应用单克隆抗体检测香蕉束顶病

应用香蕉束顶病毒（ＢＢＴＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）建立了检测香蕉束顶病的间接ＥＬＩＳＡ方法，其检测香蕉病组织汁液的最大稀释度为１：１２８０，健康香蕉组织汁液无非特异性反应。用间接ＥＬＩＳＡ方法检测了采自广东、广西９个市（县）的香蕉产区的８０个大田香蕉束顶病样本和２５个荫棚香蕉试管苗样本，其中大田样本ＢＢＴＶ的带毒率为７６．５％，试管苗样本的带毒率为８．０％。香蕉束顶病株不同部位ＢＢＴＶ含量检测表     

Avermectin对棉田主要天敌的影响

本试验从５０余种抗生素中筛选出了对棉铃虫有效的杀虫抗生素——Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ，并研究了其对棉田的七星瓢虫、草间小黑蛛和螟黄赤眼蜂蛹等主要天敌的影响。结果表明，用Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ各组份中毒力最强的Ｂ１组份４０ｍｇ／Ｌ浓度处理柞蚕卵内的螟黄赤眼蜂，其校正死亡率仅为１１％，说明Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ作为生物杀虫剂，对赤眼蜂较安全；对七星瓢虫的结果显示，其校正死亡率为４３．２８％，说明影响不大。而Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ各组份对蜘蛛类的毒性很强，Ｂ１组份的１０ｍｇ／Ｌ浓度处理草间小黑蛛，其校正死亡率１００％，比对瓢虫的ＬＣ５０强３倍以上。根据近几年棉田天敌种群的分析，捕食性天敌以瓢虫为主，赤眼蜂也是对棉铃虫寄生效果较好的天敌，因此，Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ在棉田中使用，有利于保持田间优势天敌种群     

甘薯无病毒苗培育技术研究

１９９１￣１９９６年,甘薯茎尖离体培养采用ＭＳ为基本培养基,添加６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）０．５ｍｇ／Ｌ＋萘乙酸（ＮＡＡ）０．２ｍｇ／Ｌ＋腺素（Ａｄ）５ｍｇ／Ｌ,培育出１２个甘薯品种的脱毒苗,茎尖培养成苗率５０．０％￣９５．６％,成苗期４３￣６０ｄ。切取的茎尖大小与脱毒效果呈显著的负相关（ｒ＝－０．９８７５）,茎尖带１个叶原基时,ＳＰＦＭＶ脱毒率为３８．１％,培养基中添加适量的植物病毒钝化剂可使     

杏（Prunus armeniaca L.）的茎尖培养研究

９个杏品种的茎尖培养结果表明,初代培养基因ＭＳ＋０．２ｍｇ／ｌＫＴ＋０．２５ｍｇ／ｌ２,４,－Ｄ＋０．２５ｍｇ／ｌＮＡＡ＋３％蔗糖,增殖培养基为ＭＳ＋１．５ｍｇ／ｌＢＡ＋０．１ｍｇ／ｌＩＡＡ＋２．５％山梨醇,加长生长培养基为ＭＳ（１／２Ｎ）＋２．２ｍｇ／ｌＺＴ＋３％蔗糖,诱导生根培养基为１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ｌＩＢＡ＋２％蔗糖,在相同培养条件下,不同品种的茎尖增重速率不同,从大到小依次为Ｔｙｒｎ     

棉花枯萎病菌的血清学研究

本研究以棉花枯萎病菌公安菌株为材料，用Ｄ．Ｉａｎｎｅｌｉ法提取菌丝孢子蛋白抗原，按改进的Ｊ．Ｅ．Ｄｅｖａｙ免疫方案制备抗血清。琼脂双扩散测得效价达１／６４，用琼脂双扩散、（比较）对流免疫电泳、间接ＥＬＩＳＡ及ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ测定抗血清的特异性和灵敏度。结果表明４种检测方法基本上均能鉴别到尖孢镰刀菌种的水平，但不能鉴别到种以下的分类单位，４种方法检测所达的灵敏度依次为４．８６２５×１０－２，６．０７８×１０－３，３．７９９×１０－４，３．７９９×１０－４ｍｇ×ｍｌ－１。除此之外，本研究对琼脂双扩散法在真菌血清学上的应用上作了摸索     

