斑节对虾精(竹夹)的移植和人工授精

中国台湾省将天然的或人工养殖的雌斑节对虾切除一侧眼柄,诱导其卵巢成熟,然后将雄性斑节对虾的精(竹3夹)移植到蜕皮后尚处于柔软状态下的雌虾的纳精囊中。结果发现,当向雌虾纳精囊中移植两个精(竹夹)时,雌虾第一次产卵平均孵化率为82.35％,第二次产卵的平均孵化率为39.11％。当向雌虾的纳精囊中移植一个精(竹夹)时,两次产卵的平均孵化率分别为71.87％和13.17％。从这一事实可以看出产卵亲虾可多次产卵。另外对不移植精(竹夹)的雌虾在产卵前向水     

中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)外部性征的分化及发育

中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的性别分化和生殖器官发育是其繁殖生物学的重要部分,也是进行性别调控的基础.经过2年的取样观察,研究了中国明对虾雌性纳精囊和雄性交接器的分化与发育过程.结果显示,早在仔虾后16d (16 days post-larva,PL16)即开始雌雄分化,此时,雌虾第4与第5对步足间腹甲处的锥突出现明显下陷,而雄虾的没有下陷.PL54时,雌虾纳精囊瓣膜出现,然后继续发育,到PL124时形成纳精囊雏形;雄虾交接器发育较晚,到PL54时,雄虾第1泳足的内肢才出现分化,在PL106基本形成雄性交接器.     

中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)外部性征的分化及发育

中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的性别分化和生殖器官发育是其繁殖生物学的重要部分,也是进行性别调控的基础。经过2年的取样观察,研究了中国明对虾雌性纳精囊和雄性交接器的分化与发育过程。结果显示,早在仔虾后16 d(16 days post-larva,PL16)即开始雌雄分化,此时,雌虾第4与第5对步足间腹甲处的锥突出现明显下陷,而雄虾的没有下陷。PL54时,雌虾纳精囊瓣膜出现,然后继续发育,到PL124时形成纳精囊雏形;雄虾交接器发育较晚,到PL54时,雄虾第1泳足的内肢才出现分化,在PL106基本形成雄性交接器。     

通过精液移植构建中国明对虾家系及微卫星分型鉴定父本

本研究首次采用精液移植法进行中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的家系构建,利用10尾已交尾雌虾纳精囊内精液对17尾未交尾雌虾进行了移植,共建立11个中国明对虾家系,其中含有父系半同胞家系2个;精液移植的平均受精率为46.8%,最高受精率为78%,授精成功率为64.7%。为了揭示每个家系母本内精液的来源情况,选用6个中国明对虾微卫星标记对11个家系的母本、母本内精液及每个家系的6个个体进行分析,推算出每个家系各自的父本基因型,并与各自母本内精液基因型进行比较,成功地对11个家系进行了父本鉴定。实验结果表明,11个家系的父本基因型与各自母本内精液基因型相同,每个家系内个体属全同胞关系,即对于1尾自然交尾雌虾,其纳精囊内精液只来自于1尾雄虾。通过本实验,验证了精液移植在构建中国明对虾全同胞家系和半同胞家系中的可行性,阐明了精液移植家系内个体的亲缘关系,为中国明对虾选育工作提供了技术保证。     

环境条件对中国对虾交尾影响的试验观察↑（*）

本文报告了在室内条件下中国对虾雄性生殖系统不同部位精子形态、激活反应及外界环境对对虾交尾影响等的试验观察。雄性生殖系统被分为３部分：精巢（Ｔ）、输精管和精荚（ＴＡ）;输精管又分为前、中、后３段,其中的前（ＡＶＤ）、中（ＭＶＤ）、后（ＰＶＤ）３部分以及精巢和精荚被分别匀浆取样镜检,观察精子形态。结果表明：中国对虾雄性精巢、输精管、精荚及雌虾纳精囊内精子的形态、对卵水的激活反应能力有所差异,是一逐渐成熟过程;雄虾具有多次交尾能力,不同环境条件对中国对虾的交尾影响明显;当雌虾比例较高时交尾率也高;不同对虾密度对交尾影响不明显     

