苏州大型超市小水产品中副溶血性弧菌的污染调查及耐药性分析

目的了解副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)在苏州市大型超市小水产品中的污染状况及耐药性,为建立副溶血性弧菌食物中毒预警系统提供科学依据。方法定期从苏州一大型超市抽取小水产品,根据GB/T4789.7-2008标准进行副溶血性弧菌的分离培养和鉴定,应用K-B法进行药敏实验。结果在144份样品中检出副溶血性弧菌56株,检出率38.9%。所有分离菌株对先锋必素、诺氟沙星和环丙沙星敏感;部分菌株对氨苄西林、阿莫西林、复方新诺明和头孢噻吩等具有较强的耐药性,耐药率分别为55.4%、42.9%、35.7%和32.1%;有9株菌株出现了多重耐药。结论苏州大型超市小水产品中副溶血性弧菌污染严重,应加强副溶血性弧菌食源性疾病预警,同时加强水产品抗生素使用的管理,防止其耐药菌株的传播。     

禽源金黄色葡萄球菌耐药性监测

从临床样品中分离鉴定得到183株金黄色葡萄球菌,采用微量肉汤稀释法监测其对24种抗菌药物的耐药性。结果表明,183株金黄色葡萄球菌对24种抗菌药物均呈现不同程度的耐药性,对常用的青霉素类、磺胺类药物及甲氧苄啶严重耐药,耐药率高达81%以上;其中检测出MRSA42株,检出率为22.95%。94.00%的金黄色葡萄球菌菌株呈现多重耐药,耐药谱型主要分布在3～8耐之间,以7耐菌株所占比例最大(15.30%),共有119种耐药谱型。     

胶东地区肉鸡大肠杆菌耐药性研究

试验通过CLSI推荐的K-B药敏纸片法,对胶东地区分离的肉鸡大肠杆菌进行耐药性研究。结果显示:169株肉鸡大肠杆菌分离株对17种抗菌药物均有不同程度的耐药性,对四环素、多西环素、阿莫西林耐药的菌株数量较多,耐药率分别为94.08%、94.08%、92.90%;对多黏菌素B耐药菌株数量最少,耐药率仅为0.59%;耐药率低于30%的有4种,依次为磷霉素、大观霉素、丁胺卡那霉素、多黏菌素B;其余10种药物耐药率在36.09%~79.89%。169株大肠杆菌中仅有一株大肠杆菌表现单一耐药性,其余168株分离菌均对抗菌药物表现出多重耐药,耐药范围在3~15种,其中对9~13种抗菌药物具有多重耐药性的分离菌共106株,占全部分离菌的62.72%。     

广东省候鸟副溶血性弧菌的分离与鉴定

为了解广东省候鸟副溶血性弧菌及其携带的毒力基因、抗生素敏感性和遗传进化特征,收集广东省候鸟粪便,用国标法和toxR基因PCR检测的方法进行分离鉴定获得副溶血性弧菌;通过PCR对毒力基因进行鉴定、用Etset测定MIC值,通过ERIC-PCR对副溶血性弧菌进行遗传进化分析。结果共获得122株副溶血性弧菌,这些细菌仅含有tlh(不耐热溶血素基因),而tdh(耐热溶血素基因)与trh(耐热溶血素相关毒素基因)等均为阴性。通过ERIC分群发现福田红树林保护区与湛江的鹭源菌株和湛江雷州的鹭源菌株具有高度相似性,深圳华侨城湿地菌株分布在3群,与雷州的鹭源相似度较高,为95%;福田红树林保护区分离株与深圳华侨城湿地菌株相似度大于75%。广东省候鸟携带的副溶血性弧菌具有较为丰富的遗传多样性,毒力基因携带单一,保持着较高的药物敏感性。     

