丁香酚的分离及其杀多子小瓜虫活性研究

利用不同极性大小的溶剂石油醚、乙酸乙酯、氯仿、甲醇回流提取丁香制备粗提物,进行杀灭多子小瓜虫幼虫和包囊的药效活性追踪,确定丁香杀虫的活性部位为石油醚提取部分,进而利用硅胶柱层析和中压制备液相等分离技术结合活性追逐试验追踪分离丁香石油醚提取物(对多子小瓜虫幼虫和包囊的100%致死质量浓度分别为50mg/L和80mg/L),最终分离获得一种杀虫活性物质,经质谱、核磁氢谱、核磁碳谱等多种波谱分析技术确定该活性物质为丁香酚。体外杀虫结果表明,丁香酚对多子小瓜虫具有较强的杀灭作用,其对幼虫15min、1h、2h、3h和4h的半数致死质量浓度分别为6.21(5.85~6.65)mg/L、3.50(3.24~3.84)mg/L、2.90(2.62~3.22)mg/L、2.33(2.10~2.50)mg/L和2.15(1.98~2.32)mg/L,对幼虫4h的100%杀灭的质量浓度为3.5mg/L,对包囊6h的100%杀灭质量浓度为3.5mg/L。结果表明,丁香酚是一种具有较好开发前景的杀多子小瓜虫药物。     

肉桂活性成分肉桂醛杀灭离体多子小瓜虫效果

研究从肉桂中分离纯化出具有抑杀多子小瓜虫活性的化合物。以乙醇为提取剂,用索氏超声提取法从肉桂中提取浸膏,再用石油醚、乙酸乙酯、甲醇为萃取剂,萃取不同有效组分,以不同浓度分别进行杀灭离体多子小瓜虫实验,发现石油醚萃取物的杀虫效果最优。然后对石油醚萃取物采用硅胶层析柱和制备型高效液相色谱进行分离纯化,利用质谱和核磁波谱分析,最终鉴定其杀虫活性成分为肉桂醛;将肉桂醛溶于二甲基亚砜并用二倍梯度稀释法配成不同浓度的药液测试其对离体小瓜虫的杀灭活性。结果表明,100%杀灭滋养体和感染性幼虫的剂量分别为50和8 mg/L,半数有效浓度分别为13.9和1.8 mg/L;使用剂量在50 mg/L可完全抑制小瓜虫包囊孵化。     

复方中草药防治锦鲤指环虫病试验研究

用黄柏、茯苓、百部、苦参、苦楝、贯众、青蒿、槟榔等中草药组成复方,将感染有指环虫的锦鲤在不同浓度的复方中草药煎熬物的水体中浸泡,控制一定的水体条件,显微镜下定期观察鱼鳃上的指环虫数量,统计杀虫率。结果表明:复方中草药中8mg/L的药液杀灭指环虫效果最好,其6h内杀虫率为20%～50%;24h时的杀灭指环虫效果最好,最高杀灭率为100%。     

29种天然植物提取物对指环虫杀灭作用的研究

利用金鱼、鲢、鲤、草鱼、欧洲鳗鲡所寄生的坏鳃指环虫、中型指环虫、鲢指环虫、伸展指环虫、拟指环虫为材料,建立以金鱼为寄主、中型指环虫为指示虫的杀虫药物筛选动物模型,使寄生感染率达100%。利用该模型对29种天然植物提取物进行杀虫活性筛选。结果表明:银杏外种皮、博落回、小果博落回、鸦胆子、云南重楼、杠柳、槟榔、陈皮最高杀虫率在48 h内均达70%以上,且对鱼安全性较高;刺五加、细柱五加、商陆、乌头、松针、藁本、青蒿、辣蓼、苦参对指环虫有一定的杀灭作用,杀虫率在20%~40%之间;荆芥、山奈、葫芦巴、萹蓄、芫花、马钱子、肉豆蔻、马兜铃、直立百部、千年健、常山、北乌头在实验浓度内对指环虫没有明显的杀灭作用。其中,银杏外种皮、博落回、小果博落回杀灭活性最强,使用浓度较低,该实验条件下杀灭率100%;鸦胆子、槟榔对鱼最为安全,但杀虫浓度较高。     

鱼虫清对欧洲鳗的急性毒性及杀虫效果试验

在常温静水条件下,探讨了鱼虫清对欧洲鳗（Anguilla angulla）的急性毒性效应,同时进行了鱼虫清对寄生虫的杀灭试验。结果表明：鱼虫清对欧洲鳗的24h、48h、96h的半致死浓度（LC50）分别为1.87mg/L、1.67mg/L和1.35mg/L,安全浓度为0.4mg/L。鱼虫清对指环虫（Dactylogyrus）和车轮虫（Trichodinella）的杀灭效果分别为：浓度在0.30mg/L、0.20mg/L以上作用24h,杀虫率可达100%。试验证明,鱼虫清对杀灭指环虫和车轮虫有很好的效果,值得推广。     

