狗舌草中PAs对大鼠毒性的研究

将从早花期和盛花期狗舌草中提取得到的双稠比咯啶生物碱（ＰＡｓ），按１００ｍｇ／ｋｇ分别给两组ＳＤ大鼠腹腔注射。结果表明，两个时期狗舌草中ＰＡｓ对ＳＤ大鼠均具有一定的肝毒性、肺毒性和中枢神经毒性，但盛花期狗舌草中ＰＡｓ的毒性较弱；新发现狗舌草对心、肾也具有一定的毒性作用。     

动物双稠吡咯啶生物碱中毒研究进展

含双稠吡咯啶生物碱（ＰＡｓ）的植物广泛分布于海拔８００～４０００ｍ的地区，种类繁多，尤以菊科千里光属、橐吾属和狗舌草属，豆科猪屎豆属及紫草科聚合草属和天芥菜属的多种植物中ＰＡｓ的含量大，危害严重；含ＰＡｓ的植物全草有毒，幼叶最甚，开花前，ＰＡｓ约占干物质的１．２％，开花后，约占０．４％～０．５％。已知有３０余种ＰＡｓ具有毒性，主要损害肝脏，有些还兼具肺毒性。本文综述了动物ＰＡｓ中毒的病因、病理变化、ＰＡｓ的结构和中毒机制等方面的最新研究进展。探讨了ＰＡｓ中毒病研究现存问题和解决途径     

４２份高粱与苏丹草及其２个杂交种犇犖犃指纹图谱的构建

选用１００个ＲＡＰＤ 引物和９５对ＳＳＲ 引物进行ＰＣＲ 扩增,旨在构建４２份高粱和苏丹草品种资源及２份国审品种高粱－苏丹草杂交种的ＤＮＡ 指纹图谱。结果表明,从１００个ＲＡＰＤ 引物中筛选到９个多态性高、重复性好的引物,多态性条带比率为６４．０６％,利用４个核心ＲＡＰＤ 引物可以为每份品种构建１张特定的数字指纹,并通过其中１个引物Ｆ ０１构建了１张能鉴别２个杂交种的ＲＡＰＤ 指纹图谱,不过该图谱不能区别皖草３ 号与其父本Ｓａ。从９５对ＳＳＲ 引物中筛选出多态性丰富的引物７３对,多态性条带比率为８６．０６％,通过３对核心ＳＳＲ 引物就可以构建４２份高粱和苏丹草的ＳＳＲ 数字指纹,同时利用其中１对ＳＳＲ 引物狋狓狆１８,寻找到２个杂交种的互补带,从而构建了２个高粱－苏丹草杂交种的ＳＳＲ 指纹图谱,这张ＳＳＲ 指纹图谱不仅能鉴别皖草２号和３号,还可以把杂交种与其亲本区别开来。     

凋亡引起SARDS狗的光感器细胞死亡

取３号ＳＡＲＤＳ狗和２只临诊健康的成年狗的视网膜,用原位末端标记技术,在光镜下观察特征的的形态变化来检测凋亡小核,以明确凋亡在ＳＡＲＤＳ狗视网膜退化中的作用。结果为：在ＳＡＲＤＳ狗的失明过程中感光器退化的程度不同。３呈患ＳＡＲＤＳ狗的视网膜有多量定位于外核层的凋亡小核。而健康对照狗的视网膜未见或很少见凋亡小核,炎症也不是ＳＡＲＤＳ的主要特征。研究表明,凋亡至少是ＳＡＲＳＤ狗的感光器细胞死亡的一个机     

凋亡引起SARDS狗的感光器细胞死亡

取３只ＳＡＲＤＳ狗和２只临诊健康的成年狗的视网膜，用原位末端标记技术，在光镜下观察特征的形态变化来检测凋亡小核，以明确凋亡在ＳＡＲＤＳ狗视网膜退化中的作用。结果为：在ＳＡＲＤＳ狗的失明过程中感光器退化的程度不同。３只患ＳＡＲＤＳ狗的视网膜有多量定位于外核层的凋亡小核。而健康对照狗的视网膜未见或很少见凋亡小核，炎症也不是ＳＡＲＤＳ的主要持征。研究表明，凋亡至少是ＳＡＲＤＳ狗的感光器细胞死亡的一个机制。鉴于凋亡是许多视网膜退化综合征共同的最终路径，控制其它疾病凋亡发生的方法将会可能适用于ＳＡＲＤＳ。阻止这一路径可能会使感光器功能不丧失，失明也可能不发生。     

