不同体色福瑞鲤2号肌肉品质分析

为探究鲤不同体色个体肌肉品质的差异,本研究以福瑞鲤2号(Cyprinus carpio)青灰色个体(BG)和全红个体(WR)为研究对象,通过检测其肌肉色泽、氨基酸、脂肪酸和质构指标,来评价这2种体色福瑞鲤2号肌肉品质的差异。结果表明：BG的b*^{值显著高于}WR(P<0.05);出肉率以及肌肉的水分、粗脂肪、粗蛋白和灰分无显著差异(P>0.05);不同体色福瑞鲤2号的肌肉中均能检测出17种氨基酸,其中人体必需氨基酸7种,非必需氨基酸10种。甘氨酸(Gly)、脯氨酸(Pro)、组氨酸(His)和半胱氨酸(Cys)在2组间差异不显著(P>0.05),其它氨基酸在2组间存在显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01),两种体色福瑞鲤2号之间ΣEAA/ΣTAA没有显著差异(P>0.05);BG肉豆蔻酸(C14:0)显著高于WR(P<0.05),BG的饱和脂肪酸含量较WR稍高,WR的单不饱和脂肪酸含量较BG稍高,两者多不饱和脂肪酸含量相近;WR的弹性和咀嚼性显著高于BG(P<0.05)。研究结果显示体色对福瑞鲤2号的肌肉品质有影响,本研究为鱼类肉质性状改良提供基础数据和参照依据。     

不同体色鲤的生长、酪氨酸酶活性、黑色素含量及基因表达比较

‘福瑞鲤 2 号’鲤(Cyprinus carpio)在繁育过程中会出现橘红色个体, 为了探讨鲤体色分化与生长性能的相关性, 利用‘福瑞鲤 2 号’构建具有青灰色和橘红色个体的家系, 并对其生长性状、酪氨酸酶活性、黑色素含量、黑色素合成通路(ko04916)及生长激素合成、释放和效应通路(ko04935)相关基因的表达水平进行比较。结果显示, 青灰色组 3 月龄体重、体长、体高和体厚均极显著大于橘红色组(P＜0.01), 其体长/体高显著大于橘红色组(P＜0.05)。青灰色组皮肤中酪氨酸酶活性和黑色素含量均显著高于橘红色组(P＜0.05)。与青灰色组相比, dct、mc1r、mitfb、tyr 和 tyrp1 等 12 个黑色素合成通路(ko04916)基因在橘红色组皮肤中的表达量显著(P＜0.05)或极显著降低(P＜0.01), 且 gh、ghr 和 igf2 等 6 个生长激素合成、释放和效应通路(ko04935)基因在橘红色组肌肉中的表达量也显著(P＜0.05)或极显著 (P＜0.01)降低。此外, 代谢通路内基因呈现共表达模式, 代谢通路间共有基因在组织间呈现相似表达趋势。研究表明, 鲤体色变异与黑色素合成通路存在密切关系, 且不同体色个体表现出生长差异, 推测与体色和生长调控通路间存在相同基因有关。     

应用RNAi技术构建的转基因鲤的检测分析

将构建携带H1启动子的肌肉生长抑制基因的真核表达载体,通过显微注射技术导入鲤受精卵核区附近,获得了一批具有RNAi表型的转基因鲤,PCR和分子杂交检测证实外源基因整合到受体鱼的基因组中,阳性率为32.78%;一龄鱼的生长实验表明,转基因鲤比普通鲤平均生长快0.99倍,其体高和体厚分别平均增长0.22和0.26倍,其中有31.82%的群体平均体厚是普通鲤的1.6倍。结果显示,该质粒表达的发夹环型dsRNA可以有效降解其转录产物,对阻抑肌细胞中同源基因的表达、鲤肌肉的再生能力增强起到了重要作用。这种抑制作用表现为鲤背部肌肉增厚、体质量增加,说明该基因经转录产生的双链RNA在鲤体内具有RNAi效应。RNAi技术为获得具有特殊功能的转基因鲤提供了新的手段。     