广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌的分离鉴定及其耐药性

为查明副溶血弧菌( Vibrio parahaemolyticus, Vp)对广西凡纳滨对虾( Litopenaeus vannamei )的危害及耐药情况,用常规方法对凡纳滨对虾病样进行细菌分离,API 20NE和16S rRNA对病原菌进行鉴定,K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果显示,从160份发病凡纳滨对虾肝胰腺中共分离到67株副溶血弧菌,总检出率为41.88%。67株副溶血弧菌彼此之间高度同源,其相似度达99.2%~100%,与标准副溶血弧菌ATCC17802(GenBank登录号:NR114632.1)相似度为98.8%~100%。67株副溶血弧菌对28种试验抗生素中的氟苯尼考等12种药物表现出很强的敏感性,敏感率均在80%以上;对青霉素G等5种抗生素表现出很强的耐药性。     

鸡肠道大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为分析鸡肠道大肠杆菌对常用抗菌药物的耐药性,试验采集了34个鸡直肠拭子样本,分离并鉴定大肠杆菌,采用微量稀释法测定分离菌对卡那霉素、氯霉素、氨苄西林、环丙沙星、头孢曲松钠、庆大霉素、磺胺嘧啶和强力霉素8种药物的敏感性。结果显示,分离并鉴定出34株鸡肠道大肠杆菌,其中4株经鉴定为产H₂S大肠杆菌。34株菌对卡那霉素、氯霉素、氨苄西林、环丙沙星、头孢曲松钠、庆大霉素、磺胺嘧啶和强力霉素的MIC₅₀分别为>256、256、>256、16、<0.125、256、>512和16 μg/mL,耐药率依次为100.0%、100.0%、100.0%、70.6%、11.8%、94.1%、100.0%和82.3%。34株菌均为多重耐药菌株,最少可对5种药物耐药,最多可对8种药物耐药,其中耐8种药物菌株百分率为2.9%;耐7种药物菌株百分率为58.8%;耐6种药物菌株百分率为32.4%;耐5种药物菌株百分率为5.9%。试验结果表明,34株鸡肠道大肠杆菌对8种常用抗菌药物的耐药谱广、耐药率高,兽医临床应根据试验结果调整用药方案。     

腹泻犬肠道分离菌的鉴定及耐药性分析

本试验从9例有腹泻症状的病犬分离菌株并进行16S rDNA鉴定、药敏试验及耐药基因检测,分离得到12株菌株,经鉴定有8株大肠杆菌、3株绿脓杆菌和1株粪肠球菌。药敏试验显示,12株分离菌对临床常用的3大类抗菌药物均产生了耐药性,对氨苄西林、庆大霉素和恩诺沙星耐药率较高。β-内酰胺酶耐药基因bla_(TEM)和bla_(SHV)检出率均为100%;ESBL-抗生素耐药基因bla_(CTX-M-8)的检出率为83.3%。氨基糖苷类耐药基因aac(3)-Ⅱ、aac(6’)-Ib、aacC2检出率分别为100%、66.7%、41.7%。氟喹诺酮类耐药基因qnrS和qepA的检出率分别为83.3%、58.3%。因此,药敏试验与耐药基因检测结果均表明犬腹泻分离菌株对临床常用3大类药物均已产生耐药性,且存在多重耐药现象。     

30日龄犊牛粪源大肠杆菌耐药性调查

旨在调查新疆某牛场犊牛粪源大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药情况。对该牛场92头30日龄犊牛进行直肠粪样采集,采用常规方法进行大肠杆菌的分离鉴定,利用纸片扩散法对分离菌株进行药物敏感性试验。结果表明,从92份犊牛粪便样本中共分离到92株大肠杆菌,分离率为100%;分离菌株对阿米卡星(93.75%)、恩诺沙星(64.50%)、诺氟沙星(59.30%)、庆大霉素(57.14%)4种抗菌药物的耐药性较强,耐药率均超过50%;对阿莫西林/克拉维酸钾(36.30%)、阿莫西林(26.00%)、环丙沙星(13.60%)3种抗菌药物的耐药率也相对较高;对氨苄西林的敏感性最高,耐药率仅为3.03%。综上提示,该牛场犊牛粪源大肠杆菌对不同抗菌药物产生了一定程度的耐药性,建议该牛场应在药物敏感性试验结果的指导下合理选择抗菌药物。     

