猪源乙型肝炎病毒样病毒的提纯与鉴定

用检测人血清乙肝标志物的试剂和方法,检测2823份猪血清,检出HBsAg阳性血清56份。对37份HBsAg阳性猪血清检测抗—HBs、HBeAg、抗—HBe、抗—HBc,有23份呈阳性结果。取双阳性血清经氯化铯梯度离心,获得了形态与HBV相似的病毒粒子,其比重为1.30,分子量为2.2×10~5道尔顿。将其与抗HB_(?)做免疫电泳,可见有沉淀线形成。以常规方法提纯其基因片段,以HBV引物为以基因引物做PCR扩增,结果可见有基因片段形成。其位置与HBV扩增物相近,证实两株病毒有基因同源性。试验结果认定,此毒为猪源HBV样病毒。     

从黑白花奶牛血清中检出乙肝病毒样病毒颗粒及人工感染试验

以人用检测试剂检查长春黑白花奶牛血清的HB_sA_g,采用反向间接血凝法,从49份样品中检出阳性1份(1/49),该份血清经病毒提纯,于分辨率1.2 A电子显微镜观察,发现有与乙肝病毒(HBV)形态类似的病毒颗粒,经免疫电泳检测,证实含有与HBV类似的抗原成份。以阳性牛全血4毫升人工感染阴性牛5头,60天后有2头牛血清HB_sA_g阳性(2/5),传至第3代,在血清的蛋白粗提物中亦在电镜看到了HBV样病毒颗粒。     

酶标葡萄球菌A蛋白染色法用于猪囊尾蚴病诊断的初步研究

用自制的猪囊尾蚴头节“颗粒性抗原”,以HRP—SPA作为第二抗体,进行间接免疫酶染色诊断猪囊尾蚴病。检测61份猪囊尾蚴病血清,阳性59份,检出率为96.6％;健康猪血清69份、细颈囊尾蚴病和肺丝虫病猪血清各10份,均为阴性。此法简便易行,快速、准确,适于基层使用。     

青海省西宁地区猪弓形体病的血清学调查

应用间接血凝实验(IHA),对采自西宁地区大通种猪场、青海省畜牧兽医科学院猪场和城北区几个农户的251份猪血清,进行了弓形体的定性检测.结果检出阳性血清4份,阳性率1.59%,其中采自大通种猪场的151份猪血清和青海省畜牧兽医科学院猪场的52份猪血清中,均未检出阳性血清,而采自城北区农户中的48份猪血清中,检出阳性血清4份,阳性率8.33%.     

甘肃省猪流感(H3N2)抗体的血清学调查研究

用酶联免疫吸附试验(ELISA)对甘肃省13个市州送检的188份健康猪血清和17个猪场患其它病猪血清进行了猪流感(H3N2)血清抗体检测.在11个市州的猪群中检出SIH3N2抗体,检出阳性118份,平均阳性率为27.89%.阳性率最高为66.67%,最低为5.13%.其中健康猪血清检出阳性42份,阳性率为22.34%;患其它病猪血清检出阳性76份,阳性率为32.34%.患其它病猪的阳性率高于健康猪.     

甘肃省猪流感抗体的血清学调查

用酶联免疫吸附试验对甘肃省14个市（州）的42个猪场进行了猪流感血清抗体检测。共检测394份猪血清，在11个市（州）的猪群中检出SIV H1N1抗体，检出阳性139份，平均阳性率为35．28％，阳性率最高为64．8％，最低为3．03％。其中检测健康猪血清160份，阳性43份，阳性率为26．87％；检测患其他病的猪血清174份，阳性95份，阳性率为54．95％，患其他病的猪阳性率高于健康猪。     