苹果褪绿叶斑病毒PBM1（李假痘）毒株的提纯、抗血清制备及ELISA检测

从木本植物分离的苹果褪绿叶斑病毒（ａｐｐｌｅｃｈｌｏｒｏｔｉｃｌｅａｆｓｐｏｔｖｉｒｕｓ，Ｔｒｉｃｈｏｖｉｒｕｓ组）的ＰＢＭ１毒株能引起李品种“Ｈａｕｓｚｗｅｔｓｈｅ”的假痘病，将其繁殖在昆诺藜（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍｑｕｉｎｏａ）上。感染ＰＢＭ１毒株的昆诺藜叶组织用两次蔗糖梯度离心提纯。每１００ｇ叶组织的病毒产量平均为１．６８ｍｇ。在电镜下可观察到弯曲状病毒颗粒上的螺纹结构。通过ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，病毒外壳蛋白的分子量为２１．５ｋＤａ。用提纯的病毒免疫家兔制备的抗血清和ＥＬＩＳＡ法，对感染ＰＢＭ１的昆诺藜叶片和桃花进行了灵敏的检测。     

虫螨立克防治小菜蛾和菜青虫效果好

虫螨立克属新一代生物杀虫杀螨剂,其有效成份为阿维菌素（ＡｖｅｒｍｅｃｔｉｎＢ１）,具有高效、低毒、无交叉抗性等优点。１９９９年用该生物农药防治小菜蛾、菜青虫,并取得了很好的防治效果。现将试验结果报道如下:１材料与方法１．１供试药剂０．５%虫螨立克乳油（上海市农     

草间小黑蛛对亚洲玉米螟捕食作用的研究

在实验室条件下,研究了草间小黑蛛〔Ｅｒｉｇｏｎｉｄｉｕｍｇｒａｍｉｎｉｃｏｌｕｍ（Ｓｕｎｄｅｖａｌ）〕对亚洲玉米螟〔Ｏｓｔｒｉｎｉａｆｕｒｎａｃａｌｉｓ（Ｇｕｅｎｅｅ）〕二、三龄幼虫的捕食功能反应及其寻找效应。其功能反应属Ｈｏｌｉｎｇ－Ⅱ型,相应模型为Ｎａ＝１．１４６３Ｎ／（１＋０．０２２０５Ｎ）。草间小黑蛛寻找效应和自身密度之间的关系可用Ｈａｓｓｅｌ＆Ｖａｒｌｅｙ（１９６９）模型Ｅ＝０．３９８９Ｐ－０．６３４３和Ｂｅｄｄｉｎｇｔｏｎ（１９７５）模型Ｅ＝０．３５７９／〔１＋０．３１２５（Ｐ－１）〕进行模拟。寻找效应与草间小黑蛛自身密度和玉米螟幼虫密度三者之间的关系可用Ｂｅｄｄｉｎｇｔｏｎ（１９７５）模型Ｅ＝０．３５７９／（０．６８７５＋０．００６８８６Ｎ＋０．３１２５Ｐ）进行描述,表明寻找效应（Ｅ）随草间小黑蛛密度（Ｐ）和玉米螟幼虫密度（Ｎ）的增大而下降。     

农药的ADI值

农药的ＡＤＩ值农药名称ＡＤＩ（ｍｇ／ｋｇｂｗ）齐螨素（ａｂａｍｅｃｔｉｎ）０～０．０００２乙酰甲胺磷（ａｃｅｐｈａｔｅ）０～０．０３丙烯腈（ａｃｒｙｌｏｎｉｔｒｉｌｅ）无ＡＤＩ值涕灭威（ａｌｄｉｃａｒｂ）０～０．００３艾氏剂（ａｌｄｒｉｎ）０．０００...     