信号分子H2O2 调节抗氧化系统提高高羊茅耐热性研究

 采用盆栽试验,利用１０ｍｍｏｌ／Ｌ 的Ｈ_２Ｏ_２ 对冷季型草坪草高羊茅进行叶面喷施处理,研究外源低浓度Ｈ_２Ｏ_２对高羊茅叶片中抗氧化系统的调控作用及其对高羊茅抗热性的影响。结果表明,Ｈ_２Ｏ_２ 可能作为信号分子预先增加抗氧化酶的活性,改变抗氧化剂的浓度,从而减轻随后发生的热胁迫对草坪草造成的氧化伤害;在胁迫过程中ＰＯＤ 和ＣＡＴ 活性在Ｈ_２Ｏ_２ 预处理后增加不显著,热胁迫本身增加了ＰＯＤ 的活性,但是降低了ＣＡＴ 活性,ＰＯＤ 对于提高高羊茅的耐热性可能具有更重要的作用;外源Ｈ_２Ｏ_２ 显著影响了高羊茅叶片中的ＡｓＡ－ＧＳＨ 循环,其中处理植株中的ＡＰＸ、ＧＰＸ 和ＧＲ 的活性在热胁迫过程中增加２０％ ～１１０％,ＧＳＨ／ＧＳＳＧ 下降了８０％,与高羊茅抗热性的提高密切相关。可见信号分子Ｈ２Ｏ２ 可以通过调控高羊茅的抗氧化系统提高其抗热性。     

伊氏锥虫抗独特型抗体疫苗的研究Ⅱ．伊氏锥虫变异表面糖蛋白抗独特型抗体制备与检测

用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白（ＶＳＧ）免疫大白鼠制备出抗血清，经饱和硫酸铰盐析，ＤＥ－５２纤维素离子交换层析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析提取ＶＳＧ特异性多克隆ＩｇＧ抗体（Ａｂｌ）。用Ａｂｌ免疫大白鼠和家兔制备出抗独特型血清。ＥＬＩＳＡ抑制试验检测结果表明，８份大白鼠抗独特型血清的抑制率高于２５％。用正常大白鼠ＩｇＧ致敏的醛化绵羊红细胞吸收兔抗独特型血清除去异种抗体，采用Ａｂｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，可从每毫升兔抗独特型血清中获得９７．４微克抗独特型抗体（Ａｂ２）。经ＥＬＩＳＡ抑制试验检测表明，提取的兔抗独特型抗体（Ａｂ２）对Ａｂｌ与ＶＳＧ的结合反应可产生明显的抑制效应，能识别Ａｂｌ的抗原结合部位，其配位的空间构型与ＶＳＧ表位具有相似性。     

草地类型梯度分析

紫泥泉地区位于天山北坡低山带，具有代表性的冬春秋放牧场。本文应用数量分类（ＴＷＩＮＳＰＡＮ）、排序（ＤＣＡ）和回归分析方法研究了草地类型的分类及其分布的梯度规律。研究结果表明：该地区的草地类型按传统分类划分出１８个型，ＴＷＩＮＳＰＡＮ分类结合ＤＣＡ排序归纳出８个型，其中６个型为地带性草地类型，２个型为非地带性草池类型；地带性草地类型沿水热梯度分布，非地带性草地类型沿质地梯度分布。     