不同饲料对福瑞鲤肌肉营养成分的影响

正福瑞鲤具有体形好、生长速度快、适应能力强、繁殖力强等优点,在宁夏区内推广11万亩以上,已初步形成规模。试验以宁夏主导养殖水产品种福瑞鲤作为研究对象,比较投喂大豆、大麦等粮食搭配(以下简称试验组)与投喂配合饲料(对照组)两种模式对福瑞鲤肌肉一般营养成分的影响,旨在为进一步开展福瑞鲤健康养殖模式、肉质改良研究提供科学依据。经30天饲养后,分别测定福瑞鲤肌肉水分、粗蛋白质、粗脂肪、钙、     

福瑞鲤选育家系不同养殖阶段的生长差异分析

为了进一步观察最佳线性无偏预测(best linear unbiased prediction,BLUP)家系选育方法在福瑞鲤(Cyprinus carpio)继代选育中的潜力,该研究测量了继续选育第2代家系群体不同养殖阶段的体质量和形态性状。结果表明,生长快速家系群福瑞鲤早期(4月龄)生长速度较慢,到后期则生长加快,其体质量增长表现出明显的优势。在体型方面,随着养殖时间的延长,福瑞鲤各选育家系群的体厚/体长增加,体高/体长降低,逐渐呈现其体型修长的特征;同时2个越冬期的成活率均达到了94%以上。结果表明通过BLUP家系选育对福瑞鲤长期选育是可行的。在此基础上,通过主成分分析发现,福瑞鲤生长性状第一主成分是体质量;对不同生长时期的体质量进行相关性分析,发现9月龄、14月龄、21月龄鱼的体质量与24月龄的相关系数均达到极显著水平(P0.01),分别为0.851、0.897和0.957。因此,在福瑞鲤继续选育过程中,进行早期个体选择值得尝试。     

鲤四种经济性状的微卫星标记分析

获得与经济性状相关的分子标记或基因是开展该性状分子育种的先决条件。本文利用300个微卫星标记检测了以柏氏鲤和荷包红鲤抗寒品系杂交F2代1个家系、92个个体的基因型,回归分析了其体长、体厚、体高和体重4种经济性状的GLM单标记。Permutation检验结果显示：有23个标记分别与体长、体厚、体高和体重具有显著相关性（P〈0.05）,其中,HLJ44、HLJE28、HLJ1148、HLJ1329、HLJ464与这4种性状极显著相关（P〈0.01）。对同一标记不同基因型之间进行了多重比较,找到了与这4种性状相关的基因型。此研究还发现75个微卫星标记发生了偏分离,其中11个偏分离标记与性状显著相关,偏分离指数分析表明,基因型的偏分离可能与性状的选择压力和选择方式有关。本研究获得的与鲤4种性状相关的标记及基因型,为鲤的分子标记辅助育种（MAS）和生长性状的遗传机制研究提供了有效的依据。     

“福瑞鲤2号”和乌克兰鳞鲤在天津地区池塘养殖综合效益对比分析

正"福瑞鲤2号"的原始亲本为建鲤、黄河鲤和黑龙江野鲤,育种策略是通过完全双列杂交建立自交、正反交家系构成选育基础群体,以生长性状和成活率作为主要指标,采用数量遗传学BLUP(最佳线性无偏预测)分析,结合家系选育的综合选育技术,连续5代选育[1]。"福瑞鲤2号"体形为深受养殖户和消费者喜爱的长体形,体长/体高为3.63,适宜在全国各地人工可控的淡水水体中养殖[2]。为探索"福瑞鲤2号"在天津养殖的适应性,于2020年在天津市农兴旺畜牧水产养殖场进行了"福瑞鲤2号"和乌克兰鳞鲤的池塘养殖对比试验。     

建鲤新品系家系F4代育种效果分析

利用通过2代群选和4代家系选育的建鲤新品系与市场上的普通建鲤和自繁的福瑞鲤,进行中试和小试,测定经过多代选育的建鲤新品系的育种效果,中试验结果表明建鲤新品系F4比普通建鲤生长速度快20%左右,小试结果表明建鲤新品系比福瑞鲤生长速率快,远高于普通建鲤生长速率。结果表明,建鲤经过多代选育育种效果明显。     