南方菜豆花叶病毒(SBMV)两典型株系特异cDNA和RNA探针的制备及应用

南方菜豆花叶病毒（ＳＢＭＶ）主要有２株系：菜豆株系（ＳＢＭＶ－Ｂ）和豇豆株系（ＳＢＭＶ－Ｃ）,血清学方法不能予以区分。根据已报道的核酸序列设计了２对特异引物,进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增并克隆到载体Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中,序列测定予以证实后利用随机引物法合成放射性ｃＤＮＡ探针,再进行体外转译合成地高辛ＵＴＰ标记的ＲＮＡ探针。２种探针均可分别特异地检测Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ膜上的ＳＢＭＶ－Ｂ和ＳＢＭＶ－Ｃ。ＲＮＡ探针检测ＳＢＭＶ－Ｂ和ＳＢＭＶ－Ｃ灵敏度分别为：０．１μｇ和０．０１μｇ。     

直接竞争酶联免疫吸附分析法测定桃中氰戊菊酯的残留量

采用包被抗体、酶标半抗原直接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定了氰戊菊酯在桃中的残留量。结果表明:在氰戊菊酯多克隆抗体包被浓度为4.0 mg/L、辣根过氧化物酶(HRP)标记氰戊菊酯半抗原稀释1.0×105倍条件下,ELISA法检测氰戊菊酯的线性浓度范围为0.01~10 mg/L,氰戊菊酯对抗体-酶标半抗原反应的抑制中浓度(IC50)为193μg/L,相对标准偏差(RSD,n=5)为4.5%,IC20为13.5μg/L。在2、0.2和0.05 mg/kg添加水平下,ELISA法测定桃中氰戊菊酯的回收率分别为81%~89%、85%~98%和85%~106%,RSD(n=5)分别为5.1%、5.6%和7.7%。ELISA法对桃中氰戊菊酯的最低检出浓度为0.014 mg/kg。     

噻唑磷在甘蔗和土壤中的残留消解动态及风险评估

建立了噻唑磷在甘蔗和土壤中的残留分析方法,并在广东和广西2地进行了10%噻唑磷颗粒剂在甘蔗上残留的田间试验,研究了噻唑磷在甘蔗和土壤中的消解动态和最终残留量,并对甘蔗中噻唑磷可能产生的膳食摄入风险进行了评估。甘蔗样本用乙腈提取,氨基固相萃取小柱净化,采用气相色谱-火焰光度检测器 (GC-FPD) 检测。结果表明:在0.01、0.1和1 mg/kg添加水平下,噻唑磷在甘蔗中的平均回收率为83%～84%,相对标准偏差 (RSD) 为2.6%～3.4%;在土壤中的平均回收率为84%～86%,RSD为4.1%～6.7%。噻唑磷检出限 (LOD) 和定量限 (LOQ) 均为0.01 mg/kg。田间试验结果表明:10%噻唑磷颗粒剂在广东和广西甘蔗中的消解不符合一级反应动力学方程,没有显著的消解规律,呈现的特点是浓度由小到大再变小的趋势,施药后14～21 d甘蔗中噻唑磷的残留量达到最大值0.027 mg/kg;噻唑磷在土壤中消解符合一级反应动力学方程,半衰期为8.6～9.6 d,属易降解农药;噻唑磷在甘蔗和土壤中的最终残留量均小于0.01 mg/kg。膳食摄入风险评估结果表明:甘蔗中噻唑磷对人群的急性膳食摄入风险值为225%,急性膳食摄入风险较大,还需进一步结合噻唑磷在人体内的代谢行为等数据进行综合评估;慢性膳食摄入风险值为57%,表明按照推荐剂量施用10%噻唑磷颗粒剂,慢性膳食摄入风险较低,对消费者健康是安全的。     

