利用生物絮团技术对克氏原螯虾的养殖效果初探

为探究将生物絮团技术应用到克氏原螯虾养殖的可能性，本实验利用生物絮团技术和普通饲料投喂2种方式短期养殖体质量为(9.70±0.32) g的克氏原螯虾30 d。比较养殖期间2实验组的水化学指标以及实验结束时2实验组幼虾的生长情况，肌肉及肝胰腺营养成分组成，胃、肠和肝胰腺组织的消化酶活性，肝胰腺和肌肉组织的抗氧化能力。结果显示，①在养殖期间，絮团组水体总氮(TN)、亚硝态氮(NO₂^--N)、硝态氮(NO₃^--N)的质量浓度均维持在较低的水平。②本实验条件下2实验组虾的终末体质量、增重率(WG)、特定生长率(SGR)、存活率(SR)均无显著差异。③絮团的粗蛋白含量可以达到36.8%，能够满足克氏原螯虾对于蛋白的需求。但絮团的粗脂肪含量较低，这也影响了絮团组幼虾肌肉组织的粗脂肪沉积量。④絮团组幼虾肝胰腺中α-淀粉酶(α-AL)、脂肪酶(LPS)、纤维素酶(CL)活性均显著高于饲料组幼虾，而饲料组幼虾在胃、肠组织中的α-AL活性较高，2实验组幼虾的胃蛋白酶活性无明显差异。⑤絮团组幼虾的抗氧化能力与饲料组幼虾相比，肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)活性较高，丙二醛(MDA)含量较低，但总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)以及溶菌酶(LZM)无明显差异。研究表明，生物絮团技术在克氏原螯虾的养殖中具有积极作用，可以达到与饲料投喂相同甚至更好的养殖效果。     

植物甾醇对克氏原螯虾生长消化、肠肝形态及抗氧化和免疫水平的影响

本研究旨在探究饲料中添加植物甾醇对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)生长、消化、抗氧化、免疫及肠肝形态的影响。制备 5 组等氮等脂饲料, 分别为在基础饲料中添加 0% (CON)、0.10% (P1)、0.19% (P2)、0.38% (P3) 和 0.76% (P4)的植物甾醇, 对体均重为(9.37±0.02) g 的克氏原螯虾进行 6 周的养殖实验。结果显示, P1 和 P2 组的增重率、特定生长率显著高于 CON 组(P＜0.05), 且 P2 组实验虾的生长性能最佳。P3 组实验虾肠道蛋白酶活性显著高于 CON 组, 脂肪酶活性显著低于 CON 组(P＜0.05)。P1 组肝胰腺中酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性最高, P2 组血淋巴中酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性最高, 但与 CON 差异均不显著(P＞0.05)。随着植物甾醇添加水平提高, 肝胰腺和血淋巴总超氧化物歧化酶活性与过氧化氢酶活性呈上升趋势, 丙二醛含量呈下降趋势。相较 CON 组, P1 组肠道结构更加健康完整, 植物甾醇水平达到 0.19%及以上时, 克氏原螯虾的肝胰腺与肠道组织形态出现受损状态。 随着植物甾醇水平提高, 肝胰腺的 NF-κB 相对表达水平升高。P1 组 Hsp70 相对表达水平显著高于其他组(P＜0.05)。 研究表明, 本实验条件下添加 0.10%~0.19%植物甾醇可以促进克氏原螯虾的生长消化, 改善肠肝组织形态, 提高克氏原螯虾抗氧化和免疫能力。     

