乳制品中具有降胆固醇功能乳酸菌的体外筛选

用改良的o-phthalaldehyde法对pH3．0和0．3％牛胆酸钠有一定耐受性的10株乳酸菌的体外降胆固醇活性进行了测定。这些菌在含0．3％胆盐的培养基中，37℃厌氧培养24h后，均表现出较强的降胆固醇活性。胆固醇脱除率从30．4％～43．6％不等。其中鸟肠球菌WZ38—2对胆固醇的脱除率最高；其次为植物乳杆菌WHl3—1和WH23—1。     

湖北地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析

本研究旨在分离鉴定湖北地区致奶牛乳房炎的病原菌，鉴定细菌的耐药特征．为奶牛乳房炎防治提供理论依据。从湖北两个主要奶牛小区的9个不同规模的奶牛场采集牛奶样本200份，经检测．其中3份为临床乳房炎样本，49份为隐性乳房炎。两地区隐性乳房炎的检出率分别为36．4％（20／55）与20％（29／145）。两地区乳房炎牛奶的细菌种类分布也各不同。其中武汉东西湖地区停乳链球菌的分离率最高，占33.3％（8／24）．而宜昌夷陵区以金黄色葡萄球菌分离率最高，占29％（9／31），其次为无乳链球菌，占25．8％（8／31）。从乳房炎牛奶中共分离到7种细菌共55株，其中金黄色葡萄球菌11株，表皮葡萄球菌10株，无乳链球菌10株，停乳链球菌14株，乳房链球菌2株，大肠埃希氏菌4株，克雷伯氏菌4株。分别对所有分离株进行12种药物的敏感性试验，结果表明所有菌株对先锋V、氧氟沙星均高度敏感．对临床常用的青霉素、链霉素具有较高的耐药性。     

传统发酵酸马奶中瑞士乳杆菌耐酸性的筛选

从新疆地区牧民家庭32份自然发酵酸马奶样品中分离鉴定出的82株瑞士乳杆菌中，通过耐酸实验选出39株可在pH3．0和pH3．5酸性环境中生长的菌株进行pH为3．0的人工胃液的耐受性实验。结果表明不同菌株对人工胃液的耐受能力有很大差异。     

金华市规模奶牛场隐性乳房炎主要病原菌的分离鉴定与药敏试验

对金华市规模奶牛场HMT强阳性的122个乳样进行主要细菌的分离鉴定，查出91个乳样有细菌，细菌检出率为74．59％。检出8种共104个分离菌株，其中主要为凝固酶阴性葡萄球菌53株，占51．0％；传染性细菌中，金黄色葡萄球菌23株，无乳链球菌14株，分别占22．1％和13．5％；环境性细菌感染9株占8．7％，其中链球菌属(除无乳之外)7株占6．7％，且以停乳链球菌为主(5．8％)；肠杆菌2株占1．9％，但未检出大肠杆菌；其他细菌5株占4．8％。由葡萄球菌、链球菌混合感染引起的乳房炎占12．09％。药敏试验结果表明，临床上较常使用的青霉素、链霉素、复方新诺明对该场隐性乳房炎的主要病原菌有很大的耐药性。     

新疆北部地区奶牛子宫内膜炎主要病原菌的分离鉴定及其血细胞成分分析

对临床确诊为奶牛子宫内膜炎的75头荷斯坦奶牛进行子宫炎性分泌物采样,用常规方法进行细菌分离培养及鉴定,并对19头患子宫内膜炎奶牛和8头健康奶牛进行血细胞成分分析。结果共分离鉴定出细菌189株,其中金黄色葡萄球菌56株（29．62％）,大肠埃希氏菌52株（27．51％）,铜绿假单胞菌25株（13．23％）,蜡样芽孢杆菌22株（11．64％）,无乳链球菌17株（8．99％）,停乳链球菌10株（5．30％）,沙门氏菌3株（1．59％）,中间葡萄球菌2株（1．06％）,表皮葡萄球菌、普通变形杆菌各1株（0．53％）。血细胞成分分析结果表明,子宫内膜炎奶牛组与健康奶牛组相比,淋巴细胞（LYM）、粒细胞（GRAN）、平均血红蛋白含量（MCH）、血小板分布宽度（PDW）、血小板压积（PCT）等差异极显著（P〈0．01）,其余指标差异不显著（P〉0．05）。     