河北省保定地区雏鸡鸡白痢沙门菌的分离鉴定及耐药性检测

为了有效防控雏鸡白痢沙门菌病,试验自保定某蛋种鸡场疑似为鸡沙门菌病雏鸡采取肝脏病料进行细菌的分离培养、生化鉴定、鸡白痢沙门菌多价血清学鉴定及沙门菌inv A基因PCR鉴定,并对分离菌进行致病性检测及对7种抗菌药物的耐药性检测。结果表明,10株分离菌的形态特征、生化特性、血清学鉴定结果符合鸡白痢沙门菌的特征,说明从病死雏鸡组织中分离出的细菌为鸡白痢沙门菌。沙门菌inv A基因PCR扩增出373 bp目的片段,进一步证实分离菌为鸡沙门菌。用分离菌株接种雏鸡,其死亡率高达90%,表明该菌株有很高的致病性。10株分离菌株对阿莫西林和青霉素耐药率达100%,对阿齐霉素的耐药率达90%,而对阿米卡星、头孢唑林和庆大霉素耐药性较弱、对氧氟沙星较为敏感。3耐菌株多重耐药比例为42.86%,4耐菌株多重耐药比例为57.14%,5耐菌株多重耐药比例为71.43%,说明雏鸡沙门菌分离株对所试抗菌药物均表现出不同程度的耐药性,且表现出多重耐药现象。本试验为鸡白痢沙门菌病的防治提供参考。     

猪、鸡源分离粪肠球菌的核糖体分型及耐药性分析

对上海地区1个规模化养猪场和1个规模化养鸡场分离鉴定的40株粪肠球菌,采用微量肉汤稀释法对12种抗菌药物进行药敏试验,采用Riboprinter^®微生物基因指纹鉴定系统检测分离菌株的基因指纹图谱,分别检测分离菌株中的核糖体型和耐药性。结果表明,在40株粪肠球菌中,80%以上为多重耐药菌株,有4株猪源粪肠球菌对万古霉素耐药,其中有2株表现为对万古霉素高度耐药（MIC>64 mg/L）,且对链霉素和庆大霉素同时表现为高度耐药（MIC>2 048 mg/L）。从耐药表型和核糖体分型共同分析粪肠球菌的耐药性,发现多重耐药性严重,同一核糖体型菌株的耐药表型并非完全一致。     

屠宰前鸡、猪源大肠杆菌耐药性调查

本试验旨在了解屠宰前鸡、猪源食品动物体内大肠杆菌耐药情况,分析潜在的食品安全问题。从广州市畜禽交易市场随机采集待屠宰鸡和猪的粪便样品,分离鉴定大肠杆菌,并采用琼脂稀释法检测大肠杆菌对15种抗菌药物的敏感性。结果显示,从658份猪源样品和133份鸡源样品中共分离鉴定出731株大肠杆菌,其中猪源606株,鸡源125株。药敏试验结果显示,731株大肠杆菌均表现出不同程度的耐药,耐药谱广且多重耐药现象严重。对复方新诺明和四环素的耐药率为90.0%以上,仅对头孢西丁、黏菌素和阿米卡星较敏感(耐药率均低于3%)。鸡源大肠杆菌对头孢噻肟、头孢曲松、新霉素、阿米卡星、萘啶酸和环丙沙星的耐药率显著高于猪源大肠杆菌(P＜0.05)。鸡源大肠杆菌中3耐及3耐以上的菌株占97.60%,猪源大肠杆菌占94.72%。结果表明,屠宰前畜禽体内大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性非常严重,以多重耐药为主,且耐药谱丰富多样。提示屠宰前畜禽携带的耐药菌对食品安全和人类健康存在较大的安全隐患。     