养殖密度对克氏原螯虾幼虾生长、消化酶活力和生理生化指标的影响

以体质量(0.015±0.004)g克氏原螯虾幼虾为研究对象,研究了50、100、300、600、900尾/m25种养殖密度对克氏原螯虾幼虾生长、消化酶活力和生理生化指标的影响,实验周期为30 d。结果显示,克氏原螯虾幼虾的终末体质量随着养殖密度的增大而减小。胃蛋白酶、类胰蛋白酶和淀粉酶活力随着养殖密度的增大表现出减小趋势,纤维素酶和脂肪酶活力在5种养殖密度下变化规律不显著(P>0.05)。克氏原螯虾幼虾体内水分含量在5种养殖密度下差异较小(P>0.05);粗蛋白含量随养殖密度的升高呈增高趋势,由54.02%增高至60.75%(P<0.05);粗脂肪含量不断减少(P<0.05),由26.19%减少至19.19%(P<0.05)。随着养殖密度的增大,克氏原螯虾幼虾肌肉葡萄糖的含量呈下降趋势(P<0.05),甘油三酯、总蛋白、尿素氮和胆固醇含量呈不断增多趋势(P<0.05)。克氏原螯虾幼虾肝胰腺葡萄糖、甘油三酯、总蛋白和尿素氮含量随着养殖密度的增大呈不断增多趋势。结果表明,高密度养殖对克氏原螯虾幼虾生长和消化酶活力具有一定负面影响,体内蛋白、脂肪、葡萄糖和尿素氮等物质的含量也随着养殖密度的增大而发生变化。     

噻虫嗪暴露对克氏原螯虾的病理损伤和生化反应的影响

为了探究噻虫嗪对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的影响，开展噻虫嗪对克氏原螯虾的急性毒性试验和14 d的慢性暴露试验，对克氏原螯虾的肝胰腺进行病理损伤和生化酶活分析。结果显示，噻虫嗪对克氏原螯虾的24、48、96 h的半致死浓度(LC50)分别为3.611,3.014和2.100 mg/L；噻虫嗪对克氏原螯虾的安全浓度(SC)为0.21 mg/L；通过14 d的噻虫嗪暴露试验，当暴露在52.5μg/L(1/4 LC₅₀)和105.0μg/L(1/2 LC₅₀)时，克氏原螯虾的肝胰腺都发生管腔扩大、上皮空泡化的损伤，总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和还原型谷胱甘肽(GSH)的浓度显著上升，表明肝脏中有大量活性氧(ROS)，肝胰腺发生氧化应激反应。     

复方中草药制剂对克氏原螯虾抗白斑综合征感染研究

为评价饲料中添加大黄、黄芩、茵陈、地锦草、白术、板蓝根制成的复方中草药制剂对克氏原螯虾非特异免疫、抗氧化能力和抗白斑综合征病毒感染的效果,在空白饲料中分别添加0.5%、1.0%、1.5%和2.0%的复方中草药连续投喂克氏原螯虾14 d,分析克氏原螯虾血清非特异免疫酶活、肝胰腺抗氧化能力及其对白斑综合征病毒抗感染能力。试验结果显示,以摄食空白饲料的克氏原螯虾为对照,摄食复方中草药制剂的克氏原螯虾血清溶菌酶、酚氧化酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的活性分别增加了4.07%～16.20%(P<0.05)、12.96%～31.94%(P<0.05)、32.36%～39.87%(P<0.05)、36.50%～71.94%(P<0.05),肝胰腺总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和总抗氧化能力分别提升了4.39%～25.76%(P<0.05)、32.85%～93.43%(P<0.05)、21.52%～55.10%(P<0.05),肝胰腺丙二醛含量降低了26.22%～45.05%(P<0.05)。此外,复方中草药制剂处理的克氏原螯虾人工感染白斑综合征病毒5 d的存...     

发酵饲料对克氏原螯虾生长性能、肌肉品质、抗氧化能力和肠道微生物群落的影响

为探究克氏原螯虾配合饲料经发酵处理后的饲喂效果，分别用未发酵和发酵饲料在室内循环水系统中饲养体重为(4.91±0.18) g的克氏原螯虾幼虾8周，采样分析发酵饲料对克氏原螯虾生长、肌肉品质、消化力、抗氧化能力及肠道菌群结构的影响。结果显示，(1)发酵饲料水中溶失率显著低于未发酵饲料；(2)发酵饲料显著提高克氏原螯虾增重率和特定生长率，降低饲料系数，但对存活率、肝体比、含肉率和体成分无显著影响；(3)发酵饲料显著提高克氏原螯虾肌肉硬度、弹性、咀嚼性和胶黏性，降低了黏附性；(4)发酵饲料显著提高克氏原螯虾肝胰腺及肠道中胰蛋白酶和脂肪酶活性，血清和肝胰腺中超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性，以及肝胰腺总抗氧化能力；(5)发酵饲料显著提高了肠道绒毛长度和宽度；(6)发酵饲料改善了克氏原螯虾肠道微生物结构，显著升高了厚壁菌门和放线菌门相对丰度，同时提高了肠道菌群多样性。研究表明，饲料经发酵处理后可以有效提高克氏原螯虾生长性能、肌肉品质、消化力和抗氧化能力，改善了肠道组织结构，改变了肠道微生物结构，为克氏原螯虾新型环保饲料的生产提供理论依据。     

