酶联免疫吸附测定试剂盒使用中出现的问题和解决方法

自从1971年Engvall等发表了酶联免疫吸附测定(enzyme linked i mmunosorbent as-say,ELISA)用于IgG定量测定的文章后,使1986年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测量方法,即当今广泛使用的ELISA技术。酶联免疫吸附分析法是把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一种检测技术。该技术主要的依据有三点:第一、抗原(抗体)能结合到固相载体的表面仍具有其免疫活性;第二、抗体(抗原)与酶结合所形成的结合物仍保持免疫活性和酶的活性;第三,结合物与相应的抗体(抗原)反应后,结合的酶仍能催化…     

不同方法对猪瘟免疫效果验证试验

根据农业部监测计划的规定,猪瘟抗体监测方法是酶联免疫吸附试验(抗体阻断ELISA、抗体间接ELISA)和抗体正向间接血凝试验,许多规模猪场场主偏信宣传,对猪瘟抗体采用正向间接血凝试验监测结果持怀疑态度,因此笔者通过正向间接血凝试验和酶联免疫吸附试验对3个规模化猪场66份血清样品进行了猪瘟免疫效果验证试验。     

鱼类免疫技术新进展

介绍了几种免疫学新技术（单克隆抗体、酶联免疫吸附、葡萄球菌A蛋白、荧光抗体）在鱼病学中的应用情况。     

酶联免疫吸附法在水产养殖中的应用

简要介绍了酶联免疫吸附法，并且就其在水产养殖中的应用进行了较详细的评述，主要包括ELISA用于水产品安全检测、水产动物病原菌检测和水产养殖其它领域的应用，旨在能促进该技术在水产养殖领域中的发展。     

现代生物技术检测对虾病毒在商业化应用中的限制

对虾病毒性疾病有多种,如白斑病毒、桃拉病毒、黄头病毒等。多年来,科研人员对病毒病的诊断方法进行了大量的研究,现代生物检测技术得到较多应用,如酶联免疫吸附(ELISA)、聚合酶链式反应(PCR)、核酸探针斑点杂交等．发表了较多提取病毒、改进病毒检测方     

饲料中沙门氏菌的污染现状及检测方法探究

沙门氏菌是一类革兰氏阴性、长有鞭毛的兼性需氧菌,多数存在于动物的排泄物中,其引起食物中毒的发病率极高.本文对沙门氏菌的三种主要检测方法:微生物学检测法、酶联免疫吸附法、PCR快速检测技术的实验方法、注意事项以及优缺点进行探究,对于更为准确快速鉴定沙门氏菌,防止沙门氏菌进一步蔓延具有一定的意义.     

互动平台

江苏读者杨潮:能不能列出各种疫病实验室诊断方法的中文、英文及简写?百事通:常用的疫病检测技术有:琼脂凝胶扩散试验穴agar-geldiffusionAGP雪、血细胞凝集试验穴HemadsorptinAgglutinate,HA雪和血细胞凝集抑制试验穴HemadsorptinInhibitiontest,HI雪、神经氨酸酶抑制试验穴NeuraminidaseInhibitiontestNI雪、病毒中和试验穴VirusNeutralizationTest,VNT雪、间接免疫荧光法(indirectimmunefluorescence,I-IF)、直接免疫荧光法穴directimmunefluo-rescence,DIF雪、酶联免疫吸附试验(En-zyme-LinkedImmunosorbentAssays,ELISA…     

用酶联免疫吸附受体法检测鱼类生长激素的生物活性

根据激素一受体反应的原理，结合酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体测定法（ＲＲＡ）的优点，应用我们纯化的Ａ昌鱼生长激素（ｇｃＧＨ）和大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及其特异抗体，采用鱼类肝细胞膜受体制剂，首次建立了测定鱼类ＧＨ生物活性的酶联免疫吸附受体测定法（ＥＬＩＳＡ－ＲＡ）。此法检测草鱼ＧＨ的灵敏度达０．０６３￣０．１２５ｕｇ／ｍｌ，检测大马哈鱼ＧＨ与草鱼肝膜受体结合的灵敏度达０．２５ｕｇ     

