并可引起人的感染和死亡。通过接种疫苗能有效地控制禽流感的传播,在禽流感疫苗免疫效力的评价过程中,监测免疫鸡血清抗体是最常用、最可行的方法。2009年农业部批准重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-5株＋Re-4株）制造,2012年重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）及重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-6株＋Re-4株）取代以上两个产品,2014年,北方出现了新的7．2分支毒株,而禽流感Re-4株疫苗和Re-6株疫苗对这种新型流行株的保护效力并不佳。2014年4月11日,农业部发布“中华人民共和国农业部公告第2093号”,制定了重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-7株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株＋Re-7株）2种兽药产品制造及检验规程,全国将主要以Re-6与Re-7两种疫苗联合免疫为新的趋势。本试验分别用不同毒株的禽流感试验抗原与不同毒株禽流感疫苗免疫鸡的血清通过HI试验相互检测,对抗体效价进行分析,从而得出不同毒株的相关性。     

禽流感H5N1亚型不同株抗原抗体相互检测相关性试验

禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIV）是禽流行性感冒（简称禽流感,Avian Influenza,AI）的病原。其中高致病性的H5N1亚型AIV可以造成鸡群的大批死亡,对家禽养殖业影响严重,并可引起人的感染和死亡。通过接种疫苗能有效地控制禽流感的传播,在禽流感疫苗免疫效力的评价过程中,监测免疫鸡血清抗体是最常用、最可行的方法。2009年农业部批准重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-5株+Re-4株）制造,2012年重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）及重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-6株+Re-4株）取代以上两个产品,2014年,北方出现了新的7.2分支毒株,而禽流感Re-4株疫苗和Re-6株疫苗对这种新型流行株的保护效力并不佳。2014年4月11日,农业部发布“中华人民共和国农业部公告第2093号”,制定了重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型, Re-7株）和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗（Re-6株+Re-7株）2种兽药产品制造及检验规程,全国将主要以Re-6与Re-7两种疫苗联合免疫为新的趋势。本试验分别用不同毒株的禽流感试验抗原与不同毒株禽流感疫苗免疫鸡的血清通过HI试验相互检测,对抗体效价进行分析,从而得出不同毒株的相关性。     

2022年玉溪市禽流感监测与分析

为掌握玉溪市禽流感在养殖场和活禽市场流行情况，2022年采集玉溪市9个县(市、区)32个乡(镇)62个村90个养殖场(户)及21个活禽市场2 280份样品进行监测。采用荧光RT-PCR方法对A型禽流感病毒检测并进行H5/H7/H9亚型禽流感病毒核酸分型。2022年全市共检出A型禽流感病毒核酸阳性240份，样品阳性率为10.53%,其中H9亚型233份、不确定型7份，未检出H5/H7亚型。活禽市场A型禽流感病毒核酸阳性率(31.47%)显著高于养殖场阳性率(0.27%),差异具有统计学意义(P<0.01);秋冬季节样品阳性率较高，差异具有统计学意义(P<0.01)。结果：玉溪市禽流感病毒主要分布于活禽市场，且以H9亚型流行为主，污染面较广，不同季度阳性率差异明显，但季节性差异缩小。结果提示：活禽市场是当前禽流感防控的重点，继续加强活禽市场的监测，同时强化活禽市场的检疫监管，严格执行消毒和休市制度，防止活禽市场禽流感病毒进入养殖环节。