莱氏拟乌贼纳精囊超显微结构

本研究采用组织切片和透射电镜技术，对莱氏拟乌贼(Sepioteuthis lessoniana)纳精囊进行超显微结构分析，并通过扫描电镜和投射电镜技术观察纳精囊中精子的形态构造。结果显示，莱氏拟乌贼口膜具有1个椭圆形的纳精囊，呈乳白色，交配后雌体的口膜内侧散布大量精子囊。纳精囊由囊壁组织、中心管腔和储精小囊组成，储精小囊数量较多，少数呈圆形或椭圆形，2个或多个储精小囊形成中心管腔，二者的囊腔中均分布大量精子。储精小囊和中心管腔由上皮细胞组成，细胞间排列紧密，其细胞核较大，细胞质中含有多种细胞器，包括线粒体、内质网、高尔基复合体和囊泡等；中心管腔中精子大多排列紧密有序，精子头部朝向纤毛，鞭毛位于囊腔中间。莱氏拟乌贼的精子头部细长，由圆屋顶形的顶体和细长圆柱形的精核组成，线粒体距位于精核后端，尾部为细长鞭毛。研究表明，莱氏拟乌贼纳精囊具有储存精子的功能。其中，储精小囊的上皮细胞具备一定分泌功能，其分泌物质能吸引精子进入纳精囊。     

河口区凡纳对虾亲虾培育及其生长和蜕皮

首次在上海河口地区成功进行了凡纳对虾的亲虾培育和育苗，并重点研究了凡纳对虾亲虾的生长和蜕皮规律，通过一套自行设计的水循环系统来培育亲虾，盐度为9－12的自然海水加盐度为100－120的浓缩海水调配至盐度28－30。200余尾亲虾（雌：雄为1：1）经过近两个月的培育，成活率达90％左右，暂养12d后，切除雌虾单侧眼柄促使亲虾成熟，手术后3d，即可观察到雌虾卵巢开始发育，7d后开始产卵，但未受精，30d后，雌，雄虾出现追尾，交配现象，得到受精卵并孵化出无节幼体，试验结果表明，利用河口区低盐海水兑配高盐浓缩海水在水循环系统中培育亲虾，最终生产出健康的苗种是完全可行的，切除眼柄前亲虾完成一个蜕皮周期需要14－15d，手术后，卵巢开始发育，蜕皮周期延长到20d左右，凡纳对虾亲虾在整个实验期间一直维持生长，切眼柄前雌虾的平均日生长率为0．25mm，较切眼柄后的0．17mm快，雄虾的平均日生长趋势与雌虾相似，前期为0．20mm,后期为0．15mm，文中还讨论了有关切除眼柄后亲虾生长减慢，蜕皮周期延长的原因。     

金乌贼纳精囊组织结构及其精子的储存和利用

为揭示金乌贼精子进入纳精囊及产卵过程中的精子利用方式,丰富金乌贼繁殖生物学研究内容,本研究利用实验生态学和组织切片技术,检测了交配后不同时间段雌性口膜表面精子囊和纳精囊中精子数量的变化,观察分析了雌性金乌贼纳精囊的组织结构。结果显示,金乌贼纳精囊位于繁殖期雌性个体口膜腹面的突起处,共1对。纳精囊开口于口膜内表面,通过一根中央管连通整个纳精囊。中央管内壁含有大量褶皱和纤毛。在中央管两端,有12~20个储精小囊与之相连。储精小囊四周具有发达的环肌,其中储存有大量精子,并且大部分精子头部均朝向腔室内壁。完成一次交配后,雌性金乌贼对精子囊和纳精囊中精子的利用可以分为三个阶段,主要利用精子囊中的精子(交配后1~2 d);由利用精子囊中的精子向纳精囊中的精子过渡(交配后2~3 d);主要利用纳精囊中的精子(交配后3 d以上)。研究表明,从精子囊释放出的精子进入雌性口膜表面的褶皱中,通过自身运动到达纳精囊。进入纳精囊的精子通过自身运动及中央管内壁纤毛的摆动进入储精小囊,其中大部分精子头部朝向储精小囊内壁有规律地分布。在产卵过程中,雌性优先利用精子囊中的精子,而在精子囊中精子不足时,纳精囊通过肌肉收缩以及纤毛摆动将其中的精子逐渐释放出来,卵子在雌性口膜附近完成体外受精。     