两种免疫酶试剂盒检测猪抗E型肝炎病毒IgG的比较

目的比较两种免疫酶试剂盒recomWell HEV IgG(swine)ELISA(recom Well )和recomLine HEV IgG(swine)(recom Line )检测猪抗E型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)IgG的准确性。方法分别采用基因3型和基因4型人HEV(human HEV,hHEV)人工感染无菌猪各2头,采用上述试剂盒检测猪感染后不同天数的血清样品中抗HEV IgG,同时对两头接种PBS液的无菌猪血清样品18份和4头未感染猪的18份血清进行了检测。结果 2头猪人工感染基因3型hHEV后,recomWell检测均于感染后21d出现阳性,并持续56d;recomLine检测,其中1头猪于感染后14d呈阳性,而另1头于感染后21d呈阳性,且均持续56d。2头猪人工感染基因4型hHEV后,两种试剂盒检测,其中1头猪于感染后21d呈阳性,另1头35d呈阳性,并均持续56d仍为阳性。18份对照血清两种试剂盒检测均为阴性。18份未人工感染猪血清中,只有1份两种试剂盒检测均为阳性。两种试剂盒同时检测的共72份样品中,recomWell检出阳性样品23份,阳性率约为32.0%(23/72),recomLine检出阳性样品24份,阳性率约为33.30%(24/72),检出阳性率两者差异不显著(P>0.05);在recomWell检出的23份阳性样品中,recomLine检测均为阳性,两者阳性检出符合率为100%(23/23);recomWell的漏检率约为4.1%(1/24)。结论 recomWellR和recomLine均可用于猪抗HEVIgG的检测,recomLine检测灵敏度略高于recomWell,且操作更简便,不需要特殊昂贵的检测设备,特别适合用于基层检测猪抗HEV IgG。     

应用间接接荧光抗体试验检测猪繁殖和呼吸综合征抗体

应用间接荧光抗体试验进行了猪繁殖和呼吸综合征血清抗体的检测。共检测２个猪场，计２７份血清。其中Ｐ猪猪血清２２份，检出ＰＲＲＳ阳性性血清２０份，阳性率为９０．９％；Ｌ猪场猪血清５份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２份，阳性率为４０％。首次证实我区存在ＰＲＲＳＶ感染猪群。     

青海冷湖地区生猪囊尾蚴病血清学检测

在被检的1190份冷湖地区自繁自养的生猪血清中,检出阳性血清8份,阳性率为0.67%(8/1190)。其中:560头成年猪中,检出阳性猪6头,阳性率为1.07%(6/560);410头架子猪中,检出阳性猪2头,阳性率为0.49%(2/410);220头断奶仔猪中,未检出阳性猪。检测结果显示在冷湖地区的生猪中猪囊尾蚴病客观存在。     

应用免疫荧光法诊断猪流行性腹泻的研究

应用直接免疫荧光法对猪流行性腹泻病毒(PEDV)人工感染仔猪的检出阳性率为91.4%(42/46),电镜观察阳性率为67.4%(31/46);对自然腹泻猪的检出阳性率为47.8%(11/23).对人工感染仔猪二十种组织器官冷冻切片的检测表明,PEDV 感染为肠道局部感染,应用肠粘膜涂片和冷冻切片对人工感染猪和自然腹泻猪检出率相同.应用间接免疫荧光法对 PED 阳性猪场血清的检出阳性率为89%(89/100);对屠宰场猪血清的检出阳性率为25.2%(51/202).PED 血清于4℃和20℃保存一个月后,用间接免疫荧光法俭测,其抗体效价分别降低2个或3个滴度;-20℃冻存10个月,未见抗体效价下降.对用间接免疫荧光法检出的 PED 阳性的52头份猪血清进行猪传染性胃肠炎中和试验,阳性率为21.2%,首次证明我国存在 PED 与 TGE 的混合感染.     

甘肃省猪衣原体病的血清学调查

对全省未进行过猪衣原体病免疫的11个地市的868份猪血清应用间接血凝(IHA)试验进行抗体检测，结果在11个地市中均检出抗体阳性猪血清，阳性检出率平均为34.91％。     

甘肃省酒泉市猪细小病毒病感染血清学检测报告

在11个未经猪细小病毒(PPV)疫苗免疫的种猪场采血清150份,经乳胶凝集试验(LAT)检测,在7个猪场检出猪细小病毒抗体,检出阳性血清24份,平均阳性率16%。     

应用斑点酶联免疫吸附试验快速检测猪弓形虫抗体

将斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)用于检测猪弓形虫抗体,并与常规ELISA和IHA法进行了比较。结果,对102份滴度下降的猪阳性血清检测,弓形虫抗体阳性检出率,Dot—ELISA为66.67％(68/102),常规ELISA为48.04％(49/102),IHA为27.45％(28/102);对675头商品猪血清检测,弓形虫抗体阳性检出率,Dot—ELISA为48.15％(325/675),常规ELISA为41.93％(283/675),IHA为33.80％(228/675);与3种寄生虫(猪囊虫、猪旋毛虫、住肉孢子虫)阳性血清无交叉反应;对123份弓形虫抗体阳性和158份阴性猪血清进行3次重复性试验,结果完全一致。结果证明,该法敏感性高,特异性强,操作简便快速(于接到病料后2h报告结果),便于在基层推广使用。     

猪血清中人聚合白蛋白受体的测定与分析

将人白蛋白聚合,并进行辣根过氧化物酶标记,建立了人聚合白蛋白受体测定的夹心ELISA方法.采用夹心ELISA,对21份HBsAg阳性猪血清进行了PHSA-R测定,查出19份PHSA-R阳性.对11份HBsAg阳性血清进行了HBV-DNA斑点杂交,查出4份HBV-DNA阳性.检测结果表明,猪血清中出现的PHSA-R阳性、HBsAg阳性、HBV-DNA阳性具有部分一致性.     