对氯苯氧乙酸钠在荔枝和土壤中的残留行为

建立了对氯苯氧乙酸钠在荔枝和土壤中的残留分析方法,并在广州和南宁进行了8%对氯苯氧乙酸钠可溶性粉剂在荔枝上残留的田间试验,研究了对氯苯氧乙酸钠在荔枝和土壤中的消解动态和最终残留量。样品用碱溶液提取,盐酸调节pH值至2.5后乙酸乙酯萃取,采用高效液相色谱二极管阵列紫外检测器(HPLC-PDA)检测。结果表明:在0.01、0.1和1 mg/kg 3个添加水平下,对氯苯氧乙酸钠在荔枝和土壤中的平均回收率为81%~85%,相对标准偏差(RSD)为1.9%~4.6%,检出限(LOD)为0.005 mg/kg,定量限(LOQ)为0.01 mg/kg。田间试验结果表明:8%对氯苯氧乙酸钠可溶性粉剂在荔枝和土壤中的半衰期分别为3.2~5.9 d和15.2~20.6 d,属易降解农药。最终残留量测定结果显示:8%对氯苯氧乙酸钠可溶性粉剂按有效成分20和30 mg/L分别施药2次,广州和南宁两地收获期荔枝中对氯苯氧乙酸钠的残留量均＜0.01 mg/kg。     

硝磺草酮在甘蔗和土壤中的残留行为

建立了硝磺草酮在甘蔗和土壤中的残留分析方法,并在广东和广西分别进行了10%硝磺草酮悬浮剂在甘蔗上残留的田间试验,研究了硝磺草酮在甘蔗和土壤中的消解动态和最终残留量。样品用乙腈提取,盐酸调节pH至3~4后二氯甲烷萃取,采用高效液相色谱配二极管阵列紫外检测器(HPLC-PDA)检测。结果表明:在0.01、0.1和1 mg/kg 3个添加水平下,硝磺草酮平均添加回收率为82%~84%,相对标准偏差(RSD)为1.9%~3.4%,检出限(LOD)为0.005 mg/kg,定量限(LOQ)为0.01 mg/kg。田间试验结果表明:施用10%硝磺草酮悬浮剂后,在甘蔗上的残留量呈现先降低后升高又下降的趋势;在土壤中的半衰期为12.3~14.7 d,属于易降解农药。最终残留量测定结果显示:收获期甘蔗中硝磺草酮的残留量均0.01 mg/kg。     

丙硫咪唑在烟草中的残留及消解动态

为明确丙硫咪唑在烟草中的残留消解规律，制定科学合理的农药残留限量标准，采用QuEChERS与高效液相色谱-串联三重四极杆质谱 (HPLC-MS/MS) 联用技术检测了烟草中丙硫咪唑的残留量，并进行了实际样品检测。结果表明:在0.001~1 mg/L范围内，丙硫咪唑的质量浓度与对应的峰面积间线性关系良好，R2 > 0.998。在0.02、0.2和2 mg/kg 3个添加水平下，丙硫咪唑在鲜烟叶中的回收率为94%~97%，相对标准偏差 (RSD) 为1.2%~2.7%；在0.01、0.1和2 mg/kg 3个添加水平下，丙硫咪唑在干烟叶中的回收率为85%~104%，RSD为2.0%~8.1%。丙硫咪唑在干烟叶和鲜烟叶中的最低检测浓度 (LOQ) 分别为0.01和0.02 mg/kg。消解动态试验结果表明，丙硫咪唑在鲜烟叶中的消解半衰期为5.4~16.1 d。以有效成分90和135 g/hm2的剂量分别施用15%丙硫唑?戊唑醇悬浮剂3次，于末次施药后7 、14和21 d时，干烟叶中丙硫咪唑的残留量分别为0.14~3.04、0.33~2.20和0.17~1.85 mg/kg。推荐其残留限量为 2 mg/kg，按照农药合理准则规范使用农药，于末次施药后21 d，丙硫咪唑在干烟叶中的残留量小于2 mg/kg，残留风险水平较低。     

