红笛鲷和卵形鲳鲹鳃的扫描电镜观察与功能探讨

对两种鲈形目鱼类红笛鲷Lutjanus erythopterus和卵形鲳(鱼参) Trachinotus ovatus的鳃结构进行扫描电镜观察。结果表明,红笛鲷和卵形鲳(鱼参)鳃的表面结构和微细结构与其他硬骨鱼类基本相似,鳃丝表面都具有规则或不规则分布的环形微嵴、沟、坑、孔等结构。红笛鲷的中部鳃丝表面一部分较为平坦,基部鳃丝表面则凹凸不平。红笛鲷的鳃小片高度要较卵形鲳(鱼参)鳃小片高。红笛鲷和卵形鲳(鱼参)鳃上皮的几种细胞的形态结构及数量分布存在细微的差异。红笛鲷鳃上的扁平上皮细胞界限清楚,而卵形鲳(鱼参)鳃上扁平上皮细胞表面遍布不规则的微嵴,细胞界限模糊。红笛鲷鳃丝表面的氯细胞数量多于卵形鲳(鱼参),这可能与两种鱼对生活环境、生活习性的长期演变相关。     

红笛鲷和卵形鲳鳗鳃的扫描电镜观察与功能探讨

对两种鲈形目鱼类红笛鲷Lutjanus erythopterus和卵形鲳碜Trachinotus ovatus的鳃结构进行扫描电镜观察。结果表明，红笛鲷和卵形鲳够鳃的表面结构和微细结构与其他硬骨鱼类基本相似，鳃丝表面都具有规则或不规则分布的环形微嵴、沟、坑、孔等结构。红笛鲷的中部鳃丝表面一部分较为平坦，基部鳃丝表面则凹凸不平。红笛鲷的鳃小片高度要较卵形鲳够鳃小片高。红笛鲷和卵形鲳够鳃上皮的几种细胞的形态结构及数量分布存在细微的差异。红笛鲷鳃上的扁平上皮细胞界限清楚，而卵形鲳够鳃上扁平上皮细胞表面遍布不规则的微嵴，细胞界限模糊。红笛鲷鳃丝表面的氯细胞数量多于卵形鲳够，这可能与两种鱼对生活环境、生活习性的长期演变相关。     

南海北部黄鳍金枪鱼幼鱼和成鱼鳃的组织学比较研究

本研究运用光学显微镜、扫描电镜以及透射电镜技术研究了南海北部黄鳍金枪鱼(Thunnus albacares)幼鱼和成鱼鳃的显微组织结构、鳃表面超微结构和鳃小片内部超微结构特点。结果表明, 黄鳍金枪鱼鳃丝顶端弯曲, 鳃弓、 鳃丝和鳃耙表面具有不同类型的细胞。表面超微结构研究显示黄鳍金枪鱼的鳃具有高的片层密度、独特的斜向血流模式以及鳃的融合特性, 幼鱼和成鱼鳃结构之间存在显著不同。鳃小片内部超微结构研究显示鳃扁平上皮细胞覆盖于鳃丝和鳃小片表面, 顶端存在微绒毛或微脊结构, 相对幼鱼, 成鱼具有高的细胞质密度; 离子细胞主要分布于鳃小片以及鳃小片基部, 幼鱼离子细胞顶端开口为微绒毛, 成鱼为小坑状。本研究阐明了黄鳍金枪鱼幼鱼和成鱼鳃的组织结构, 丰富了黄鳍金枪鱼鳃的基础生物学资料, 为研究高速游泳鱼类鳃的形态特征与其高速游泳习性之间的关系提供了参考。     

苏氏鲢鲶鳃超微结构观察

对苏氏鲢鲶鳃结构进行扫描和透射电镜观察.鲢鲶鳃丝末端膨大呈杓状结构,每一鳃丝两侧具许多呈褶状的鳃小片,相邻两鳃丝上的鳃小片紧密镶嵌排列.鳃弓和鳃耙表面分布众多味蕾.鳃丝呼吸面上皮细胞薄,高度血管化,形成呼吸面隆起;非呼吸面由微脊细胞彼此相连,间缝具分泌细胞开口.鳃小片由单层或数层外上皮细胞和由基膜相隔的柱状细胞及其围在血管腔的凸缘构成,氯细胞多分布在鳃小片基部,并有开口通外.还探讨了鲢鲶鳃丝和鳃小片特殊的结构与功能.     