七叶树外种皮不同溶剂提取物杀灭中型指环虫研究

为研究七叶树外种皮不同极性溶液提取物的药效,为其在水产寄生虫病防治中的利用提供参考,以感染中型指环虫的金鱼为寄生动物模型,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇和水提取七叶树外种皮的有效成分,并检测其杀灭中型指环虫的生物活性,确定七叶树外种皮杀虫的活性部位。结果显示,七叶树外种皮甲醇提取物和水提取物显示出良好的杀虫活性,供试寄主动物药物暴露48 h后的EC_(50)、EC_(90)分别为5.23、7.33 mg/L和6.48、12.29 mg/L。     

复方中草药防治锦鲤指环虫病初探

为研究复方中草药对鱼类指环虫病的防治效果,用黄柏、茯苓、百部、苦参、苦楝、贯众、青蒿,槟榔等中草药组成复方,将感染有指环虫的锦鲤放在不同浓度的复方中草药煎熬液中浸泡,控制一定的水体条件,显微镜下定期观察鱼鳃上的指环虫数量,统计杀虫率。结果表明:8 mg·L-1的复方中草药药液对指环虫的杀灭效果最好,6 h内的杀虫率为20 %～50 %,24 h时对指环虫的杀灭活性最高,杀灭率达100 %。     

利用重楼杀灭罗氏沼虾寄生纤毛虫的初步研究

利用系统溶剂极性法提取重楼,制备粗提物,以寄生罗氏沼虾上的纤毛虫(聚缩虫和靴纤虫)为指示寄生虫,进行杀灭罗氏沼虾寄生纤毛虫的药效活性追踪试验,初步确定重楼杀灭纤毛虫的活性部位,并对活性部位进行安全性评价。实验结果表明,不同极性的重楼提取物对纤毛虫均有一定的杀灭作用,其中重楼甲醇提取物对纤毛虫的杀灭作用最强,其浓度为45mg/L时,对纤毛虫杀灭率为100%,确定其含有杀灭纤毛虫的活性成分。活性部位对罗氏沼虾仔虾急性毒性实验结果显示,甲醇提取液对仔虾的96h半致死浓度(LC50)为272mg/L,其安全浓度为111.5mg/L,表明重楼是一种比较安全、杀虫效果良好的水产用中草药。     

苦参提取物对草鱼车轮虫病的防治研究

研究了苦参提取物对草鱼车轮虫病的防治效果.通过将感染车轮虫的草鱼投放在加有不同浓度的苦参提取物的水体中,控制养殖水体条件,显微镜下定期观察鱼体上的车轮虫数量,统计杀虫率和一周后各试验组的病鱼死亡率.结果表明:12 mg/L浓度的苦参提取物6h杀虫率54.3%,12h杀虫率为100%;10 mg/L浓度苦参提取物6h杀虫...     

杀虫剂与银杏果皮提取物复配杀灭鱼类指环虫

以人工感染金鱼鳃上指环虫的杀灭率和金鱼死亡率为指标,研究甲苯咪唑、吡喹酮、托曲珠利及敌百虫4种杀虫剂与银杏果皮提取物复配前后的杀虫效果和毒性。试验结果表明,4种杀虫剂在较低质量浓度与银杏果皮复配后杀虫效果均有不同程度的提高。0.25mg/L甲苯咪唑复配前杀虫率为78.08%,复配后杀虫率提高至93.84%(P0.05),0.25、0.50、1.00mg/L吡喹酮复配前杀虫率分别为51.37%、70.32%、81.51%,复配后提高至90.41%、99.24%、99.02%,且均差异显著(P0.05),0.25、0.50mg/L托曲珠利复配前杀虫率为47.26%、60.96%,复配后提高至87.82%、95.72%,差异显著(P0.05),0.25、0.50、1.00mg/L敌百虫复配后杀虫率分别为67.81%、94.52%、99.31%,显著高于复配前杀虫率(P0.05)。在低质量浓度下,4种杀虫剂复配后对金鱼的毒性影响较小。     