运用ELISA快速检测CPV抗体方法的建立与均衡性的研究 I.间接ELISA快速检测CPV抗体方法的建立

用蔗糖密度梯度离心和凝胶层析纯化犬细小病毒(CPV)作抗原，建立了检测CPV抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)，其特异性和稳定性良好，结果判定精确明显，易于把握。     

鱼体鲜度评价技术和方法的研究进展

鱼体在微生物和自身内源酶的作用下,容易在感官、物理、化学和微生物等方面发生质量变化,导致其迅速腐败变质,鲜度下降。鱼体鲜度的快速、无损评价在其保鲜、贮藏及运输等方面有着重要的科学意义和应用价值,将成为未来品质评价的一个重要方向。本文从微生物的快速检测(酶联免疫吸附技术(ELISA)和基因芯片检测技术)、风味物质的快速评价(电子鼻、电子舌和嗅觉可视化技术)和其他物理化学技术(近红外光谱技术、电导率及生物阻抗技术和计算机视觉技术)等方面介绍了目前鱼体鲜度快速评价的主要技术和方法,并且总结分析了国内外的这些快速检测技术的应用研究现状,展望了鱼体鲜度评价未来的发展方向。     

自贡市大安区猪瘟抗体水平的检测及其流行分析

1材料与方法1.1试验材料1.1.1对照血清:标准猪瘟阳性血清、标准猪瘟阴性血清由购买的试剂盒配备。1.1.2待检血清:采集2004年11月至2005年10月四川省自贡市大安区何市镇、大山铺镇、新店镇、三多寨镇、新民镇、永嘉乡、团结镇养猪场、户养的359头份血样,详细记录所采血样对应的猪的年龄,品种,地域分布等数据。1.1.3诊断试剂:酶联免疫吸附试剂盒购自美国IDEXX公司(批号06-03793-04)。ELISA试剂盒包括:96孔聚苯乙烯酶联板、血清稀释液、PBST洗液、稀释液Ⅰ、稀释液Ⅱ、标准猪瘟阳性血清、标准猪瘟阴性血清、抗猪IgG酶标抗体、酶标抗体稀…     

猪细小病毒病的诊断与防治

猪细小病毒病是猪的繁殖障碍病,该病的特点主要是初产母猪产弱仔、死胎、畸形胎、木乃伊。其血清学诊断方法有血凝和血凝抑制试验、中和试验、乳胶凝集试验、酶联免疫吸附试验、荧光抗体技术、核酸探针技术与PCR技术等,其中最常应用的是血凝抑制试验。该病与伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪繁殖与呼吸综合征、血凝性脑炎、布氏杆菌病、衣原体病和弓形体病引起的流产易混淆,可通过流行病学、症状、病理变化、血清学及病原分离与鉴定等方面加以区别。     

猪瘟病毒实验室诊断研究进展

猪瘟的实验室诊断中,主要有针对病毒抗原、抗体及分子生物学检测三大类方法。病原检测方法有免疫组化法、酶联免疫吸附试验(ELISA法)、免疫金标记技术等;抗体检测有免疫荧光中和试验(IFCNT)、间接血凝试验(IHA)等;分子生物学检测有反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等。     

猪细小病毒的诊断与防治

猪钿小痛毒病是猪的繁殖障碍病，该病的特点主要是初产母猪产弱仔、死胎、畸形胎、木乃伊。其血清学诊断方法有血凝和血凝抑制试验、中和试验、乳胶凝集试验、酶联免疫吸附试验、荧光抗体技术、核酸探针技术与PCR技术等，其中最常应用的是血凝抑制试验。该病与伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪繁殖与呼吸综合征、血凝性脑炎、布氏杆菌病、衣原体痛和弓形体病引起的流产易混淆．可通过流行病学、症状、病理变化、血清学及病原分离与鉴定等方面加以区别。     