诱导南美白对虾交配行为的观察

南美白对虾（Ｐｅｎａｅｕｓ　ｖａｎｎａｍｅｉ）在对虾属中属于开放型纳精囊虾种（即雌虾不具纳精囊），具有对水环境抗逆能力强，营养要求低，生长快，肉味鲜美，虾体加工出肉率高，全年皆可进行育苗生产和有较强的抗病力等特点，在世界现有养殖条件下以“强悍者（ａ ｔｏｕｇｈ ａｎｉｍａｌ）”著称，因此被誉为当今世界上公认的３大优良虾种之一。 笔者就１９９４～１９９９年南美白对虾育苗生产中观察到的亲虾交配情况报告如下，希望能够为进行南美白对虾育苗生产的单位提供一些帮助。１ 材料和方法１．１ 亲虾 国内实验室条件下全人…     

凡纳滨对虾不同品系繁育性状的比较分析

为了评估不同品系凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)雌虾繁殖性能和后代幼体发育情况, 在相同养殖条件下, 选取野生群体雌虾 90 尾, P 品系雌虾 166 尾, S 品系雌虾 115 尾, 构建了 103 个家系。其中, 野生群体家系 56 个, P 家系 28 个, S 家系 19 个。本研究共进行 30 d, 记录了整个生产周期内每尾雌虾的繁殖参数及后代幼体的发育数据。结果显示, 与 P 品系和 S 品系相比, 野生群体雌虾在交配率和孵化率方面具有显著优越性。在雌虾产卵性能方面, P 品系雌虾产卵量极显著低于另外两个品系(P＜0.01), 产卵周期极显著高于另外两种品系(P＜0.01)。关于幼体发育, 无论是在幼体存活率还是变态时长方面, 野生群体都表现出一定的优越性。分析凡纳滨对虾各繁殖性状间相关关系, 发现在 3 个品系中均可以观察到体重与产卵量呈显著正相关(P＜0.05), 野生群体、P 品系和 S 品系体重与产卵量的相关系数分别为 0.364、0.278 和 0.553。凡纳滨对虾的受精卵孵化率与幼体变态(Z_Ⅰ→P₁)发育时长呈显著负相关(P＜0.05), 相关系数为?0.211, 这表明凡纳滨对虾受精卵孵化率越高, 其幼体变态发育时长越短。研究表明, 凡纳滨对虾雌虾不同品系间的繁育性能具有较大选择潜力, 在筛选高繁育性能亲虾品系的过程中可以根据雌虾繁殖力高低及后代幼体发育情况综合进行选择。     

Sperm capacitation of the shrimp Litopenaeus vannamei

Litopenaeus vannamei is one of the most important species of farmed shrimp. The females have an ‘open’ thelycum. Mating is accomplished by attaching the male spermatophore onto the surface of the thelycum 4–6 h before spawning. During this period, sperm may have to undergo morphological changes associated with a capacitation process that has been described for other shrimp species. The objective of this research was to extend research on sperm capacitation in L. vannamei by ultrastructural and biochemical means. The sperm of L. vannamei were divided into those freshly prepared from the spermatophore (S‐sperm), extracted from the male gonopores, and those extracted from the female thelycum (T‐sperm). Under transmission electron microscopy, ultrastructural differences were detected between the S‐ and the T‐sperm in the nuclear material, the filamentous meshwork and the cytoplasmic particles. Under scanning electron microscopy, the difference was observed in the cap and spike regions. Immunofluorescence using confocal microscopy to detect tyrosine phosphorylated proteins revealed different distribution patterns between S‐ and T‐sperm. The location of phosphorylation activity changed from the spike in S‐sperm, to the filamentous meshwork in the T‐sperm. These morphological and biochemical changes confirm that capacitation of L. vannamei sperm takes place following mating.     

