水产品中重金属和药物残留的检测

随着消费水平的提高,人们对水产品的质量安全越来越重视。重金属和药物残留的检测是衡量水产品质量安全的一个重要环节。实验分别采用快速检测法和标准检测法,对鱼、虾、蟹和贝类进行砷、铅、铬、孔雀石绿、氯霉素的检测,探讨在水产品质量安全监管中快速检测法和标准检测法的应用效果。     

锦鲤疱疹病毒(KHV)的检测技术概述

本文介绍了锦鲤疱疹病毒(KHV)的临床感染症状和5种检测手段,包括PCR检测法、细胞培养分离法、透射电镜观察法、ELISA检测法、间接免疫荧光检测法(IFAT)等,旨在通过进一步了解锦鲤疱疹病毒病的发病机理,为KHV病毒株的分离纯化以及相关疫苗的研制提供参考。     

养殖的3龄暗纹东方鱼屯毒性检测

对达到性成熟的养殖的 3龄暗纹东方鱼屯的肝脏和卵巢毒性用小鼠生物检测法进行了检测 ,1 2h内小鼠无任何不良反应 ,表明在肝脏和卵巢供试液中均未检测出毒性     

水产动物传染病快速检测方法研究进展

介绍了几种简单、快速、准确检测鱼病的方法。包括使用选择性培养基,免疫诊断技术中的荧光抗体技术,酶标记免疫诊断、协同凝集反应、酶联免疫吸附检测法、斑点酶联免疫吸附技术,以及核酶探针技术。     

水产品中四环素类抗生素残留检测方法的比较和探讨

介绍了水产品中四环素类抗生素残留的高效液相色谱检测法,并通过对实际工作中两种常用的四环素类抗生素残留检测方法的比较研究,建立了一种适合于日常检测需要的液相色谱分析方法.该方法简便、准确、快速,检出限能够满足水产品中渔药残留限量的要求.     

养殖的3龄暗纹东方鲀毒性检测

对达到性成熟的养殖的3龄暗纹东方Tun的肝脏和卵巢性用小鼠生物检测法进行了检测，12h内小鼠无任何不良反应，表明在肝脏和卵巢供试液中均未检测出毒性。     

鱼类饲料中黄曲霉毒素B1检测技术研究进展

综述了黄曲霉毒素B_1的毒理效应及其危害,介绍了国内外现有的检测方法,比较了各种方法在实际应用中的优缺点,得出结论:免疫学检测法为半定量、定性检测方法,多应用于初筛或者批量检测中,准确性稍差;理化检测方法为定性、定量检测方法,稳定性、重复性、准确性较高,且液相色谱质谱联用法为国标的检测方法之一;近年来新兴起来的检测方法虽然能够达到检测效果,但仍需进一步研究。最后对检测方法进行展望。     

饲料中沙门氏菌的污染现状及检测方法探究

沙门氏菌是一类革兰氏阴性、长有鞭毛的兼性需氧菌,多数存在于动物的排泄物中,其引起食物中毒的发病率极高.本文对沙门氏菌的三种主要检测方法:微生物学检测法、酶联免疫吸附法、PCR快速检测技术的实验方法、注意事项以及优缺点进行探究,对于更为准确快速鉴定沙门氏菌,防止沙门氏菌进一步蔓延具有一定的意义.     

次黄嘌呤生物传感器检测鱼类新鲜度之研究

检测鱼类新鲜度的常规方法是测定其总挥发性盐基氮（ＴＶＢ－Ｎ）或细菌菌落总数，手续繁琐且代价较高，本文提出的方法是一种新颖的快速检测法。实验表明，在鱼的腐败过程中，总挥发性盐基氮（ＴＶＢ－Ｎ，国标）、细菌落落总数和次黄嘌呤（Ｈｘ）的量之间皆存在着良好的相关性。因此，鱼腐烂而累积于组织的次黄嘌呤量可以指示鱼类的新鲜度，生物传感器快速检测法将取代现有的常规手段。     