浅析闽西地区福瑞鲤新品种推广现状与前景

<正>鲤鱼是我国主要淡水养殖品种之一,也是目前养殖地域最为广泛的一种鱼类。淡水鱼类中鲤鱼产量在全国淡水鱼类养殖产量中居草鱼和鲢鱼之后,排名第三,占全国淡水鱼类养殖产量12%左右,对池塘养殖增产增收具有极其重要的作用。福瑞鲤是中国水产科学研究院淡水渔业研究中心以建鲤和野生黄河鲤为原始亲本进行杂交获得的鲤鱼新品种,2011年获得国家农业部水产新品种证书。在相同条件下,同其他鲤鱼品种相比,福瑞鲤具有生长快(比普通鲤鱼提高20%以上,比建鲤提高13.4%)、体形好(体长/体高约     

福瑞鲤夏花养成鱼试验总结

福瑞鲤于2011年获得了水产新品种证书,品种登记号为GS-01-003-2010,是国家大宗淡水鱼产业技术体系岗位科学家、中国水产科学研究院淡水渔业研究中心董在杰研究员及其团队从1998年起,以生长速度及体型体色为主要选育指标,以建鲤和野生黄河鲤为基础群体,通过1代群体选育和连续4代BLUP家系选育后获得的杂交新品种。从2008年起,陆续在山东、江苏、四川等地进行了生产性养殖对比试验,试验得出"福瑞鲤"的生长性状良好,具有生长     

中国鲤育种的主要方法、遗传解析及展望

水产种业是水产养殖业发展的基础,是渔业战略性、基础性核心产业,也是保障未来养殖业绿色、健康发展的核心竞争力。随着水产业全球化、市场化的发展,我国种业正面临着前所未有的机遇与挑战。特别是随着生物技术的快速发展,水产育种也由传统的选择育种和杂交育种,发展至细胞工程育种、分子标记辅助育种、全基因组选择育种、分子设计育种和基因组编辑等精准设计育种。水产动物重要经济性状的基础研究及其遗传改良技术的创建驱动着我国水产种业的蓬勃发展,截止2022年,通过全国水产原种和良种审定委员会审定并由农业农村部公告的水产新品种就有266个,其中鲤新品种数量最多,为31个,表明鲤育种工作卓有成效。本文重点回顾了我国鲤的种质和基因组资源现状,鲤的主要品种及其育种方法;简要介绍了鲤生长、抗病、体色、饲料转化率等经济性状关联的遗传研究进展,并由此提出了新时代背景下鲤种业的发展方向和措施建议,以期为我国鱼类育种提供借鉴。     

草鱼AdipoR1-B基因克隆、组织分布及其表达的营养调控

为探讨Adipo R1-B在鱼类糖类和脂质代谢中的作用,本实验采用RACE方法获得了草鱼Adipo R1-B的全长c DNA序列(登录号:KP733846),利用生物信息学技术对该基因及其所编码蛋白的结构特征进行了分析;采用实时定量PCR技术,检测了Adipo R1-B在19个不同组织中的表达特性以及高糖(45%)、高脂(8%)和高糖高脂饲喂对草鱼肝脏中该基因表达的影响。结果显示,草鱼Adipo R1-B c DNA全长2186 bp,其中开放读码框为1122 bp,编码373个氨基酸;跨膜结构分析表明草鱼Adipo R1-B为典型的7次跨膜蛋白;同源性分析结果显示,草鱼Adipo R1-B与其他物种的Adipo R1-B高度同源(氨基酸相似度78%以上),并与斑马鱼Adipo R1-B的进化关系最近;组织分布结果显示,Adipo R1-B在草鱼肝脏中表达量最高,中枢神经系统和红肌次之;此外,高脂和高糖高脂饲喂均能够显著提高草鱼肝脏中Adipo R1-B的表达水平。因此,草鱼肝脏中Adipo R1-B的表达水平受到日粮中脂类水平的调控,推测该受体可能在调节鱼类脂质代谢中发挥重要作用。     