维生素C对克氏原螯虾肝胰腺非特异性免疫的影响

为探究维生素C作为饲料添加剂短期投喂克氏原螯虾(Procambarus clarkii)对其肝胰腺非特异性免疫的影响,并寻找出最适的添加量,将规格相同(27 g±3 g)、健康无伤的克氏原螯虾暂养7 d后分5组,对照组投喂基础饲料,4个试验组投喂的饲料为在基础饲料中添加维生素C(添加量分别:0.1、0.2、0.4、0.8 g/kg)。投喂5 d后,取试验虾肝胰腺进行免疫相关酶活指标的测定,结果显示:添加0.2 g/kg的维生素C可以显著提升克氏原螯虾肝胰腺中SOD、CAT、T-AOC等抗氧化酶的活性,对于免疫酶ACP、AKP的活力依然有显著提升作用。并且对于肝胰腺中MDA的含量有降低作用(P<0.05)。0.4 g/kg添加组,能够显著提升肝胰腺中CAT活力,并且显著降低MDA含量(P<0.05)。由此可以得出在饲料中添加0.2~0.4 g/kg维生素C可以在一定程度上提升克氏原螯虾肝胰腺的非特异性免疫。     

克氏原螯虾病原菌感染发病标志性免疫及生理生化指标的筛选

为筛选克氏原螯虾(Procambarus clarkia)因受病原菌感染导致发病的标志性生理生化指标, 以嗜水气单胞菌 (Aeromonas hydrophila)为攻毒菌株, 采用半致死剂量注射感染克氏原螯虾, 分析了感染初期(12 h)、发病期(24~72 h)和感染后恢复期(90 h)血淋巴中的非特异免疫、糖类代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及常规生理生化指标共 23 项, 结果显示, 在发病期, 8 项非特异免疫指标中, 感染组过氧化氢酶(CAT)活力和总抗氧化能力(T-AOC)在发病状态下提高显著(P＜0.01), 均值分别是空白对照组的 3.29 倍和 2.56 倍; 感染组发病期蛋白代谢指标白蛋白(ALB)和尿素(UREA) 浓度极显著提高(P＜0.01), 其浓度均值比空白对照组分别提高了 1.75 与 5.58 倍; 感染组发病期消化酶指标中淀粉酶(AMY)活力在发病过程中活性显著下降(P＜0.01), 比空白对照组下降了 74.18%; 血清中肌酸激酶(CK)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 4 种酶活力在发病期显著提高(P＜0.01), 与空白对照组比分别提高了 16.72、219.21、74.43、2.66 倍。在所检测指标中, 葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)和脂肪酶(LPS) 4 项指标在克氏原螯虾发病过程中均变化不显著(P＞0.05)。结果表明, 克氏原螯虾血清中 CAT、T-AOC、 ALB、UREA、AMY、CK、ALT、AST 及 GSH-Px 9 项指标变化对细菌感染发病极敏感, 可作为判断其受细菌病感染发病的标志性指标。本研究结果可为克氏原螯虾患病风险评估和疾病预警提供新的技术依据。     

低pH胁迫对克氏原螯虾鳃和肝胰腺酶活力及组织结构的影响

采用石蜡切片技术,结合生物酶的测定,以体重(25.88±4.40)g的克氏原螯虾(Procambarus clarkii)为研究对象,研究了低pH胁迫对克氏原螯虾鳃和肝胰腺生理代谢与组织结构的影响。在得出96 h LC50的基础上,将克氏原螯虾暴露于半致死浓度pH水体中96 h,以pH7.6作为对照,并于胁迫后0 h、2 h、8 h、24 h、96 h采集鳃和肝胰腺样品,测定鳃部分代谢酶和肝胰腺主要抗氧化指标,并对鳃和肝胰腺组织进行切片观察。实验结果表明,pH 96 h LC50为3.675。低pH暴露后,实验组鳃Na~+-K~+-ATP酶和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力逐渐升高,细胞色素氧化酶(cytochrome oxidase,COO)活力逐渐下降;肝胰腺超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力呈现先上升后下降的变化趋势,丙二醛(malondialdehyde,MDA)在肝胰腺中的累积量显著增加(P0.05)。切片结果表明,低pH胁迫引起克氏原螯虾鳃组织中呼吸上皮细胞逐渐脱落,角质层受损;肝胰腺组织中B细胞及其内部转运泡体积增大,转运泡内颗粒物质增多,肝小管结构受损。研究结果表明,低pH胁迫会对克氏原螯虾生理代谢产生影响,并引起组织缺氧;虾体氧化防御功能在胁迫前期被诱导激活,但在胁迫后期受到一定抑制;低pH胁迫可以引起克氏原螯虾鳃和肝胰腺组织结构损伤。     

