犬精液冷冻及解冻技术研究

犬冷冻精液质量的好坏直接影响受胎率 ,影响养犬户的经济效益。而冻精解冻后精子活动和生存时间 (解冻后 37℃保存 4ｈ精子活力 )又是冷冻精液质量中最重要的两个指标。我们进行了同一样品 ,采用不同温度解冻 ,对冻后精子活力及生存时间影响的对比试验。目的是寻找最佳的解冻温     

猪冷冻精液技术的应用实践

猪精液冷冻后会导致精子活力不足,从而使猪冷冻精液在生产中的应用效果不理想,未得到大范围的使用,本文对甘肃省猪冷冻精液技术进行了分析,以促进猪冷冻精液技术的研究。     

抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

目前,猪的人工授精以鲜精和常温保存的液态精液为主,冷冻精液在人工授精中所占的比例不足1%,由于解冻后精子复苏率较低、异常精子多、受胎率低等原因,在生产上猪的精液冷冻与牛的精液冷冻相比尚未得到普遍推广、应用。精子的冷冻处理在畜牧业上是一个重要且具有特殊优势的操作过程。提高精子冷冻技术水平,需要对配子的生理学知识和精子收集、处理过程的生化改变有更深入的了解,这些     

乌苏里貉精液冷冻技术研究

为探索乌苏里貉精液冷冻技术,通过试验,筛选出了适合于乌苏里貉精液的鲜精稀释液和冷冻保护液配方,摸索出了乌苏里貉精液的冷冻程序,包括降温、平衡和预冷冻等各技术环节以及冷冻精液的最适解冻温度,解冻后在生物显微镜下观察,精子活力均在4~5级。     

阿拉善绒山羊精液冷冻效果分析

精液冷冻技术实现了家畜精液的长期保存，不受时间和地域的限制，扩大了优良公畜的使用范围，最大限度的提高了种畜的利用率。有关山羊精液冷冻技术的研究也有许多成功的报道，但由于山羊精液冷冻后对精子损伤较大，受胎率下降，从而限制了山羊精液冷冻技术的推广应用。此次使用3种精液冷冻稀释液进行阿拉善绒山羊精液冷冻试验，目的是分析精液冷冻效果，筛选适宜的稀释液配方，为阿拉善绒山羊精液冷冻技术的推广应用提供参考依据。     

银狐精子冷冻前后超微结构的研究

采用按摩法采集银狐精液，将鲜精和冷冻解冻精液离心、固定，制备电镜样品，通过电镜观察，研究精子冷冻前后超微结构变化，并进一步研究受精机理和精子冷冻的基础理论，以推动狐狸人工授精技术的发展。     

海带多糖对猪精液冷冻效果影响的研究

为了寻找一种可较好地保护精子的天然抗冻剂,通过在猪精液的冷冻基础液中添加不同浓度的海带多糖,研究冷冻后猪精子的活率及线粒体活性、精子质膜和顶体的完整性等各项参数指标,探讨不同浓度的海带多糖对猪精液冷冻保存效果。     

德国牧羊犬冷冻精子超微结构的研究

运用电子显微镜技术观察了２头德国牧羊犬冷冻精子超微结构的变化，结果表明，冷冻的犬精子畸形率明显上升，表现出不同程度的质膜破损或脱落，精核膨胀，中段膨胀，顶体膨胀、部分脱落或全部脱落，螺旋线粒体膨胀、断裂、剥离和丢失。犬精子的原生质膜、顶体、线粒体在冷冻过程中最易受到损害，２头公犬冷冻精子的顶体完整率分别为３６．９％和２５．８％。     

用低渗膨胀试验评价黑猩猩冷冻精子的膜完整性

精液品质评定的常见方法有精子活力、畸形率和顶体完整率等指标,但这些指标不能评定精子的真实受精能力。目前低渗膨胀试验作为检验精子膜功能的一种方法得到广泛认可,利用它可检验具有完整膜的精子是否具有生化活性。本试验通过对冷冻2只黑猩猩精液进行低渗膨胀来评定冷冻精子的膜完整性。试验结果显示,本研究中的黑猩猩的冷冻精子在低渗溶液中的膨胀率较高,表明试验黑猩猩的冷冻精液有较高的活力,精子具有较高的穿透率和受精能力。     

牛细管精液冷冻温度曲线的研究

牛冷冻精液精子复苏率的高低与原精质量、精子耐冻性、稀释液种类、稀释方法及精液冷冻和解冻速度等因素有关。其中，精液在冷冻过程中温度变化曲线是影响精子复苏率高低的重要因素之一。研究细管精液在不同条件下冷冻，精液温度变化曲线及精子复苏率变化的规律，优选出细管精液最适宜的冷冻温度曲线，可以为提高牛冷冻精液质量提供重要保障。     

抗冻保护剂对家蚕精子活性的影响

采用保存兔精子的基础稀释液配以不同的抗冻剂作为家蚕精子的冷冻稀释液。用液氮对家蚕精子进行冷冻保存，复温后观察精子活性。通过比较几种稀释液的效果，显示在短期冷冻中，含牛奶和DMSO的稀释液对家蚕精子有较好的保护作用。     

抗氧化剂对家畜精液冷冻保存的应用研究进展

 在家畜精液冷冻稀释液中加入抗氧化剂以提高冷冻精液质量的研究受到广泛关注,通过添加抗氧化剂降低精子在冷冻保存过程中的氧化损伤,保护精子质膜、精子顶体和DNA的完整性,提高冷冻-解冻后精子的受精能力。论文针对目前主要的一些抗氧化剂在家畜精液上应用研究的现状,对精子氧化损伤机理和常用抗氧化剂研究进行综述,期望对家畜精液冷冻保存的相关研究提供一定的理论依据和参考。     

