鸡源致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

分离鉴定某蛋鸡养殖场病鸡的病原并对病原的部分重要生物学特性进行研究.通过病理剖检、细菌和菌落形态观察、分子生物学鉴定、生化试验和动物回归试验,确定从8只病鸡分离的21株病原菌为大肠杆菌.对30种抗菌药物的药物敏感性试验分析表明,这些菌株存在广泛的多重耐药,特别是对青霉素G、阿莫西林、卡那霉素、甲氧嘧啶、复方新诺明、四环素、氯霉素和万古霉素耐药严重,对头孢哌酮、头孢曲松、头孢他啶、氨曲南、阿米卡星、妥布霉素较为敏感.对超广谱β-内酰胺酶(ESBL)表型及基因型分析可知,所有菌株均为产ESBL大肠杆菌,其主要的ESBL耐药基因为bla_(TEM).     

肠出血性大肠杆菌O157毒力及黏附相关基因的PCR检测和PCR—RFLP分析

为了了解大肠杆菌O157分离菌株携带毒力及黏附相关基因的情况及菌株的多态性.用聚合酶链式反应扩增stx1、stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因.选用限制性内切酶HincⅡ和EcoRⅡ对分离的O157:H7菌株eaeA基因进行酶切,选用限制性内切酶HaeⅢ、HinfⅠ、EcoRⅡ和RsaⅠ对分离的O157:H7菌株chxA基因进行酶切,最后对这两个基因进行PCR-RFLP分析.结果,所有O157:H7菌株扩增出eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,但没有扩增出stx1和stx2基因;4株O157:H?菌株,均没有扩增出stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,且只有1株扩增出stx1基因.所有分离菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小与标准菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小相同.结果表明,由于所有菌株缺失stx2基因,其致病力相对较低,且在基因水平较为保守,多态性较为单一.     

重庆市禽白血病及禽网状内皮组织增生症的血清流行病学调查

禽白血病和禽网状内皮组织增生症均为禽的肿瘤性免疫抑制疾病,是危害养鸡业的两种非常重要的病毒性传染病。为调查重庆市肉鸡中禽白血病及禽网状内皮组织增生症的流行情况,在北碚区、涪陵区、开县、垫江县、潼南县五个区（县）的8个活禽交易市场采集260份血清样本,采用酶联免疫吸附试验检测了所有血清中禽白血病病毒（ALV）和禽网状内皮组织增生病毒（REV）的抗体。检测结果显示：禽白血病病毒和禽网状内皮组织增生病毒抗体阳性率分别为16.5%（43/260）和5%（13/260）,双抗体阳性率为4.61%（12/260）。与全国其他地区相比,重庆市肉鸡中这两种病原的感染率相对要低,但仍应重视这两种疾病的防控,以控制病原的进一步传播。     

鸽源白色念珠菌的分离鉴定及药物敏感性分析

重庆某鸽场1～3周龄幼鸽喉头出现大块干酪样物，堵塞喉头，导致无法进食并陆续死亡。本研究旨在鉴定导致该鸽场大批幼鸽发病的病原。在病鸽喉头、嗉囊、腺胃、肠道等部位采集病料，接种含1%庆大霉素PDA平板分离病原，采用革兰染色、棉蓝染色、芽管生成试验和PCR扩增鉴定病原。分离的病原菌进行动物回归试验和药物敏感性试验。最终在5只病鸽分离到8株革兰染色呈卵圆形、黑色或粉紫色的革兰阳性酵母样菌体，棉蓝染色结果显示菌体长出菌丝和孢子。这些真菌在含1%庆大霉素PDA平板上生长为乳白色、边缘整齐的光滑菌落，在胎牛血清中孵育能生成芽管，能扩增出白色念珠菌特异rDNA基因间转录间隔区序列。动物回归试验结果显示分离菌株能导致雏鸡嗉囊肿胀，嗉囊鳞状上皮细胞变性、坏死、脱落。药物敏感性试验显示分离菌对两性霉素B、制霉菌素和克霉唑敏感。本研究确定了导致鸽场发病的病原为白色念珠菌，且分离菌在体外对部分抗真菌药物敏感。     

应用生物信息学方法筛选猪肺炎支原体保护性抗原

猪支原体肺炎是一种严重危害养猪业的传染病,目前尚无有效疫苗预防和阻止该病的传播.筛选具有高保护性和高免疫反应性的候选抗原是制备有高免疫保护力的疫苗的关键.本文以猪肺炎支原体232菌株为基础,用多种在线生物信息学软件预测蛋白的亚细胞定位,将筛选得到的外膜蛋白和分泌蛋白通过BLAST序列比对进一步筛选出高保守型的蛋白作为疫苗候选抗原分子.最终在232菌株编码的691个蛋白中得到62个候选蛋白抗原.为下一步通过试验验证进一步确定其是否为保护性抗原奠定了基础,也为研究猪肺炎支原体的致病过程、致病机理和免疫反应机制提供了大量的目标分子.     