Sperm Quality of Pond-Reared and Wild-Caught Penaeus monodon in Thailand1

Sperm quality, as determined by visual examination and by reaction with “egg-water” was not significantly different (P > 0.05) for sperm obtained by electro-ejaculation from ablated or non-ablated pond-reared Penaeus monodon. Nor was sperm quality different between pond-reared and wild-caught prawns. Normal sperm, determined by appearance, ranged from 17.1 to 21.0%, while reactive sperm ranged from 1.5 to 3.0%. There were, however, significant correlations (P < 0.01) between spermatophore weight and prawn weight (r= 0.73, N= 434). Male prawns weighing 4150 g produced on average spermatophores weighing 22.7 mg and containing 0.8 million sperm, while prawns weighing 61-90 g produced on average spermatophores weighing 56.6 mg with 2.5 million sperm. Ablation did not increase spermatophore size or sperm quality, although it significantly increased mortality of ablated males. Male prawns could be re-ejaculated at about weekly intervals with no change in sperm quality. Wild-caught female prawns artificially inseminated with spermatophores from electro-ejaculated males produced normal spawns with 51% average egg fertilization, and 41% nauplii hatch success. Nauplii hatch success following spawning increased from >60% for newly inseminated females to near zero after 30 days post-insemination, indicating spermatophore depletion and/or deteriorated sperm quality during spermatophore storage in the thelycum. The findings of the present study indicate that electro-ejaculation and artificial insemination are relatively simple and practical methods for improving captive reproduction performance of closed-thelycum prawns such as P. monodon, and that pond-reared and wild-caught males produced sperm of similar quality.     

中国对虾（Penaeus chinensis）精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测 １０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在 １％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

刀额新对虾输精管的组织学及精荚形成

刀额新对虾 (Metapenaeusensis)采自福建沿海 ,体长约 14cm。活体解剖、取样、固定 ,于OlympusBH 2显微镜下观察 ,其生殖管道分为前输精管、中输精管、后输精管和端壶腹 4部分。前输精管上皮为单层柱状上皮 ,其分泌物呈嗜碱性 ;中输精管分泌物为嗜酸性 ,前段为高柱状上皮 ,后段则为柱状上皮 ,至后段共出现 2处上皮隆起 ,隆起间为扁平上皮 ;分泌管出现于中输精管前段 ,其分泌物呈嗜酸性 ,开口于中输精管后段 ,分泌物由此处流入中输精管腔 ;后输精管腔结构与中输精管腔相似 ,但管径缩小 ;端壶腹共分 3个腔 ,其中 2个由后输精管腔延续形成 ,精荚 1个。精荚由精子团和精荚壁组成。精荚壁分 2层 ,内层为均匀的嗜碱性初级精荚壁 ,精子团位于初级精荚壁中央 ;外层为次级精荚壁 ,呈嗜酸性 ,略呈“C”形包被于初级精荚壁之外。整个精荚横切面的外形似柳叶状 ,分为光滑区和皱折区 2部分 ,光滑区由次级精荚壁包被 ,皱褶区则为裸露的初级精荚壁。精荚形成于中输精管后段 ,它是由前输精管的嗜碱性分泌物、中输精管嗜酸性分泌物以及分泌管上皮细胞分泌物经复杂的化学变化形成     

A technique for electrically stimulating extrusion of spermatophores from the lobster, Homarus americanus

A technique for electrically inducing spermatophore extrusion from live lobsters (Homarus americanus) is described. When a 12-V stimulus is applied around the coxa of the fifth walking leg, a single spermatophore is extruded through the gonopore. The sperm in extruded spermatophores are morphologically normal and undergo normal acrosome reactions. The technique provides a ready source of viable sperm for in vitro studies on fertilization and for artificial insemination of freshly molted female lobsters. The spermatophore itself is a natural package for sperm storage and may be useful in the future development of lobster sperm banks.     

池塘养殖斑节对虾生长、发育与性成熟

为了解不同养殖条件下斑节对虾的生长、外生殖器发育、性腺发育及性成熟之间的关系,对其养殖进行跟踪调查研究.结果显示:①斑节对虾雌雄外生殖器官发育和头胸甲长呈线性关系;②不同养殖环境条件下,斑节对虾性成熟生物学最小型个体无显著差异.雄性精荚出现的生物学最小型个体为头胸甲长3.1 cm,体长11.1 cm,体质量20.0 g;雄性性成熟个体的头胸甲长3.7 cm,体长13.0 cm,体质量37.0 g.池养雌性斑节对虾的性成熟生物学最小型个体以纳精囊的发育完全(可与雄虾交配)为标志,其最小性成熟个体的头胸甲长4.3 cm、体长15.1 cm、体质量53.0 g,雌性性成熟个体为头胸甲长5.0 cm,体长17.0 cm,体质量75.0 g以上;③池塘养殖斑节对虾性成熟与日龄和养殖环境相关.鱼塭雄虾精荚出现的最早时间为日龄120 d前后,其性成熟日龄约为160 d;池塘养殖雄虾精荚出现的最早时间为日龄150 d前后,其性成熟日龄约为260 d.鱼媪雌虾最早交配发生在日龄165 d前后,性成熟日龄205～236 d,池养雌虾最早交配发生在日龄240～ 280 d,性成熟日龄295～360 d以上.     