副溶血性弧菌耐药基因的研究进展

副溶血性弧菌为水产品主要致病菌之一,水产业和农业中抗生素的过量使用导致副溶血性弧菌对所推荐使用的抗生素产生了抗性,并且在副溶血性弧菌中已经发现了质粒和整合子等基因移动元件,更增加了与其他细菌发生耐药基因相互交换和重组的几率。对副溶血性弧菌的耐药研究现状、耐药机制和耐药基因的水平转移进行综述。     

福州动物园动物高水平耐庆大霉素肠球菌耐药表型检测

为了解福州动物园动物细菌耐药现状,选用肠球菌为指示菌,采用琼脂平板筛选法(ADSP法)筛选高水平耐庆大霉素肠球菌(HLGRE)。根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法测定耐药菌株对6种抗菌药物的耐药性,用PCR法对分离出的不同来源的高水平耐氨基糖苷类肠球菌进行菌种鉴定。从动物园圈养野生动物共分离出78株HLGRE,不同动物来源的分离率不同,其中草食动物HLGRE分离率最低,占55.56%;肉食动物HLGRE分离率最高,占84.38%。药敏试验结果显示,不同动物来源的HLGRE均对红霉素和土霉素的耐药率最高,分别为100%和96.1%,对氨苄西林和万古霉素的耐药率最低。     

Antibiotic resistance pattern of foodborne Salmonella isolates in Addis Ababa (Ethiopia)

A total of 39 Salmonella cultures isolated from raw minced beef and chicken (gizzard, liver, and heart) samples in Addis Ababa were examined for susceptibility to a group of 10 selected antimicrobials. 34 isolates (87.2%) were resistant to one or more antibiotics. The antibiotics to which isolated Salmonella strains were most often fully resistant included nitrofurantoin (48.7%), furazolidone (48.7%) and streptomycin (46.2%). Only 4 antimicrobials (gentamycin, kanamycin, rifampicin and sulphamethoxazole-trimethoprim) were effective against all Salmonella isolates with the exception of 2 which were intermediate in resistance to kanamycin (1) and sulphamethoxazole-trimethoprim (1). 77.8% of the S. Enteritidis strains showed multiple resistance to up to four antibiotics followed by S. Typhimurium (60.0%) and S. Dublin (33.3%). The high level of antibiotic resistance of foodborne Salmonella isolates in the study area is an indication of indiscriminate and continuous use of subtherapeutic doses of antibiotics in animals.     

天津市水产养殖动物霍乱弧菌携带情况调查

从2008年4月至11月,对天津市11种水产养殖动物进行霍乱弧菌检验,共取得样品211份,其中携带霍乱弧菌的样品36份,检出率为17.1%,经血清凝集试验证明都为非O1霍乱弧菌。在11种水产养殖动物中,以南美白对虾霍乱弧菌的检出率最高,为25.0%;鲤鱼和金鱼次之,分别为7.7%和5.3%;其他8种水产养殖动物中未检出霍乱弧菌。     

灵长类动物肠道沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验

从13个动物园的非人灵长类动物中采集了384份粪便样品,经过细菌分离培养后,并经染色镜检和生化试验等分离鉴定出153株沙门氏菌,分离率为39.84%。按照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)的判定标准,对分离得到的153株沙门氏菌进行了22种抗生素药物的药敏试验,结果表明,153株均表现出不同的程度的耐药性,其中,羧苄西林的耐药率最高,为95.42%,而亚胺硫霉素最敏感,敏感率为90.20%;且153株沙门氏菌分离株均为多重耐药菌株(n≥2),其中1株的耐药数可达18种之多,耐2~12种抗菌药物的菌株多达123株,占分离菌株的80.39%。从不同动物园分离的沙门氏菌对22种抗生素耐药情况的方差分析来看,在所调查的13个动物园中,不同动物园沙门氏菌分离株的耐药情况也不同。     