三种CRISPR/Cas9基因敲除变异检测方法的比较分析

比较三种常用的CRISPR/Cas9基因敲除检测变异方法,从准确性、耗时、成本和应用限制等方面进行评估。采用T7核酸内切酶I、限制性内切酶和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别对利用CRISPR/Cas9方法敲除的fibinb和ngs基因的50尾斑马鱼(Danio rerio)突变纯合个体和突变杂合个体进行检测,用野生型个体作对照;同时用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对CRISPR/Cas9方法敲除的ogn和ddb1基因的突变杂合个体进行了检测。结果表明:三种方法均能够区分突变杂合个体,其中T7核酸内切酶I检测法耗时最短,但该方法不能用于鉴定突变纯合个体;限制性内切酶检测法能够用于鉴定纯合个体,但需要有特异性的识别位点;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法能够区分纯合和杂合个体,对序列无依赖性,能够检测出序列中存在的所有变异。成本上,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法最经济;限制性内切酶的价格存在较大的差异,因此检测成本依赖于酶的价格。三种检测方法各有优缺点,在应用实践中可根据试验需要选择合适的方法。     

中国对虾血细胞吞噬功能的研究↑（*）

本研究建立了检测中国对虾血细胞吞噬功能的橙检测法。该检测法可同时直观地观察中国对虾血细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬和杀伤情况：一项试验可同时获得吞噬和杀伤百分率，吞噬和杀伤指数四个指标。用本法研究四种免疫增强剂对时虾血细胞吞噬功能的作用，结果表明，他们均可提高血细胞对金葡菌的吞噬活力以及血淋巴中的溶菌活力和酚氧化酶活力，但经统计学分析，结合攻毒试验的结果，浙农Ⅰ号和湖州Ⅰ号的免疫效果优于湖州Ⅱ号和湖州Ⅲ号。     

套式PCR在中华绒螯蟹颤抖病病原螺原体检测中的应用

提取人工分离、培养的中华绒螯蟹颤抖病病原螺原体的基因组DNA,并进行梯度稀释作为PCR模板,根据GenBank已有螺原体16S rRNA基因序列设计出套式PCR外部引物,将螺原体特异性引物作为内部引物,利用套式PCR对梯度稀释的模板进行扩增,得到271 bp产物,对照已有的一步PCR检测法,检测灵敏度提高100倍,最小检测达15.5 fg数量级螺原体DNA,从而建立更为灵敏的中华绒螯蟹颤抖病病原螺原体的检测方法。     

应用双抗夹心ELISA法检测皱纹盘鲍致病病原—创伤弧菌的研究

以皱纹盘鲍脓足病致病病原－ － 创伤弧菌为抗原,制备兔抗血清,抗体纯化后以辣根过氧化物酶标记,建立检测创伤弧菌的双抗夹心ＥＬＩＳＡ 检测法。结果表明,双抗夹心ＥＬＩＳＡ 法有较高的灵敏度,可检出含菌１０４ 个／ｍｌ 的菌悬液。与创伤弧菌对照菌株有明显的阳性反应不与副溶血弧菌、溶藻胶弧菌、河流弧菌等８ 株对照菌株产生影响检测结果的交叉反应。应用该法检测３０ 份病鲍样品,阳性检出率为６６ ．７ ％ 。     

鱼肠道弧菌单克隆抗体流式细胞术检测技术的研究

以抗鱼肠道弧菌单克隆抗体为基础,结合流式细胞术,根据荧光信号强弱比例确定检测鱼肠道弧菌时所需单克隆抗体的最优反应量为200μL,最佳反应时间为45min。在最优反应条件下,抗鱼肠道弧菌单克隆抗体可特异性识别鱼肠道弧菌,阳性荧光信号比例达12.9%;对不同密度的鱼肠道弧菌进行重复性试验,变异系数均在5%以内,说明流式细胞术具有较好的精密度;人工感染健康牙鲆试验表明,流式细胞术检测法能快速从发病鱼的鳃、肝、脾、肾、腹水等部位检测出病原菌,而对照组为阴性;本试验建立的鱼肠道弧菌单克隆抗体流式细胞术检测技术为鱼肠道弧菌的快速检测提供了新方法。     