鸡肠黏膜乳酸菌的抗菌能力及其对抗菌素的药敏特性

从肉鸡空肠黏膜上分离到6株菌，均为革兰氏阳性菌，其中3株乳杆菌（R2、R4、R6），3株肠球菌（R1、R3、R5）。生理生化鉴定表明，R2为嗜酸乳杆菌；R4为德氏乳杆菌乳亚种；R6为德氏乳杆菌德氏亚种；R1、R3和R5为粪肠球菌。产乳酸能力分析表明，培养至12h时R2产乳酸速度最快，到24h时R4产生乳酸浓度最高，为69．59mmol／L。在抑菌试验中，R2、R4对鸡大肠杆菌O1、鸡伤寒沙门氏菌O9和金黄色葡萄球菌的抑制作用显著高于其它菌株（P〈0．05）；药敏试验结果表明，R2和R4对治疗性抗菌索青霉素、四环索、卡那霉素、链霉素、万古霉素有较强的耐受性；对添加剂用抗菌索二硝托胺、硫酸多粘菌素、氨苯胂酸、杆菌肽锌的耐受性较强。     

昆明地区奶牛临床型乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

奶牛乳房炎是奶牛常见病和多发病之一，给奶牛养殖业带来了巨大的经济损失。试验对昆明地区多个奶牛场的奶牛临床型乳房炎病原菌进行分离、鉴定，从114份乳样中共分离出13种305株细菌，经培养特性、染色镜检、生化鉴定等试验，鉴定出金黄色葡萄球菌63株，占20．66％；表皮葡萄球茵26株，占8．52％；无乳链球菌53株，占17．38％；停乳链球菌23株，占7．54％；乳房链球茵19株，占6．23％；乳链球菌14株，占4．59％；粪链球菌15株，占4．92％；化脓链球菌14株，占4．59％；大肠杆菌48株，占15．74％；真菌12株，占3．93％。分别对所有分离菌株进行17种药物的敏感性试验，结果表明：除真菌外所有菌株对庆大霉素、新霉素、环丙沙星、诺氟沙星、林可霉素、乳肿康均高度敏感，对临床常用的青霉素、链霉素、鱼腥草等具有较强的耐药性。     

健康奶牛产道内正常菌群的研究

本试验从山东省不同奶牛场筛选出60头健康状况良好的奶牛，按试验要求分三组，第一组为20头8～15月龄的未配种的青年奶牛，第二组为20头处于干奶期（围产期）的奶牛，第三组为20头产后一个月的奶牛。采用常规细菌培养、分离、鉴定的方法从产道分离到细菌150株，其中乳酸杆菌46（30．70／4）株、表皮葡萄球菌39（26％）株、无乳链球菌21（14％）株、大肠杆菌23（15．3％）株、芽孢杆菌8（5．3％）株、棒状杆菌5（3．3％）株、念珠菌8（5．3％）株。比较结果显示，乳酸杆菌为正常奶牛产道内的主要寄生菌，其次是表皮葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌。但是未配青年奶牛的阴道内，乳酸杆菌的分离率并不高。试验发现，奶牛阴道内的寄生菌一般为2～3种。     

干酪乳杆菌的筛选及其在褐色活性乳饮料中的应用

以产酸速度、pH2.5人工胃液耐受性、pH8.0人工肠液耐受性、0.3％胆盐耐受性,对传统发酵乳制品中分离的298株干酪乳杆菌进行筛选,并对其在褐色活性乳饮料中的应用进行评价.结果表明:共有1 1株干酪乳杆菌在脱脂乳中产酸速度显著快于其他菌株(P＜0.05),其中IMAU60143、IMAU70020和IMAU10510具有优良的人工胃肠液和胆盐耐受能力(P＜0.05),此3株干酪乳杆菌在褐色活性乳饮料中具有良好的贮藏稳定性,其中IMAU70020于4℃贮藏28d活菌数仍大于5.0×108CFU/g.     