中国对虾雄性生殖系统感染WSSV在其垂直传播中的作用

通过人工感染实验,对中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)雄性亲虾进行投喂感染。在确定其携带WSSV粒子后,将被WSSV感染的精荚人工移植到健康的雌虾纳精囊内。在无其他病源的情况下,促其产卵繁殖,统计各组子代的受精率、孵化率及无节幼体至溞状幼体的变态率贸?式PCR技术对亲虾及子代进行WSSV检测。结果表明,受WSSV感染的精荚能够把病毒传播给健康雌虾,雌虾能产出携带WSSV的卵子,培育出带毒幼体。各组子代的受精率、孵化率及变态率的统计结果表明,感染组和对照组在受精率上没有明显区别,受WSSV感染的精卵细胞可以正常结合。对照组受精卵的孵化率明显高于感染组,差异显著(P=0.045<0.05)。对照组无节幼体的变态率也高于感染组。说明WSSV的入侵对受精卵及幼体的发育有影响,WSSV感染导致部分受精卵及幼体不能正常发育或死亡。     

Effect of 17α-Methyltestosterone and 17α-Hydroxyprogesterone on the Quality of White Shrimp Penaeus vannamei Spermatophores

Abstract.— Controlled reproduction of penaeid shrimp requires a better utilization of males by sperm quality monitoring and sperm quality improvement. Spermatophores of white shrimp Penaeus vannamei were improved, in terms of increased sperm count, spermatophore weight, and a reduced incidence of sperm abnormalities by a single injection of 17α-methyltestosterone at 0.01 or 0.1 μg/g body weight. 17α-hydroxyprogesterone did not induce a significant improvement in spermatophore quality. These findings indicate that a steroid injection program should be evaluated as a practical way of improving spermatophore quality in commercial operations.     

红螯螯虾输精管的结构及精荚的形成

运用组织学、组织化学和蛋白电泳等多种方法，对红螯螯虾输精管结构和精荚形成进行研究，结果发现，红螯螯虾精荚为一个连续的管状结构，由精子群、精荚基质和精荚壁组成； 精荚壁完全包裹精子，分初级、次级精荚壁2层，初级精荚壁由致密的纤丝组成，包裹精子和精荚基质；次级精荚壁由大小不等的小泡和疏松的纤丝组成，包裹在初级精荚壁之外。红螯螯虾输精管可分为前、中、后输精管。其上皮细胞均具有合成、分泌精荚形成物质的功能。前输精管卷曲段的高柱状上皮，分泌弱嗜酸性丝状分泌物，主要成分为中性粘多糖和蛋白质，形成均匀的初级精荚壁；中输精管的高柱状上皮，成丛状向内腔突起，具有分泌泡，其分泌物为嗜酸性、颗粒状物质，主要成分为酸性粘多糖和蛋白质，形成不均匀，黏性极好的次级精荚壁。后输精管结构较简单，肌层较前两者厚，同时管腔更大，其内精荚结构完整。后输精管与射精管相连处有一狭部，内有瓣膜相隔。射精管肌层厚，上皮明显突起，内无精荚。     

克氏原螯虾雄性生殖系统的超微结构

采用透射电镜研究了克氏原螯虾输精管的超微结构,采用石蜡切片法研究了克氏原螯虾的精巢、输精管和精荚的显微结构,并对精巢做了周年变化研究。结果表明,精巢由许多生精小囊和收集管组成,其结构呈葡萄串状,生殖细胞在生精小囊内发育成熟后由收集管输送到输精管;输精管有左右两条,相对于左侧输精管,右侧输精管比其约长一半,直径更大,卷曲程度更高,内容物含量更多,分泌细胞内的内质网含量更丰富;输精管根据形态不同分为前、中、后、生殖突4段,前中段具有分泌精荚壁物质的功能,后段具有储存、射出精荚的功能,末端生殖突为输精管出口;精荚呈长囊形或椭球形,由精子团、精荚基质和两层精荚壁组成,精子团偏向精荚一侧分布;克氏原螯虾雄虾精巢在一周年中的5—8月和10月处于精子细胞期的生精小囊比例很高,具有两个成熟时期。