SA、H2O2 和6-BA预处理对沟叶结缕草耐寒性的影响

 通过对沟叶结缕草进行叶面喷施信号化合物ＳＡ、H₂O₂ 和6-BA,研究了预处理对沟叶结缕草耐寒性的影响。结果表明,ＳＡ、H₂O₂ 和6-BA预处理可以有效控制或者防止结缕草叶片中活性氧的积累和氧化伤害的发生,从而提高其抗寒性;预处理植株中ＰＯＤ、ＣＡＴ 和ＡＰＸ 活性在胁迫过程中显著高于对照,冷胁迫本身可以诱导ＳＯＤ 的活性避免O₂ ^-的积累,ＧＲ 在抗寒胁迫过程中可能起到负反馈的作用,抗氧化酶活性升高与沟叶结缕草耐寒性的获得密切相关;在这３种信号化合物中,ＳＡ 预处理植株中ＳＯＤ,ＣＡＴ 和ＧＲ 活性高于对照和其他化合物预处理植株,并且具有最小的ＭＤＡ 浓度,因此,ＳＡ 对于提高沟叶结缕草的耐寒性最有效。     

顿河红豆草下胚轴培养及其植株再生

对顿河豆草５ｄ龄无菌苗下胚轴愈伤组织诱导及其植株再生条件的研究结果表明,愈伤组织培养基为ＭＳ基础培养基,附加０．２ｍｇ／ｌ２,４－Ｄ、１ｍｇ／ｌＢＡＰ和２ｍｇ／ｌＮＡＡ,ｐＨ５．８;分化培养我激素ＭＳ培养基;生根培养基为１／２ＭＳ或１／２ＬＳ＋０．０５ｍｇ／ｌＮＡＡ＋０．８％琼脂培养基。其愈伤组织绝大多数生长良好,出愈率达９６．８％。体细胞胚化率为２５．３％,具有体细胞胚分化力的基因型占３５％,生     

大赖草的组织培养及植株再生的研究

大刺草在成熟胚在含有２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＳ培养上形成颗粒状愈伤组织，减少培养基中的２，４－Ｄ浓度，愈伤组织分化出绿色的芽点。生根培养基为不含任何激素的ＭＳ培养基，有分化能力的愈伤组织可以在保持培养基（ＭＳ＋２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０．５ｍｇ／ＬＢＡＰ）上长期保存，利用这一培养程序可以快速，大量地繁殖大赖草，文章还对外源激素在植物组织培养中的作用进行了讨论。     

非洲猪瘟间接ELISA诊断试剂盒的研究

用带有编码非洲猪瘟病毒衣壳蛋白Ｐ７２ 基因的重组杆状病毒（Ｂａｃｐ７２）作载体,在ｓｆ９细胞中表达并得到重组Ｐ７２蛋白,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ可得到分子量在 ７２ｋＤａ左右的电泳带。用标准阳性非洲猪瘟血清对 Ｐ７２蛋白进行 ＥＬＩＳＡ检测,证明该蛋白具有生物学活性。用Ｐ７２作为间接法的包被抗原,对ＥＬＩＳＡ反应条件进行了优化。确定最佳包被液为ＰＢＳ（ｐＨ７．２）、最佳封闭液为１％ＰＣＴ、最佳血清稀释液为４％ＰＥＧ６０００／ＰＢＳ、最佳冲洗液为０．５Ｍ ＮａＣｌ／０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳ（ｐＨ７．２）。本实验反应体系采用５０μｌ的微量法,可节约试剂及抗原。反应在２小时内即可完成,达到了快速诊断的目的。包被了抗原并用封闭液封闭后的酶标板密封后保存于－２０℃的冰箱中,至少可以保存５个月。阻断试验和交叉试验表明ＥＬＩＳＡ法有良好的特异性。间接ＥＬＩＳＡ比Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法具有更高的灵敏性。血清学调查没有得到阳性结果,与我国实际情况相符。用Ｂａｃｐ７２表达的非洲猪瘟病毒Ｐ７２蛋白抗原作为间接ＥＬＩＳＡ的检测抗原来检测非洲猪瘟血清具有快速、简单、无感染的特点。本实验为非洲猪瘟ＥＬＩＳＡ检测试剂盒的最终组装提供了实验依据。     

