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利用聚合酶链式反应(PCR)技术,测定了西藏牦牛和黑白花奶牛生长激素基因的Alu I-RFLP(限制性内切酶片段长度多态性),并比较了2牛群的基因频率。在西藏牦牛和黑白花奶牛中,等位基因A的频率分别为0.935和0.905,等位基因B的频率分别为0.065和0.065,卡方检验差异不显著(P>0.05)。 相似文献
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《中国兽医杂志》2019,(11)
为快速确定临床禽腺病毒-Ⅰ群(FAdVs)的血清型,本研究根据FAdVs的Hexon基因设计引物,对12个血清型FAdVs标准毒株进行PCR扩增,并根据扩增目的片段进行酶切位点分析和相应酶切反应研究,建立聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法。结果显示,利用该引物可同时扩增12个血清型FAdVs标准毒株,扩增片段大小为894 bp;扩增片段酶切位点分析显示,Eco130 Ⅰ、Pf123Ⅱ、Mlu Ⅰ、Psy Ⅰ和BgⅡ为主要酶切位点,这5种酶切反应结果显示12个血清型FAdVs标准毒株可以得到不同的酶切图谱,且能区分12种血清型FAdVs;应用该酶切方法对本实验室保存的2株已知血清型的分离株进行分析,其结果与已确定的血清型一致。表明本试验建立的PCR-RFLP方法简便、特异性和区分度好,可用于12个血清型FAdVs的分型。 相似文献
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为了了解大肠杆菌O157分离菌株携带毒力及黏附相关基因的情况及菌株的多态性.用聚合酶链式反应扩增stx1、stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因.选用限制性内切酶HincⅡ和EcoRⅡ对分离的O157:H7菌株eaeA基因进行酶切,选用限制性内切酶HaeⅢ、HinfⅠ、EcoRⅡ和RsaⅠ对分离的O157:H7菌株chxA基因进行酶切,最后对这两个基因进行PCR-RFLP分析.结果,所有O157:H7菌株扩增出eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,但没有扩增出stx1和stx2基因;4株O157:H?菌株,均没有扩增出stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,且只有1株扩增出stx1基因.所有分离菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小与标准菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小相同.结果表明,由于所有菌株缺失stx2基因,其致病力相对较低,且在基因水平较为保守,多态性较为单一. 相似文献
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本试验旨在对宁夏六盘山区肉牛杂交改良群体垂体特异性转录因子1(Pit-1)基因的多态性进行研究,为其杂交改良提供理论基础。采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP),对该群体101个个体Pit-1基因多态性进行检测。结果表明,扩增出的451 bp片段为目的基因片段,其PCR产物经限制性内切酶HinfⅠ消化后表现出多态性,共检测到AA、BB和AB 3种基因型。其中AA基因型频率6.93%(7个);AB基因型频率34.65%(35个);BB型基因型频率58.42%(59个),等位基因A频率24.26%;等位基因B频率75.74%。因此,宁夏六盘山地区的肉牛杂交改良群体Pit-1基因具有多态性。 相似文献
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鸡贫血病毒山东分离株的限制性内切酶酶切图谱多态性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
利用套式PCR扩增在病毒(CAV)687bp片段,分别以HaeⅢ,HinfⅠ和HpaⅡ酶切,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析其限制性片段长度多态性。用该技术对我国山东分离株的分析表明,SJ1和SJ2与日本的TK5803株和瑞典的1/80和1/91株相同,应属于Tcdd用限制性内切酶酶切图谱多态性(RFLP)分类方法中的第2组。 相似文献
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在总结猪应激综合征危害的基础上,对猪氟烷基因的遗传方式进行了阐述,并提出利用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测技术选育优良猪品种的预防措施。 相似文献
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牦牛mtDNA限制性类型及与其它牛种分化研究 总被引:2,自引:0,他引:2
用20种限制性内切酶分析了21头牦牛mtDNA限制性片段长度多态性,通过双酶切制定出春内切酶物理图谱,发现牦牛mtDNA存在4种限制性类型计算出牦牛与普通牛,瘤牛分化时间大约分别在1.1-2.2,1。01-2.01百万年前。 相似文献
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鸡贫血病毒国内分离株的酶切图谱多态性分析 总被引:2,自引:1,他引:1
用套式PCR 扩增了鸡贫血病毒(CAV)长度为687 bp 的特异片段,以Hae Ⅲ、Hinf Ⅰ、Hpa Ⅱ分别酶切,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了其限制性酶切片段的多态性。对几株国内外分离株的分析表明,TK5803和山东分离株SJ1、SJ2 应属于Todd 的限制性内切酶酶切图谱多态性分析法(RFLP)分类中的第2 组;吉林JL1 株和哈尔滨CL1 株相同,但与其他任何毒株均不相同,大连DL1 株也不同于任何现有毒株,因而都不能归属于Todd 划分的7 个小组;荷兰弱毒株与目前发现的所有毒株均不同,具有其特征性的酶切图谱。 相似文献
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T-RFLP快速鉴定生鲜肉中牛羊成分的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
试验旨在建立快速检测生鲜肉中牛、羊成分的定性分析方法。通过T-RFLP法,上游引物的5′端用6-FAM进行荧光标记,下游引物5′端用ROX进行荧光标记,PCR结束后选择限制性内切酶HinfⅠ、BlnⅠ进行酶切消化,在测序仪上通过毛细管电泳即可检测荧光标记的两个末端的限制性片段。利用不同物种产生的不同峰谱达到对物种快速定性的目的。该法能够对生鲜肉中牛、羊肉进行定性鉴定分析,不同物种产生不同峰谱,限制性内切酶HinfⅠ酶切牛肉样品所产生的限制性末端片段长度为46和373 bp,限制性内切酶BlnⅠ酶切羊肉样品所产生的限制性末端片段长度为203和515 bp。 相似文献
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蜜蜂线粒体DNA碱变性提取法 总被引:2,自引:0,他引:2
一、前言线粒体DNA(mtDNA)已被广泛应用于动植物群体遗传学和进化生物学的研究中,并为分子系统学提供了有价值的比较生物学的数据,取得了许多非常有意义的结果。有效的mtDNA提取方法,无疑是开展这方面研究的前提。而mtDNA提取实验成功的标志是把染色体DNA(即核DNA)、蛋白质与RNA尽量去除干净,从而获得一定得率和纯度的mtDNA,以满足mtDNA用于限制性片段长度多态性(RFLP)分析中的酶切及聚合酶链式反应(PCR)中酶切、拷贝和连接的需要。本试验用碱变性提取法,CsCl超速离心法和蛋… 相似文献
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回顾了传统细菌分型方法的重要作用,并重点介绍了近年发展得比较成熟的脉冲凝胶电泳(PF-GE)、低频限制性切割位点聚合酶链式反应(IRS-PCR)、随意扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)、多位点酶电泳(MLEE)和多位点测序分型(MLST)等6种用于细菌分型的分子生物学技术的原理、特点以及应用情况,指出了其他细菌分型技术,如ARDRA、SSCP、DGGE、TGGEI、S等的不足,对基因芯片技术和实时PCR在细菌分型上的应用潜力进行了展望。 相似文献
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用4种限制性内切酶对小眼高原鳅进行了线粒体DNA的酶切分析,共检测出7个酶切位点,发现EcoRI一种酶切类型具有多态性。 相似文献