干冰用于鸡超低温冷冻精液短期保存和运输的可靠性评估

为解决液氮保存下鸡冷冻精液的异地运输难题,研究对北京油鸡冷冻精液在干冰（-79℃）中进行短期保存,分别保存0 h（对照组）、12 h、24 h、48 h和72 h,以模拟冷冻精液在干冰中的短期运输,并测定干冰不同保存时间的鸡冷冻精液精子质量和受精能力。结果显示：干冰保存后北京油鸡冷冻精液的精子活力、存活率、顶体完整率、质膜完整率和受精率均显著降低（P<0.05）,精子畸形率显著增高（P<0.05）,且随着干冰保存时间的增加,精子质量和受精能力逐渐下降。研究表明,干冰作为冷源对鸡冷冻精液的精子质量有较大的损害作用,使用干冰难以实现对鸡冷冻精液的有效短期保存和运输。     

哺乳动物精子冷冻工艺中防冻剂的研究进展

精子冷冻是一种简单、经济、高效的生物遗传资源保存方法,目前已经应用到许多领域,并成为治疗人类不育、牲畜繁殖和生物资源多样性保护的重要手段。在精子冷冻保存过程中的适当阶段加入防冻剂,能够有效的避免或减少精子的冷冻损伤和寒害,从而提高冷冻—解冻精子的活力。作者就防冻剂的种类、防冻剂的选择及加入与去除的方式对冷冻—解冻哺乳动物精子活力的影响作一简要综述。     

五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。     

冷冻处理对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响

为了检测冷冻处理对猪精子蛋白酪氨酸磷酸化(PTP)水平的影响,试验将采用手握法采集的精液作为试验材料,对精子进行不同时间的冷冻处理,解冻后进行间接免疫荧光处理,对冻融精子PTP水平进行研究。结果表明:冷冻处理的精子PTP水平变化不明显;冷冻处理后的精子PTP位点仍然主要集中在精子颈部,这与未经处理的精子大体一致,不同的是冷冻处理组磷酸化程度加深,而且随着时间的延长精子尾部出现微弱的磷酸化位点。     

胆固醇对山羊精液冷冻效果的影响

研究了胆固醇对山羊精液冷冻的影响。结果表明，胆固醇不影响冷冻后精子的活力，但影响精子的项体，添加胆固醇后，精子顶体部分脱落的比例增高，但全部脱落的比例降低。     

抗冻蛋白对山羊精子冷冻保护效果的分析

本实验系统评价了抗冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ)对山羊精子的冷冻保护效果。采用假阴道法采集6只云南黑山羊精液,离心洗涤去除精浆后和冷冻稀释液(0、0.1、1、10、100μg/m L AFPⅢ)混合,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投入液氮保存。解冻后检测精子活力、顶体、质膜以及早期凋亡等指标。同时采用透射电镜(TEM)观察冷冻对精子超微结构的影响。结果表明:与对照组相比,AFPⅢ并不能显著改善山羊解冻后精子活力、顶体完整性、质膜完整性和低渗耐受性(P0.05)。此外,AFPⅢ并不能抑制解冻后精子的磷脂酰丝氨酸(PS)外翻。电镜实验结果进一步证实,AFPⅢ并不能有效保护冷冻精子质膜。总之,本实验证实,AFPⅢ并不能降低山羊精子的冷冻损伤,相反其可能加重冷冻对精子质膜的损伤,其损伤机制尚需要进一步研究。     

肌醇类SIB对云南半细毛羊精液冷冻保护效果影响的研究

为了进一步降低冷冻过程中冰晶形成对云南半细毛羊精子的机械损伤,实验首次检验了肌醇类冰晶抑制剂(SIB)对绵羊精子的冷冻保护效果。采用的SIB是1,4-环己二醇(1,4-CHD)。电刺激采集精液后,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投入液氮保存。结果表明:1,4-CHD不能提高云南半细毛羊冷冻精子的活力,而且随着1,4-CHD浓度的增加,精子活力呈逐步下降趋势。此外,1,4-CHD也不能改善解冻后云南半细毛羊精子的顶体状态和质膜完整性。解冻后,当用等渗缓冲液稀释精子时,1,4-CHD冷冻组精子的质膜破损率明显高于不含1,4-CHD的对照组(P<0.05)。然而,SIB的存在可能有利于冷冻精子磷脂酰丝氨酸(PS)正常分布的维持。解冻后,1,4-CHD冷冻组精子的PS标记率明显低于对照组(P<0.01)。当分别采用渗透压为404 mOsm,528 mOsm,648mOsm或853mOsm的缓冲液去稀释解冻后的精子时,就移动速度和质膜完整性指标而言,4个处理组之间差异不显著(P>0.05)。总之,肌醇类SIB并不能改善云南半细毛羊冷冻精子的活力、移动速度、顶体以及质膜完整性等指标。然而1,4-CHD可能抑制冷冻解冻过程引起的细胞早期凋亡。     

猪精液冷冻技术研究

1956年英国人Polge开始研究猪精液的冷冻保存.后来的研究中,利用牛精液冷冻方法冷冻猪精液,解冻后的精子具有活力,但没有受精能力,虽然在1970年之前有几例猪冻精成功受胎的报道,但其结果不能被重复.