5种中草药的不同溶剂提取物对嗜水气单胞菌抑菌活性的研究

为探讨不同有机溶剂对常用中草药的提取效果及其提取物对水产常见病原菌的抑菌活性，以50%乙醇、无水乙醇、氯仿、甲醇、丙酮、乙酸乙酯和石油醚为提取溶剂，根据水浴旋转蒸发器回流提取工作原理，分别对五倍子、乌梅、诃子、大黄和五味子等5种中草药进行固液萃取，并用其提取物对水产高致病性病原菌嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）进行体外抑杀菌试验。结果表明：50%乙醇、无水乙醇、甲醇对5种中草药的提取效果优于其他4种溶剂，尤以甲醇的提取效果最佳，其提取率分别为五倍子46.09%、乌梅27.58%、诃子29.55%、大黄50.34%、五味子30.88%;提取效果最差的是石油醚，其提取率分别为五倍子1.98%、乌梅1.73%、诃子2.21%、大黄0.89%、五味子3.40%。体外抑菌试验结果显示，嗜水气单胞菌对五倍子的3种醇提物均表现为极度敏感，对大黄的甲醇提取物表现为高度敏感，对五倍子、大黄和五味子的氯仿提取物以及对乌梅、大黄和五味子的石油醚提取物呈低度敏感，对五倍子的丙酮提取物等共25种提取物表现为中度敏感；五倍子、大黄的醇提物对供试菌的抑杀菌效果明显优于其他3种中草药的任何一种...     

4株细菌代谢产物增强鲫鱼免疫功能有效活性部位的研究

分别以蕈状芽孢杆菌(Bacillus mycoides)、皮杆菌(Dermabactersp)、噬菌蛭弧菌(Bdell ovibro bacteriovorus)和蜂房芽孢杆菌(Bacillus alvei)4株细菌代谢产物不同溶剂(石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇)的提取物腹腔注射鲫鱼(Carassius auratus),通过测定注射提取物后鲫鱼的血清凝集抗体效价、离体白细胞吞噬活性、吞噬细胞杀菌活性,研究不同代谢产物、不同提取物对鲫鱼免疫功能的影响,以确定代谢产物中活性物质的有效活性部位。结果表明:蕈状芽孢杆菌代谢产物中的活性物质主要集中在石油谜和乙酸乙酯提取物中;噬菌蛭弧菌代谢产物中的活性物质主要集中在石油醚和三氯甲烷提取物中;蜂房芽孢杆菌代谢产物中的活性物质主要集中在石油醚提取物中;而皮杆菌代谢产物中的活性物质则集中在乙酸乙酯和石油醚提取物中。试验结果为进一步追踪分离活性单体提供了基础资料。     

羊栖菜和裙带菜中抗凝血活性物质的初步筛选

Components with blood-anticoagulant activity were fractionated from marine algae Sargassumfusiforrne and Undaria pinnatifida and the activity of the components was investigated by using the method of bioassay. It was found that the 80% ethanol soluble fraction of Sargassumfusiforme exhibited no blood-anticoagulant activity, while the components obtained from the 80 % ethanol insoluble fraction (hot water extract) gave obvious bloodanticoagulant activity. A further study suggests that the principal component in the hot water extract from Sargassumfusiforrne with high blood-anticoagulant activity should be sulfated polysaccharides, in which the activity was positively correlated with the content of total sugar and fucose in sulfated polysaccharides. As for Undaria pinnatifida, the n-butanol extract fractionated from the 80% ethanol soluble fraction had blood anticoagulant activity, while the petroleum ether, ether, ethyl acetate, or water extract showed no bloodanticoagulant activity.     

微波辅助萃取生姜中的有效成分及其抑菌作用研究

本实验以生姜为原料,先用乙醚、正己烷、乙酸、乙酸乙脂、丙酮、乙醇为供试溶剂,确定了乙醇为生姜提取的最佳溶剂。分别以40%、50%、60%、70%、80%的乙醇进行了单因素实验,确定了70%乙醇为最佳提取浓度;再以功率为160w、320w、640w的微波,固液比为1∶10、1∶13、1∶16,对生姜进行150s、180s、210s的辐射处理。所进行的正交实验表明:生姜提取的最佳工艺条件分别为:乙醇浓度70%、微波功率320w、固液比1∶16、提取时间180s。所得生姜提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉的抑菌实验表明:供试菌的抑菌圈分别为:金黄色葡萄球菌12.3mm、大肠杆菌11.7mm、枯草芽孢杆菌12.1mm、酿酒酵母13.5mm、黑曲霉15.2mm,生姜提取物对供试菌的抑菌效果依次为:黑曲霉>酿酒酵母>枯草芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌。得到各种供试菌的最低抑菌浓度分别为:金黄色葡萄球菌10.938mg/mL、大肠杆菌43.75mg/mL、枯草杆菌43.75mg/mL、酿酒酵母菌5.469mg/mL、黑曲霉为2.734mg/mL。     

Efficacy of Liriope platyphylla on Hematology and Immune Response in Olive Flounder,Paralichthys olivaceus,Against Flexibacter maritimus Infection

