鱼类爱德华氏菌病的诊断与防控（中）

3常见鱼类爱德华氏菌病及症状由爱德华氏菌感染引起的鱼类疾病统称为鱼类的爱德华氏菌病（Edwardsiellasis）,由Etarda引起的鱼类爱德华氏菌病主要是鲶鱼气肿性腐败病（emphysematous putrefactive disease of catfish,EPDC）,又称迟钝爱德华菌病;由E.ictaluri引起的则主要是斑点叉尾鮰肠型败血症（Enteric septicemia of Channel catfish,ESC）和黄颡鱼红头病 （Red-Head disease of Yellow catfish）。     

养殖大菱鲆爱德华氏菌病的研究

2004年5月至2005年9月间，先后对潍坊、烟台、威海和青岛等沿海区域养殖的大菱鲆自然发生的6宗爱德华氏菌感染病例进行了流行病学、病原分离鉴定和组织病理学等方面的调查研究。根据分离菌株的形态、生理生化特性，并结合16S rDNA序列分析，将其鉴定为迟钝爱德华氏菌 (Edwardsiella tarda)。人工感染实验证实该菌为大菱鲆爱德华氏菌病的致病菌。大菱鲆迟钝爱德华氏菌病具有急性和慢性两种感染形式。迟钝爱德华氏菌感染可引起大菱鲆肾脏、脾脏、肝脏、肠、鳃、皮肤等器官组织发生不同程度的病理变化，其显著特点是单核巨噬细胞增生，使得各器官组织出现巨噬细胞浸润现象。病鱼的组织病理变化以肾脏最为明显，包括巨噬细胞大量增生，多发性局灶坏死伴有渗出性炎症反应以及肉芽肿的产生；肾脏外观则显示异常膨大，正常组织转变为白色脓疡或豆腐渣状。本文属国内首次报道爱德华氏菌感染大菱鲆致病，为该鱼类的健康养殖和疾病防治提供参考和依据。 关键词：大菱鲆；迟钝爱德华氏菌；细菌鉴定；组织病理学；16S rDNA     

养殖大菱鲆的爱德华氏菌病

2004年5月至2005年9月间,先后对潍坊、烟台、威海和青岛等沿海区域养殖的大菱鲆自然发生的6宗爱德华氏菌感染病例进行了流行病学、病原分离鉴定和组织病理学等方面的调查研究。根据分离菌株的形态、生理生化特性,并结合16S rDNA序列分析,将其鉴定为迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)。人工感染实验证实该菌为大菱鲆爱德华氏菌病的致病菌。大菱鲆迟钝爱德华氏菌病具有急性和慢性两种感染形式。迟钝爱德华氏菌感染可引起大菱鲆肾脏、脾脏、肝脏、肠、鳃、皮肤等器官组织发生不同程度的病理变化,其显著特点是单核巨噬细胞增生,使得各器官组织出现巨噬细胞浸润现象。病鱼的组织病理变化以肾脏最为明显,包括巨噬细胞大量增生,多发性局灶坏死伴有渗出性炎症反应以及肉芽肿的产生;肾脏外观则显示异常膨大,正常组织转变为白色脓疡或豆腐渣状。本文属国内首次报道爱德华氏菌感染大菱鲆致病,为该鱼类的健康养殖和疾病防治提供参考和依据。     

迟缓爱德华氏菌病

迟缓爱德华菌病,是由迟缓爱德华菌引起鱼类、牛蛙等水生动物疾病的统称,其中鱼类疾病有肠道败血症和肝肾坏死病、鳗赤鳍病、鳗臌胀病、鳗溃疡病、鳗肝肾病、鳗肝肾综合症等。迟缓爱德华氏菌还可引起人体肠炎、腹泻、脑膜炎、蜂窝组织炎、肝脓肿、败血症等症状。为我国的三类水生动物疫病。     

5种消毒剂对鮰爱德华菌抑菌效果研究

鮰爱德华菌为变形菌门、γ-变形菌纲、肠杆菌目、肠杆菌科、爱德华菌属,曾被称为爱德华氏菌"GA7752"群,有研究也将其称为鮰爱德华氏菌或鮰爱德华菌,是多种鱼致病的主要病原菌,1976年,在美国斑点叉尾鮰中首次发现,可引起斑点叉尾鮰肠道败血症和黄颡鱼"红头病"等。鮰爱德华菌病从鱼苗到成鱼均可大面积暴发,流行水温24~28℃,主要感染鮰科鱼类。为更好地防治该病,笔者开展了消毒剂对鮰爱德华菌的杀菌实验,筛选出较好杀菌效果的消毒剂,以期为鮰爱德华菌的疾病防治提供参考。     