虾青素对微囊藻毒素MC-LR胁迫下克氏原螯虾的生长、繁殖及免疫力的影响

本文目的旨在研究虾青素对微囊藻毒素MC-LR胁迫下(25μg/L)克氏原螯虾的免疫力及生长繁殖的影响。实验设计四个梯度的饲料中虾青素添加比例分别为(0、5、10、20 mg/g)养殖周期持续8星期。结果表明虾青素显著提高了克氏原螯虾肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸(AKP)的活力(P0.05)。5g/kg虾青素的添加量即可对SOD酶活具有明显提升(P0.05);10 g/kg的虾青素添加量对AKP的提升最为明显(P0.05);研究还发现虾青素可显著提高微囊藻毒素MC-LR胁迫下克氏原螯虾的存活率和特定生长率(SGR)(P0.05),提高克氏原螯虾雌虾的抱卵量。研究表明虾青素作为一种抗氧化剂适宜于在克氏原螯虾饲料中添加,并且具有提高虾体免疫活力,缓解微囊藻毒素MC-LR对虾体氧化胁迫的作用。     

Occurrence of Psorospermium sp. in several North American crayfish species, with comparative notes on Psorospermium haeckeli in the European crayfish, Astacus astacus

Psorospermium haeckeli is a thick-walled, unicellular organism widely reported in European astacid crayfish. Its taxonomic status and life cycle have not been elucidated. It is often referred to as a “parasite”, but conclusive evidence has yet to be found. Recent examination of two North American crayfish species, Procambarus clarkii and Procambarus zonangulus, confirmed its presence in the south-central USA (Louisiana) with morphologies that differ from that of P. haeckeli. This form had been previously reported from Orconectes virilis in southern Canada. We report here the presence of this North American form of Psorospermium in additional North American crayfish including Orconectes immunis and Orconectes rusticus from the northern USA (Minnesota and Wisconsin), Procambarus alleni and Procambarus fallax from the southern USA (Florida), and Pacifastacus leniusculus from the western USA. We also confirm this Psorospermium in O. rusticus from eastern Canada (Ontario). It was not, however, confirmed in several additional southern crayfish species including Cambarus diogenes, Cambarellus puer, Fallicambarus fodiens, and Orconectes palmeri. We describe the morphological forms of this Psorospermium and conclude that it is present in many crayfish species in North America.     

克氏原螯虾染色体及其核型

染色体是遗传物质的载体,是研究细胞遗传学的基础,为研究克氏原螯虾染色体及其核型,实验以性未成熟雄性个体的精巢为材料,采用低渗和空气干燥常规方法制备细胞分裂中期染色体标本,研究了克氏原螯虾染色体及核型。Giemsa和DAPI染色后在显微镜下观察到清晰的精母细胞减数分裂中期二价体和精原细胞有丝分裂中期染色体时相。对减数分裂中期二价体及有丝分裂中期染色体进行了数目上的统计。结果显示,克氏原螯虾二倍与单倍染色体数目分别为2N=188和N=94。由于有丝分裂染色体形状微小,核型分析困难,故选取减数分裂中期二价体,根据长度及着丝点位置对其进行了初步核型分析,核型公式为N=55M+22(SM,ST)+17T,未发现异形性染色体。     