鸡大肠杆菌病病原的分离鉴定

无菌采取某鸡场送检的疑似大肠杆菌病的病死鸡的心血、肝、脾、肾,进行病原菌的分离、鉴定、生化试验,动物试验和药敏试验。结果显示引起该鸡场鸡只发病的病原为大肠杆菌,并且该菌对小白鼠和鸡有较强的致病力,对阿米卡星、链霉素、庆大霉素、氟苯尼考敏感,对环丙沙星、痢特灵中度敏感,对诺氟沙星不敏感,新诺明、红霉素、青霉素、氨苄西林、头孢唑啉钠则对其没有抑菌作用。表明该鸡场出现了耐药的致病性大肠杆菌,在以后的肉鸡生产中应慎用抗生素,在使用药物治疗大肠杆菌病时,应根据药敏试验结果,选择敏感药物,且应注意交替用药,按疗程投药。     

重庆市部分养殖场金黄色葡萄球菌耐药性分析及ESBL基因检测

为了解重庆市部分养殖场动物源性金黄色葡萄球菌的耐药及携带超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)基因情况,从重庆部分养殖场采集共1 371份样品,经前处理、增菌,划线接种,挑取疑似菌落,PCR扩增金黄色葡萄球菌特异性nuc基因,对分离鉴定的金黄色葡萄球菌进行药物敏感性试验,并检测菌株中携带的ESBL基因。结果显示:从1 371份样品中分离到89株金黄色葡萄球菌,包括25株猪源菌株、32株鸡源菌株、6株牛源菌株、10株羊源菌株和16株兔源菌株。89株菌对青霉素类药物耐药最为严重,其次为四环素类、大环内酯类和喹诺酮类。除2株兔源菌株外,其余分离菌均为多重耐药,耐药数量从2种到21种不等,猪源菌株的多重耐药最为严重。ESBL基因检测结果显示共有86株细菌携带blaTEM-1a基因,携带率高达96.6%。分离的金黄色葡萄球菌菌株耐药严重,且广泛携带TEM-1a型ESBL基因。     

肉鸡非典型新城疫与大肠杆菌混合感染的诊治

新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的一类禽类高致病性传染病,其传统疫苗对流行毒株有一定保护力。但近年来在生产中几乎所有的商品鸡均多次使用ND疫苗,非典型性新城疫仍不断发生;更重要的是．近几年来非典型新城疫与大肠杆菌的混合感染在养鸡场中广泛发生,使用抗菌药后,用药期临床症状虽有所减轻．但伴发零星死亡,     

山东省农村厕所改造情况的调研报告

正为贯彻落实习总书记"厕所革命"的重要指示和中央一号文件"持续改善农村人居环境,坚持不懈推进农村‘厕所革命’"的精神,1月31日至2月3日,中国农村技术开发中心有关人员赴山东开展了农村厕所建设情况调研。调研组与山东农业大学乡村厕所建设团队进行了座谈,实地走访考察了山东三个市的农村厕所改造情况,根据调研情况提出了农村厕所改造中需注意的问题及建议。     

产志贺毒素大肠杆菌stx2a和stx2b的血清和牛奶抗体检测

于新桥医院采集健康人群血清535份,两个屠宰场采集商品猪血清415份,5家奶牛场和1家奶站采集新鲜牛奶326份,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清（牛奶）中的stx2a和stx2b抗体．用P／N〉2．1作为阳性判定标准,535份健康人群血清检测到stx2a抗体阳性和stx2b抗体阳性血清各21份（3．93％）;415份商品猪血清检测到stx2a抗体阳性血清4份（0．96％）,stx2b抗体阳性血清2份（0．48％）;326份新鲜牛奶检测到stx2a抗体阳性血清25份（7．46％）,stx2b抗体阳性血清21份（6．44％）．牛奶中stx2抗体阳性率最高,健康人群血清次之,商品猪血清的阳性率最低．由此表明重庆市STEC菌株中携带stx2基因．