中华鳖爱德华氏菌病病原和组织病理研究

从中华鳖病病鳖的肝脏分离得到菌株ｓ－１。用菌株Ｓ－１进行人工感染，１００％的鳖患病，从感染的病鳖的肝脏分离到菌株ｓ’－１，经生理生化反应测定，它与菌株ｓ－１特性一致。经鉴定，菌株ｓ－１是迟钝爱德华氏菌，野生型。爱德华氏菌感染会引起鳖的脏器发生变质性病变。主要症状呈肝脏型，肝局部坏死，有结节状肉芽肿。     

牙鲆病原迟钝爱德华氏菌的药物敏感性测定与分析

对分离并经鉴定的牙鲆病原迟钝爱德华氏菌进行了常用抗菌类药物的敏感性测定,结果表明供试的35株迟钝爱德华氏菌,均对所测定的37种抗菌类药物中的头孢唑啉等20种药物高度敏感、对青霉素G等5种药物耐药、对氨苄青霉素等12种药物表现在株间存在差异。     

二温式聚合酶链反应鉴别诊断迟缓爱德华氏菌病

根据迟缓爱德华氏菌株23S rDNA基因,设计合成一对引物XZE15、XZE16,建立了二温式聚合酶链反应(PER)鉴别诊断迟缓爱德华氏菌株的技术.特异性试验表明,对3株迟钝爱德华氏菌株进行PCR扩增出与预期大小相一致的284 bp的特异性片段,但对3株钻鱼爱德华氏菌及其他对照鱼病病原体核酸模板的PCR扩增不出现任何条带;敏感性试验结果显示,该二温式PCR可以检测到10 Pg的迟钝爱德华氏菌DNA.     

斑点叉尾鮰维氏气单胞菌病的诊断与防治

综述了鮰爱德华氏菌的分类学地位、生物学特性、致病机理以及有关鮰爱德华氏菌病的症状、病理变化和控制措施等方面的研究进展,并概述了在鮰爱德华氏菌病药物防治和免疫预防等方面的研究成果.     

牛蛙爱德结氏菌病病原菌的鉴定和致病因素的研究

从患爱德华氏菌病的牛蛙肌肉、肝、肾、血液和腹水中分离到８株细菌，根据其形态和生理生化特性鉴定为野生型迟钝爱德华氏菌。人工感染实验均为该病的病原菌，毒素检测试验表明，致病因素主要是内毒素而不是外毒素。分离菌 株的主要特性为杆状、革兰氏阴性、周生鞭毛、兼性厌氧。接触酶、甲基红试验和硝酸盐还原均为阳性。在三糖铁琼脂上产Ｈ２Ｓ。氧化酶、丙二酸盐利用、Ｖ．Ｐ试验、明胶液化、尿素酶。苯丙氨酸脱氨酶为阴性。分解     

牙鲆迟钝爱德华氏菌病及其病原特征

爱德华氏菌属(Edwardsiella)的迟钝爱德华氏菌(E.tarda),是多种淡、海水养殖鱼类的一种重要病原菌,在世界不少国家和地区均有由该菌引起的、不同程     

鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕的构建及制备条件优化

菌蜕具有完整细菌表面抗原结构, 可诱导机体的体液和细胞免疫应答, 成为疫苗制备的候选之一,为了探讨鳗鲡迟缓爱德华氏菌菌蜕疫苗的可行性, 实验采用基因重组技术构建了噬菌体PhiX174裂解酶基因(Lysis E)的温控表达载体, 转化迟缓爱德华氏菌, 成功制备其菌蜕, 并对菌蜕形态、溶菌动力学、裂解效率以及制备条件等进行了研究。结果表明, 细菌菌蜕表面形成溶菌孔道, 细胞因内容物流失而发生明显的皱缩; 构建的迟缓爱德华氏菌诱导后1 h开始裂解, 5 h后裂解基本完成, 裂解效率为99.99%, 冷冻干燥后重悬涂布平板, 未检出活菌, 电镜观察表明冻干前后细胞形态未见明显变化; 构建的迟缓爱德华氏菌分别在OD₆₀₀值为0.4和0.6进行诱导, 其裂解过程和裂解效率没有明显区别; 分别用LB、BHI、NB 3种培养基进行比较研究, 其中LB培养基制备的菌蜕细胞较完整、裂解完全, 是制备迟缓爱德华氏菌菌蜕最优培养基。本研究成功构建了鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕, 并对其制备条件进行了优化, 为鳗鲡爱德华氏菌病疫苗开发奠定了基础。     