溴氰菊酯对克氏原螯虾的氧化胁迫效应

为了解溴氰菊酯对克氏原螯虾的毒性及致毒机理,采用24h换水式生物试验研究了溴氰菊酯对克氏原螯虾的96h急性毒性,分光光度法检测了6、12、24和48h后0.01、0.02和0.04μg/L溴氰菊酯对肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)的含量等氧化胁迫相关指标的影响。结果表明,24、48和96h的半致死浓度分别为0.1560、0.0993和0.0562μg/L,安全浓度为5.62ng/L;在整个暴露过程中,溴氰菊酯各个处理组都引起了氧化胁迫相关指标的变化。SOD和CAT活力的变化趋势相同,都呈抑制-诱导-抑制的变化规律,MDA含量则一直高于对照组。暴露6h后,0.01μg/L浓度组MDA含量极显著高于对照组(P<0.01),0.04μg/L浓度组MDA含量约为对照组的1.98倍(P<0.05);暴露12h后,MDA仍保持较高水平,0.02μg/L浓度组MDA含量约为对照组的1.76倍(P<0.05);暴露24h后,各浓度组CAT活力分别比对照组上升了70.98%、73.05%和66.67%(P<0.01);暴露48h后,0.01、0.02μg/L浓度组的SOD活力分别下降了...     

克氏原螯虾血细胞及免疫功能的初步研究

甲壳动物血细胞在宿主免疫应答中发挥着重要的作用，其中包括识别、吞噬、包囊黑色素形成、胞毒作用和胞间的信息传递。不同类型的血细胞其防御机制不同，因此血细胞的形态和分类是甲壳动物免疫学的基础。通常情况，十足目甲壳动物的血细胞类型主要依据细胞质中颗粒物质的有无和颗粒物质的相对大小进行分类。研究采用Giemsa染色法、H.E染色法和电子显微技术法对克氏原螯虾血细胞进行分类，观察到3类血细胞：透明细胞、小颗粒细胞、大颗粒细胞，它们所占的比例分别为19.9%，46.1%，34.1%。在电镜下，这3类血细胞的超微结构极为容易辨识。透明细胞通常在3类细胞中最小，核质（N/C）比最高，但无明显的颗粒；相比之下，小颗粒细胞和大颗粒细胞内部的颗粒数量逐渐增多。利用体内和体外培养技术研究克氏原螯虾血细胞对外源体（以Sephadex A-25色谱硅珠作为抗原）的包囊作用，初步探讨克氏原螯虾血细胞在对外源体免疫应答过程中的识别机理。将Sephadex A-25色谱硅珠植入克氏原螯虾体内，抗原物周围被大量血细胞包囊，通过切片技术观察到抗原物周围的血细胞绝大部分为小颗粒细胞，证实在包囊过程中起主要作用的血细胞是小颗粒细胞，即小颗粒细胞在包囊反应中比较活跃。研究结果为以后进一步研究克氏原螯虾的细胞免疫机制和提高其抗病能力提供了科学依据。     

红螯螯虾XO-SG神经细胞的原代培养

本研究采用酶解的方法获得红螯螯虾眼柄XO-SG复合体的单个神经细胞,并依据显微观察对XO-SG神经细胞进行分类,同时利用Leibovitz's L-15等作为基础培养基离体培养解离的神经细胞。目的是建立虾类XO-SG神经细胞的分类标准并确定合适的培养条件,便于在体内外开展神经内分泌系统的调控研究。结果显示,根据神经细胞形态特点,红螯螯虾XO-SG神经内分泌细胞分为6种类型,不同类型的细胞在细胞大小以及显微结构上存在明显差异;建立了红螯螯虾眼柄XO-SG神经元的体外原代培养方法,细胞在改良的L-15培养基中存活状态良好,原代培养的神经细胞可以在体外存活14 d。离体培养过程中,不同类型神经细胞的再生速率存在差异,部分细胞在第2天就出现再生的轴突或树突。再生过程基本可以持续7 d,随后细胞开始萎缩凋亡。本研究为红螯螯虾眼柄神经细胞的分类以及利用神经细胞在体外开展虾类的内分泌代谢和调节机制研究提供了基础依据和研究平台。     

Intensification of redclaw crayfish Cherax quadricarinatus culture: I. Hatchery and nursery system

Intensification of an indoor hatchery and nursery system for the Australian redclaw crayfish Cherax quadricarinatus (von Martens) (Decapoda: Parastacidae) was obtained by increasing the surface area available for the crayfish juveniles and by synchronizing the age of the hatchlings held in each tank. The former improvement was facilitated by distributing an artificial seaweed-like material throughout almost the entire volume of small (275 l) hatching tanks. As the number of egg-bearing females was increased from 3 to 8 per hatching tank, the number of juveniles per liter also increased to as many as 6.5 juveniles/l, without reaching an apparent upper limit. The hatchlings were kept in the tanks for 75 days from the day females were found to be gravid and then harvested and graded according to size. The average juvenile weight at harvest was 0.34±0.04 g. The weight distribution of the juvenile males was not significantly different from that of the juvenile females on the day of harvest, and in both the distribution was positively skewed.     