结缕草属植物SRAP－PCR体系的建立和优化

以ＳＤＳ法提取的结缕草属植物叶片ＤＮＡ 为模板,分别采用单因子试验和正交设计试验２种方法,对影响结缕草属植物ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 的MG²⁺ 、ｄＮＴＰ、引物、ＴａｑＤＮＡ 聚合酶和模板ＤＮＡ 五个因素进行优化试验。单因子试验分别研究各因素在多水平条件下对ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 反应体系的影响,得到最佳反应条件。正交设计采用Ｌ１６（４５）方案,综合考虑各因素间的相互作用,通过直观分析法获得各影响因素的最佳反应水平。根据４对引物对６ 份结缕草属植物材料扩增结果的验证比较,２种方法所获得的最佳反应体系存在一定的差异。通过综合比较和分析２种方法的优化体系扩增出的条带数、多态性条带数及多态性比率,最终建立了结缕草属植物ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 的最佳反应体系：MG²⁺２．００ｍｍｏｌ／Ｌ、ｄＮＴＰ２２０μｍｏｌ／Ｌ、引物０．２０μｍｏｌ／Ｌ、ＴａｑＤＮＡ 聚合酶０．５０Ｕ、模板ＤＮＡ６０ｎｇ、２μＬ１０×ｂｕｆｆｅｒ,总体积为２０μＬ。这一优化体系的建立为今后利用ＳＲＡＰ标记技术进行结缕草属植物遗传多样性、种质鉴定、遗传连锁图谱及亲缘关系分析等方面的研究提供了科学的依据。     

禽白血病／肉瘤病毒群特异性抗原P^gag27的分离和纯化

本试验用差速离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒，并以ＳＤＳ法裂解病毒，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析ＡＭＶ结构蛋白成分，最后选用水平板式电泳系统，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ比较大量地分离了Ｐ＾ｇａｇ２７。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和琼脂扩散试验检验其抗原活性，并且用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量和纯度，结果表明，提纯的病毒蛋白具有抗原活性，且达到电泳纯。     

水分胁迫下外来种铜锤草和本地种酢浆草的生理指标比较研究

分别采用单一与混合种植方式和不同梯度的水分胁迫处理,对外来种铜锤草和本地种酢浆草的生长、生理指标、叶绿素荧光参数进行了比较研究。结果表明,随水分胁迫的增强,２个物种叶片的相对含水量,叶绿素ａ、ｂ和蛋白质含量下降,电导率、ＭＤＡ 含量和Ｏ２-· 产生速率呈上升趋势。保护酶ＳＯＤ、ＰＯＤ 活性在ＳＤ 胁迫时达到峰值,然后下降,且ＰＯＤ 比ＳＯＤ 对干旱更敏感;在相同水分胁迫条件下,酢浆草比铜锤草的变化幅度大,且混合种植下的酢浆草比单一种植下的变化幅度大;犉０ 呈上升趋势;犉狏、犉犿、犉狏／犉犿、犉犿／犉０ 呈下降趋势,Ｔ、ＨＴ 和Ｃ 在ＳＤ 胁迫时具有统计学意义（犘＜０．０５）,ＨＣ 在ＭＤ 时就开始显著下降（犘＜０．０５）。总之,２ 个物种的叶绿素荧光参数与生理指标变化规律相似,说明外来种铜锤草比本地种酢浆草有更强的耐旱能力,而且在混合种植下具有较强的夺水和光合竞争能力。     

减蛋综合征病毒全基因组DNA文库的构建及物理图谱分析

Ｅ Ｄ Ｓ Ｖ Ａ Ａ２ 株纯化 Ｄ Ｎ Ａ 经 Ｈｉｎｄ Ⅲ、 ＰｓｔⅠ和 Ｓｐｈ Ⅰ水解后, 分别提取 Ｄ Ｎ Ａ 片段并克隆至ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ｋ Ｓ（ ＋ ） 和ｐ Ｇ Ｅ Ｍ３ Ｚｆ （ ＋ ） 载体, 构建了 Ｅ Ｄ Ｓ Ｖ 全基因文库。根据 Ｅ Ｄ Ｓ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 片段和基因组 Ｄ Ｎ Ａ 电泳迁移率计算, Ｅ Ｄ Ｓ Ｖ 基因组大小为３２９ｋｂ , 通过克隆片段酶谱鉴定, 杂交建立了 Ｅ Ｄ Ｓ Ｖ 限制性内切酶 Ｈｉｎｄ Ⅲ、 Ｐｓｔ Ⅰ和 Ｓｐｈ Ⅰ的物理图谱。     