苏氏Mang鲶鳃超微结构观察

对苏氏Mang鲶鳃结构进行扫描和透射电镜观察。Mang鲶鳃丝末端膨大呈杓状结构，每一鳃丝两侧具有许多呈褶状的鳃小片，相邻两鳃丝上的鳃小片紧密镶嵌排列。鳃弓和鳃耙表面分布众多味蕾。鳃丝呼吸面上皮细胞薄，高度血管化，形成呼吸面隆起，非呼吸面由微脊细胞彼此相连，间缝具分泌细胞开口。鳃小片由单层或数层外上皮细胞和由基膜相隔的柱状细胞及其围在血管腔的凸缘构成，氯细胞多分布在鳃小片基部，并有开口通外，还探讨了Mang鲶鳃丝和鳃小片特殊的结构与功能。     

斑点叉尾(鱼回)鳃结构的扫描电镜观察

应用扫描电镜对斑点叉尾鮰（Ictaluruspunctatus）鳃的表面微细结构进行了观察。结果表明，斑点叉尾鮰鳃的表面结构和微细结构与其他硬骨鱼类基本相似，鳃弓和鳃耙表面被具环形微嵴的扁平上皮细胞所覆盖，鳃弓表面细胞之间有孔洞；鳃耙基部较粗壮；中部鳃丝上皮细胞表面的微嵴两侧有细小的横突，有些微嵴出现融合或间断；端部和基部鳃丝上皮细胞表面的微嵴消失，形成密集颗粒状突起；鳃小片的高度和片间距较大。讨论了斑点叉尾鮰鳃的形态结构与其生理功能的关系。     

稀有鮈鲫鳃的组织结构及水体镉暴露对其影响

运用石蜡切片技术和扫描电镜技术对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)鳃结构进行观察,并采用浓度为2 mg/L的Cd Cl_2水溶液对稀有鮈鲫进行急性毒理实验。结果显示:稀有鮈鲫具4对鳃,由鳃耙、鳃弓、鳃丝及鳃小片组成。鳃的各个部位表面均有上皮细胞覆盖;鳃耙和鳃弓具味蕾,鳃弓上还具不同类型的黏液细胞;相邻鳃小片的上皮细胞间也分布有黏液细胞,在鳃小片基部有氯细胞着生。鳃丝表面有不规则凹陷和微嵴,具沟、坑、孔等结构;鳃小片两面均呈凹凸状。在2 mg/L的Cd Cl_2水溶液暴露下,鳃受到损伤,发生鳃小片充血呈球状,鳃上皮水肿、脱落,黏液细胞增多等现象;并随时间延长受损程度加重。     