针对9种常见肠道致病菌的免疫乳的研究

以9株人肠道病原菌(致病大肠杆菌3株、志贺氏菌3株、沙门氏菌3株)制备的混合抗原对孕牛进行系统免疫，以获得对人致病肠道杆菌具有特异性的牛乳抗体。对母牛进行系统免疫后，免疫乳和非免疫乳中IgG总含量没有显著变化。但经免疫处理的母牛，其初乳(产犊后24h内)中针对9种致病肠道杆菌的特异性IgG效价为2^10-2^12，而非免疫母牛为2^7-2^10，免疫处理后初乳中特异性IgG效价提高了2—9倍；经免疫处理的母牛，其常乳中针对9种致病肠道杆菌的特异性IgG效价为2^6-2^10，而非免疫母牛为2^1-2^6，免疫处理后常乳中特异性IgG效价提高了8-14倍。对免疫乳中IgG热致变性进行研究，其结果为：经60℃、10min，60℃、30min，70℃、10min，70℃、30min，80℃、10min，80℃、30min加热处理，免疫乳中IgG变性率分别为14．81％、25．20％、76．44％、85、58％、100％、100％。对免疫乳中IgG酸稳定性进行研究，其结果为：经pH2、10min，pH2、30min，pH4．5、60min，pH4．5、120min处理，免疫乳中IgG活性持留率分别为66.69％、56．55％、100％、100％。     

猪饲料添加剂复合菌种的筛选和特性研究

根据微生态理论,文章选用嗜酸乳杆菌、纳豆芽孢杆菌、酿酒酵母作为制备复合微生物饲料添加剂的试验菌株。经一系列实验,结果表明:所选3种试验菌均能耐受0.3%的猪胆盐,对pH值为3.0的酸性环境也有较强的抵抗力,活菌数均在106CFU/ml以上;3种试验菌对人工胃肠液均有理想的耐受能力,能顺利通过胃、十二指肠到达小肠发挥作用,并能抑制猪体常见致病菌,是制备复合微生物饲料添加剂的优良菌种。     

Selection of enterococci for potential canine probiotic additives

Enterococci are important inhabitants of animal intestine and are widely used in probiotic products. A potentially successful probiotic strain is expected to have several desirable properties in order to be able to exert its beneficial effects. Forty enterococcal isolates from dog faeces were tested for characters believed to be important for probiotic strains; bacteriocin production, resistance or tolerance to antibiotics, low pH, bile tolerance and adhesive activity. The total count of enterococci was found to be 3.3-7.3log(10)CFU/g of faeces. Most identified strains were Enterococcus faecium. All strains were sensitive to vancomycin, ampicillin, penicillin and chloramphenicol. Thirty-three percentage of strains were resistant to erythromycin and 28% to tetracycline. Among 40 isolates, 75% showed a broad inhibitory spectrum only against Gram-positive indicator bacteria. Seven strains with broad bacteriocin activity were selected for further assays. In the presence of 1% bile, the survival rate of selected strains ranged between 72 and 98%. Survival of strains at pH 3.0 was found in the range between 76 and 87% after 3h. The adhesion of the tested strains to intestinal mucus ranged from 4 to 11% for canine mucus and from 5 to 8% for human mucus. E. faecalis EE4 and E. faecium EF01 showed the best probiotic properties. It indicates that they could be used as new candidate probiotic strains after in vivo testing.     

长白山原始森林土壤源耐低温乳酸菌的筛选

试验旨在筛选长白山原始森林土壤中耐胁迫生长能力强、产酸能力强、体外抑菌特性好的耐低温乳酸菌,并对其相关生物学特性进行分析,为东北地区寒冬季节低温青贮提供优良乳酸菌菌种资源。采用低温（10℃）进行耐低温乳酸菌初筛,经不同pH、温度及盐度等条件下进行乳酸菌生长特性测定后,进行候选菌株的种属鉴定,并对候选菌株进行生长曲线、产酸曲线、耐酸和耐胆盐性能、抑菌性能测定及小鼠饲喂试验。结果显示,通过10℃低温条件培养,初筛获得11株能够良好生长的耐低温乳酸菌,其中C37、C34和C4212经16S rRNA测序分析后鉴定为植物乳杆菌,在培养7 d时,pH均可下降至4.25以下,均能够在4℃、45℃、pH 3.0、6.5% NaCl等条件下良好生长。生长曲线分析发现,3株乳酸菌均在4 h达到对数生长期,10~12 h后进入生长稳定期。在培养24 h时,C37、C34和C4212可将pH分别降至4.04以下,在pH 3.0条件下,C37和C4212具有较高的存活率,且对0.5%胆盐具有一定的耐受性,其存活率均在80%以上。对常见病原菌体外抑菌表明,3株乳酸菌对产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及肠炎沙门氏菌均有抑制作用,小鼠饲喂试验表明生物安全性好。本试验结果表明,从长白山原始森林土壤中筛选和鉴定出的乳杆菌C37、C34、C4212可作为东北地区寒冬季节低温青贮优良乳酸菌菌种资源。     