弧菌颉颃菌的筛选及其在对虾养殖中的初步应用

试验从养殖环境中分离到22株细菌,以副溶血弧菌为病原指示菌,点种法筛选到1株弧菌颉颃菌A4;通过生理生化试验和16S rRNA序列分析,鉴定该菌为枯草芽孢杆菌。抑菌性能试验结果显示,分离菌株对副溶血弧菌、溶藻弧菌及灿烂弧菌均具有较好的颉颃作用。在对虾养殖试验中发现,使用枯草芽孢杆菌制剂2 d后可显著减少水体中的弧菌数量（P＜0.05）,改善对虾生长状态。该菌株可作为益生菌开发成微生态制剂,用于对虾养殖中弧菌病的预防。     

Antimicrobial resistance pattern of Salmonella serotypes isolated from apparently healthy slaughtered camels (Camelus dromedarius) in eastern Ethiopia

A total of 714 samples consisting of faeces, mesenteric lymph nodes, liver, spleen, abdominal and diaphragmatic muscles (each 119) were collected from November 2001 to April 2002 from apparently healthy slaughtered camels (Camelus dromedarius) in eastern Ethiopia. One hundred sixteen (16.2%) Salmonella strains belonging to 16 different serovars were isolated. All Salmonella strains isolated were examined for antimicrobial resistance to 17 selected antimicrobials. The minimum inhibitory concentration (MIC) values were determined by the microdilution broth test. Fifty-two (44.8%) of the Salmonella isolates were resistant to one or more antimicrobials. Thirty-nine of the 52 (75%) resistant Salmonella serovars exhibited multiple resistance to up to eight different antimicrobials. Among the serovars tested, S. Typhimurium, S. Heidelberg, S. Braenderup and S. Hadar displayed multiple resistance mainly to streptomycin (35.3%), spectinomycin (28.4%), sulfamethoxazole (25.0%), ampicillin (24.1%), trimethoprim (22.4%), trimethoprim/sulfamethoxazole (18.9%), tetracycline (12.9%) and colistin (11.2%). All Salmonella strains tested were susceptible to ciprofloxacin, nalidixic acid, gentamicin, kanamycin and neomycin. The present study showed the importance of camels as a potential source of single and multiple resistant Salmonella strains to different antimicrobials that are also used in the public health sector for the treatment of different bacterial diseases in Ethiopia.     

犊牛腹泻源大肠杆菌耐药情况及HPI相关基因的检测

本研究旨在明确犊牛腹泻源性大肠杆菌的耐药情况、强毒力岛（HPI）标志基因及相关基因的携带情况，以及大肠杆菌分离株与HPI携带的关系。采集犊牛病理性腹泻样本158份，采用麦康凯培养基和伊红美蓝培养基进行筛选，镜检符合大肠杆菌形态的进行VITEK 2 Compact生化鉴定和PCR鉴定，采用K-B纸片法对大肠杆菌分离株进行药敏试验，应用PCR方法进行分离株HPI相关基因携带情况的检测。结果显示，共分离得到75株大肠杆菌，分离株对阿莫西林、哌拉西林、氨苄西林、头孢唑啉、氟苯尼考、恩诺沙星、四环素的耐药率均>90%，对头孢氨苄、头孢拉定、头孢曲松、环丙沙星、诺氟沙星和氧氟沙星的耐药率均≥ 60.00%，对阿米卡星较敏感，耐药率为9.33%；75株大肠杆菌全部耐3种以上药物，多重耐药（≥ 10）的菌株占85.33%，耐药谱集中在耐14~17种药物，5株对19种药物全部耐药。HPI标志基因irp2的阳性率为100%，其他相关基因fyuA、irp3、irp5、irp8和ytbA的检出率在66.00%以上。综上所述，宁夏地区犊牛腹泻源性大肠杆菌耐药普遍，多重耐药现象严重。