杜仲对草鱼生长、肌肉品质和胶原蛋白基因表达的影响

为研究杜仲对草鱼生长性能、肌肉品质及胶原蛋白基因COL1A1和COL1A2表达的影响,实验采用初始体质量为(215.0±0.4)g的草鱼120尾,随机分为2处理组(每组3重复,每重复20尾鱼),分别饲喂基础饲料(对照组)和添加2%杜仲的实验饲料(杜仲组),养殖时间为8周。结果显示,与对照组相比,添加2%杜仲对草鱼生长性能无显著影响,但能显著增加肌肉、皮肤和肝脏胶原蛋白水平,增加肌肉总必需氨基酸(TEAA)、总氨基酸(TAA)水平。2%杜仲可显著降低草鱼肌肉的冷冻失水率、离心失水率,但对肌纤维密度和肌纤维直径无显著影响。在胶原蛋白基因表达方面,2%杜仲显著增加了第4周、8周时草鱼的肌肉、皮肤和第8周时的肝脏组织COL1A1、COL1A2基因m RNA表达量。研究表明,饲料中添加2%杜仲可改善大规格草鱼的肌肉品质。     

In vivo fish models for visualizing Aeromonas hydrophila invasion pathway using GFP as a biomarker

The invasion pathway of Aeromonas hydrophila in vivo was studied in Crucian carp (Carassius auratus gibelio) with a virulent strain A. hydrophila J-1 transformed with a plasmid encoding green fluorescent protein (pGFPuv) (A. h J-1^GFP), which had similar virulence characteristics (haemolysin, extracellular proteases production, toxicity for EPC cells, survival in fish serum and LD₅₀ value) as the parent strain. Fish were divided into four experimental groups: (1) normal fish; (2) bacteria bath challenged, unwounded fish; (3) skin artificially wounded by scalpel, bacterial bath challenged fish; and (4) skin mucus layer partially removed by paper towel, bacterial bath challenged fish. The number of bacteria from blood, gills, kidney, muscle, liver and intestine were detected at 2, 4, 8, 12, and 24 h post-challenge. High bacterial numbers were observed in the muscle of the artificial wound group, in the kidney of the mucus removed group and in the gills of all groups. In conclusion, the gills and damaged skin are likely to be the main routes of entry for A. hydrophila, and GFP can be used as a real-time biomarker to study intimate host–pathogen interaction in fish.     

金属硫蛋白基因对转基因鲤及实验动物体内重金属累积的影响

金属硫蛋白(metallothiontine,简称MT),又称重金属结合蛋白,是一种低分子量富含半胱氨酸的金属结合蛋白。锌、铜、镉等多种金属元素均可在体外或体内诱导组织MT大量合成。已有研究表明,MT在微量元素代谢、重金属富集、环境污染的清除等方面起重要作用,因此, 选择恰当的启动子是保证外源基因在转基因鱼中成功表达的最重要因素。在转基因鱼的研究过程中,使用的转基因材料从最初阶段的人及其它哺乳类如牛、羊等的生长激素基因发展到现在的鱼的生长激素基因,启动调控顺序也由小鼠的重金属螯合蛋白(MT-1)基因发展到鱼的重金属结合蛋白基因,如虹鳟金属硫蛋白基因、鲤β-肌动蛋白基因、美洲鲽抗冻蛋白基因以及鲤金属硫蛋白     