Screening of Pychrotrophic Lactic Acid Bacteria from Changbai Mountain Soil

The purpose of the experiment was to screen psychrotrophic lactic acid bacteria with strong stress-resistant growth ability,acid production ability and good bacteriostatic characteristics in vitro,and analyze its related biological characteristics,so as to provide excellent psychrotrophic lactic acid bacteria resources for low temperature silage in Northeast China.The culture condition of 10 ℃ was used to screen the psychrotrophic lactic acid bacteria.After the determination of the growth characteristics of Lactobacillus under different pH,temperature and salinity conditions,the species identification of the candidate strains was carried out,and the growth curve,acid production curve,acid and bile salt resistance,bacteriostatic performance and feeding test of mice were conducted for the candidate strains.The results showed that 11 strains of psychrotrophic lactic acid bacteria could grow well at 10 ℃.The strains C37,C34 and C4212 were identified as Lactobacillus plantarum by 16S rRNA sequencing analysis.The pH of C37,C34 and C4212 decreased to below 4.25 after 7 days of culture.In addition,C37,C34 and C4212 could grow well at 4 ℃,45 ℃,pH 3.0 and 6.5% NaCl.The analysis of growth curve showed that the three strains of Lactobacillus all had a fast growth rate,entered the logarithmic growth period at 4 h,and entered the stable growth period in 10-12 h after inoculation.In the aspect of acid production rate,C37,C34 and C4212 could reduce pH below 4.04 at 24 h of culture.At pH 3.0,C37 and C4212 had a high survival rate,they all had a certain tolerance to 0.5% bile salt,and the survival rate was more than 80%.C37,C34 and C4212 had inhibitory effect on enterotoxin producing Escherichia coli,Salmonella Typhimurium,Staphylococcus aureus and Salmonella Enteritis,and the animal test of three Lactobacillus plantarum were safe.Based on the results of this experiment,Lactobacillus C37,C34 and C4212 were screened and identified from the forest soil of Changbai Mountain,which could provide excellent lactic acid bacteria resources for low temperature silage in winter in Northeast China.     

西藏豆科牧草青贮饲料中耐低温优良乳酸菌的筛选

本研究对西藏地区豆科牧草青贮饲料中的乳酸菌进行分离、鉴定,以期得到优良的乳酸菌菌株。以苜蓿和箭筈豌豆青贮饲料为试验材料,共分离得到6株同型发酵乳酸菌,经传统微生物培养和16S rRNA序列分析,3株(LCG9,CG35和AG11)为戊糖片球菌,2株(LCG3和LAG1)为植物乳杆菌,1株(LA3)为弯曲乳杆菌;除AG11和LAG1在5℃,LCG9和AG11在pH 3.0和8.0生长微弱外,其余乳酸菌菌株均在5~20℃,pH 3.0~8.0及3.0%和6.5% NaCl培养液中生长良好。从耐低温特性、产酸能力和发酵速率3个指标考虑,植物乳杆菌LCG3最适宜用于西藏青贮饲料生产的乳酸菌菌种。     