德研究人员发明鸡肉细菌快速检测法

德国环境与自然保护联盟前不久在对德国几家大型连锁超市出售的鸡肉进行抽样检测后发现,半数以上鸡肉样本合有耐药病菌,引发人们对家禽养殖业大量使用抗生素的担忧,因为滥用抗生素可能导致部分细菌产生耐药性,人一旦感染这些耐药细菌可能面临有药难医的严重后果。为此德国科研人员推出鸡肉产品细菌快速检测法。     

应用双抗夹心ELISA法检测皱纺盘鲍致病病原—创伤弧菌的研究

以皱纹盘鲍脓足病致病病原－创伤弧菌为抗原,制备兔抗血清,抗体纯化后以辣根过氧化物酶标记,建立检测创伤瓜菌的双抗夹心ＥＬＳＩＡ检测法。结果表明,双抗夹心ＥＬＳＩＡ法有较高的灵敏度,可检出含菌１０＾４个／ｍｌ的菌悬液。     

WSSV和IHHNV对虾病毒的胶体金免疫层析快速检测

为了快速、方便地检测出这2种病毒,研究将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金免疫层析技术快速、简便、直观的优点结合起来,建立了同时检测2种对虾病毒(WSSV和IHHNV)的同步PCR-胶体金免疫层析检测方法。采用了生物素标记和地高辛(Digoxigenin)标记引物。PCR扩增产物利用胶体金免疫层析技术进行检测。胶体金免疫检测试剂条的检测线(T线)处的层析膜处点上地高辛的单抗,经地高辛标记的PCR扩增产物可在T线上被检测到,在10 min内即可得到检测结果。同时,在PCR过程中使用UNG(尿嘧啶-DNA糖基酶),极大地控制了遗留污染。通过此方法检测对虾WSSV和IHHNV病毒的灵敏度均可达到10~100个拷贝,高于国家标准PCR检测法10~100倍。此检测方法让工作人员避免了接触有毒和诱导突变的试剂,免除基层检测实验室购买电泳设备和荧光检测系统的投资。     

水产品中孔雀石绿、结晶紫药物残留检测方法的优化

对《水产品中孔雀石绿和结晶紫的残留量的测定高效液相色谱荧光检测法》(GB/T 20361—2006)中提取、浓缩等前处理过程进行了优化。结果表明，硼氢化钾的体积为4 mL、二氯甲烷为25 mL，且样品浓缩至近干时孔雀石绿、结晶紫回收率均较高，孔雀石绿回收率达91.0%以上，结晶紫回收率在72.5%以上。指出，优化后的方法回收率高，分离效果好，可用于水产品中孔雀石绿、结晶紫药物残留检测。     

武隆山羊弓形虫病感染性抗体检测与分析

为明确山羊弓形虫病在武隆地区的流行情况,通过颈静脉采血,分离血清样本,利用ELISA抗体检测法,对武隆地区多个乡镇的养殖场进行弓形虫感染性抗体的抽样检测与分析。结果表明,武隆地区存在山羊弓形虫病阳性病例,平均阳性检出率为48%;3种养殖模式中分散养殖模式的检出率最高(60%),专业羊场养殖模式检出率最低(38%);板角山羊、渝东黑山羊和波尔山羊的阳性检出率无明显差异;山羊的不同生长阶段中青年羊的阳性检出率高达56.7%。通过检测与分析,明确了山羊弓形虫病在武隆的流行趋势,也为该病的防控提供了理论依据。     

锦鲤和锦鲫类养殖水体中硝化细菌的富集和分离培养

应用富集培养技术,从锦鲤和锦鲫类的养殖水体中分离得到6株具有硝化作用的菌株,分别命名为a1、a2、a3、a4、a5、a6菌株,其中a1、a2、a4、a5、a6菌株为杆状革兰氏阴性菌,a3菌株为球状革兰氏阴性菌,经纯度检测,均为严格的自养硝化细菌。试验结果表明,通过优化分离培养基及格里斯试剂检测法,有效提高了分离效率,所得菌株均为革兰氏阴性菌,其中5株为杆菌,1株为球菌。