欧洲鳗短钩拟指环虫病及其鳃组织病理

报道了患短钩拟指环虫病欧洲鳗的症状、流行状况和鳃显微组织病理.游动和呼吸频率异常、鳃丝浮肿和鳃上粘液增多为该病的主要症状.该病尽管在冬季也有发生,但水温在26℃以上的春末、夏季和秋初是最易发病的流行季节,流行出现明显的季节性变化.患病欧洲鳗鳃的组织病理变化主要表现出5种类型,其一是鳃小片上皮细胞增生,使邻近的鳃小片相连;其二是鳃小片粘液细胞增生,同样使鳃小片连成一片,增生的粘液细胞经阿利新蓝(Alclan blue)和过碘酸雪夫氏(Periodic acid schiff)二者联合染色后呈蓝紫色的染色反应,属于Ⅳ型的粘液细胞;其三是鳃小片肿大,但单层扁平上皮细胞无肿大现象,上皮细胞层与毛细血管相分离,鳃小片上皮细胞坏死,上皮细胞层破裂,血细胞外溢,鳃小片上皮细胞坏死脱落后,失去鳃小片原有的结构;其四是鳃小片肿大同时伴随单层扁平上皮细胞肿大,进一步发展,鳃小片上皮细胞坏死脱落后,鳃小片同样失去原有的结构;其五是鳃小片毛细血管严重充血扩张,比原毛细血管扩张几倍到十几倍,形成充满红细胞的棒状到球状的动脉瘤.结果表明鳃上皮细胞增生、粘液细胞增生、鳃小片肿大、上皮细胞坏死脱落和严重充血成动脉瘤等病理变化都可导致患病欧洲鳗呼吸困难,轻者影响其生长,重者最终因呼吸衰竭而死亡.     

人工培育四指马鲅鳃组织结构及其早期发育

采用组织切片和透射电镜技术对人工培育四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)鳃结构及其早期(1—35日龄)发育进行观察。结果显示,鳃耙列齿状,鳃丝梳状排列在鳃弓上,鳃小片排列在鳃丝两边。透射电镜下鳃小片主要由线粒体丰富细胞(Ⅰ型和Ⅱ型)、扁平上皮细胞、柱细胞、血细胞、黏液细胞和未分化细胞组成。四指马鲅鳃早期发育显示,1日龄鳃原基形成;3日龄出现鳃弓,有扁平上皮细胞和血细胞;5日龄出现鳃小片,鳃小片上有柱细胞,基部有线粒体丰富细胞;18日龄鳃小片增多,鳃结构完善;35日龄鳃结构基本和成鱼一致。根据发育特点将其分为3个阶段:第1阶段(0—3日龄)为原基期,鳃原基形成但未分化,仔鱼主要靠鳍褶、皮肤和卵黄囊上的微血管进行呼吸;第2阶段(4—17日龄)为鳃结构分化、发育期,鳃耙、鳃弓、鳃丝、鳃小片逐渐形成,具备鳃基本的结构特点;第3阶段(18—35日龄)为鳃结构完善期,鳃组织发育主要体现在数量和形状的变化。     

草鱼烂鳃病、小瓜虫病及其防治

一、草鱼的烂鳃病一般是由鱼害粘球菌引起的。烂鳃病的主要症状是；解剖观察病鱼的鳃部，明显可见鳃片上有泥灰色、白色或蜡黄色的斑点，鳃片的表面，尤以鳃丝末端粘液很多，并常粘附着淤泥和杂物碎片，有时亦可看到瘀血和斑点沉积在鳃片上。严重患病病鱼的鳃盖片中央，表皮由于被鱼害粘球菌感染后腐蚀成近圆形或不规则的透明小窗，故有“开天窗”之称。[诊断烂鳃病]1．组织病理观察，明显可见病鱼的鳃，特别是鳃丝、鳃小片由于粘球菌的侵袭而坏死、崩溃，往往不能辨认其细胞形态。呼吸上皮组织、呼吸上皮细胞及流经其间的红细胞均已坏死，…     