禽白血病／肉瘤病毒群特异性抗原P_（27）~（gag）的分离和纯化

本试验用差束离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒（ＡＭＶ）。并以ＳＤＳ法裂解病毒，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析ＡＭＶ结构蛋白成分，最后选用（ＬＫＢ）水平板式电泳系统，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ比较大量地分离提纯了Ｐｇａｇ２７。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和琼脂扩散试验检验其抗原活性，并且用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量和纯度。结果表明，提纯的病毒蛋白具有抗原活性，且达到电泳纯。     

鸡传染性法氏囊病病毒野毒株VP2基因高可变区酶切位点分析

参照澳大利亚鸡传染性法氏囊病病毒（ Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ）００２７３ 毒株基因组序列设计的 １ 对引物,位于 Ｖ Ｐ２ 高可变区两端,通过 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ,扩增了 ５ 个 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 山东分离株 Ｖ Ｐ２ 基因的 ６０７～１ ０８０ 位核苷酸片段（ａａ２０３～３０６）。 Ｐ Ｃ Ｒ 产物经纯化后,分别用 Ｄｒａ Ⅰ、 Ｓａｃ Ⅰ、 Ｓｓｐ Ⅰ、 Ｐｓｔ Ⅰ和 Ｓａｕ３ Ａ Ｉ共 ５ 种限制性内切酶（ Ｒ Ｅ）进行消化处理,结果 ５ 个分离株均为 Ｄｒａ Ⅰ（－ ）、 Ｓａｃ Ⅰ（－ ）和 Ｓａｕ ３ Ａ Ｉ（＋ ）, Ｌ Ｃ２ 和 Ｔ Ａ 株为 Ｓｓｐ Ⅰ（＋ ）, Ｌ Ｃ１ 和 Ｊ Ｎ 株为 Ｓｓｐ Ⅰ（－ ）, Ｌ Ｃ１ 和 Ｌ Ｃ２ 株为 Ｐｓｔ Ⅰ（＋ ）, Ｊ Ｎ、 Ｌ Ｌ 和 Ｔ Ａ 株为 Ｐｓｔ Ⅰ（－ ）;５ 个分离株的酶切图谱与美国变异株迥异,而 Ｔ Ａ 株与日本超强毒株 ９０１１ 相类似。５ 个分离株与现用疫苗株对比,至少在 Ｖ Ｐ２ 可变区内存在着一定的差异,这可能是 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 接种免疫鸡群仍然暴发 Ｉ Ｂ Ｄ 的原因之一。     

传染性法氏囊病病毒VP2/VP0基因在重组鸡痘病毒中的表达

以鸡痘病毒复制非必需区ＴＫ基因为侧翼,在牛痘病毒Ａ型包涵体晚期启动子（ＡＴＩ）与１６个串联的突变型早期痘苗病毒ｐ７．５启动子组成的复合启动子的下游,分别插入编码传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）结构蛋白ＶＰ２和ＶＰ２－４－３（ＶＰ０）的基因片段后,进行了同源重组和蓝斑筛选,获得２株重组病毒ｖＵＴＡＬａｃＶＰ２－７和ｖＵＴＡＬａｃＶＰ０－１０。经ＥＬＩＳＡ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表明,重组病毒ｖＵＴＡＬａｃＶＰ２－７能表达ＶＰ２,ｖＵＴＡＬａｃＶＰ０－１０能表达ＶＰ２和ＶＰ３,ＶＰ２和ＶＰ３的Ｍｒ分别为４１０００和３２０００。     

鸭霉形体模式株与国内分离株细胞蛋白SDS—PAGE图谱比较

本实验以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术，对鸭霉形体模式株和国内分离的ＳＱＪ－５Ｃ３株进行了电泳图谱分析。结果表明，模式株与分离株电泳图谱总体上相差不大，但也存在２～３条蛋白带的差异，这说明ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术在霉形体种的鉴定中有一定意义。