鱼呼肠孤病毒(FRV)抗血清的制备及其应用

在FRV的分离和纯化基础上，本文介绍了制备FRV抗血清的几种方法。并采用不连续对流免疫电泳法(DCIE)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行FRV诊断学研究结果，同时对这两种方法检测FRV的灵敏度作了比较。     

自贡市大安区猪伪狂犬病抗体水平的检测及其流行分析

1材料与方法1.1试验材料1.1.1对照血清:标准猪伪狂犬病阳性血清、标准猪伪狂犬病阴性血清由购买的试剂盒配备。1.1.2待检血清:采集2004年11月至2005年10月四川省自贡市大安区何市镇、三多寨镇、大山铺镇、新民镇、新店镇养猪场户养的527头份血样,详细记录所采血样对应的猪的年龄、品种、地域分布等数据。1.1.3诊断试剂:酶联免疫吸附试剂盒购自美国ID EXX公司(批号06-03793-04)。ELISA试剂盒包括:96孔聚苯乙烯酶联板、血清稀释液、PBST洗液、稀释液Ⅰ、稀释液Ⅱ、标准猪伪狂犬病阳性血清、标准猪伪狂犬病阴性血清、抗猪IgG酶标抗体、…     

禽流感的诊断技术研究

禽流感可感染人类,公共卫生意义重大。由于其病毒(AIV)亚型众多,抗原性变异极快,毒株的致病性也相差很大,早期快速诊断和血清学监测就成了预防和控制禽流感的前提条件。禽流感的传统诊断方法是分离病毒和检测抗体,近年来,AIRC相继建立了血凝抑制试验(HI)、琼脂扩散试验(AGP)、神经氨酸酶抑制试验(NI)、间接酶联免疫吸附试验(ELISA)、玻片血凝抑制试验等血清学诊断技术及分子诊断技术(RT-PCR)。目前,我国专家研制成功了“禽流感H5,H7,H9亚型多重实进荧光RT-PCR检测试剂盒”,可在4h之内同时检测3个AI亚型,满足了对AI疑似病例的快速确诊需要。     

应用ELISA检测珠海市供港澳猪猪瘟抗体

<正>猪瘟在我省流行比较严重,曾造成较大的经济损失。从1988年后全省采取每年春秋两防的免疫措施,使我省的猪瘟疫情得到了全而的控制,但是猪瘟病例时有发生。为了调查我市供港澳猪猪瘟的免疫情况,应用ELISA方法检测猪瘟免疫抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)具有操作简便、     

鱼类细菌性疾病快速诊断技术进展

阐述了应用现代生物技术检测细菌性鱼病的情况，主要有：选择性培养基、免疫诊断技术、单克隆抗体技术、核酸杂交技术、聚合酶链反应技术以及电子计算机辅助技术等。     

猪圆环病毒2型快速检测方法研究进展

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)可以引起猪生殖和呼吸道疾病、断奶仔猪综合征、皮炎和肾炎等，给全球养猪业造成了严重的经济损失。快速、精准的检测方法对该病毒的防控尤为重要。对近年来国内外已发表的PCV2快速检测方法的原理、特点及检测应用进行综述，主要介绍了基于PCR的检测方法(常规PCR、巢式PCR、荧光定量PCR、多重PCR、纳米PCR、数字PCR及其他基于PCR的方法)、核酸等温扩增技术(环介导等温扩增、重组酶介导等温核酸扩增、重组酶聚合酶扩增)、基因芯片、原位杂交、液相芯片系统以及免疫学检测方法(免疫层析技术、酶联免疫吸附试验、琼脂扩散试验、斑点测点法、表面等离子体共振技术)。此外，也对相关方法的未来发展方向进行了展望，以期为我国有效防控PCV2传播和感染提供科学而全面的参考。