无乳链球菌不同途径感染吉富罗非鱼后病原菌在体内的分布规律研究

为探讨无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)感染罗非鱼(Oreochromis spp)的致病途径。采用腹腔注射、灌胃和浸泡三种方式对吉富罗非鱼进行无乳链球菌(HN016菌株)胁迫感染,利用平板活菌计数法统计三种方式感染后病原菌在体内组织的分布。注射和灌胃两种方式感染后均出现典型的链球菌感染发病症状,其中注射组在感染24 h后出现死亡高峰,死亡率为92.5%;灌胃组感染48 h后出现死亡高峰,死亡率为90%;而浸泡组,感染后均没有出现明显的发病症状,也没有出现死鱼。注射组和灌胃组在感染后2 h,其脾脏、肝脏、前肾、胃、腮、皮肤和肌肉组织中均可分离出病原菌,5 h后在脑组织中均可分离出病原菌,8 h后各组织分离出的病原菌数达到峰值;而浸泡组在感染8 h后才从各组织中分离出病原菌,且它们的数量均低于同时期的注射组和灌胃组。注射和灌胃两种方式可使吉富罗非鱼快速感染无乳链球菌而发病,而浸泡方式感染后病原菌虽可以侵入机体,但不表现出症状。由此,我们推测在自然条件下养殖的罗非鱼是通过口腔采食携带无乳,链球菌的食物而被感染。     

Isolation and characterization of strains of Flavobacterium columnare from Brazil

Flavobacterium columnare is an important pathogen of freshwater fish, implicated in skin and gill disease, often causing high mortality. An outbreak of skin disease in fingerling and adult Nile tilapia, Oreochromis niloticus (L.), cultivated in a recirculation system, was investigated. Four strains were isolated and characterized by biochemical reactions, enzyme production, fatty acid profile and analysis of the 16S-23S rDNA intergenic spacer region. All strains were identified as F. columnare. Experimental infection assays with one of these strains (BZ-5-02) were conducted and pathogenicity (by intramuscular route) was demonstrated in Nile tilapia and channel catfish, Ictalurus punctatus (Rafinesque). This is the first report of characterization of Brazilian strains of F. columnare.     

Evaluation of the link between gyrodactylosis and streptococcosis of Nile tilapia, Oreochromis niloticus (L.)

Streptococcus iniae and Gyrodactylus niloticus are two common pathogens of cultured Nile tilapia, Oreochromis niloticus. We studied concurrent infection of tilapia by G. niloticus and S. iniae and evaluated whether parasitism in tilapia with Gyrodactylus increased susceptibility and mortality following immersion infection with S. iniae. Results showed that death mainly occurred in fish with G. niloticus and challenged with S. iniae (G-S group). The accumulative mortality (42.2%) was significantly higher in the G-S group than in fish not infected by the parasite (6.7%), but exposed to S. iniae. Bacteriological examination revealed S. iniae from > or =92% of dead or moribund fish challenged with S. iniae. Gyrodactylus not only damaged fish epithelium and provided entry for invasive bacteria but also was found to harbour viable cells of S. iniae for 24 and 72 h. Streptococcus iniae was isolated from 60% and 40% of G. niloticus collected from fish infected by intraperitoneal injection or immersion, respectively, at 24 h post-challenge. The present study confirms that parasitism of tilapia by G. niloticus increased host mortality following exposure to the bacterial pathogen S. iniae.     

碳酸盐碱胁迫下尼罗罗非鱼氨代谢两种途径时序研究

为了解罗非鱼在碱水环境适应过程中的氨代谢机制,将尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)放在(2、4、6 g/L)碳酸盐(Na HCO3)碱水环境中进行急性胁迫。检测碱胁迫72 h内的血氨浓度,肝、肾、鳃组织及水体、尿液、血液尿素浓度变化,肝、脑、鳃谷氨酰胺(Gln)浓度,肝、脑谷氨酰胺合成酶(GS)活性,肝氨甲酰磷酸合成酶(CPS)活性,不同组织中GS、CPS、谷氨酰胺酶(GLS)的基因表达变化。结果显示:急性胁迫下尼罗罗非鱼血氨浓度上升,于12 h到达峰值。随着血氨升高,各组织中的尿素浓度0~6 h快速升高,CPS活性0~2 h快速升高,基因相对表达量0~24 h升高,表明尿素代谢途径0-6 h内启动。肝谷氨酰胺浓度0~6 h快速升高到达峰值,肝GS活性0~6 h和12~24 h快速升高,组织中GS、GLS基因相对表达量在0~24 h升高,表明谷氨酰胺代谢途径0~6 h内启动。结果表明,在碱胁迫条件下,尼罗罗非鱼在胁迫早期同时启动尿素代谢途径与谷氨酰胺代谢途径共同参与调节血氨浓度。     

Caudal deformity syndrome (CDS): an autosomal recessive lethal mutation in the tilapia, Oreochromis niloticus (L.)