呼伦贝尔草原野生牧草青贮中优良乳酸菌的分离及鉴定

本研究对呼伦贝尔草原牧草青贮饲料中的乳酸菌进行了分离、鉴定,旨为筛选出优良乳酸菌菌株。以4个地区不同群落牧草的青贮饲料为试验材料,并采用传统微生物学鉴定方法及16S rRNA序列分析对分离得到的乳酸菌菌株进行了鉴定。菌株DME53为草乳杆菌,DMG108为干酪乳杆菌,DMC80为植物乳杆菌,DMG138为短乳杆菌,DMG139为戊糖片球菌;其中菌株DMG138为异型发酵乳酸菌,其余4株菌均为同型发酵乳酸菌。除DMG139在40和45 ℃下生长微弱外,其余菌株均在5~45 ℃不同温度条件下, 3.0%和6.5% NaCl培养液中良好生长。除菌株DME53在pH 3.0下不能生长外,其余菌株均在pH 3.0~8.0条件下良好生长或微弱生长。菌株DMC80具有产酸能力较强、发酵速率较快、耐酸、耐低温等特性,可作为制备适用于呼伦贝尔地区青贮饲料菌制剂的优良菌株。     

西藏地区藏北嵩草附着乳酸茵的理化特性

本研究以藏北嵩草（Kobresia littledalei）上附着的乳酸菌为研究对象，分离得到肠膜明串珠菌肠膜亚种两株，融合魏斯氏菌11株，食物魏斯氏菌6株，然后对这3种试验菌进行不同温度及pH条件下的生长试验、耐盐试验及糖发酵试验等生理生化特性的研究。结果表明，与常规条件下分离得到的相同菌株相比较，青藏高原极端环境中分离的魏斯氏乳酸菌和明串珠菌株都能在4~40 ℃的条件下生长，部分融合魏斯氏菌还可在50 ℃下微弱生长；耐酸碱试验表明，魏斯氏乳酸菌株都能在pH值为3.0和9.5的条件下生长；在耐盐性方面，部分魏斯氏菌可以在18%的NaCl下生长；在碳源利用方面，本研究提取的食物魏斯氏菌可利用半乳糖；融合魏斯氏菌可利用阿拉伯糖、蜜二糖、甘露醇。因此，藏北嵩草中所分离的乳酸菌比常规环境中的乳酸菌有较强的耐温性和耐酸碱性，而且能更广地利用碳源，从而为其在饲料青贮、酸奶发酵等方面的应用奠定基础。     

山竹岩黄芪青贮中优质乳酸菌的分离和鉴定

从山竹岩黄芪(Hedysarum fruticosum Pall.)青贮饲料中分离到3株乳酸菌(HF84,HF69,HF49)。经传统鉴定方法及16SrRNA序列分析,菌株HF84为蒙氏肠球菌(Enterococcus mundtii),菌株HF69为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.Lactis),菌株HF49为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。3株乳酸菌均为同型发酵乳酸菌,蒙氏肠球菌在pH 3.0条件下不能生长,乳酸乳球菌乳酸亚种在pH 3.0、温度5℃时及6.5%NaCl溶液中不能生长,植物乳杆菌均可在试验设定条件下生长。通过测定3株乳酸菌的生长曲线和产酸速率,菌株HF49生长速度快、产酸性能好,可作为制备乳酸菌青贮饲料添加剂的优良菌株。     

青稞秸秆青贮饲料中优良乳酸菌的筛选及鉴定

为筛选出适合于青藏高原青稞秸秆青贮用的优良乳酸菌菌株,研发新型青贮添加剂。分离了青藏高原青稞(Hordeum vulgare)秸秆青贮饲料中的乳酸菌,利用传统微生物培养法和16S rRNA序列分析法对乳酸菌进行鉴定,探讨其生物学特性,并筛选出优良的乳酸菌菌株。共分离获得4株同型发酵乳酸菌菌株,其中HG24,LH2为植物乳杆菌(Lactobacillusp lantarum),LH9为乳酸片球菌(Pediococcusacidi lactici),LH7为戊糖片球菌(Pediococcusp entosaceus)。分离出的乳酸菌菌株均能在5～30℃,pH 3.5～7.0及3.0%和6.5% NaCl培养基中生长良好,其中HG24,LH2在pH值为3的培养基中仍能生长,体现出分离的乳酸菌菌株具有耐低温、耐酸性和耐盐性强的特征。4株乳酸菌菌株中HG24和LH2产酸能力强、生长速率快,最适宜于用作青贮乳酸菌菌种。