草鱼生长相关的微卫星标记在选育群体中的验证

生长性状是水产动物遗传育种中的重要经济性状,利用与性状相关的分子标记与育种相结合的手段,可以大大加速育种进程。在对草鱼生长性状的前期研究中,采用数量性状位点(QTL)定位的方法,在1号连锁群中发现了2个与生长相关的QTL。在此基础上,实验利用这2个QTL侧翼的2对微卫星标记(CID391_2、CID1512、CID973_1和CID254_1),对长江草鱼选育群体的480个个体进行分析,以期基于草鱼QTL定位结果,对草鱼生长相关的微卫星标记在选育群体中进行验证。结果显示:(1)4个微卫星标记在该群体中均具有高度多态性,其中各位点观测等位基因数(N_a)为12～23个,有效等位基因数(N_e)为4～12个,观测杂合度(H_o)为0.607～0.904,期望杂合度(H_e)为0.751～0.902;(2)利用方差分析及多重比较对4个多态性的微卫星标记与选育草鱼群体的生长性状(体质量和体长)进行关联分析,发现CID391_2在雌性个体中,各基因型与体质量和体长之间均无显著差异;而在雄性个体中,各基因型与体质量和体长之间差异显著。CID1512、CID973_1和CID254_1在雌性或雄性个体中,各基因型与体质量和体长之间均具有显著差异。研究表明,对草鱼生长相关的微卫星标记在选育群体中的验证结果,为进一步开展草鱼生长性状QTL定位研究和基于QTL结果的分子标记辅助育种(MAS)实践奠定理论基础。     

Screening of new Paenibacillus polymyxa S3 and its disease resistance of grass carp (Ctenopharyngodon idellus)

A new strain of Paenibacillus polymyxa S3 with antagonistic effects on 11 major fish pathogens (especially Aeromonas hydrophila), but had no toxicity to grass carp, was screened from the sediment of fishponds. In vivo colonization studies showed that strain S3 could be colonized and distributed in the gill and abdomen of the grass carp. Bioassay results showed that the weight growth rate of grass carp in the strain S3 oral group (16.01%) and strain S3 immersion group (16.44%) was significantly higher than those of the control group (8.61%). At the same time, the activities of ACP, AKP, CAT and GSH-Px in the serum of grass carp in oral and immersion groups were significantly higher than those of the control group. In addition, the treatment with strain S3 could significantly upregulate the expression of the antioxidant-related genes and immune-related genes Keap1, Nrf2, C3, LZM, IgM, TLR-4 and MyD-88 in grass carp tissues. The challenge test showed that strain S3 treatment significantly increased the survival rate of grass carp infected with Aeromonas hydrophila. Whole genome sequencing analysis showed that strain S3 had 16 active metabolite gene clusters, indicating that it had abundant gene resources, which provided important support for its development for fish microecological preparations. In summary, a new strain of Paenibacillus polymyxa S3 with antibacterial activity against a variety of fish pathogens was screened in this study and its probiotic function was evaluated, proving its potential value in fisheries.     

草鱼SREBP-1基因的克隆及糖对其在肝脏中表达的影响

固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控糖脂代谢相关基因表达的关键核转录因子。为获知草鱼SREBP-1基因的序列及其在肝脏中的表达规律,本实验采用同源克隆和RACE方法获得了草鱼SREBP-1基因的部分cDNA序列,并通过生物信息学方法对该基因及所编码蛋白的结构特征进行了分析;采用实时荧光定量PCR技术,对SREBP-1基因在8种不同组织的表达规律及低糖(糖含量24%)和高糖(糖含量42%)投喂条件下肝脏中的表达水平进行了研究。结果显示,所克隆到的草鱼SREBP-1基因cDNA长4 760 bp,其中包括开放读码框3 426bp,编码1 141个氨基酸;草鱼SREBP-1具有一个典型的碱性螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链结构(bHLH-zip);氨基酸序列比对结果显示,草鱼SREBP-1与其他鱼类的同源性在76%~88%之间,与斑马鱼的进化关系最近;草鱼SREBP-1基因在脑中的表达量最高,肝脏和肠次之,在肾脏、脾脏、肌肉、脂肪和性腺中均有少量表达;与对照组相比,SREBP-1基因在高糖诱导下表达量显著提高(P0.05),低糖诱导下没有显著性差异。研究表明,在高糖负荷条件下,草鱼肝脏中SREBP-1可能会促进糖的利用和转化,从而参与糖代谢调节过程,为丰富鱼类糖代谢调控机理提供研究资料,并有望为提高鱼类对饲料糖的利用效率提供理论依据。