液相色谱-串联质谱法同时测定菠菜、土壤及水体中螺虫乙酯及4种代谢物残留

采用QuEChERS及固相萃取样品前处理方法,结合液相色谱-三重四极杆串联质谱技术（LC-MS/MS）,以负离子扫描和多反应监测模式（MRM）,建立了菠菜、土壤及水体中螺虫乙酯及4种代谢物（B-enol、B-keto、B-mono和B-glu）残留的检测方法。通过对质谱检测条件的优化表明,以乙腈-0.5%甲酸水溶液作为流动相,采用梯度洗脱时,色谱分离度及灵敏度最好。通过对样品前处理条件的考察,发现选用0.1%甲酸-乙腈溶液作为提取溶剂,经50 mg的m（PSA）:m（GCB）=1:1净化处理后,在0.05、0.5和1 mg/kg添加水平下,螺虫乙酯及4种代谢物在菠菜中的回收率为81%~103%,相对标准偏差（RSD）为1.7%~7.9%;在土壤样品中的回收率为82%~98%,RSD为1.9%~7.6%。采用NH2柱作为固相萃取柱,用10 mL二氯甲烷洗脱,在0.005、0.05和0.5 mg/L添加水平下,螺虫乙酯及4种代谢物在水体中的回收率为82%~95%,RSD为1.5%~6.2%。在0.002~1 mg/L范围内,螺虫乙酯及4种代谢物的质量浓度与对应的峰面积间呈现良好的线性关系,r在0.996 7~0.999 7之间。检出限（S/N=3）分别为螺虫乙酯（0.000 2~0.000 3 mg/kg）,B-enol（0.000 1~0.000 3 mg/kg）,B-keto（0.000 4~0.000 6 mg/kg）,B-mono（0.000 4~0.000 7 mg/kg）,B-glu（0.000 2~0.000 6 mg/kg）;定量限（S/N=10）分别为螺虫乙酯（0.000 6~0.001 mg/kg）,B-enol（0.000 3~0.001 mg/kg）,B-keto（0.001 2~0.001 6 mg/kg）,B-mono（0.001 2~0.001 9 mg/kg）,B-glu（0.000 6~0.001 3 mg/kg）。方法分析结果符合农药残留检测要求,适用于菠菜、土壤及水体中螺虫乙酯及4种代谢物残留的同时检测。     

同位素内标法检测灭蝇胺及其代谢物三聚氰胺在双孢蘑菇子实体和覆土中的残留

采用超高效液相色谱-串联质谱内标法检测灭蝇胺及其代谢物三聚氰胺在双孢蘑菇 Agaricus bisporus 子实体和覆土中的残留量,以及两者在双孢蘑菇工厂化栽培中的变化规律。样品经 V (甲醇) : V (水) = 4:1混合溶液提取,MCX固相萃取柱净化,HILIC 色谱柱分离,超高效液相色谱-串联质谱测定,三聚氰胺-13C同位素内标法定量。结果表明:灭蝇胺和三聚氰胺的检出限均为0.001 mg/kg。在0.02~1 mg/kg添加水平下,灭蝇胺在双孢蘑菇子实体和覆土样品中的回收率为86%~102%,相对标准偏差 (RSD) 为2.7%~5.3%;三聚氰胺在子实体和覆土样品中的回收率为98%~103%,RSD为1.5%~2.4%。在有效成分为1、10、50和250 mg/kg施药水平下,灭蝇胺消解规律符合一级反应动力学,在覆土中的平均半衰期为31.3 d。在覆土中灭蝇胺会转化为三聚氰胺,第2潮蘑菇采摘结束后,覆土中灭蝇胺的转化率为8.58%~13.87%。在施药水平较高 (50、250 mg/kg) 时,灭蝇胺和三聚氰胺在第1潮菇中的残留量高于在第2潮菇中的,其最高检出量灭蝇胺为2.36 mg/kg,三聚氰胺为1.75 mg/kg。综合考虑环境和产品安全,建议灭蝇胺的使用量不宜超过50 mg/kg。     

