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鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕的构建及制备条件优化
引用本文:李宁求,余露军,付小哲,刘礼辉,林 强,常藕琴,石存斌,黄志斌,吴淑勤.鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕的构建及制备条件优化[J].水产学报,2012,36(11):1754-1762.
作者姓名:李宁求  余露军  付小哲  刘礼辉  林 强  常藕琴  石存斌  黄志斌  吴淑勤
作者单位:中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室;中国水产科学研究院珠江水产研究所, 农业部渔药创制重点实验室
基金项目:国家科技支撑计划项目(2012BAD25B02); 国家自然科学基金项目(31202032); 广东省自然科学基金项目(7004728)
摘    要:菌蜕具有完整细菌表面抗原结构, 可诱导机体的体液和细胞免疫应答, 成为疫苗制备的候选之一,为了探讨鳗鲡迟缓爱德华氏菌菌蜕疫苗的可行性, 实验采用基因重组技术构建了噬菌体PhiX174裂解酶基因(Lysis E)的温控表达载体, 转化迟缓爱德华氏菌, 成功制备其菌蜕, 并对菌蜕形态、溶菌动力学、裂解效率以及制备条件等进行了研究。结果表明, 细菌菌蜕表面形成溶菌孔道, 细胞因内容物流失而发生明显的皱缩; 构建的迟缓爱德华氏菌诱导后1 h开始裂解, 5 h后裂解基本完成, 裂解效率为99.99%, 冷冻干燥后重悬涂布平板, 未检出活菌, 电镜观察表明冻干前后细胞形态未见明显变化; 构建的迟缓爱德华氏菌分别在OD600值为0.4和0.6进行诱导, 其裂解过程和裂解效率没有明显区别; 分别用LB、BHI、NB 3种培养基进行比较研究, 其中LB培养基制备的菌蜕细胞较完整、裂解完全, 是制备迟缓爱德华氏菌菌蜕最优培养基。本研究成功构建了鳗源迟缓爱德华氏菌菌蜕, 并对其制备条件进行了优化, 为鳗鲡爱德华氏菌病疫苗开发奠定了基础。

关 键 词:鳗鲡    迟缓爱德华氏菌    菌蜕    条件优化
收稿时间:2012/3/31 0:00:00
修稿时间:2012/8/27 0:00:00

Construction of Edwardsiella tarda ghosts from eel and their optimization of preparation conditions
LI Ning-qiu,YU Lu-jun,FU Xiao-zhe,LIU Li-hui,LIN Qiang,CHANG Ou-qin,SHI Cun-bin,HUANG Zhi-bin and WU Shu-qin.Construction of Edwardsiella tarda ghosts from eel and their optimization of preparation conditions[J].Journal of Fisheries of China,2012,36(11):1754-1762.
Authors:LI Ning-qiu  YU Lu-jun  FU Xiao-zhe  LIU Li-hui  LIN Qiang  CHANG Ou-qin  SHI Cun-bin  HUANG Zhi-bin and WU Shu-qin
Abstract:
Keywords:Edwardsiella tarda  ghost  optimization of preparation condition
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