Sperm production in the red claw crayfish Cherax quadricarinatus (Decapoda, Parastacidae)

The objective of this study is to evaluate the effect of body size, temperature and annual cycle on sperm production in Cherax quadricarinatus. Sperm count and sperm mortality were estimated, the reproductive system was weighted, and macro and microscopical analysis of the testes and vasa deferentia were conducted. Sperm count and weight of the reproductive system are strongly related to male size, in contrast to sperm mortality. The spermatophore structure presented macro and microscopical differences between sizes. Males higher in size have more adherent spermatophores. This species has a reproductive cycle related to sperm production. Sperm count and weight of the vasa deferentia rise in summer, while the weight of the testes increases in winter. During the spring, the sperm cord presents a higher density than in other seasons. The temperature seems to affect sperm production being 27 and 29 °C the best assayed conditions. The present results are relevant information to obtain the best sperm viability selecting male size, season of sampling and the best temperature for the reproductive stock and future assays of spermatophore cryopreservation for this species aquaculture.     

亚硝酸盐对红螯光壳螯虾不同组织免疫相关酶活性及超微结构的影响

应用透射电镜技术,结合生物酶测定,研究了水体中不同浓度亚硝酸盐胁迫下红螯光壳螯虾肝胰腺、鳃和肌肉组织中免疫相关酶的活性变化,以及对肝胰腺和鳃的形态学影响。结果显示,与对照组相比,亚硝酸盐胁迫下,3种组织的ACP、AKP、SOD以及GSH-PX的活性都显著降低(P<0.05);随着亚硝酸盐浓度增加,酶活力呈现降低的趋势;鳃组织Na+,K+-ATPase和Ca2+,Mg2+-ATPase的活性也显示出随亚硝酸盐浓度升高而降低的趋势。超微结构显示,随着亚硝酸盐浓度增加,鳃角质层受损、断裂;上皮细胞排列疏松、空泡化;细胞器变形;鳃腔内也出现空泡化现象,血细胞变形。肝胰腺上皮细胞排列杂乱无章,细胞裂解,空泡化;微绒毛受损、断裂,肝小管间距扩大、结缔组织变得稀薄,血细胞变形;高浓度组R细胞的脂滴减少,核膜解体,细胞膜破裂,空泡化加剧;F细胞的核糖体减少,空泡化加剧,内质网水肿。研究说明亚硝酸盐对红螯光壳螯虾3种组织的免疫相关酶活产生影响,并损伤肝胰腺和鳃的形态学结构,影响其生物学功能。     

Characterisation of cellulase activity in the digestive system of the redclaw crayfish (Cherax quadricarinatus)

Endogenous cellulase activity was identified in the gastric fluid and digestive gland of the redclaw crayfish. Cellulase showed maximal activity from pH 4 to 5 and was stable for up to 2 h at 40°C. Cellulase activity in the digestive gland was unaffected by antibiotic treatment. Taken together these findings suggest a significant endogenous component for redclaw cellulase activity. Partial purification of cellulase activity was performed using anion exchange and gel filtration chromatography. One major and one minor band of activity were identified subsequently by SDS-PAGE and zymography. The molecular weight of the major band was estimated at 40 kDa while the minor band was estimated at 30 kDa. Redclaw cellulase enzymes demonstrated broad substrate specificity, hydrolysing polysaccharides containing β-1,4 and mixed β-1,4 and β-1,3 glycosidic bonds but showed a preference for soluble substrates. Hydrolysis products of cellodextrins of various lengths also showed that the enzymes liberated free glucose. Exposure of redclaw to antibiotics resulted in a dramatic decline in bacterial populations in the gastric contents (>90%) but only a 40% decline in cellulase activity.