黄瓜中醚菌酯的残留及风险评估

建立了醚菌酯在黄瓜中的残留分析方法,并在广州和天津进行了30%醚菌酯可湿性粉剂在黄瓜上残留的田间试验,研究了醚菌酯在黄瓜上的消解动态和最终残留,采用风险商值法对黄瓜中醚菌酯可能产生的膳食风险进行了评估。黄瓜样本用乙腈提取,高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)检测。在添加水平为0.01、0.05和0.5 mg/kg时,平均添加回收率在91%～95%之间,相对标准偏差为3.74%～9.99%,检出限(LOD)为0.001 mg/kg,定量限(LOQ)为0.01 mg/kg。田间试验结果表明,醚菌酯在广州和天津黄瓜中的半衰期分别为1.5 d和2.1 d,消解迅速,施药3 d后最终残留量为0.08～0.23 mg/kg,施药5 d后最终残留量均低于LOQ值。风险评估结果表明,施药后3 d时黄瓜中醚菌酯的残留风险商值均远远低于1。表明喷施30%醚菌酯可湿性粉剂防治黄瓜白粉病,按照推荐剂量使用对人体健康是安全的。     

丙环唑在香蕉和土壤中的消解动态及残留安全性评价

采用田间试验方法研究丙环唑在香蕉和土壤中的残留动态。超高效液相色谱-串联四极杆液质联用法进行(UPLC-MS/MS)定量定性分析。丙环唑在香蕉中的平均回收率为81.9%～100.2%;在香蕉全果中的平均回收率为72.8%～103.6%;在土壤中的平均回收率为81.9%～94.6%。动态结果表明:丙环唑在香蕉全果中比在土壤中消解快,其消解半衰期分在香蕉全果和土壤中分别为13.9d和23.3d。在香蕉上按照推荐剂量最多施药2次,采收期距最后一次施药40d,香蕉果肉中丙环唑残留量小于0.011mg/kg。低于中国规定的最高残留限量(MRL,0.1mg/kg),说明该药为低残留、易消解农药。     

高效液相色谱-串联质谱法检测宁南霉素在人参中的残留及消解规律

为明确宁南霉素在人参上的消解规律和最终残留水平，于2019年在吉林省白山市、抚松县、延吉市以及辽宁省桓仁县4地进行了宁南霉素在人参及其植株中的田间残留及消解动态试验。样品经体积分数为0.2%的甲酸水溶液提取，采用PLS＋PXC固相萃取柱净化，XSelect? HSS T3色谱柱分离，高效液相色谱-串联质谱 (HPLC-MS/MS) 测定。结果表明:在0.1、0.2和1 mg/kg添加水平下，宁南霉素在鲜人参和人参植株中的平均回收率分别为90%~99%和92%~94%，相对标准偏差 (RSD) 分别为4.7%~5.6%和4.0%~5.6%；在0.2、1和2 mg/kg添加水平下，宁南霉素在干人参中的平均回收率为89%~95%，RSD为1.4%~10%。在鲜人参与人参植株中的定量限 (LOQ) 均为 0.1 mg/kg，在干人参中的 LOQ 为 0.2 mg/kg。白山、桓仁两地的消解动态试验结果显示，宁南霉素在人参植株上的半衰期分别为11.77和0.76 d。4地的最终残留试验结果显示，宁南霉素在鲜人参上的最终残留量低于LOQ，在人参植株上的最终残留量为相似文献