The effect of different solvent‐based (methanol, ethanol, and aqueous) extracts of Liriope platyphylla at 0, 0.1, 1.0, and 2.0 mg doses on hematology and innate immune response in olive flounder, Paralichthys olivaceus, against Flexibacter maritimus is reported. The red blood cells and white blood cells significantly increased with ethanol and aqueous extracts with any dose against F. maritimus while the hematocrit level significantly increased with methanol or ethanol extracts. However, the hemoglobin content significantly increased irrespective of the doses and type of extracts, whereas the mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin, and mean corpuscular hemoglobin concentration significantly decreased. The lymphocytes and monocytes significantly increased in all doses and extracts, whereas neutrophils increased in ethanol or aqueous extracts. However, the thrombocytes level neither the doses nor extracts did not significant changes to the control against pathogen. Total protein and globulin levels significantly increased with all the doses of ethanol extract while does not significant change in methanol extract. The phagocytic activity and complement activity were significantly enhanced with any dose of ethanol extract while with aqueous extract it was only at 1.0 and 2.0 mg doses. At all the doses of each extract significantly enhanced the leucocytes activity against F. maritimus. The results confirm that the ethanolic and aqueous extracts of L. platyphylla stimulate the immune response against F. maritimus in P. olivaceus.     

仙鹤草乙醇提取物在急性肺损伤中的作用研究

为探讨仙鹤草乙醇提取物在脂多糖诱导急性肺损伤中的作用,使用NIH雄性小鼠40只,随机分为机分为空白组、模型组与实验组(相当于仙鹤草生药8g/kg组,16 g/kg组和24 g/kg组),每组8只。试验组以仙鹤草乙醇提取物连续灌胃(qd×5 d),空白组和模型组以等量N.S.灌胃。末次灌胃后以脂多糖(LPS)2.5 mg/kg气管滴注建立急性肺损伤模型。建模24 h后以酶联免疫法检测血浆前列腺素E2(PGE2)、白介素-10(IL-10)和环氧化酶-2(COX-2)含量。结果与模型组相比,仙鹤草乙醇提取物8 g/kg组,16 g/kg组和24 g/kg组血浆PGE2和COX-2水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,仙鹤草乙醇提取物8 g/kg、16 g/kg、24 g/kg组血浆IL-10水平显著升高(P<0.05)。结论仙鹤草乙醇提取物可能通过抑制COX-2表达,降低PGE2生成,并促进IL-10的生成对急性肺损伤产生保护作用。     

正交试验优选诃子醇提工艺研究

采用4因素3水平正交设计实验,并建立以紫外分光光度法(UV)测诃子中没食子酸的含量方法,对影响诃子中没食子酸提取工艺的因素进行了系统考察。结果发现,以没食子酸得率作为考察指标,影响提取率的主次因素为:D(提取次数)>B(料液比)>A(提取浓度)>C(提取时间),最佳提取工艺条件为:60%乙醇浓度,提取时间90min,料液比12mL/g,提取次数为3次。     

浒苔提取物对太平洋牡蛎受精卵孵化的抑制效应

针对2007-2009年间在黄海海域形成"绿潮".的大型绿藻浒苔(Enteromorpha prolifera).研究了其3种不同极性有机溶剂(甲醇、丙酮、氯仿)提取物对太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)受精卵孵化的影响.结果表明.在48 h内.浒苔的甲醇和丙酮提取物对太平洋牡蛎受精卵孵化有较强的抑制作用.高浓度提取物能够完全抑制太平洋牡蛎受精卵孵化至D型幼虫.而氯仿提取物对太平洋牡蛎受精卵孵化的影响没有明显的浓度-效应关系.应用乙酸乙醋和石油醚对浒苔的甲醇提取物进行液-液萃取.并探讨了乙酸乙醋相和石油醚相中的浒苔提取物对牡蛎受精卵孵化的影响.结果表明.石油醚相和乙酸乙醋相中的浒苔提取物对牡蛎受精卵孵化均有很强的抑制效应.上述研究表明.浒苔中存在能够抑制太平洋牡tfi受精卵孵化的活性物质.这类物质应具有较高的极性.     

镉在海藻中的化学形态

利用化学试剂逐步提取法研究了紫菜、海带、裙带菜和羊栖菜中镉的存在化学形态。研究结果表明:镉以多种化学形态存在于4种海藻中,1 mol/L氯化钠提取态镉和 2% 醋酸提取态的镉所占比例较大,两者约占总镉含量的76.3%～92.9%。0.6 mol/L盐酸提取态、去离子水提取态和80%乙醇提取态镉所占比例较小,其中乙醇提取态(离子态镉)约仅占总镉含量的0.4%～9.2%,且对于4种海藻,紫菜中的离子态镉所占比例最低(均小于1%)。实验进一步证实以海藻中总镉含量作为检测标准不能准确反映海藻及其制品的食用安全性,因此亟需建立海藻中针对毒性较强的离子态镉的检测标准限量和快速有效的检测方法,以保障我国海藻产业和出口创汇经济的顺利发展。