Abstract. Deformities consisting of an upward curvature of the spine in the caudal region with varying degrees of reduction of the caudal fin were observed in some fry of a laboratory population of Oreochromis niloticus (L.). This spinal deformity was combined with a reduction of the operculum, exposing some gill lamellae. No deformed fry survived for more than 7 days after completion of yolk sac absorption. Breeding tests demonstrate that the mutant phenotype is controlled by a single autosomal recessive gene.     

地衣芽孢杆菌De株对黄鳍鲷生长及其养殖池塘主要环境因子的影响

运用综合对比分析法，对黄鳍鲷（Sparuslatus）养殖中定期泼洒地衣芽孢杆菌（Bacillus lichenformis）De的应用效果进行了探讨。结果表明，施用地衣芽孢杆菌De可在一定程度上优化水体环境和养殖生产性能，使养殖黄鳍鲷的成活率、体长增长率和体质量增长率分别提高18．2％、21．0％和312％；显著降低水中氨氮（NH3-N）、亚硝酸盐（NO2^-N）、活性磷酸盐（PO；一一P）质量浓度及底泥中有机碳的质量分数（P〈0．05），其中养殖前、后期的底泥有机碳质量分数分别较对照组降低49．77％和22．63％，NO2^-N、PO4^3-P质量浓度则总体较对照组降低25．82％和41．00％，NH3-N质量浓度在养殖前、中和后期较对照组降低36．33％、18．10％和14．28％；水体中弧菌数量在养殖后期较对照组降低61．76％，底泥中的总异养细菌数量在养殖中、后期较对照组提高38．61％，整个养殖期间水体及底泥中的芽孢杆菌数量分别较对照组提高15．34％和26．37％。     

Effects of experimental hypo- and hyperthyroidism on iodothyronine deiodinases in Nile tilapia, Oreochromis niloticus

In the present study, we examined the effects of experimentally-induced increases or decreases in plasma concentrations of thyroid hormones on iodothyronine deiodinases in tilapia, Oreochromis niloticus. To obtain hyperthyroid tilapia, fish were injected with porcine follicle stimulating hormone (pFSH) 36 hours before sampling or fed on demand for 11 days with tilapia pellets containing 12 ppm T3. Tilapias were made hypothyroid by providing them food containing 0.2% methimazole for 11 days. Plasma T4 and T3 and the in vitro deiodinase activity in liver, kidney, brain and gill were measured at the end of the treatment period. Injection with pFSH caused an increase in plasma T4 but had no influence on plasma T3 levels. A small increase in plasma T3 was observed in T3-fed fish. Plasma levels of both T4 and T3 were decreased by methimazole treatment. We observed no changes in kidney type I deiodinase (D1), whereas liver type II deiodinase (D2) was increased during hypothyroidism and decreased during hyperthyroidism. Hypothyroidism resulted in a significant decrease in brain, gill and liver type III deiodinase (D3). An pFSH-induced increase in T4 stimulated brain and gill D3 but not liver D3, whereas the opposite was true in T3-fed fish. We conclude that the regulation of D1 and D3 in tilapia is probably different compared to mammals.     