迟钝爱德华氏菌对牙鲆半致死浓度的测定

腹水病是牙鲆常见的细菌疾病之一,具有感染率高、死亡严重、流行速度快、前期症状不明显,难以防治等特点,给我省的牙鲆养殖业造成很大的损失.本实验中用迟钝爱德华氏菌对牙鲆进行了感染实验,被感染的牙鲆出现了腹水病相似的症状,表明迟钝爱德华氏菌是牙鲆腹水病病原之一.迟钝爱德华氏菌对牙鲆的半致死浓度为2.1×105 CFU/mL.     

牙鲆腹水病病原免疫血清的制备和纯化试验研究

用迟钝爱德华氏菌免疫家兔,制备出高效价迟钝爱德华氏菌免疫血清.先制备迟钝爱德华氏菌抗原, 耳缘静脉注射免疫家兔.经微量反应板法检测血清效价, 效价达到1 ∶ 2560;用Millipore Montage抗体纯化试剂纯化抗体,纯化的抗体经SDS-PAGE电泳,杂带较少,条带主要集中于50 kD处;用斑点酶联免疫吸附试验检测时, 迟钝爱德华氏菌呈阳性, 温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、河流弧菌、溶藻弧菌、鳗弧菌、腐败希瓦氏菌、产碱普罗威斯登菌、阪崎肠杆菌和大肠杆菌均呈阴性.试验结果表明,特异、高效价的迟钝爱德华氏菌免疫血清,为快速检测牙鲆腹水病病原奠定了基础.     

不同饲料投喂制度对控制斑点叉尾鮰疾病的影响

笔者在长期的水产工作中发现，很多渔场主都喜欢在鱼类疾病高发期间，通过限制投喂来控制鱼类疾病。对此措施的效果我们一直持怀疑态度。因此，笔者于2008年7月，在本单位水产良种场针对斑点叉尾鮰感染爱德华氏菌前后，使用不同的投喂制度进行了对比试验。现将试验情况报告如下。     

鱼用新药“康达富”对鳗鲡弧菌和福建爱德华氏菌的杀灭作用

用２倍稀释法测定了新药“康达富”对鳗鲡弧菌、鳗鲡福建爱德华氏菌的杀灭作用，结果表明，该药对鳗鲡弧菌、鳗鲡福建爱德华氏菌有极强的杀灭作用，其最低抑菌浓度分别为０．００４ｍｇ／ｍｌ和０．０００４ｍｇ／ｍｌ，最低杀菌浓度分别为０．００８ｍｇ／ｍｌ和０．０００８ｍｇ／ｍｌ。采用琼脂扩散纸片法，检测了“康达富”商品药的原药Ａ和原药Ｂ对鳗鲡福建爱德华氏菌的联合杀灭作用，结果表明，两种原药的杀灭效果呈显著的累加作用。     

牛蛙感染迟缓爱德华氏菌的研究

2001年10月底，厦门地区一些牛蛙（Rana catasbianay）养殖场养殖的牛蛙暴发流行传染病，造成大批成蛙和幼蛙死亡。经流行病学调查和病原分离鉴定，确定其主要致病原为迟缓爱德华氏野生型（Edwardsiella tarda）。该菌具有溶血性，对SPF小鼠有强致死作用，对幼蛙和蝌蚪致病力较小，根据药敏实验结果，和敏感药物进行治疗取得了良好的疗效。     

牙鲆迟钝爱德华氏菌血清型及荧光抗体检验

以迟钝爱德华氏菌的代表菌株(HC010907-1)为免疫原,制备免疫血清,对分离于牙鲆鱼的130株迟钝爱德华氏菌进行了血清型检定,结果表明:供试的130株迟钝爱德华氏菌均为同种血清型;同时以此免疫血清为第一抗体,以标准羊抗兔IgG荧光抗体为第二抗体,进行了荧光抗体技术检验迟钝爱德华氏菌的可行性试验,表明亦具有较强的特异性。     

龟鳖主要疾病的最新防治技术（二）

1．病原多为因体表损伤或环境恶化及寄生虫侵袭后感染嗜水气单胞菌、假单胞杆菌、爱德华氏菌等病原所致，感染病原多为革兰氏阴性菌。