华南地区猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒检测分析

为了解华南地区猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的最新流行情况,采集了华南地区11个规模猪场各饲养阶段猪血清807份,用套式PCR(nPCR)检测猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2);采集了若干猪场2010年1月至2011年8月期间有咳嗽、喘气、消瘦及疑似PDNS等临床症状的猪血清312份,以及无临床症状猪血清104份,以nPCR检测PCV-2,以一步法反转录PCR(RT-PCR)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒。结果发现,所调查的11个规模猪场中只有5个检出PCV-1,所有猪场均检出PCV-2。PCV-2阳性率为30.61%,而PCV-1阳性率仅为4.21%;经产母猪和7周龄以上保育猪PCV阳性率最高;有临床症状的猪血清PCV-2阳性率为58.65%,PRRSV阳性率为37.82%,PCV-2阳性猪群中有39.89%的猪同时感染PRRSV;有症状猪群7月～9月的PCV-2感染率最高,而1月～3月最低;无临床症状猪血清PCV-2阳性率为27.9%,PRRSV阳性率为0.96%,PCV-2与PRRSV无混合感染。证明PCV尤其是PCV-2在华南地区仍广泛传播并流行,而且PCV-2与PRRSV混合感染致病情况较多。PCV-2的感染率与季节有一定的相关性,种猪带毒情况严重。     

乙型肝炎病毒DNA聚合酶检测新方法

目前已经明确,相当一部分乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者血清中含有乙型肝炎病毒(HBV,也称Dane颗粒)。据报告,HBV的环形DNA中约1/4为单股DNA。Kaplan等证明HBV颗粒内存在DNA聚合酶(DNA—P,EC2777),体外加入各种单核苷酸底物可以修补病毒DNA的单链部分。目前测定DNA—P活     

应用间接荧光抗体试验检测猪繁殖和呼吸综合征抗体

应用间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）进行了猪繁殖和呼吸综合征（ＰＲＲＳ）血清抗体的检测。共检测２个猪场，计２７份血清。其中Ｐ猪场猪血清２２份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２０份，阳性率为９０９％；Ｌ猪场猪血清５份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２份，阳性率为４０％。首次证实我区存在ＰＲＲＳＶ感染猪群。     

青海省西宁地区猪弓形体病的血清学调查

应用间接血凝实验(IHA)，对采自西宁地区大通种猪场、青海省畜牧兽医科学院猪场和城北区几个农户的251份猪血清，进行了弓形体的定性检测。结果检出阳性血清4份，阳性率1．59％，其中采自大通种猪场的151份猪血清和青海省畜牧兽医科学院猪场的52份猪血清中，均未检出阳性血清，而采自城北区农户中的48份猪血清中，检出阳性血清4份，阳性率8．33％。     

甘肃省猪衣原体病的血清学调查

对全省未进行过猪衣原体病免疫的11个地市的868份猪血清应用间接血凝（IHA）试验进行就体检测，结果在11个地市中均检出体阳性猪血清，阳性检出率平均为34.91％。     

应用ELISA间接法检测猪流行性腹泻抗体的研究

应用猪流行性腹泻病毒(PEDV)吉(J)毒株猪胎肠单层细胞培养物,以冻融法制备抗原,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法检测PED抗体的方法。对30头份经直接免疫荧光技术证实的PED病猪群血清测定,97％为阳性;检测32头份无PED猪场猪血清,93％为阴性。对1份PED“华毒株”,1份“川毒株”以及3头份“吉毒株”PED免疫血清测定,均为阳性。对猪传染性胃肠炎血清、猪轮状病毒病血清、疑似猪血球凝集性脑脊髓炎血清、鸡传染性支气管炎血清及猪梭菌性肠炎血清共16头份检测均为阴性,证明PEDV不与TGEV等其它3种冠状病毒血清发生交叉反应。89头份疫区猪血清的区域性试验阳性率为75％(67/89);对82头份屠宰猪血清测定,53％阳性。抗原包被板保存期试验表明,包被板在-20℃可保存2个月。