4种遗传型罗非鱼的耐盐慢性驯化表现

在实验室小水体中,对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus,新吉富)、萨罗罗非鱼(Sarothrodon melanotheron)以及它们的杂交F1和F2("吉丽"罗非鱼)进行盐度梯度实验,观察其耐盐能力。采用4(遗传型)×4(水平或重复)随机区组设计。对照组全程维持淡水养殖;实验组起始盐度为0,盐度每天提高8直至实验鱼100%死亡。在水温保持(27.2±1.3)℃、正常投饵情况下,萨罗罗非鱼、尼罗罗非鱼、杂交F1及F2的50%死亡盐度平均值(MLS)分别为125.78±1.66、54.22±2.51、77.33±1.89和73.73±1.32;萨罗罗非鱼的累计存活率(CS)和MLS值均显著高于尼罗罗非鱼、杂交F1和F2(P<0.05);杂交F1和F2的CS值及MLS值均显著高于尼罗(P<0.05);F2和F1之间CS值和MLS值差异不显著(P>0.05)。     

罗非鱼湖病毒核蛋白的克隆表达、抗体制备及其组织分布

近年来罗非鱼湖病毒(TiLV)在多个国家流行,对世界罗非鱼养殖业造成严重威胁。中国是罗非鱼第一养殖大国,尽管我国大陆还没有TiLV的正式报道,鉴于吉富罗非鱼是我国重要的罗非鱼养殖品种,其对TiLV的感染特性研究具有重要意义。本实验采用TiLV对吉富罗非鱼进行人工感染,随后在肝脏组织中克隆和测定了TiLV第6片段基因。罗非鱼湖病毒第6片段基因cDNA全长1044 bp,开放读码框(ORF)为954 bp,编码317个氨基酸,预测分子量为36.38 ku;5′非编码区(NCR)为19 bp,3′非编码区(NCR)为972 bp。系统进化树分析表明该蛋白属于TiLV核蛋白(NP)。随后在大肠杆菌中表达和提纯了GST融合NP蛋白,在新西兰大白兔上制备了多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗体效价为1∶51200,且抗体可特异性识别感染组织中的病毒NP蛋白。对吉富罗非鱼不同组织进行苏木精—伊红(H.E)染色观察,发现肝脏组织坏死并形成合胞体,脾脏部分细胞出现空泡、坏死,含铁血黄素增多,头肾细胞坏死,鳃丝上皮细胞明显解离脱落,鳃小片黏连,脑组织细胞肿大。通过蛋白印迹法(WB)和免疫组化(IHC)对人工感染TiLV的吉富罗非鱼不同组织进行检测,结果显示,NP蛋白在肝脏、脑、体肾和头肾等组织中均有表达,以肝脏组织中表达量最高。为了解吉富罗非鱼对TiLV的免疫反应,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定免疫因子TNF-α和TGF-β在主要免疫器官脾脏和头肾组织中的表达。研究表明,在感染早期(感染后12~24 h),病毒可显著抑制TNF-α和TGF-β在脾脏和头肾中的表达,可能通过抑制宿主这些免疫因子来促进病毒自身早期的复制。本研究将为进一步解读TiLV的致病机理及其高效防控提供理论基础。     

罗非鱼源无乳链球菌溶血素基因体外表达及其免疫原性

为研究罗非鱼源无乳链球菌溶血素(Hemolysin,Hly)对鱼体的免疫保护作用,根据已获得的无乳链球菌ZQ0910全基因组序列设计引物扩增hly基因,定向克隆于原核表达载体p ET-28a中,构建原核重组质粒p ET-28a-hly,经IPTG诱导表达后,制成亚单位疫苗免疫吉富罗非鱼,并分析疫苗的免疫保护力。结果显示,hly基因产物大小1335 bp,编码444个氨基酸,经测序与Gen Bank报道的链球菌属Hly氨基酸序列同源性可达99%。经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见一条51.7 k D的特异条带;Western blotting分析结果说明表达的Hly蛋白能与His-Tag单抗特异性结合;制备的亚单位疫苗免疫鱼体后第14天即可检测到抗体产生,并在第28天达到峰值,抗体效价为1∶4096,免疫保护率为70%。由此证实,该亚单位疫苗有望成为预防由无乳链球菌引起的罗非鱼链球菌病的基因工程类疫苗。